大量研究表明KKS在心血管系统各种疾病的发病机制中发挥相当重要的作用，如高血压、心力衰竭及心肌缺血、LVH及内皮功能紊乱。随着人们对KKS的认识不断深化，不但在心血管方面，而且在其他多种病理过程中的作用逐渐成为研究的热点。特异性受体正成为研究的新靶点，相应拮抗剂的问世将成为新一代更具选择性的治疗心血管疾病、炎症、疼痛及免疫性疾病的新型药物。【参考文献】[1]Abelous JE,Bardier E. Les substnces hypotensives de lurine humaine normale [J].Compt Rend Soc Biol,1909,66(3):511?522.[2]Kraut H,Frey EK,Werle Nachweis eines Kreislaufhormon in der Pankreasdruse[J].Hoppe?Seyler?s Z Physiol Chem,1930,189(1):97?106.[3]Sharma kinin mediate the hypotemsive action of angiotensin converting enzyme（ACE)inhibitors?[J]. Gen Pharmacol,1990,21(4):451?457.[4]Yousef GM,Diamandis new human tissue kallikrein gene family: structure,function,and association to disease[J].Endocr Rev ,2001,22(2):184?204.[5]Schmaier AH. 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Atherosclerosis,2002,161(2):261?267.组织激肽释放酶的生物学性质和作用机制人体内的激肽释放酶包括血浆激肽释放酶和组织激肽释放酶,二者分别由前激肽释放酶（prekalikrein）和激肽释放酶原（prokallikrein）转换而来。血浆激肽释放酶催化高分子激肽原水解，生成缓激肽（bradykinin）和胰激肽（kallidin）。在人体内，组织激肽释放酶又称为胰/肾激肽释放酶[4]，它能催化低分子激肽原水解，生成胰激肽。缓激肽和胰激肽在激肽酶I的作用下羧基端水解掉Arg，分别生成des-Arg_-BK和des-Arg_-kallidin，后者仍具有生物活性，需要血管紧张素转化酶或氨基肽酶才能完全灭活，激肽主要与G蛋白耦联的B1 R，B2 R结合发挥作用。B2 R为管家基因表达，是正常状态下激肽发挥作用的主要受体，对缓激肽，胰激肽敏感；而B1R在炎症和缺血等损伤下诱导生成，对des-Arg_-kallidin，des-Arg -BK敏感，其中B1 R对des-Arg_-kallidin的敏感度大于des-Arg -BK。认为B1R可能参与损伤部位的炎症反应和循环改善，并在新生血管生成中起重要作用。激肽与受体结合后，激活NO-CGMP和PG-CAMP途径，从而调节NO和PG等生物活性物质的释放来参与多器官功能调节和多种病生过程，如抑制凋亡、炎症、肥大、纤维化，促进心肾脑血管的新生血管的生成和脑的新生神经的生成。组织激肽释放酶在心血管及肾脏的保护作用人组织激肽释放酶（HTK）广泛存在于人肾、心血管、中枢神经系统、胰、肠等脏器中，并通过其代谢产物与受体结合，来发挥其广泛的病理生理作用。其中以HTK 在心血管及肾疾病方面的研究最多。激肽释放酶－激肽系统（kallikreinkinin system ,KKS）在维持正常血压，保护心脏方面起重要作用，激肽释放酶－激肽系统（kallikreinkinin system ,KKS）缺陷会引起高血压，Berry在1989年对一份家族进行的研究显示人尿激肽释放酶（human urinary kallikrein, HUK）可减少高血压的风险。许多高血压或心肌缺血再灌注(I∕R)模型的动物实验表明，以腺病毒为载体的人组织激肽释放酶基因（ad. htk）转导能降低高血压，缓解心肌肥厚和纤维化，还可提高心脏功能，减少心肌梗死范围，减少心肌I∕R后的室颤和凋亡。人尿激肽释放酶（human urinary kallikrein, HUK）是一种显著的肾血管扩张剂，利尿剂，促钠排泄剂，能保护肾脏。人尿激肽释放酶（HUMAN URINARY KALLIKREIN, HUK）下降会引起住院病人轻度肾病，严重者可引起严重肾衰，激肽释放酶－激肽系统（kallikreinkinin system ,KKS）可通过抑制炎症和氧化酶来对抗高盐饮食或药物引起的肾衰。组织激肽释放酶对脑组织的保护作用在人类，已证实组织激肽释放酶分布在丘脑、下丘脑、脑灰质、脑干网状结构的神经元和腺垂体细胞及脉络丛细胞上。B2R在人星形神经胶质、少突胶质细胞、小胶质细胞、脑血管内皮细胞、大脑皮质、纹状体、丘脑、下丘脑的神经元上都有表达。而B1R在丘脑、下丘脑的神经元和基底动脉中有表达。体外研究显示人类B1R在血管内皮细胞、大动脉的平滑肌细胞、冠状动脉、肌性小动脉中都有存在。在缺血等损伤或炎症时，B1R表达上调。这些都为组织激肽释放酶通过代谢产物激肽结合B1R和B2R来保护脑组织提供了前提，具体的神经保护作用及其作用机制表现如下：1 扩张脑动脉，改善缺血脑组织血供和氧供人们对脑缺血的病理生理进行了深入研究,并提出了多种学说，但迄今为止没有一种机制能完全阐明脑缺血的损伤机制。现认为参与脑缺血损伤的分子机制有兴奋性氨基酸的释放、钙离子稳态失衡、自由基的形成、蛋白酶的激活及NO的介导作用等。NO在脑缺血损害中所起的作用一直是研究的热点。NO具有神经保护和神经毒素双重作用。认为NO的双重作用与其产生来源有关，NO由NOS 催化底物L - 精氨酸合成。NOS 可分为结构型(cNOS) 和诱导型(iNOS) ,cNOS 包括内皮源性(eNOS) 和神经源性(nNOS) 。实验证明,源于iNOS和nNOS过度表达所形成的NO有神经毒性,而源于eNOS所产生的NO却有神经保护作用。所以能通过上调eNOS来增加NO的药物能起神经保护作用。B1R和B2R是特殊的可调节的G蛋白耦联受体，已证实它们在内皮细胞中的细胞信号转导通路相同。当激肽与B1 R或B2 R结合后，受体胞内端耦联的G蛋白激活磷酸酯酶C(PLC)激活,PLC进一步水解4，5－二磷酸肌醇（IP3），IP3弥散到胞浆中与肌浆网中IP3受体结合，引起贮库中Ca2+释放，细胞外Ca2+内流，使细胞内Ca2+增加，最后激活eNOS,产生NO。胞内Ca2+增加还激活磷脂酶A2（PLA2），诱生PGI2。Lamontagne，Be´lichard 等指出des-Arg_-BK扩血管作用至少部分由NO介导，PG似乎不重要。激肽扩张脑动脉的作用部分来自NO的释放。急性中风病人在缺血发作起始后8天期间外周循环中胰激肽升高。Simone等研究显示：22例较大梗死灶的大脑中动脉闭塞患者较14例正常成人，其组织激肽释放酶浓度呈升高趋势，胰激肽浓度升高。这些都说明在缺血脑组织中，组织激肽释放酶和胰激肽激活。胰激肽具有明显的扩张血管作用。胰激肽及其代谢物des-Arg_-kallidin能分别与B2R,B1R结合并释放NO，扩张脑动脉。在正常人和动物，扩血管作用主要由B2R介导;而在炎症或缺血等损伤情况下，主要由新表达的B1R介导扩血管作用。如在病理情况下，B1R显示出比B2R更明显的扩张冠脉的作用。在急性脑梗死等缺血性损伤时，缺血部位血管细胞被诱导生成B1R，此时激肽即与B1R结合扩张缺血区脑组织的动脉血管，从而改善缺血脑组织血供和氧供。2促进缺血脑组织的新生血管的生成在外周血管病的病人和动物模型中显示激肽释放酶－激肽系统（KALLIKREINKININ SYSTEM ,KKS）上调，激肽释放酶－激肽系统（KALLIKREINKININ SYSTEM ,KKS）在心肌/四肢缺血性疾病中的促进新生血管形成和抑制细胞凋亡中起重要作用。有理论认为，激肽通过增强血管形成对缺血组织存在长时间的保护作用。局部转导HTK基因能引起该区血管生成和促进组织恢复。活体实验表明，HTK 基因转导能促进兔角膜新生血管的生成和毛细血管增生。有研究表明，低剂量（106 PFU）的ad. htk 转导入小鼠能促进四肢肌肉毛细血管、动脉的生长，107 PFU的可使微血管进一步扩张。对链脲霉素引起的糖尿病小鼠，局部予KLK能使其后肢骨骼肌微血管减少的进程中止。这一作用是通过抑制凋亡，促进血管再生来实现的。运用组织激肽释放酶抑制剂KLK结合蛋白抑制KLK后，可观察到其抑制毛细血管内皮的增值并诱导其凋亡，最终抑制新生血管的形成。在体外研究中发现，激肽通过IP3-AKt/蛋白激酶B(即IP3-AKt－B)或钙调蛋白途径激活内皮一氧化氮合酶（eNOS），从而使血管内皮生长因子受体通过eNOS介导引起基质层内皮细胞形成。体内研究表明，AKt－B和eNOS与引起的新生血管形成通路是功能相关的。诱导生成的激肽与血管内皮生长因子A共同发挥以下作用：诱发血管生成，产生NO，舒张血管。药理学研究表明：B1R在毛细血管增殖方面起作。B1R在缺血性损伤中不仅直接调解内皮细胞的生长和存活（激肽能有效吸引白细胞，白细胞是产生内皮细胞生长因子需要的），还能通过增加血管外血浆蛋白的渗出来参与缺血后新生血管的生成（这些蛋白为血管形成提供临时支架）。新近有研究表明：遗传性B1R缺乏则修复性的新生血管就不能形成。所以，B1R在促进缺血组织的新生血管的生成中起重要作用。在急性脑缺血和细胞损伤时，缺血部位细胞B1R表达上调，组织激肽释放酶通过代谢产物des-Arg_-kallidin与B1R结合，并进一步通过IP3-AKt－B或钙调蛋白途径激活内皮一氧化氮合酶（eNOS），从而促进缺血脑组织的新生血管的生成。3促进神经胶质细胞迁移和抑制细胞凋亡，减少炎症细胞的侵润不同的动物模型都表明组织激肽释放酶（KLK）通过抑制细胞凋亡和炎症细胞侵润来减少心肾脑等器官损伤。Julie Chao和 Lee Chao在阻断大脑中动脉（MCAO）造成大鼠局部脑缺血的模型中，将导入脑室后，能明显减少缺血诱导的神经功能损伤，缩小脑梗死面积，促进神经胶质细胞存活和迁移至缺血性半影区和中心，减少神经细胞和神经胶质细胞的凋亡，炎症细胞的侵润，促进新生血管生成和神经细胞再生，从而提高了存活率。脑MCAO后静脉持续微泵输入人组织激肽释放酶对缺血再灌注引起的行动障碍等神经功能恢复有直接作用。MCAO引起的脑缺血再灌注破坏了血脑屏障，KLK基因或蛋白可通过血脑屏障进入脑缺血损伤区，进而发挥神经保护作用。形态学分析显示：KLK基因转导增强了存活率，促进神经胶质细胞迁移至缺血性半影区和中心。KLK基因导入后细胞存活率提高与与升高脑中NO水平和phospho-Akt,Bcl-2水平，减少半胱天冬酶－3活化，降低NAD(P)H氧化酶活性，抑制超氧化物产生有关。这说明KLK基因或蛋白转入对脑缺血性损伤的保护作用不依赖于其扩血管，降血压作用，而是通过以下途径：促进神经胶质细胞存活和迁移，通过抑制氧化应激和抑制Akt-Bcl-2信号转导通路来抑制凋亡。研究显示激肽在细胞迁移和凋亡方面的效应能被B2 R拮抗剂艾替班特阻滞，表明B2 R介导这些作用，B2 R在保护缺血脑卒中的作用同时也在B2 R缺陷鼠中得以证实。B2 R缺陷鼠在缺血再灌注（I/R）损伤后比野生型鼠表现出更明显的梗死范围和凋亡，更严重的行动障碍。它们在缺血第1天白细胞聚集比野生型鼠减少，但在缺血第3天白细胞聚集比野生型鼠多。有研究显示早期（脑缺血 h～ h）用B2 R拮抗剂可通过抑制水肿形成来减弱一过性脑缺血损伤。以上表明B2R有双重的效应：缺血早期促进炎症细胞的侵润，引起血管渗透性增加，但晚期通过促进Akt磷酸化，降低NAD(P)H氧化酶活性，抑制超氧化物起神经保护作用。4．拮抗血管损伤，抑制动脉肥厚Murakami等在给行血管球囊成形术后鼠左颈总动脉局部转导KLK基因后，动脉内膜/中膜比值明显比对照组低，这一作用被NOS抑制剂L-NAME拮抗，说明它是NO依赖性的。Emanueli等在鼠动脉重构模型中，发现全身给KLK基因通过改变血管剪切应力来减少新内膜形成。zhang等在高盐饮食引起的鼠高血压脑出血模型中转导KLK基因后，显著缓解高血压，抑制动脉肥厚，减轻脑血肿，正是通过以上作用，组织激肽释放酶在高血压脑出血中起到了重要保护作用，从而使动物死亡率下降。
LVH被认为是高血压患者的独立危险因素。BK能够对抗主动脉结扎引起高血压大鼠LVH的发展，这种抗心肌肥厚的效应能被B2受体拮抗剂艾替班特殊性及NO合酶抑制剂L?NNA抵消，说明BK是通过降低NO释放来发挥抑制LVH的作用，证实在SHR大鼠LVH的发病机制中心血管KKS的缺乏占有重要作用，而心血管组织KLK及激肽原的活性降低是导致心脏BK减少的原因，因此心脏KKS组分的不足可能引起高血压和LVH心肌功能障碍。在用ACEI雷米普利进行降压及逆转LVH的观察中发现，大剂量雷米普利[1 mg/（kg·d)]共6周的治疗可降低血压，抑制LVH的发展，而给予小剂量雷米普利[10 μg/（kg·d）]6周后对血压及血浆中ACE活性没有影响，但阻止了主动脉结扎后引起的LVH。2种剂量雷米普利抗心肌肥厚的作用及大剂量雷米普利的降压作用均可被B2受体拮抗剂艾替特及NO合酶抑制抵消。该研究说明KKS和RAS在阻止或延缓心室肥厚这一靶器官损害的重要作用，更支持了KKS是心血管保护因子的观点。
已知自然界生物体中存在着数万种生物活性肽，而我们人体中具有活性的肽就有1000种之多，仅脑中就存在近40种，人们还在不断地发现、分离、纯化新的活性肽物质。 通常，人们依据生物活性肽的作用和分泌部位将其分为下丘脑一垂体月亮石激素、消化道激素、其他激素和活性肽。 1）下丘脑一垂体肽激素 丘脑与垂体紧密相连，组成神经内分泌调节系统。包括促肾上腺皮质激素、促甲状腺素释放激素、促性腺素释放激素、生长激素释放激素（CHRH）、生长激素抑制素（CHIH）、促黑色素细胞抑制激素（MRIH）、促黑色素细胞释放激素（MRH）、催乳素释放激素（PRH）、催乳素抑制激素（PIH）、促皮质素释放激素（LRH）、抗利尿激素（ADH）和催产素等。 2）消化道激素 由胃肠道合成的肽类激素包括促胃泌素（34肽）、肠促胰液素（27肽）、缩胆囊素（8肽）、胃动素（22肽）、血管活性肠肽（28肽）、神经降压肽（13肽）等。现已证明，许多胃肠道肽类激素在大脑和外周神经系统中也有发现，称为脑肠肽。这些肽类物质不断调整机体的反应性，以适应内外环境的变化，保证机体的健康状态。 3）其他激素和活性肽 其他激素和活性肽包括胸腺肽、胰岛素、胰高血糖素、降钙素、血管紧张肽Ⅰ（10肽）、Ⅱ（8肽）、Ⅲ（7肽）、内啡肽、脑啡肽、谷胱甘肽等。 下面介绍人体内几种重要的小分子活性肽。 1）谷胱甘肽 谷胱甘肽（GSH）是一种含γ-酰胺键和巯基的3肽，由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成，存在于几乎身体的每一个细胞中。谷胱甘肽能帮助人体保持正常的免疫系统功能，并具有抗氧化作用和整合解毒作用。 2）促甲状腺素释放激素 促甲状腺素释放激素是由下丘脑合成分泌的一种3肽物质．它能促进腺垂体分泌促甲状腺素，后者促进甲状腺细胞增生、合成并分泌甲状腺激素。 3）胸腺肽 胸腺肽是胸腺组织分泌的具有生理活性的5肽物质。 临床上常用的胸腺肽是从小牛胸腺发现并提纯的有非特异性免疫效应的小分子多肽。 胸腺肽能促进淋巴细胞转化，增强巨噬细胞吞噬活性，可用于治疗多种免疫缺陷病。 4）脑啡肽 脑啡肽是由5个氨基酸残基组成的神经肽。脑啡肽广泛存在于中枢神经系统中，在下丘脑前部、尾状核及苍白球处有较高的活性，在中枢神经系统中起神经递质或神经调节物作用，参与抑制痛觉传导，与体温调节、心血管调节、内分泌激素的释放均有关。 5）加压素 加压素（又称抗利尿激素）是由下丘脑的视上核和室旁核的神经细胞分泌的9肽激素，经下丘脑一垂体束到达神经垂体后叶后释放出来。其主要作用是提高远曲小管和集合管对水的通透性，促进水的吸收，是尿液浓缩和稀释的关键性调节激素。 6）催产素 催产素又称缩宫素，是由下丘脑合成、垂体后叶释放的一种 肽物质。催产素在雌性哺乳动物生产时大量释放，可扩张子宫颈和收缩子宫，促进分娩。催产素还能使人对陌生人产生信赖感，有助于治疗孤独症等病。 7）促性腺激素释放激素 促性腺激素释放激素（GnRH）是下丘脑分泌产生的10肽神经激素，刺激或抑制垂体促性腺激素的分泌，对脊椎动物生殖的调控起重要作用。 6）神经降压肽 神经降压肽（NT）是一种由13个氨基酸组成的内源性多肽，主要存在于下丘脑前部与底部、伏核和隔部，脑干和脊髓中主要在胶质带的小细胞中间神经元和三叉神经运动核等处，可使毛细血管通透性增强、皮肤血管扩张、血压降低、促进胰高血糖素释放，抑制胰岛素释放，刺激胃肠道收缩，抑制胃酸分泌等。 随着人们对生物活性多肽认知的不断深入，近年来科学家们逐渐将目光转向活性肽药物的开发。多肽类药主要用于治疗癌症、代谢类疾病、心血管疾病、内分泌类疾病、血液病，缓解疼痛，调节认知等各个领域。 参考文献 [1] 李勇．肽临床营养学[M]．北京：北京大学医学出版社，2012. [2] 冯秀燕，计成．寡肽在蛋白质营养中的作用[j]．动物营养学报，2001，13(3)：8-13. [3] Agar WT，Hird F J，Sidhu G S. The active absoption of amino-acids by the intestine[J]．Physiol.，1953，121(2)：255一263. [4] Neway H，Smith P H . Intercellular hydrolysis of dipeptides during intestinal absorption[J]．Physiol.，1996，152：367一380. [5] Daniel H. Molecular and Integrative PhysioI0gy of Intestinal Peptide Transport[J]．Annual Rev. Physiol.，2004，66：361一384. [6] zaloga G P . Physiologic effects of peptides based enternal formulae[J]．Nutrition in cIinical practice，1990，5：231—237. [7] Hara H，Funabili M，Iwata，et al . Portal absorption of small peptides in rats under unrestrained conditions[J]．J Nutr.，1984，114：1122—1129. [8] Leonard J V，Marrs T C，Addison J M，et al. Intestinal absorption of amino acids and peptides in Hartnup disorder[J]．Pediatr Res.，1976，10（4）:246—249 [9] 李冠楠，夏雪娟，隆耀航，等.抗菌肽的研究进展及其应用[J]．动物营养学报，2014，26(1)：17一25. [10] 王春艳，田金强，王强.改善心血管健康的食源性生物活性肽构效关系研究进展[J]．食品科学，2010，31(13)：307一311. [11] 李世敏．食源性活性多肽与降血压研究进展日[J]．老年医学保健，2008，14(2)：125一127. [12] Dziuba J，Minkiewicz P，Nalecz D，et al. Database of biologically active peptide sequences[J]．Nattrunges.，1999，43：190—195.‘ [13] Shin Z，Yu R，Park S A，et al. His-His-Leu ，an angiotensin 1 converting enzyme inhibitory peptide derived from Korean soybean paste，exerts arltihyPertensive activity in vivo[J]．J Agric Food chem.，2001，49(6)：3004一3009. [14] Hirasawa M , Shijubo N，Uede T，et al. Integhn expression and ability to adhere to extracellular matrix protelns and endothelial cells in human lung cancer lines[J]．Br J Cancer.，1994，70(3)：466—473. [15] Florentin l，Chung V，Martinez J，et al. In vivo immuno-pharmacological properties of tuftsin(Thr-Lys-Pro-Arg)and some analogues[J]．Methods Find Exp Clin Pharmacol.，1986，8(2)：73—80. [16] Tsuchita H，Suzuki T，Kuwata effect of casein phosphopeptides on calcium absorption from calcium-fortified milk in growing rats[J]．Br J Nutr.，2001，85(1)：5一10. [17] 张昊，任发政．天然抗氧化肽的研究进展[J]．食品科学，2008，29(4)：443一447. [18] 张莉莉，严群芳，王恬．大豆生物活性肽的分离及其抗氧化活性研究[J]．食品科学，2007，28(5)：208一211. [19] 荣建华，李小定，谢笔钧．大豆肽体外抗氧化效果的研究[J]．食品科学，2002，23(11)：118一120. [20] 崔剑，李兆陇，洪啸莺吟．自由基生物抗氧化与疾病[J]．清华大学学报自然科学版，2000，40(6)：9一2. [21] 陆融，王卓．小分子多肽抗肿瘤作用的研究进展[J]．天津医科大学学报，2005，11(3)：499一502. [22] Chène P，Fuchs J，Bohn J，et al. A small synthetic peptide , which inhibits the p53-hdm2 interaction，stimulates the p53 pathway in tumour cell lines[J]．J Mol Biol.，2000，299（1)：245一253. [23] Issaeva N，Friedler A，Bozko P，et al. Rescue of mutants of the tumor supPressor p53 in cancer cells by a designed peptide[J]．Proc Natl Acad Sci USA.，2003，100(23)：13303一13307. [24] 朱维铭.临床营养角色的转变：从营养支持到解怡疗[J]．肠外与肠内营养，2009，16(1）：1—3l. [25] 裴新荣，杨奋悦，张召锋，等.海洋胶原肽抗皮肤老化作用的实验研究[J]．中华预防医学杂志，2008，42(4)：235—238. [26] 梁锐，张召锋，赵明，等.海洋胶原肽对剖宫产大鼠伤口愈合促进作用[J]．中国公共卫生，2010，26(9)：1144一1145. [27] 王竹青，李八方．生物活性肽及其研究进展[J]．中国海洋药物杂志，2010，29(2)：60一68. [28] 何平均．抗肿瘤寡肽类药物研究进展[J]．中国医药生物技术．2009，4(4)：288一290. [29] 孙立春，COY David H．多肽药物研究进展[J]．上海医药，2014，35(5)：55一60. [30] Fang H，Luo M，Sheng Y，et al. The antihypertensive effect of peptides：a novel altemative to drugs？[J]．Peptides，2008，29(6)：1062一1071. [31] 聂彩辉，徐寒梅．多肽药物的发展现状[J]．药学进展，2014，38(3)：1:6一202. [32] 李晓玉．安泰胶囊的免疫增强和保肝作用[J]．中国药理学通讯，1999，16(2)：28一30.
生物活性肽是蛋白质中25个天然氨基酸以不同组成和排列方式构成的从二肽到复杂的线性、环形结构的不同肽类的总称，是源于蛋白质的多功能化合物。活性肽具有多种人体代谢和生理调节功能，易消化吸收，有促进免疫、激素调节、抗菌、抗病毒、降血压、降血脂等作用，食用安全性极高，是当前国际食品界最热门的研究课题和极具发展前景的功能因子。以下为几种重要生物活性肽的发展状况。乳肽早在20世纪50年代，该公司即以乳酪蛋白酶解制取了第一代的酪蛋白肽和氨基酸混合物，含5～8个氨基酸组成的肽和70％以上的游离氨基酸，用于低抗原性防过敏牛奶粉，在市场上行销40多年；60～70年代，开发出第二代的高度水解乳清蛋白肽混合物，含10～12个氨基酸组成的肽和40％～60％的游离氨基酸。以上两代产品的游离氨基酸含量过高，影响了产品的风味和生物效价；90年代，推出了低度水解乳清蛋白肽混合物，含10～15个氨基酸组成的肽和20％以下的游离氨基酸，产品风味明显改善，生物效价提高。 992年，和研究了胰蛋白酶、凝乳蛋白酶等酶的固定化反应器制取乳肽的工艺，可以通过调节流速来控制反应程度，并通过重复使用酶来降低成本。1989年，.和.研究了带超滤膜的酶反应器，在反应器内加入钙和磷酸根离子，用于制备酪蛋白磷酸肽和去磷酸化酪蛋白多肽。 我国对乳肽的研究不多，主要是进行蛋白酶的筛选和酶解工艺的优化，如1991年，肖安乐等人筛选出胰蛋白酶的胰酶是水解变性乳清蛋白质的最佳酶种；1994年，王凤翼等人对胰蛋白酶控制水解α－酪蛋白的最佳条件进行了优选；张和平等人采用胰蛋白酶水解热敏性乳清蛋白，获得热稳定好、易溶解的多肽，并以此开发出稳定性良好的乳清饮料；1995年，于江虹也从牛乳酪蛋白中分离提纯获得酪蛋白磷酸肽，证实了其在小肠中可与钙、铁等矿物质形成可溶性络合物，促进人体对钙、铁的吸收；广州市轻工研究所生产的酪蛋白磷酸肽CPP含量达85％以上，易溶于水，加工性能稳定，已在我国市场上推出。最近，我国生物工作者开发了采用微生物发酵控制、蛋白转化率高的乳肽产品，其中氨态氮占20％左右、肽态氮占80％左右，产品无不良气味，已获专利；湖北工学院吴思方等人进行了固定化胰蛋白酶生产酪蛋白磷酸肽的研究，CPP得率为％，产品中CPP总含量为15％，此工艺中酶可重复多次使用，既降低了成本，又有利于产品分离和生产自动化。大豆肽大豆肽是大豆蛋白质经酸法或酶法水解后分离、精制而得到的多肽混合物，以3～6个氨基酸组成的小分子肽为主，还含有少量大分子肽、游离氨基酸、糖类和无机盐等成分，分子质量在1000μ以下。大豆肽的蛋白质含量为85％左右，其氨基酸组成与大豆蛋白质相同，必需氨基酸的平衡良好，含量丰富。大豆肽与大豆蛋白相比，具有消化吸收率高、提供能量迅速、降低胆固醇、降血压和促进脂肪代谢的生理功能以及无豆腥味、无蛋白变性、酸性不沉淀、加热不凝固、易溶于水、流动性好等良好的加工性能，是优良的保健食品素材。 大豆肽的生产有酸法水解和酶法水解。酸法因水解程度不易控制、生产条件苛刻、氨基酸受到损害而很少采用；酶法水解易控制、条件温和、不损害氨基酸而大多被采用。酶的选择至关重要。通常选用胰蛋白酶、胃蛋白酶等动物蛋白酶，也可选用木瓜和菠萝等植物蛋白酶。但应用较广的主要是放线菌166、枯草芽孢杆菌1389、栖土曲霉3942、黑曲霉3350和地衣型芽杆菌2709等微生物蛋白酶。 20世纪70年代初，美国首先研制出大豆肽，公司建成了年产5000吨食用大豆肽装置；日本于80年代开始研制大豆肽，不二制油公司首先采用酶法规模化生产出3种大豆肽，雪印和森永等乳业公司应用大豆肽生产食品。 我国近几年也开展了大豆肽的生产和应用研究。江西省科学院高科技中心李雄辉等人采用ASI389中性蛋白酶和木瓜蛋白酶双酶水解生产大豆肽，使大豆肽生成率为％，肽态氮含量大于85％，游离氨基酸含量小于8％，平均肽键长度5～8，分子质量2000μ左右。双酶水解工艺既缩短了酶解时间、提高了蛋白质水解度，又减轻了产品苦味。华南理工大学黄惠华等人用木瓜蛋白酶对大豆分离蛋白进行水解试验，测得木瓜蛋白酶的动力学常数。另外，无锡轻工大学的葛文光对大豆肽的生理功能及作用效果进行了研究；郭敏亮采用豆粕生产出大豆肽饮料等。 根据大豆肽的理化特性，可用大豆肽为基本素材，开发肠胃功能不良者和消化道手术病人康复的肠道营养食品的流态食品、降胆固醇、降血压、预防心血管疾病的保健食品，增强肌肉和消除疲劳的运动员食品、婴幼儿及老年人保健食品、促进脂肪代谢的减肥食品、酸性蛋白饮料和用作促进微生物生长、代谢的发酵促进剂等。高F值寡肽高F值寡肽即是由动、植物蛋白酶解后制得的具有高支链、低芳香族氨基酸组成的寡肽，以低苯丙氨酸寡肽为代表，具有独特的生理功能。F值是指支链氨基酸（BCAA）与芳香族氨基酸（AAA）的摩尔比值。 1976年，Yamashita等人首次利用胃蛋白酶和链霉蛋白酶从鱼蛋白和大豆分离蛋白酶解中制得含低苯丙氨酸的寡肽混合物，产率分别为％和％，苯丙氨酸含量分别为％和％。1982年，Nakhost等人用α－胰凝乳蛋白酶和羧肽酶A酶解大豆蛋白，也制得相似的产物。1986年，Soichi等人进行了多种酶分别酶解乳清蛋白制取低苯丙氨酸寡肽的多种工艺、方法试验，结果以胃蛋白酶－链霉蛋白酶两步水解法为佳，产品得率为％、苯丙氨酸含量为％。1991年，Shinya等人用嗜碱蛋白酶和肌动蛋白酶水解玉米醇溶蛋白，制取了无苦味高F值寡肽，产率为％，F值，AAA含量为％。 1996年，西班牙的Bautista等人用肌动蛋白酶和Kerase中性蛋白酶酶解葵花浓缩蛋白，制取高F值寡肽，产率为％，F值为，AAA含量为％。王梅也在1992年首次采用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶降解玉米黄粉；成功地研制出高F值寡肽混合物，产率为％，F值为，AAA含量为％，完全符合高F值制剂的要求，为解决玉米湿法淀粉厂副产品——黄粉的综合利用开创了新路子。 高F值寡肽具有消除或减轻肝性脑病症状、改善肝功能和改善多种病人蛋白质营养失常状态及抗疲劳等功能，除可制作治疗肝疾药品外，还可广泛用作保肝、护肝功能食品，烧伤、外科手术、脓毒血症等高付出病人及消化酶缺乏患者的蛋白营养食品和肠道营养剂，高强度劳动者和运动员食品营养强化剂等。谷胱甘肽（GSH）谷胱甘肽是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸经肽键缩合而成的活性三肽，广泛存在于动物肝脏、血液、酵母和小麦胚芽中，各种蔬菜等植物组织中也有少量分布。谷胱甘肽具有独特的生理功能，被称为长寿因子和抗衰老因子。日本在50年代开始研制并应用于食品，现已在食品加工领域得到广泛应用。我国对谷胱甘肽的研究尚处于起步阶段。 谷胱甘肽的生产方法主要有溶剂萃取法、化学合成法、微生物发酵法和酶合成法等4种，其中利用微生物细胞或酶生物合成谷胱甘肽极具发展潜力，目前即以酵母发酵法生产为主。 由于谷胱甘肽分子有一个特异的γ－肽键，决定了它在人机体中的许多重要生理功能，如蛋白质和核糖核酸的合成、氧及营养物质的运输、内源酶的活力、代谢和细胞保护、参与体内三羧酸循环及糖代谢，具有抗氧化、抗疲劳、抗衰老、清除体内过多自由基、解毒护肝、预防糖尿病和癌症等功效，因此而成为机体防御功能肽的代表。谷胱甘肽除可在临床上用作治疗眼角膜疾病，解除丙烯酯、氟化物、重金属、一氧化碳、有机溶剂等中毒症状的解毒药物外，还可用于运动营养食品和功能食品添加剂等。中国在生物活性肽的研究开发上，从事活性肽的研究单位也多从医药角度出发，研究力量及投入较少，限制了活性肽药食两用功能的发挥，市场上国产的活性肽药品和食品寥寥无几。但近几年研究逐步活跃起来，报道渐多，前景看好。当前生物活性肽研究开发的方向是：肽的定向酶解技术开发，包括高效、专一性强的酶种选育、复合酶系共同作用机理、机制，脱苦微生物的分离、纯化和机理研究，酶解工艺改进技术等；功能性肽的分离、分析技术开发，包括新型高效分离设备和分离工艺，灵敏度高、简单易行的目标肽活性分析检测体系和分析技术及下游精制技术；肽的功能性生物学评价研究；生物活性肽功能食品开发等。
EGF（Epidermal Growth Factor）—— 表皮细胞生长因子，又名人寡肽-1，是人体内的一种活性物质。
关于它的讨论一直挺多的
商家常用的宣传语是：“唯一得到诺贝尔奖的美容成分”、“尖端生物科技”，“皮肤衰老就是体内EGF减少造成的”。
但有相当数量、具备一定专业知识的反对者认为，EGF是纯忽悠，还觉得它致癌或导致增生。他们用一些相关论文佐证EGFr（人体细胞上的EGF受体）和多种癌症严密相关，并指出EGF不是合法护肤品添加成分，国家的许可成分里是没有EGF的。
使用者的反馈也是两极分化
有人认为非常有效，也有人觉得效果并不惊艳；有说EGF治好了敏感肌的，也有说一用就过敏的；有人觉得这成分美白祛斑，同时也有不少人说根本白瞎。
到底是怎么回事呢？
为方便时间紧张的童鞋，先上结论：
Wiki是这么定义EGF的
表皮生长因子（Epidermal growth factor，EGF），是最早发现的生长因子, 对调节细胞生长、 增殖和分化起着重要作用。人类的表皮生长因子蛋白有53个氨基酸残基，三个二硫键，质量6千道尔顿。
表皮生长因子通过与细胞表面的表皮生长因子受体(EGFR)结合而起作用。它与表皮生长因子受体的高亲和力结合，会激发受体内在的酪氨酸激酶的活性，从而启动信号转导系统的级联反应，发生多种生物化学变化。细胞内钙水平上升, 增加糖酵解与蛋白质合成, 增加某些基因(包括表皮生长因子受体)的表达, 最终导致DNA合成和细胞增殖。
结合相关文献与我们的亲身使用感受
我们是这样看待EGF的
（对权威性有强烈要求的读者，请自行以EGF或者人寡肽-1为关键词，检索相关论文。）
在表皮有破损、伤口的情况下
推荐的 EGF 修复效果
这一点已经不用多说， EGF最早的战场，也是在医学领域被用来促进创伤和烧伤的愈合，并在临床验证中取得了很好的效果。 各大EGF品牌早就把这个功能宣传的人尽皆知，不需要我们再背书了。
只简单的给一个观点：
不管是从我们自己的使用感受出发（美羊羊在激光后使用EGF的经历；张大叔在医美诊所的实地案例观察），还是从科学界的研究结果来看， 在表皮有明显创口、皮肤组织受损的时候，EGF可以帮助表皮细胞更快地分裂、再生，并促进组织的修复。
诺贝尔奖有点牵强
“唯一诺贝尔奖美容成分”，这估计是被宣传得最多的一句广告语。 但这句话其实不够准确，甚至颇为牵强， 准确的说法应该是“与诺贝尔生理学或医学奖有关的美容成分”， 因为：
用于日常护肤有点鸡肋
这部分应该是大多数童鞋最关心的。毕竟时不时去趟医美诊所，在自己脸上动动刀、扎扎针可不属于普罗大众的日常生活。 我们最关心的还是当用在健康皮肤上时，有没有宣传中的抗衰老效果。
EGF虽然确实有激发胶原蛋白、促进肌肤生长、修复胶原纤维的功效， 但我们一再说，它的威力，得在肌肤受损时、通过皮肤表面的创口进入皮肤内才能充分发挥出来。 在肌肤没有损伤的健康情况下，细胞接收到EGF也不会做出太大的反应。
而且在皮肤足够健康完整的情况下，外用EGF是否能如品牌宣传的那样被皮肤充分吸收和利用， 目前还没有定论。
首先，单独的优质EGF用在健康皮肤上的美容效果确实如科学界的实验报告一样，普遍不明显。有很多观点认为是分子量过大无法吸收造成的。不过也有一些乐观的声音，对于渗透率也有一些针对性的试验，比如用猪皮来测定外用EGF的吸收率等。同时EGF的具体的渗透率与肌肤状态也有关系。
而且，EGF作为信号蛋白，与一般常用的美容成分不同，被细胞的EGF-r吸收后，细胞如何做出回应，并不是单一因素造成的，这就决定了你使用的产品的配方和EGF的活性、纯度、保存条件的不同，也影响到你使用产品后的效果。
美羊羊自己也在皮肤健康时使用过EGF产品，总体来说看不到太多对皮肤的明显改善效果。
EGF产品背后的猫腻
既然当用于健康皮肤时，EGF的功效并不突出，为什么还有那么多童鞋感受到了非常明显的效果呢？
个人认为，有这种可能性： 他们买到的是名为EGF，实为多种成分复配的产品。 而国内某些EGF产品最常见的搭配成分就是各种胜肽，添加时的浓度往往还特别大方 （因为一些不可说的原因，成本一般比较便宜，比如使用的是仿版肽而非原厂产品）。
至于为什么要这么做？ EGF名气大、好宣传是一个原因；另外还有个原因，如果说是自产的EGF，可以显得有核心科技嘛 （那些肽都是有版权的，作为仿品真不适合拿出来宣传）。
胜肽的小知识
由于肽的种类太多，目前已知有应用的肽类已达四万多种，遍布各行各业，光护肤领域就有数百种。加之行业里肽类的命名比较随意，所以童鞋们非常容易搞混， 比如老以为六胜肽就是去皱的，其实六胜肽也分很多种。
肽类的一般命名方式如下： 以“ 乙酰基六肽-8 ”为例， 最前头的“乙酰基”说明这个肽使用乙酰基修饰， 类似的还有生物素、棕榈酰、肉豆蔻酰等修饰方法； “六肽”是指有六个氨基酸 （至于具体是哪些氨基酸，要看分子式，总共有20的六次方种排列组合） ； -8表示第一个造出或发现这个肽的厂商，认为这是第8种六肽，或者没准就是觉得8这个数字比较吉利（玩笑）， 所以加上了这个后缀，以和其他乙酰基修饰的六肽作区分。
事实上，很多肽类的这个后缀数字经常会由于命名冲突，不得不变来变去。也有时候某个肽类用的比较广泛，就直接命名为寡肽几了。
比如，EGF叫寡肽-1（它是第一个被发现的信号蛋白）。一般十肽以下归为胜肽或小分子肽；十肽以上、50肽以下归为多肽；五十肽以上就算蛋白质了。
新一代的EGF
对的，为了能让EGF在美容行业真正的发光发热，原料厂家真的没闲着。 EGF已经有仿生肽了，就是从EGF身上找到的片段组合——寡肽24。
寡肽24的分子量大幅小于EGF， 因而便于吸收且易于保存，潜在副作用可能也小了很多。而在美容方面的功效，目前被认为和EGF 差不多 （可以理解为就是这部分功效的片段）。
最早靠EGF起家，主打生物科技概念的美国奢侈护肤品牌ReVive（美羊羊以前推荐过，最近12亿美元出售给资生堂的那家），早已悄悄把全线产品里原来添加的EGF换成寡肽24了。 EGF如今应该已经算传统成分，而不是未来科技了。
EGF虽好，但不要贪杯哟
有这样一个人体内的信号蛋白质， 是造成脂溢性脱发、导致各种细胞衰老凋亡的重要因素， 除此之外没有其他功能。总之看起来坏事干尽，所到之处，尽是凋敝。
那么你是不是希望最好消灭掉这种信号蛋白质呢？
这个成分叫DKK1 ， 还真有研究人员做过实验，敲掉了老鼠胚胎的这种蛋白产生基因，想看看这样的老鼠是不是就不容易衰老了，结果却是全部胚胎直接畸形成死胎了。
因为DKK1在人体内的职责是： 让发育到位的器官等组织停止增生，是维持生命体各部分正常形态的重要信号蛋白。
而脂溢性脱发也是由于过多的DHT（双氢睾酮，一种雄激素，一般被认为会导致脱发）导致头发过度增生（你没看错，它其实是促进毛发增长的），DKK1赶紧来压制，结果不慎超过平衡造成的。
举这个例子是想说， 人体内的系统是一个复杂的平衡体系，这类信号蛋白的使用和抑制最好要格外谨慎。 EGF相比之下，算是相当安全的信号蛋白了， 但它在美容修复之外，同时具备的激发免疫系统活跃度、令肌肤细胞活跃度提升等能力也是双刃剑。
常见的情况就是， 长时间持续使用高浓度EGF后，有些童鞋会出现皮肤状态不稳定，容易长小油脂粒等问题。 即使是寡肽24，在此类作用小了很多的情况下，用的太多也会出现类似问题。
对此，ReVive的做法是，嘱咐购买了寡肽24含量最多的极致精华（1500美元20毫升）的用户，用完一套不要持续使用，过几个月再买下一套。
终极建议
我们对喜爱使用EGF的童鞋的建议也是这样：
1， 不要长时间持续使用高浓度产品， 效果反而更好。
2，在日常护肤中的使用浓度，也应该尽量保守一些。
一方面， 相当比例的人会对过多的EGF或EGF生产中带入的少量蛋白质杂质过敏； 另一方面， 绝大多数活性成分，都有通过实践获得的最佳浓度范围， 并非是浓度越高越好，也不是吸收得越多越快就更好。只不过一般护肤品里的活性成分，浓度普遍太低，才会让童鞋们产生浓度越高、吸收越快，效果就越好的这种错觉。
EGF的八卦
大部分EGF厂家总是只说Cohen为此获得诺贝尔奖。 可这些生长因子的发现者，也是主要研究者， 那次和Cohen共同获奖的传奇级别的著名美女（年轻时）—— 科学家Rita Levi Montalcini， 总是会被故意省略掉，为什么呢？
因为她在欧美实在太有名、太频繁出现了， 而她老年的样子大家都知道是这样的：
年轻时是这样哒：
有没有觉得EGF厂商们的宣传团队实在太颜（fu）控（qian）了。
其实从我们找到的报道来看， 她本人是从来没用EGF来抗面部衰老的。 因为从她发现动物舔舐伤口能够加速愈合开始，她和Cohen就针对EGF的愈伤方向进行研究。
另一方面， 她一直在使用自己发现的NGF（神经细胞生长因子）维持头脑健康， 生 前保持每天持续高强度工作，直到2012年，103岁的她忽然去世前，还一直如年轻人一样，思路敏捷、口齿伶俐、精力充沛得毫无衰退迹象—— 不过NGF的抗脑部衰老效果未得到大范围临床测试的明确证明， 单个案例暂时不能证明效果。
将蛋白质水解成多肽
催化纤维蛋白的水解
基因工程制药------浅谈摘要： 主要介绍基因工程的概念、基因工程技术开发药物的一般过程及基因工程药物，同时探讨了今后利用基因工程技术进行药物开发、研究的发展方向。正文：1 基因工程概述所谓的基因工程是指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其它载体分子，构成遗传物质的新组合，并使之参入到原先没有这类分子的寄主细胞内，而能持续稳定地繁殖。基因工程的第一个重要特征是跨越天然物种屏障的能力，即把来自任何一种生物的基因放置在与其毫无亲缘关系的新寄主生物细胞中去的能力。这表明人们有可能按照主观愿望创造出自然界中不存在的新物种。第二个特征是，它强调了一种确定的DNA小片段在新寄主细胞中进行扩增的事实．才能制备到大是纯化的DNA片断，从而拓宽了分子生物学的领域，使之在生物制药领域有巨大的应用。基因工程自从20世纪70年代初期问世以来，无论是在基础理论研究领域，还是在生产实际应用方面．都已经取得了惊人的成绩。基因组核苷酸全序列的测定与分析，是基因工程技术促进基础生物学研究的一个出色范例。2001年2月12 日，由6国的科学家共同参与的国际人类基因组公布了人类基因组图谱及初步分析结果，这结果为人们提供了约3000 多个基因可用来制药，将推进基因制药产业的快速发展。由于基因克隆技术的发展，已使得基因工程技术在工业生产尤其是制药生产中发挥了重要作用。以前人们利用微生物自身生产有用的产品，如利用青霉菌生产青霉素、利用链霉菌生产链霉素等。但是从这些生物体中分离纯化这些药物，不仅成本昂贵，而且技术上也相当困难。如今将编码这些药物的基因克隆并转移到合适的生物体内进行有效的表达，就可以方便地提取到大量的有用药物。2 基因工程技术开发药物的一般过程利用基因工程技术开发一个药物，一般要经过以下几个步骤：①目的基因片断的获得：可以通过化学合成的方法来合成已知核苷酸序列的DNA片段；也可以通过从生物组织细胞中提取分离得到，对于真核生物则需要建立cDNA文库。 ②将获得的目的基因片断扩增后与适当的载体连接后，再导入适当的表达系统。③在适宜的培养条件下，使目的基因在表达系统中大量表达目的药物。④将目的药物提取、分离、纯化，然后制成相应的制剂。以上方法大部分是以微生物或组织细胞作为表达系统．通过微生物发酵或组织细胞培养来进行药物生产。近年来，通过转基因动物来进行药物生产的"生物药厂"成为目前转基因动物研究的最活跃的领域，也是基因工程制药中最富有诱人前景的行业。转基因动物制药具有生产成本低、投资周期短、表达量高、与天然产物完全一致、容易分离纯化等优势，尤其是适合于一些用量大、结构复杂的血液因子，如人血红蛋白（Hb）、人血白蛋白（HSA）、蛋白C（Protein C）等。英国的爱丁堡制药公司通过转基因羊生产α1-抗胰蛋白酶（α1-AAT）用于治疗肺气肿，每升羊奶中产16g AAT，占奶蛋白含量的 30%，估计每只泌乳期母羊可产70g AAT。另外，转基因植物制药比转基因动物制药更为安全，因为后者有可能污染人类的病原体。目前，已经开发出许多转基因植物药物，例如脑啡肽、α-干扰素和人血清蛋白，以及两种最昂贵的药物即葡萄糖脑苷脂酶和粒细胞-巨噬细胞群集落因子等。3 基因工程药物基因工程药物自20世纪70年代末期以来，有了飞跃的发展。1978年首次通过大肠杆菌生产由人工合成基因表达的人脑激素和人胰岛素，1980年美国联邦最高法院裁定微生物基因工程可以获得专利．1982年第一个由基因工程菌生产的药物--胰岛素．在美国和英国获准使用以来，各种基因工程药物犹如雨后春笋，得到了蓬勃发展。我国的医药技术的研发和产业化也取得了长足的进展。（1） 抗生素类 传统的抗生素生产，主要利用化学合成或微生物发酵来获得，其生产过程中菌种的表达水平比较低，生产成本比较高，而且在使用过程中容易产生耐药菌群。而利用基因工程技术可以对生产菌种进行基因改造，得到表达水平高、产品目的性强的菌株，如大肠杆菌生产青霉素酞胺酶。德国一个科研小组对生产半合成青霉素的材料6APA．用基因工程来增强大肠杆菌的青霉素酰胺酶活性。将大肠杆菌的基因 PBR322的质粒克隆化所形成的菌株，其酶活力比原株提高 50倍．从而提高6APA生产能力。我国王以光利用基因重组技术对螺旋霉素产生菌进行改造，增强了丙酰基转移酶的基因在螺旋霉素产生菌中的表达，并提高了丙酰螺旋霉素的产量。（2） 活性多肽类 在人体中存在一系列含量较低，但生理活性很高，而且在人体代谢过程中起着重要的调节作用的活性多肽类物质如激素等，这些物质在临床上可以作为药物来治疗相应的因此类物质失衡而造成的疾病。此类药物的制剂多来源于各种动物的脏器，生产方法复杂，成本高，个别产品还必须从动物的尸体中进行提取，无法进行大规模工业化生产，自基因工程技术问世以来，通过基因重组技术，可以由微生动进行生产，这是基因工程技术的最大成就之一，以下是这类药物中比较典型的两个。胰岛素： Genentech公司在1978年，由Goeddel等学者应用基因重组技术开发出使用大肠杆菌生产人胰岛素。随着基因工程技术的不断发展，生产胰岛素的工艺和技术也不断得到完善，在临床上已经完全取代了由动物脏器提取得到的产品。目前，我国新疆转基因羊已能够成功表达人胰岛素原，为胰岛素的生产开发了新途径。生长素： 人类生长素临床用于治疗侏儒症和肌肉萎缩症．传统制造方法是由人脑下垂体抽提精制而得，其原料来源困难，产量受到极大限制。全世界侏儒症患者中仅有1%可以得到治疗，原因是生长素价格极其昂贵，达每克5000美元。1979年Genentech公司由Goeddel等学者应用基因重组技术首先开发出使用大肠杆菌生产人生长素．近年来还开发了以酵母菌来生产生长素，其产量可达到×106～× 106分子/细胞。目前，我国基因工程人生长素已研制成功，并投入市场和用于临床使用。除上述药物外，运用基因工程技术生产的这类药物还有神经生长因子（PDGH）、人基底成纤维细胞生长因子、绒毛膜促性腺激素等。（3） 细胞免疫调节因子 基因工程技术用于细胞免疫调节因子的产品较多，临床广泛应用于抗肿瘤和免疫调节等。近年来，由于基因重组和细胞融合两大技术的进步，加上高压液相层析技术、氨基酸序列分拆装置以及蛋白质的精制和解析技术的改进，使一些调节细胞免疫活性物质的研究和开发得到快速发展，如干扰素（INF）、白介素（IL）、集落刺激因子（CSF）和肿瘤坏死因子（TNF）等。干扰素是其中研究较为广泛，技术比较成熟，产业化较早的一个产品。第一代干扰素是从血液中进行提取而得到。据芬兰的K Canted报道，处理23000L血液，所得纯度1%以下的干扰素不足100mg．所以产量很低。而且由于血源质量不能保证，可能造成血源性传染病的传播。第二代干扰素是采用基因工程技术进行生产的，其生产水平可达250000分子/细胞，每升可含亿单位，成本显著下降，产品纯度很高，含量可达90%以上。目前，已经商品化的基因工程干扰素有α、 β、γ三种，而且生产技术也在不断完善。俄罗斯科学家构建了以假单胞菌为载体的表达系统来生产基因工程干扰素．与传统的大肠杆菌表达系统相比其培养周期短，细胞易于破碎便于提取。随着基因重组技术的不断发展，一些研究人员对干扰素基因进行改造，构建靶向干扰素基因及表达载体。夏小兵等利用限制性内切酶分别从含有抗乙型肝炎S抗原（HbSAg）人源单链抗体与人干扰素α质粒中切出目的基因，连接到 pET22b质粒中，构建成单链抗体靶向干扰素表达载体，在大肠杆菌中表达成功。（4） 疫苗传统的疫苗是病源微生物的减毒或灭活物质，但这些疫苗都不理想，有可能发生回复突变，恢复毒性；或者因为灭活不适当引起疾病流行。利用基因工程技术生产的新型疫苗，可以克服传统疫苗价格昂贵、安全性能差等缺点，能为目前尚无有效疫苗的某些特殊疾病如艾滋病，提供有效的治疗手段。第一个商品化的基因工程疫苗是抗人乙型肝炎病毒（HBV）的疫苗。我国大约有10% 的人口受到HBV的侵害， HBV的感染通常还与特殊的肝癌（HCC）有着密切的关系，每年全世界死于HCC的病人有30万左右。HBV具有高度的寄主专一性，只能感染人类和黑猩猩，这意味着只能从肝炎患者身上才能获得有限数量的病毒，供做疫苗使用，而且从患者血液中提取制备的疫苗，还有传染艾滋病的可能。利用基因工程技术生产的抗HBV疫苗克服了传统疫苗的缺点，质量和安全性高，用量极少，一般剂量为10mg以下，接种3次，为普通药品用量的千分之一。1982年P Valenzuela等人将S基因（HBV表面抗原基因）的一个片段克隆在一种载体上，结果在酵母中合成出来HBV表面抗原（HbsAg）颗粒，其产量达25 μg/L，酵母表达系统现在已经能够大规模生产供给人类使用的重组肝炎疫苗。大约20年前，人们发现"裸露"DNA注入体内能够诱发免疫反应，科学家们进行了大量研究，开发出了新型的核酸疫苗。所谓核酸疫苗，是指将编码某种抗原蛋白的外源基因（DNA或RNA）直接转移到动物体内，通过宿主表达系统合成抗原蛋白，诱导宿主对该抗原蛋白产生免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。现已开发出多种核酸疫苗，例如：流感核酸疫苗、艾滋病疫苗、狂犬病疫苗、结核病疫苗和乙型肝炎疫苗和戊肝疫苗等。（5） 基因治疗制品 基因治疗在1990年开始进行实验， 1993年美国FDA给人类基因治疗下的定义为："基于对活性细胞遗传物质的改变而进行的医学治疗，这种改变可以在活体外进行，然后应用于人体，或者直接在人体内进行"。因此，基因治疗存在两种方式，即间接体内法和体内法。间接体内法主要是通过在体外进行基因转移，筛选可表达外源基因的细胞，然后再转移到体内；体内法则是直接在体内改变与修复遗传物质。随着分子生物学、基因重组技术的发展，有关目的基因的获得方法已趋成熟，但是，目的基因的转移传递系统、目的基因的表达调控以及疗效和安全性还需进一步研究证实。目前，基因转移系统主要是两类：一类是由病毒介导的基因转移系统，主要包括逆转录病毒（Rt）、腺病毒（Ad）、疱疹病毒（HSV）和腺病毒相关病毒（AAV）载体等。Nnldini等开发出一种基于HIV的重组Rt载体，不需要辅助细胞，能广泛感染各种非分裂细胞，同时保留了能整合在宿主染色体上的特点。世界上第一例基因治疗所采用的载体即是Rt载体，治疗腺苷酸脱羧酶缺乏所致的严重联合免疫缺乏症（ADA-SCID）。另外一类是非病毒介导的基因转移系统，包括脂质体、分子偶联载体、基因枪和裸DNA等。另外，反义核苷酸技术也应用于基因治疗，尤其在抗乙肝病毒的基因治疗方面，包括反义DNA、反义RNA和核酶 RNA等。2001年，Robaczewska等首次通过静脉给予反义 DNA，选择性抑制北京鸭HBV在鸭肝脏中的复制和表达，证明了反义DNA在动物实验中的有效性。美国Viagene公司研究出一种被称为"艾滋病毒免疫制剂"，该药为一种鼠逆病毒与核心蛋白编码的基因序列和HIV表面抗原RNA结合产物，在小鼠和灵长类动物试验中确定该药能诱导出强的 HIV-特异性杀伤细胞。4 结束语基因工程技术使药品开发发生了根本性的转变。传统的药品开发方式是在大量的化学合成物质和微生物代谢产物中进行随机筛选，得到其中的有效成分作为新的药物。采用基因工程技术开发新药，是通过对致病机理的研究，找到那些可用于治疗目的的有效成分以及其编码基因，经过基因重组将其转入适当的载体，大量表达其有效成分作为治疗药物。同时，基因工程技术给药品生产技术带来了革命性变化。过去一些生产困难的产品，如激素、酶、抗体等一些生物活性物质，通过基因工程手段可以高质量、高收率地付诸生产，同时生产成本也大幅度降低，提高了患者的用药水平和生活质量。基因工程技术在传统医药不能有效治疗的一些疾病，如癌症、艾滋病、遗传病等的诊断、治疗和预防等方面提供了有效的新手段，并取得了一些重大的突破。如发现了致癌基因，可使癌症的早期诊断和治疗药物的开发成为可能。随着分子生物学和基因重组技术的发展，我们相信这些严重危害人类生命的疾病，在不久的将来会得到有效的预防和治疗。
细胞工程论文
细胞工程是生物工程的一个重要方面。总的来说，它是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法，按照人们的设计蓝图，进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。下面是我为大家整理的细胞工程论文，欢迎阅读。
【摘要】 目的制作去细胞肌肉组织工程支架，并检测其与人羊膜上皮细胞的生物相容性。方法 采用TNT和十二烷基磺酸钠结合的化学萃取方法制作去细胞肌肉组织工程支架，冰冻切片观察其结构。将人羊膜上皮细胞种入支架培养7 d后，用免疫组化检测羊膜上皮细胞的增殖活性、NT3及BDNF的表达,扫描电子显微镜观察其超微结构。结果 支架中细胞去除完全，其主要结构为平行排列的管状结构。细胞外基质的主要成分弹性纤维和胶原纤维保持完好。羊膜上皮细胞在支架里有增殖活性，并呈现NT3、BDNF免疫反应阳性。扫描电镜显示，羊膜上皮细胞在支架中分布均匀，生长良好。结论 成功的制作了去细胞肌肉组织工程支架，其与人羊膜上皮细胞有良好的相容性。
【关键词】 去细胞肌肉;人羊膜上皮细胞;生物相容性
近年来组织工程研究的重要进展之一就是采用自体或异体移植物制作天然生物降解材料的组织工程支架。其中去细胞移植物与机体有良好的生物相容性。去细胞肌肉支架可作为生物工程支架支持神经细胞轴突再生。Mligiliche等〔1〕把去细胞肌肉移植入大鼠坐骨神经缺损处,4 w后发现有大量神经轴突长入去细胞肌肉支架中。由于单独应用去细胞肌肉支架治疗神经系统疾病的效果有限，去细胞肌肉支架要发挥更大的作用往往需要向支架中植入种子细胞〔2，3〕。研究表明羊膜上皮细胞可分泌多种神经因子〔4，5〕，促进神经元轴突的生长，是一种良好的治疗神经系统疾病的种子细胞。本研究利用化学去细胞的方法制成去细胞肌肉支架，并把羊膜上皮细胞种入去细胞肌肉支架内，探究两者的相容性，为开展组织工程治疗神经系统方面的疾病提供新的途径。
1 材料与方法
材料
实验动物 Wistar 大鼠由吉林大学白求恩医学院实验动物中心提供。
试剂 IMDM培养基及小牛血清由Hyclone 公司提供。5′溴尿嘧啶核苷(BrdU) 及BrdU 单克隆抗体购自Neomarker公司;神经营养素(NT)3,脑源性神经营养因子(BDNF)兔抗人多克隆抗体购自武汉博士德公司，SABC免疫组化试剂盒购自福州迈新生物公司。人羊膜上皮细胞株为本实验室保存。
方法
去细胞肌肉支架的制备 参考 Brown等〔6〕去细胞膀胱的制作方法制备去细胞肌肉支架，简述如下：取Wistar大鼠腹锯肌，放入蒸馏水中，在摇床中以37℃、50 r/min摇48 h后,转入3%的TritonX100溶液,摇床中37℃、50 r/min摇48 h。然后放入蒸馏水中，摇床37℃、50 r/min摇48 h。换成1% SDS溶液，摇床37℃，50 r/min摇48 h。PBS洗24 h。PBS中4℃保存备用。
支架形态结构的观察及成分鉴定 肉眼观察去细胞肌肉的形态。去细胞肌肉用4%多聚甲醛PBS固定1 h，5%蔗糖90 min，15%蔗糖90 min，30%蔗糖过夜以梯度脱水，OCT包埋，冷丙酮速冻，之后放入-70℃冰箱保存。恒冷箱切片机切片，HE 染色，观察其内部结构。此外对切片进行Van Gienson(VG)染色和 Weigert染色(VG+ET染色)检测支架的细胞外基质成分。
人羊膜上皮细胞的培养 人羊膜上皮细胞在DMEM培养液中(含10%胎牛血清，100 U/ml青霉素，100 mg/ml链霉素，200 μg/ml的谷氨酰胺)，37℃、5 % CO2及饱和湿度条件下的细胞培养箱中培养，隔天换液，待单层培养细胞生长至80%汇合后，传代培养。
人羊膜上皮细胞与去细胞肌肉支架相容性的鉴定
取生长良好的人羊膜上皮细胞，80%细胞接近融合，弃去培养液，胰蛋白酶消化，当胞体回缩，细胞间隙变宽时，用血清终止消化，反复轻吹瓶壁细胞，制成单细胞悬液于离心管中，1 000 r/min，离心3 min。用DMEM重悬细胞。用1 ml注射器吸入细胞悬液，以2×106/ml 密度注入去细胞肌肉支架中分装至24孔板中，在37℃、5 % CO2及饱和湿度条件下的细胞培养箱中培养，隔天换液，培养1 w。掺入Brdu(终浓度为10 mg/L)，继续培养1 d后，恒冷箱切片机切片(方法同前)。切片经PBS 洗后，3% H2O2灭活内源性过氧化物酶10 min，血清封闭20 min;一抗用BrdU(1∶1 000稀释)单克隆抗体，BDNF和NT3多克隆抗体(1∶100稀释)4℃孵育过夜，PBS 洗后，二抗37℃孵育30 min，PBS 洗后，SABC37℃孵育30 min，DAB显色。光镜下观察。
扫描电子显微镜鉴定羊膜上皮细胞在去细胞肌肉支架上的生长情况 取生长良好的人羊膜上皮细胞，80%细胞接近融合时，用上述方法消化下来后，把羊膜上皮细胞种植到去细胞肌肉支架中，放在24孔板中，在37℃、5 % CO2及饱和湿度条件下的细胞培养箱中培养7 d后，用2%戊二醛固定后，梯度乙醇脱水，CO2临界点干燥，镀膜，采用扫描电子显微镜观察并拍照。
2 结 果
支架的组织结构与成分 去细胞肌肉外观呈乳白色,半透明,质地柔软。从大体上看，肌肉去细胞前后整体大小与形状无显著变化。支架纵切面的HE染色观察可见骨骼肌细胞成分消失,而纤维网架结构保持完整，支架内主要为平行管道。VG+ET染色证明支架成分主要为胶原纤维和弹力纤维等细胞外基质成分，胶原纤维为红色波浪状结构，弹性纤维为蓝色丝状结构，见图1。
羊膜上皮细胞与去细胞肌肉支架的兼容性 见图2，HE染色显示人羊膜上皮细胞在支架中生长良好，分布均匀(图
图1 去细胞肌肉支架大体与组织切片染色
图2 去细胞肌肉支架的病理图片2A)。免疫组化染色显示，BrdU阳性细胞数目多，提示支架中的人羊膜上皮细胞有增殖能力(图2B)。抗NT3和BDNF染色显示，支架中的人羊膜上皮细胞含有NT3、BDNF阳性颗粒，呈棕褐色分布在细胞质中(图2C，2D)。JSM5600LV扫描电子显微镜显示，在支架内部分布有大量细胞，细胞在支架中分布比较均匀，生长状态良好(图2E)。
3 讨 论
理想的支架材料应与细胞外基质类似，与活体细胞有良好的生物相容性〔7，8〕。去细胞肌肉作为治疗神经损伤的生物工程支架材料有如下优势：(1)去细胞肌肉的细胞外基质成分对组织细胞的'迁移、黏附、生长代谢都有重要作用，研究表明再生的轴突可以很好的黏附在去细胞肌肉支架上〔9〕。(2)去细胞肌肉的排列结构与神经膜管类似,仅在直径上略大于神经膜管〔10〕，它们提供了轴突可生长穿过的足够空间〔9〕，该结构对于诱导神经轴突再生是十分重要的。 Fansa等比较了接种施万细胞的不同去细胞生物材料(肌肉，静脉，神经外膜)桥接缺损的外周神经的结果，发现缺乏神经膜管样结构的去细胞肌肉支架(静脉和神经外膜支架)中的再生轴突是无序和排列混乱的，而有神经膜管样结构的去细胞肌肉支架中的再生轴突是有序排列的〔11〕。这种轴突再生的有序性对神经损伤的轴突再生同样也是十分重要的。(3)去细胞肌肉引起的免疫排斥反应较小〔9，12〕。这些优势都说明去细胞肌肉可作为治疗神经损伤的理想的材料。本研究采用的制作去细胞肌肉的方法主要用来减少异种移植材料的免疫排斥反应。该方法能有效的去除脂膜和膜相关抗原以及可溶性蛋白，并能有效的保留细胞外基质成分的原始空间结构。肌细胞正常呈平行分布，其细胞外基质成分也是平行分布的，从支架纵切面的结果看支架的纤维成分也是平行排布的，VG+ET染色结果显示细胞外基质的主要成分胶原纤维和弹性纤维保持完好。这些结果进一步证实此方法可成功制备去细胞肌肉支架。
由于单独应用去细胞肌肉支架治疗神经系统疾病的效果有限〔13〕，去细胞肌肉的生物相容性也有待验证。本研究用人羊膜上皮细胞作为种子细胞种入去细胞肌肉支架以探讨其相容性。研究表明，羊膜上皮细胞中含有多种生物活性因子，包括黏蛋白、转移生长因子、前列腺素E、表皮生长因子样物质,IL1，IL8 等因子，另外，还可分泌BDNF和NT3等重要的神经营养因子〔4〕。其中层黏蛋白、BDNF和NT3等生物活性因子对神经损伤的治疗具有十分重要的作用。羊膜上皮细胞可作为一种较理想的种子细胞，与去细胞肌肉支架结合可能成为治疗神经系统疾病的一个理想的组织工程材料。本实验观察到人羊膜上皮细胞在去细胞肌肉支架中分布均匀，抗BrdU、BDNF及NT3免疫组化显示去细胞肌肉支架中羊膜上皮细胞有良好的增殖能力，并能表达BDNF和NT3，说明羊膜上皮细胞在去细胞肌肉支架中保持了良好的生物学活性。以上结果一方面证明了本研究制作的去细胞肌肉支架有良好的生物相容性，另一方面为应用羊膜上皮细胞和去细胞肌肉支架结合治疗神经系统疾病提供了理论和实验基础。
总之 ，本研究成功制备了去细胞肌肉支架，并证实人羊膜上皮细胞在去细胞肌肉支架中能分泌重要的神经营养因子，人羊膜上皮细胞与去细胞肌肉支架桥接体为神经缺损再生提供了基底膜、神经营养因子等种种有利因素，构成了良好的神经再生微环境，有利于使神经缺损得到较好地修复，为进一步研究羊膜上皮细胞与去细胞肌肉支架桥接体治疗神经损伤奠定了一定的实验基础。
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药学毕业论文开题报告篇3 题 目 名 称： 番泻叶对小鼠尿量的影响 研究现状： 一、普鲁兰酶 普鲁兰酶(Pullulanase，. 2. 1. 41)是一种能够专一性切开支链淀粉分支点中的α糖苷键，从而剪下整个侧枝，形成直链淀粉的脱支酶。普鲁兰酶还可以分解普鲁兰多糖，普鲁兰酶来源于微生物，R-酶则来源于植物。普鲁兰酶最初是由Bender和Wallenfels于1961年通过产气气杆菌Aerobacter. aerogenes}(典型菌为肺炎克雷伯氏杆)发酵获得，他们报道了该酶良好的酶学性能。之后，各国的科研人员经过广泛深入研究，从不同的地区、微生物中获得该酶，掀起了开发普鲁兰酶的高潮。 在淀粉加工工业中，α淀粉酶最为常用，它的功能是水解淀粉的α-1,4糖苷键，单独用它时，产物中含有大量分支结构的糊精，其中就含有大量的α-1,6糖苷键。假如不把淀粉的α-1,6糖苷键彻底分解的话，势必会造成很大的浪费。自然界中，存在有能分解淀粉的α-1,6糖苷键的酶，通称为解支酶。如寡α-1,6葡萄糖苷酶( , Oligo-l,6-glucosidase )，普鲁兰酶( )，异淀粉酶( , Isoamylose )，支链淀粉一6-葡聚糖酶( )，其中普鲁兰酶要求的底物分子结构最小，故而可以将最小单位的支链分解，导致可以最大限度的利用淀粉，所以在淀粉加工工业中有着重要的用途和良好的市场前景。故而许多国家都争相开发，但是到现在为止，只有丹麦的NOVO公司具有普鲁兰酶的生产能力。我国只有向其进口，但是其价格昂贵，限制了普鲁兰酶在我国的应用。其实，我国早在七十年代就开发普鲁兰酶的产生菌，但是该菌的酶学性质不适合生产，至今我国在普鲁兰酶的国产化方面还没有报道。 在淀粉的加工行业上，对普鲁兰酶的酶学性质的要求是耐酸耐热，其原因是因为通常使用外加酶化法，由于所用酶类的限制，普鲁兰酶的添加可以在两步反应的任何一步，但必须满足上述的反应的条件。因此所开发的普鲁兰酶的酶学性质必须满足现有的酶法水解制糖的条件，也就是耐酸耐热。 二、普鲁兰酶的研究现状 1.产普鲁兰酶的微生物 普鲁兰酶最初是由Bender和Wallenfels于1961年通过产气杆菌(Aerobacter aerogenes)发酵获得。他们报道了该酶的良好性能之后，各国的科研人员经过广泛深入的研究，从不同的地区的微生物中获得该酶，掀起了开发普鲁兰酶的高潮。但是迄今为止，尽管发现许多微生物能够产普鲁兰酶，但是由于当今工业生产条件(酸性，温度)，大多数微生物所产的普鲁兰酶并无商业价值。以下便介绍一下普鲁兰酶的生产菌种。 蜡状芽抱杆菌覃状变种(Bacillus cereus ) 由日本的ToshiyukiTakasaki于1975年发现。该菌同时产生两种淀粉酶:β-淀粉酶和普鲁兰酶。最佳作用条件为pH6～，温度50℃，最大转化率(淀粉水解产生麦芽糖)大约为95%.酶学研究中发现，此酶在pH5，温度60℃依然保持大部分活性，该菌的营养细胞呈棒杆状，聚集成长短不等紊乱链状，无运动性，格兰氏阳性，产芽抱时细胞无明显膨胀。该菌最适生长温度30℃～37℃ ,最高生长温度在41℃～45℃，可以利用葡萄糖，甘露糖，麦芽糖，海藻糖，淀粉和糖原。 嗜酸性分解普鲁兰多糖芽抱杆菌() 上世纪八十年代初，丹麦Novo公司获得此菌，此菌所生产的普鲁兰酶耐热 (60℃)，耐酸()。该公司经过投入巨资开发研究，1983年Nov。公司在日本和欧洲市场同时商业化销售，商品名Prornozyme。如今，它是应用最广，产量最大的普鲁兰酶。呈棒状，深层发酵几小时后，可观察到类原生质体的膨胀细胞，较稳定，饱子呈圆柱体或椭圆体。格兰氏反应阳性，37℃生长良好，45℃以上和pI-1高于以上不长，在以普鲁兰糖为碳源的培养基(( ～)上生长良好。 枯草芽饱杆菌(Bacillus subtilis) 1986年，日本的Yushiyuki Takasaki报道了一株能产生耐热耐酸普鲁兰酶的菌种，被命名为Bacillus subtilis TU。此菌种所产生的酶为普鲁兰酶和淀粉酶的混合物，可水解淀粉为麦芽三糖和麦芽搪.水解普鲁兰糖为麦芽三糖，其中普鲁兰酶最佳作用pH为～，但在时亦有约50%的酶活，此普鲁兰酶最佳作用温度60℃。 耐热产硫梭菌(Clostridum Themosulfurogenes) 1987年.德国的等报道了一株能同时产a淀粉酶、普鲁兰酶和葡萄糖淀粉酶的菌种:耐热产硫梭菌。该菌种所产普鲁兰酶有较广的温度适应范围(40℃～85℃)，在～有较高的活性，在如此广的范围内都有较强活力无疑将扩大该普鲁兰酶的应用领域. Bacillusnaganoensis,Bacillus deramificans, 上世纪九十年代，Deweer发现了普鲁兰酶产生菌Bacillus naganoensis;Tomimura筛选出Bacillus deramifrcans。这两株菌所产的普鲁兰酶的酶学性质与Bacillus. Acidopullulyticus的酶学性质相似。这两株菌都是中度嗜酸菌，在以上就不生长，温度超过45℃以上同样也不生长。这两株普鲁兰酶产生菌的发现，进一步拓宽了普鲁兰酶的应用。 产普鲁兰酶的高温菌菌种 自上世纪八十年代以来，人们逐渐意识到在通常的自然条件下，很难筛选得到极端耐热的普鲁兰酶生产菌种，于是各国的科学家便把目光转移到温泉嗜高温细菌的筛选，而且现在已经取得较多的成果。Bacillus如vorcaldarius所产普鲁兰酶的最适温度和pH分别是75～85℃, , Thermotoga maritime的最适温度和pH分别是90℃, , Thermurs caldopHilus的最适温度和pH分别是75℃,, Fenidobacterion pernnavoran最适温度和pH分别是80～85℃, 2.普鲁兰酶的分子结构 至今为止，许多普鲁兰酶的基因己经被克隆，但是还没有见到任何有关普鲁兰酶结构的报道，但是在根据序列相似性对糖普键水解酶的分类，普鲁兰酶属于第13家族，α淀粉酶家族，这个家族中包含了30多种酶，可以分为水解酶，转移酶。异构酶三大类。这些酶能够水解和合成α～,α～,α～,α～,α～,α～糖苷键。其中很多酶的结构已经被报道，它们都采取了(β/α)8的结构，通过生物信息学的研究，这个家族的蛋白都有一个共同的结构，酶的活性中心都是(β/α)8折叠筒的结构，命名为结构域A。第13家族的大多数酶还具有结构域B，它是位于(β/α)8折叠筒中，第三个β片层与第三个α螺旋之间的一段序列，其特点是结构和长度差异较大，推测其功能是与底物的结合有关。在紧接着(β/α)8折叠筒后，还有C结构域，紧接C结构域，部分家族成员还有结构域D。 3.普鲁兰酶的应用 普鲁兰酶，在食品工业中是一种用途广泛的酶制剂和加工助剂。它能专一性分解淀粉中的支链淀粉和糖原分子及其衍生的低聚糖分支中的α～l, 6糖苷键，使分支结构断裂，形成长短不一的直链淀粉。因此，将该酶与 其它 淀粉酶配合使用时，可使淀粉糖化完全。近年来，普鲁兰酶己作为淀粉酶类中的一个新酶种，应用于淀粉为原料的食品等工业部门，在食品工业中有如下几方面的作用: 单独使用普鲁兰酶，使支链淀粉变为直链淀粉 直链淀粉具有凝结成块，易形成结构稳定的凝胶的特性，因此，可作为强韧的食品包装薄膜。这种薄膜对氧和油脂有良好的隔绝性，又因涂布开展性好，故适合于作为食品的保护层。它还适合于淀粉软糖制造，也可用作果酱增稠剂，用于装油脂含量高的食品，以防止油的渗出以及肉食品加工。近年来在食品工业中提倡使用可被生物降解的薄膜，直链淀粉在这些方面具有较大的发展前途。豆类直链淀粉含量较高，因此绿豆淀粉制成的粉丝韧性比其它淀粉好，如果用普鲁兰酶处理谷物淀粉，再制成直链淀粉后，可以制成高质量的粉丝。一般谷物淀粉中，直链淀粉含量仅占20%，支链淀粉含量约为80%。工业上每生产1吨直链淀粉就有4吨副产品的支链淀粉。美国虽然通过遗传育种的方法.得到含直链淀粉60%玉米新品种，但不大适于大量生产。国外已采用普鲁兰酶改变淀粉结构，可使支链淀粉变为直链淀粉。据报道，采用此法收率可达100%.制造直链淀粉的方法为，先采用普鲁兰酶分解经液化的分支部分，使其转变为直链淀粉，并以丁醇或缓慢冷却法沉淀淀粉。再回收含少量水分的晶型沉淀物，最后通过低温喷雾干燥法制成粉状的直链淀粉。 普鲁兰酶与β～淀粉酶配合使用生产麦芽搪 饴糖是我国传统的淀粉糖产品，其中所含部分麦芽糖，广泛用于糖果、糕点等食品工业。目前生产方法是以α～淀粉酶进行液化，再用β～淀粉酶水解支链淀粉，这样只能水解侧链部分。接近交叉地位的α～糖苷键时，水解反应停止。但如果使用普鲁兰酶共同水解，便能使分支断裂，提高淀粉酶水解程度，降低了β极限糊精的含量，大大提高了麦芽糖的产率，有利于生产麦芽搪浆。目前对加普鲁兰酶进行糖化己作了较大规模的试验。 试验条件为。每批投料量约为900公斤碎米，粉浆浓度为15～16Be°数皮用量(对碎米计)，β～淀粉酶活性2,000单位/克以上，;普鲁兰酶活性45,000～55,0 00单位/克，系由产气气杆菌生产，每批用量为1公斤。试验结果表明，加入普鲁兰酶糖化的试验糖与对照糖品相比，还原糖平均增加，麦芽糖含量平均增加了，糊精含量平均减少了高浓度麦芽糖浆较之高浓度葡萄搪浆，具有不易结晶，吸湿性小的特点，所以高浓度麦芽糖浆在食品工业中有着广泛的用途。采用普鲁兰酶与p一淀粉酶配合使用，成本低廉，麦芽糖收率达到70%左右，其至更高。 用于啤酒外加酶法糖化 啤酒生产中麦芽，既是酿造啤酒的主要原料，也为酿造过程提供了丰富的酶源。在啤酒酿造的糖化过程中，麦芽中分解淀粉的主要酶是α～淀粉酶、β～淀粉酶和分解淀粉α～1. 6糖瞥键的R一酶(植物普鲁兰酶或植物茁霉多糖酶)。β～淀粉酶与另两种淀粉酶协同作用，可使淀粉分解成麦芽糖(也包括少量的麦芽三糖和极少量的葡萄糖)和低分子糊精。使麦芽汁有比较理想的糖类组成。在工业生产中为了节约麦芽用量，采用所谓外加酶法糖化，即在减少麦芽用量的前提下，增加淀粉质辅助原料的比率，并加入适当种类的酶制剂进行搪化。要使大麦及其它辅助原料糖化完全，需要外加a一淀粉酶和分解α～糖苷键的普鲁兰酶制剂等。单独使用a一淀粉酶时产生麦芽糖和麦芽三搪是很不完全的。假如分解淀粉α～糖苷键的酶活性不足，淀粉分解就不完全，其结果是可发酵性糖含量低，制成的啤酒发酵度达不到要求。若采用能分解α～和α～糖苷键的糖化型淀粉酶，则其反应产物为葡萄糖，容易使酒味淡薄。采用普鲁兰酶与α～淀粉酶协同，效果良好，其分解产物主要是麦芽糖和少量的麦芽多糖。采用外加酶法糖化时，加入酶制剂的用量为:淀粉酶6～7单位/克大麦及大米:蛋白酶，60-80单位/克，并配合以菠萝蛋白酶10ppm，普鲁兰酶50单位/克大麦。以上三种酶制剂均添加于糖化或酒化开始。 总之，普鲁兰酶无论作为酶制剂和食品工业的加工助剂均有广阔的发展前途。 研究目的和意义： 酶制剂工业是上世纪七十年代就己经形成的一个重要的产业，目前世界酶制剂总产值达100亿美元，我国的产值约为100亿人民币，并且随着其应用领域的不断扩大以及新酶种的开发，这一市场正在迅猛发展。但是全球酶制剂产业几乎被几家外国公司所垄断，其中丹麦的NOVO公司几乎占全球总销售额的一半。本研究对普鲁兰酶的开发，对酶制剂产业的发展有重要的意义。 其次我国自从七十年代开始便对普鲁兰酶进行研究开发，但是所开发得到的普鲁兰酶，既不耐热也不耐酸，这就使其在工业化应用中受到了局限。为了改变我国对进口产品的依赖，填补我国这一领域的空白，寻找一条国产化的道路，本研究的目的是利用自然微生物资源，普鲁兰酶，提高我国淀粉原料的利用率，从而提高整个淀粉加工行业的生产率，这对我国淀粉加工产业的意义是不言而喻的。 研究内容(内容、结构框架以及重点、难点)： 一.普鲁兰酶产生菌的筛选 (1)样品的采集; (2)菌种初筛; (3)菌种复筛; (4)菌种保藏方法; (5)酶活力测定方法的建立。 二.产普鲁兰酶菌株的产酶条件的研究 (1)碳源，氮源对发酵产酶的影响; (2)初始PH对发酵产酶的影响; (3)接种量对发酵产酶的影响; (4)发酵温度对产酶的影响; (5)金属离子对产酶的影响。 重点或关键技术： (1)纯菌株的分离; (2)菌株的鉴定方法的选择。 研究方法、手段： 一.普鲁兰酶产生菌的筛选 (1)样品的采集：选择适合产生的地点(面粉厂.菜地.果园等)采集土样 (2)菌种初筛：在采集的土样用无菌水稀释后，在含有淀粉类的培养基中做平板涂步， 37℃培养48h后，用碘液进行显色反应，将有淀粉酶产生的菌落接于斜面中保存。 (3)菌种复筛：将前期分离的能产生淀粉酶的菌株涂步于普鲁兰糖平板上，37℃培养48h后用95%乙醇进行透明圈实验。有透明圈产生说明菌株产生普鲁兰酶，将产生透明圈的菌落挑于斜面培养基培养。 (4)菌种保藏方法： 采用4℃低温保藏。 (5)酶活力测定方法的建立：采用发酵培养液经过离心后利用DNS显色法 520nm测定吸光值，测定标准葡萄糖标准曲线，利用标准曲线计算普鲁兰酶酶活大小。 二.产普鲁兰酶菌株的产酶条件的研究 (1)碳源，氮源对发酵产酶的影响：采用不同碳源，氮源培养基培养一段时间，测定酶活力。(其他条件相同：接种量，装瓶量，初始PH值，转速，培养时间。) (2)初始PH对发酵产酶的影响：采用相同发酵培养基，在不同初始PH下接种等量种子液。在相同条件下培养，测定发酵液的酶活。(其他条件相同：接种量，装瓶量，转速，最佳培养温度，最佳培养时间。) (3)接种量对发酵产酶的影响：在发酵培养基中分别接入2%，4%，6%，8%， 10%，14%，18%的种子培养液于最佳碳源，氮源，最佳初始PH的培养基中，在相同条件下培养，分别检测酶活。(采用以上确定的最佳碳源，氮源，最佳初始PH。) (4)发酵温度对产酶的影响：采用相同培养基，在不同温度下(25℃，30℃，35℃，40℃，45℃)培养一定时间，测定酶活力。 (5)金属离子对产酶的影响：在基础培养基中加入少量不同金属离子，发酵后测酶活。(金属离子有： 锰离子，钙离子，锌离子，镁离子，铁离子，铜离子。) 研究进度 ：完成项目总体进度30%，样品土样的采集及前期的准备工作,菌株的初筛，包括(样品土样原液的涂步培养及摇床培养，产支链淀粉酶菌株的挑选及斜面培养)。 ：完成项目总体进度50%,菌株的复筛，包括(产普鲁兰酶菌株的筛选及斜面培养),葡萄糖标准曲线的测定,酶活测定方法的建立,并以酶活大小对菌株进行再次筛选。 ：完成项目总体进度80%,产酶条件的研究。包括：碳源，氮源，初始PH值，接种量，发酵温度，金属离子。并通过各中单因素试验确定发酵培养基的最佳碳源，氮源，初始PH值，接种量，发酵温度，金属离子。 2009、4—2009、5 ：完成项目总体进度100%,课题总结，撰写论文。 文献综述(包括：国内外研究理论、研究方法、进展情况、存在问题、参考依据等) 自从1961年Bender H.等人在研究一株产气气杆菌Aerobacter aerogenes(典型菌为肺炎克雷伯氏杆菌)时首次发现普鲁兰酶后，国际上对产生这种酶的微生物进行了广泛研究，发现许多微生物可以产生此酶，并筛选出一些适用于工业化生产的优良菌株。随着该酶的应用发展，对耐热性普鲁兰酶的研究也逐渐增多，已成功克隆并表达了该酶的基因。国内1976年开始对一株产气气杆菌(Aerobacteraerogenes 10016)的普鲁兰酶进行研究，对该菌株的产酶条件、酶的分离提取及酶学性质作了报道，并研究了该酶的食品级提取技术。此外，陈朝银、刘涛等人从云南温泉水样中筛选到一株产普鲁兰酶高温栖热菌菌株，通过诱导等实验将该酶的酶活从提高到170u/mL，酶产量提高了近2500倍左右，酶的最适作用温度及pH分别是75℃和，具有一定的耐热和耐酸特性。 陈金全等从温泉水样中筛选到一株产耐热耐酸普鲁兰酶的野生菌株，并根据形态、生理生化特征、细胞化学组分分析及16SrDNA序列比对、基因组DNA的G+C摩尔百分含量、同源性比对等实验，鉴定其为脂环酸芽抱杆菌属(Alicyclobacillus)的一个新种，所产酶最适作用温度为60℃，最适pH值，具有较好的耐热耐酸特性。杨云娟等利用毕赤酵母成功构建了普鲁兰酶表达量较高的基因工程菌，摇瓶发酵酶活可达，最佳发酵条件下产量可达 .酶的最适作用温度为600C，最适pH值，具有较好的耐热耐酸性。目前我国仍没有具备独立生产普鲁兰酶能力的厂商，要实现低成本、国产化的生产，还有很长的路要走。 技术应用于耐热脱支酶的研究，使耐热异淀粉酶的研究有了很大发展。Coleman等人将嗜热厌氧菌T. brockii普鲁兰酶基因克隆到中得到的克隆子分泌的普鲁兰酶数量高于出发菌株，Okada等人将Bacillus Steanther, onhiu:中编码热稳定异淀粉酶的基因克隆到:中，得到的转化菌株其异淀粉酶能在60 ℃稳定15分钟。Burchadf将。ostridium thermosulf urogenes DSM38%的嗜热异淀粉酶基因克隆并在中表达，所得酶的最适pH和最适温度与出发菌相同，而且在高温下仍能保持活性.Antranikiam等人将Pyrococcus舟riousous的异淀粉酶基因克隆到中并分离得到了酶蛋白。尽管如此，目前尚未有已将转基因的耐热性异淀粉酶工程菌应用到工业生产中的报道。众所周知，利用物理和化学诱变剂单独或复合处理微生物细胞是选育高产变种菌株行之有效的经典方法，它在为培育多种抗生素、氨基酸、核苷酸激酶(尤其是蛋白酶和淀粉酶)的高产变种菌株方面曾经起过极为重要的作用，至今仍然是方便易行和行之有效的方法之一。 主要参考文献： [1][美]惠斯特勒等编王雏文等译.淀粉的化学与工艺学[M].北京：中国食品出版社，1988 [2]张树政.酶制剂工业[M]. 北京: 科学出版社，1998 [3]邬显章.酶的工业生产技术[M]. 吉林: 吉林科学技术出版社，1988 [4]Taniguchi H, Sakano Y, Ohnishi M, Okada G(1985) Pullulanase[J].TanpakushitsuKakusan Koso. 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第一作者：Chi Chung Lee
通讯作者：Yilin Hu，Markus W. Ribbe
通讯单位：加州大学欧文分校
论文DOI：
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钼固氮酶在常规环境下催化还原 N2 到 NH3 发生在 M 团簇处。该团簇是一种复杂的辅助因子，包含两个由间隙碳化物连接的金属硫部分立方烷和三个带硫。最近的一项晶体学研究表明，N2 的结合是通过 M 簇的带硫在转换时的位移来实现的。然而，在催化过程中 N2 结合和带硫移动的直接证据仍然没有发现。该研究工作表明 N2通过电子和硫的消耗被捕获在 M 簇上，并且 N2-捕获状态在生成 NH3 方面具有催化能力。此外，本文证明只有当亚硫酸盐与还原剂一起提供时才会发生产物释放，亚硫酸盐作为硫化物插入到带硫置换的位置，并且在催化过程中存在带硫的动态进出。总之，这些结果确立了辅因子带硫的移动作为固氮酶反应的关键。
背景介绍
固氮酶是一种复杂的金属酶，与农学、环境和能源等领域有着密切的关系。作为全球氮循环中的一个关键步骤，固氮酶在催化大气 N2 转化为生物可利用 NH3 方面的作用广为人知，固氮酶还可以在模拟环境反应中将 CO 和 CO2 还原为碳氢化合物（例如，CH4、C2H6、C3H8），用于生产碳燃料。除了 N2和 CO，固氮酶还能够还原多种替代底物，包括 C2H2, CN , N3 和 H+，进一步说明了这种重要金属酶的催化多功能性。传统钼 (Mo) 固氮酶的催化是通过一个双组分系统完成的，该系统利用还原酶组分将电子传递给催化组分以进行底物还原。还原酶成分，称为铁 (Fe) 蛋白，是一种同源二聚体，包含一个亚基桥接 [Fe4S4]簇和每个亚基内的 ATP 结合位点；被称为催化成分的钼铁(MoFe) 蛋白是一种α2β2-异四聚体，其在每个 α/β-亚基界面含有一个 P-簇([Fe8S7])，以及在每个 α-亚基内含有一个 M-簇 (或 FeMoco; [( R -homocitrate)MoFe7S9C)。在底物转换过程中，钼固氮酶的两种成分蛋白相互形成功能复合物，使 ATP 依赖的电子从 Fe 蛋白的 [Fe4S4] 簇通过 P 簇转移到 M 簇。MoFe 蛋白，一旦积累了足够数量的电子，就会发生底物还原。
固氮酶的功能重要性和与生俱来的复杂性，激发了几代研究人员对这种酶促 N2 还原机制进行研究；Lowe-Thorneley 模型是迄今为止最知名的动力学描述，用于解释质子的蛋白内传递和电子到 M 簇以进行底物结合、活化和还原。另一方面，由于这些结合物种的瞬态特性，研究人员已证明固氮酶的底物或中间结合状态表征极具挑战性。在这方面的研究中，冷冻淬火光谱技术与钼固氮酶活性位点基因修饰相结合，已被用于表征这种酶的某些状态，这些状态可能与催化相关。然而，获得 Mo-固氮酶配体结合状态分子描述的一个非常重要步骤来自于 MoFe 蛋白的 CO 结合形式的高分辨率晶体结构，它揭示了 μ2-CO 配体桥接在 M 簇的 Fe2 和 Fe6 之间，代替了带状硫 (S2B)。这一结果令人兴奋，因为它指出了一种机制，涉及通过取代辅助因子的带硫产生活性 Fe 物质。更有趣的是，在 S2B 位点进行的后续晶体脉冲追踪研究表明辅助因子的整个带区域可能参与催化。
图文解析
图1. N2 结合的 Av1* 的GC-MS 和频率选择性 NMR 分析。a、b，产生的C2H4 的 GC 洗脱曲线 (a) 和 GC-MS碎裂模式 (b)；条件分别为在 D2/C2H2下的 Av1（灰色）、N2/D2/C2H2下的 Av1（蓝色）和 D2/C2H2下的 Av1*（棕色），基于 H2O 的反应。c，在 Av2、MgATP 和连二亚硫酸盐存在下，在 Ar 下转换时，由 Av1（实心蓝色）、14N2 制备的 Av1*（实心红色）和 15N2（实心棕色）制备的 Av1* 生成 NH4+ 的频率选择性 1H NMR 光谱。
图 2. 各种 Av1 蛋白种类的 EPR 和 GC-MS 分析。a-j，垂直模式(a-e) 和平行模式 (f-j) 的 EPR 光谱，用于测试静息态 Av1 (a,f)，N2 结合的 Av1* (b,g)，连二亚硫酸盐重新激活的 Av1* (TOD) (c,h)、Eu(II)-EGTA/亚硫酸盐再活化 Av1*(TOS) (d,i) 和 Eu(II)-EGTA/亚硒酸盐再活化 Av1*(TOSe) (e,j)。k-o，对 Av1 (k)、Av1*(l)、Av1*(TOD) (m)、Av1*(TOS) (n)和 Av1*(TOSe) (o) 酸淬灭后释放的 15N2 进行 GC-MS 分析。
图 3. 底物转换对亚硫酸盐物种的要求。a，在含有 Av2、MgATP 和Eu(II)-EGTA 的体外活性测定中，在不存在 (-S) 或存在各种硫源（+S2-,+SO42 和 +SO32 ）或亚硒酸盐 (+SeO32-) 的情况下，Av1* 的活性。b，在含有 Av2、MgATP 和 Eu(II)-EGTA 的体外测定中，Av1* 的 C2H2 还原活性与亚硫酸盐 (SO32-)或亚硒酸盐 (SeO32-) 浓度的滴定关系。c，使用 2mM SO32-（实心绿色固体）或 NFE（空心圆圈）作为硫源，在 C2H2 还原中，Av1* 活性与时间的关系。
图 4. Av1*(TOS) 的晶体学分析。Av1*(TOS) 的链-A/B (P-团簇(A/B)) (a) 和 链-C/D(P-团簇(C/D)) (b) 界面处的P-团簇结构。原子颜色编码：Fe，橙色；S，黄色；O，红色；N，蓝色。c-f，链-A（M-簇（A））（c，e）和链-C（M-簇（C））（d，f）中，M-团簇的结构。c,d，侧视图；e,f，沿M-团簇(A) (c,e) 和 M-团簇(C)(d,f) 的 Fe1-C-Mo 轴的视图。
图 5. 带状硫与催化相关的移动。a，各种 Av1 蛋白或蛋白链中单个硫或硫基团的相对电子密度。b,c, GC-MS 分析 Av1*(TOS) (b) 及其分离的 M-簇 (c) 中酸不稳定、簇结合的 34S2- 离子的释放。d, ICP-OES 测定从不同样品提取的 M 簇中的 Se/Mo 比。
图 6. Av1*(TOSe) 的XAS/EXAFS 分析。a-g，对 Av1*(TOS) 在过量 SeO32 中转换10min（指定为 Av1*(TOSe)，黑色），Av1* (TOSe) 在过量 SO32 中转换 5min（指定为 Av1*(TOSe)5min，蓝色）和 Av1*(TOSe) 在过量 SO32 转换 60min（指定Av1*(TOSe) 60min，红色），获得的Fe (a-d) 和 Se K-edge XAS 分析 (e-g)。
图 7. SO32-的配位和还原。a-c，由 SO32- 或 NH3配位的 M 簇的 DFT 优化模型。d，两种SO32-配位情况下的反应能，假设耦合的 e-/H+ 转移发生在初始配位步骤之后。e，在两种SO32-配位情况下，硫掺入的累积反应能。
总结与展望
基于上述结果，本文结合使用生化、分析、光谱和结构方法来证明 N2 在电子和硫耗尽条件下被捕获在 M 簇上，并且这种 N2 捕获状态与催化相关，能够产生 NH3。此外，研究表明产物释放仅在亚硫酸盐和还原剂存在的情况下发生，亚硫酸盐作为硫化物插入到带硫置换的位置，并且在催化过程中存在带硫的动态流动。这些证据共同指出带硫的移动是固氮酶机制的一个新的关键因素。
当下的 教育 更加倡导人性关怀,尊重个体生命,赏识教育和激励教育受到了普遍认可,尤其是语文课堂教学中的激励教育,更是得到了许多教师的充分重视和广泛的应用。下面是我为大家整理的关于激励教育论文，供大家参考。
论文关键词：高职学生心理透视惩罚教育激励教育
论文摘要：分析了高职学生的心理、惩罚教育的弊端，并从理论、心理、现实论述的基础上提出应大力提倡激励教育。
1998年以来，随着高校扩招，我国高等职业技术教育进人快速发展轨道。目前，无论是在校生人数还是院校所数，都已占居了我国高等教育的半壁河山，成为我国进人高等教育大众化的一支强劲生力军。但与之而来的是其生源质量与精英教育阶段相比有较大的落差:录取分数较低，个体心理复杂，前进航向迷离，就业压力频添。因此有人称之为“孤独的一代”、“失落的一代”和“满负压力的一代”。高职学生中确有些自卑自负，甚至自暴自弃;而高职教育工作者中也确有些抱怨责难情绪，甚而施以惩罚教育。面对这一现实，高职教育工作者一定要增强紧迫感和责任感，牢固树立以人为本、育人先育心的理念，积极施行激励教育。
一、不堪重负的心灵
了解和剖析一下高职学生的心态，有利于我们选择合适的教育方式。
1.高考留下的阴影
我们的高职学生也曾在千军万马拥过“独木桥”的行程中，熬过春秋，用过心思，流过汗水。但奋斗的结果又是他们及他们的父母不大愿意接受的。从踏进高职院校的那一天，他们有的就似乎笼罩在一层阴影里:觉得低人一等，不情愿或不敢与同学交流，甚至走路也不敢抬头，在学习和生活中经常体验的是徘徊，进退维谷，自卑自负。
2.情感朦胧的困惑
对爱情对性的渴望好奇是高职生的生理已成熟而心理不成熟的特殊表现。高职学生摆脱不了两个困惑:一是传统与现代的冲突。他们既渴望现代的刺激，又突不出传统的制肘，其行为受双重价值的导向:师长、父辈以“学业为重”的教诲和享有爱情愉悦的诱惑;“白头偕老”的信誓和“不求天长地久，只求曾经享有”的牵惹。他们夹在传统与现代裂缝中，处于对青春、爱情、性的欲说还羞、左右为难的处境。二是理想与现实的差距。校园 顺口溜 中的“我爱的人名花有主，爱我的人惨不忍睹”就是注脚。其实唐代诗人张先的诗就描述了这种差距:“琴棋书画诗酒花，当年件件不离他。如今世事多变更，柴米油盐酱醋茶。”今天的时代虽没有“棒打鸳鸯”，然而面对地域、就业的现实，“劳燕分飞”也屡见不鲜。处在理想与现实，新与旧的夹缝中，高职生的困惑情有可原。
3.思想教育的冷漠
大学阶段是人社会化的重要时期。社会主流 文化 建构人的社会性的核心品质。处于转型期，社会的开放、生活的快节奏、价值观的多元化，高职生们思想、行为更加活跃。但价值观的冲突，价值标准的边界模糊，使公共权威丧失，在“乱花渐欲迷人眼”的多元选择对象上，看不到社会的主流文化及文化的应然趋势，对思想教育课，不少高职生以逃课、睡觉、读英语来示反感，面对无根的仿徨和脱离现实的说教，高职生们体验的是价值真空、行为无序的寻找精神家园的心理疲惫和精神焦虑。
4.社会公正的失望
对社会公正的渴求是各阶层的共同愿望，而高职生群体表现更为强烈。教师苦口婆心说，理想的社会里，老幼无欺，人人平等，但在现实的社会里，有尔虞我诈，贪污腐化。弱势群体失语的困境使来自不同家庭背景的学生有着同样的“重任在肩，舍我其谁?”的社会责任感。在激情燃烧的岁月里，他们装得下“应然”的理想社会，而装不下“实然”的现实社会。当他们矢志于以个人为本位去辐射社会，以强烈的情绪指导自己实践，以某种好恶左右自己的判断时，社会的公正矛盾便成为他们无法释怀的一个结，因而失望，进而悲哀。
5.就业艰难的苦闷
承受着难以扬眉的压抑，高职学生在复杂的心理矛盾冲突中经过几年的学习，渴望走出校门干出一番业绩。当他人的成功咄咄逼人呈现在面前时，其成功动机被迅速催化。在强调自我能力，强调拥有金钱，强调拥有地位的社会，他们甚至比他们的父辈有更为强烈的成功欲望。然而他们的就业又遇上“三峰叠加”时期，现实社会为他们准备的不仅有斑斓的花环，还有严寒的霜雪。市场经济本身的盲目性和不确定性使之对生活的把握度大大降低，就业与择业难让他们提前体验了为生计担忧的滋味。
二、惩罚教育的痛失
面对高职学生心理的郁闷、行为的不范、素质的参差，我们有的高职教育工作者不是去理解他们，不是去贴近他们，更说不上去帮助他们脱困解惑，而是用老祖宗的药方—惩罚教育去医治他们，这无异于淫医治痛。
惩罚教育，在我国可以说源远流长，从孔夫子创立私学开始，它便与学生共存亡。其显著特征就是直接和变相体罚学生。这种方式，在当今的高职院校仍有一些市场。如学生德育不合格，就以劳动来处罚;学生违犯校纪校规，则采取经济处罚。如此种种，并没有如教育者想象的那样能取得如意的效果，相反对高职学生的心理来说是雪上加霜。
1严重损害了学生的心灵
台湾著名作家柏扬在西安市实验小学说过这么一段发人深省的话，有人问:“柏杨先生，你是否还记得你上小学时候的老师?”柏杨思考须臾道，“总的说来，印象比较模糊，但有一位姓侯的数学老师令我终生难忘。因为他的数学教得非常好，而我的数学老是学不好，所以他总是打我。以致那时便在幼小的心灵里结下了仇恨的种子，就是到了今天，我也不会原谅他。”柏杨现在是否应原谅那位老师我们姑且不论，但那位老师的体罚确实伤害了一颗幼小的心灵，这是沉痛的教训。
2.污辱了学生的人格
笔者曾跟遭过老师谩骂的几位学生交谈过，他们直言不讳地说:“皮肉之苦我们可以吃，精神上的折磨我们受不了，我们高职生也是人，我们也有自己的人格。”
3.挫伤了学生的积极性
一份调查问卷的答卷上，一个学生写下了这么几句话:罚款只告诉我们不应该这么做，没指出应该怎么做，搞得我们无所适从，由感到一无是处，到产生“失败者”的压抑心理，失去了前进的动力。采取惩罚教育，不管教育者心多么诚，从眼前看，学生可能被惩罚得老实了，但从长远看，惩罚教育会在学生身上留下永难驱散的“阴影”。 4.塑造扭曲的灵魂
老师用不文明的体罚手段去教育学生，学生就可能用不文明的手段去对待别人，促使了学生报复心理的形成。
三、激励教育应弘扬
当前，教育界很强调以人为本的教育与和谐教育，其实激励教育与之一脉相承。激励教育，是建立在尊重人、尊重人格基础上的教育，它主要采用激励、表扬、诱导等手段去实现目的。
1.激励教育的理论之根
激励教育产生的基础是近现代管理理论中的激励理论。严密地考察所有人类的激励理论，可以发现一个共同的基本原理:人们愿意做那些能够从中得到报尝(物质的、精神的)的事情。激励理论有下述三种类型。
需要理论:认为人们都有身心上的需要，而且他们总要尽力使这些需要得到满足。激励因素是一种推动力，它产生于一个人想使各种需要得到满足的愿望。反之，一种得到满足的需要不能成为激励因素。
强化理论:也称为刺激理论或诱导条件论。这种理论的立论基础是学习原理一后果定律。该理论认为:得到奖励的行为倾向于重复出现，没有得到奖励的行为则倾向于不重复出现。
期望理论:如果说强化理论强调的中心是工作绩效与奖励之间的客观关系，那么期望理论则强调其主客联系—一个人期望得到什么?那些相信自己的努力能够带来出色的工作绩效并预计他们的成就可以获得重大奖励的人会提高自己的工作积极性，并在奖励与他们的期望吻合以后继续保持这种积极性。
以上三种激励理论是根于对人的基本看法，认为人不是“经济人”，不是“工具人”，而是“亲善人”。人能够互相信任，互相平等，人具有微妙性，人与人具有亲善性，说到底也就是以人为本。因此，把激励移植到对学生上，则成激励教育。
2.激励教育的心理之基
激励教育获得成功的原因，心理学做了极好的回答:人们有这样一种普遍心理状态，激励中枢能并愿意接受产生快乐效果的刺激，希望得到他人或社会的赞赏。而且接受外界积极愉快的刺激越多，就越能释放出更多的“热能”。心理学告诉我们让学生在和谐的环境中，成功的氛围里偷快地学习和成长，学习的劲头当然会更大，成绩的提高也在情理之中，成长也会更为顺利。中国也有句古语，“责子十过不如奖子一长。”对于正在苦学、苦闷的高职生，特别是裹着“差生”外衣的学生，尤其应让他们体会一下成功的喜悦。
3.激励教育的现实之果
激励教育产生的效应比较明显，成功的例子很多。青年作家黄蓓佳在一篇 文章 中说:“我上高中二年级时，写了一篇 作文 ，语文老师在上面圈了98个红圈圈，贴到学校宣传橱窗里。那红圈圈的数目，是一天中午没人注意时我偷偷站在那里数的，一共数了三遍……数完了，又站远一点点看看，看见作文纸上红艳艳一片。当时我心里有一种隐隐约约的预感，觉得我的人生道路也许会从作文开始。"98个“红圈圈”，扬起了黄蓓佳人生的风帆，一直激励着他步入作家之例。
棋圣聂卫平在他的《我的黑白世界》一文中写了这么一件事:“陈伯伯(陈毅元帅)可能看出了我的心情，和我下棋时曾留情让我赢了。这盘棋可以说是我一生的起点。你们看冠军弟弟没能赢陈伯伯，我却赢了!我还是行的呀?”陈毅元帅的“手下留情”，竟使聂卫平一路自信走来，成长为中日 围棋 擂台赛的“抗日英雄”。我们不能不为陈老总的育人“绝招”拍手叫好。
综上所述，我们要实现教育的目的，就应该想方设法让学生体验一次次成功的欢乐和胜利的喜悦，激发他们无休止追求成功的信念和力量，特别是对于高职生中的“后进生”，更应该抓住一些微不足道的“亮点”和“成功点”，诱导他们驱散失败的“阴影”，走向成功之路。
诚然，表扬奖励学生也不宜过勤过滥。过勤，会使学生平淡无味，从而失去激励的作用;过滥，会使学生仅满足于眼前的利益和荣誉，而不从长远出发去端正思想，开显德性，从而失去激励的意义。
摘要随着时代的发展和新一轮教育改革的推进，教师将会不可避免地遇到许多困难，关于激励教育的实践也出现了一些新的问题，作为当代专家型的教师，在实际的教学中应该能够关注到激励教育的重要意义。因此，笔者对于教育过程中的激励教育做进一步的思考。
激励教育一直作为教育心理学的重要内容被广泛研究。美国著名心理学家斯滕伯格在他的著作中已经把激励与教育作为重要的方面进行论述。教师的激励是为了强化和提高学生的学习动机。动机是指激发和维持人行为的内部状态，动机在人的成长和发展过程中起着很重要的作用。事实上，在每个人的学习过程中，非智力因素往往比智力因素显得更加重要，而动机又是非智力因素的核心成分，所以在教育心理学领域得到广泛研究。①很多研究致力于把心理学领域关于动机的理论运用到教育领域来提高教育教学的效果。对于学生来说，具有强烈学习动机能够使他们积极的完成学习任务，实现课程内容的内化和吸收，进而有利于德智体美全面发展的教育目的的实现。而对于教师来说，在教学过程中需要通过各种激励的方式和 方法 来促进学生的学习，达到课程的教学目标的实现。既然学习动机在实际的课程与教学过程中如此重要，那么就需要我们进一步去探究教师在教学实践过程中激励学生的学习动机方面存在的一些问题。经过分析 总结 发现在教师激励学生的过程中，应该注意以下四个方面：
1 激励的方式
激励作为教师在教学过程中促进学生学习的常用手段，常常会取得良好的效果。但是，教师在实际的激励过程中存在的问题是往往只关注显性的结果，而不关注隐性的学生心理的变化。也就是说，作为优秀的教师应该不仅能够通过激励使学生达到学习目标，而且还能够引导学生产生对学科的积极的兴趣和态度。古人云：“知之者不如好之者，好之者不如乐之者”，就是说兴趣是一个人积极探究某种事物或进行活动的强大动力。然而现实是，很多教师依然只是关注自己教学目标的达成，过分或者变向的激励方式往往会使得学生身心疲惫。这些激励方式的目标指向明显偏向了教学目标和学业成绩，而忽视了学生的学习兴趣和学习能力的培养。新一轮的课程改革非常强调“生本位”的概念，要求注重学生的主体性，提高学生的学习兴趣以及发现问题和创造性的解决问题的能力。激励方式的指向性的偏差会导致教学过程中只见物不见人的结果，严重忽视学生的主体性意义的存在，违背了国家倡导的“以人为本”的教育理念。
2 培养动机的价值取向
心理学上把动机分为内在动机和和外在动机，内在动机是指由学习活动本身的意义和价值所引起的动机，外在动机是指由外部诱因所引起的动机。学生处于上面的何种动机取决于学生自身的动机的价值取向，价值取向规定着动机的性质、强弱和方向。但是并不能说明外在动机比内在动机更好，因为后现代的社会所体现复杂的多元文化表现出来也是价值取向的多样性。我们要提出的观点是，适合的就是最好的。也许在小学、学前阶段大多数的孩子更适合的是外在动机，他们关注更多的是自己的行为能够得到老师家长的表扬和肯定。作为教师，首先应该肯定学生所具备的这种价值取向，这也是一种尊重学生和他们身心发展特点的表现，教师不能强制的要求学生去按照自己的价值取向去规范自己的行为和动机。其次，教师可以在维持他们自身动机取向的同时也引导他们向内在动机的方向发展，可能他们开始不会接受，但是随着年龄的增长、 经验 的积累和认知水平的提高，他们会自觉的向教师引导的方向发展，当然也有可能学生坚持自己原有的价值取向，最后形成自己的人生观价值观都是以功利性为目的，所以我们认为教师只是发挥引导的作用，学生主要的发展的主动性都是决定于他们自身。就培养学生学习的价值取向来说，教师的引导方向应该是与社会利益整体相一致，与学生个体发展规律相一致，以个性发展为目标，让学生去乐于去学习和会学习。②
3 调节动机的强弱水平
对于动机的强弱水平是否能够影响到个体行为的结果，许多心理学家都有过研究。正如心理学家耶基斯、多德森的研究成果表明，各种活动都存在一种最佳的动机水平，动机不足或者过分强烈都会使工作效率下降。同样对于学生的学习也是一样，教师的教学不断的强化学习动机能让学生过分的紧张，但是完全忽视了学习动机的培养也可能让学生过分的放松，这两种极端都是不利于学生学习和发展的。③也有学者研究表明：动机适中的学生的学习效率最好。这是因为学习动机适中的学生不会更多的去关注失败和外在因素的影响，他们关注更多的是学习任务和学习任务有关的有价值信息。他们通常表现为好奇心强、思维较为灵活、理智反应一直占主导地位。在师生的互动过程中教师的语言、行为、态度都会影响到学生的动机水平，所以教师要时刻注意保持调节学生的动机水平在一个适中的状态。
4 注重学生的积极的成就动机
正如自20 世纪50 年代麦克里兰和阿特金森( Mcclel land & Atkinson) 把成就动机当作研究的主题以来， 这一领域已经吸引了大批心理学家的兴趣，并引发了众多研究。成就动机是驱动个人在社会生活的特定领域追求更高目标， 并力求获得成功的内部力量。研究普遍认为， 成就动机与学生的学业成绩乃至未来成就密切相关， 是其学业与事业成功的关键。④我国研究者从上世纪80 年代末开始， 也陆续展开了对中学生成就动机的研究 。这些研究者得出的主要结果是：首先，成就动机对学生的学习具有激活特性和使动机能，可促使学习者尽快进入学习状态。学生学习自觉性、主动性的程度，正是由这一机能决定的。其次，成就动机具有积极定向和导向机能，可使学生将全部精力集中在学习等必要的活动上而疏离 其它 无关事物，并能有效抵制各种无关刺激的干扰。第三，成就动机具有内隐性特点，它不能决定学生采用何种智力活动方法构建他的知识体系，而只是通过集中注意、准备力量、降低知觉阈值、提高敏感性来促进学习。最后，成就动机的激发能够对学习能力的形成和发展会产生巨大影响。对于学生的成就动机的培养，教师常用的 教学方法 和策略有：给学生设置具体的学习目标，在学习过程中设置中等程度的障碍，及时反馈学习成绩信息，组织学习上的竞争活动，引导学生对于学习结果的正确归因等等。
随着终身学习的理念被越来越多的人接受，许多学者已经发现教师的职能已经不应仅仅传授有限的学科知识，而更重要的是培养学生对于学习的兴趣和积极的情感态度以及自主获取教学资源主动学习的能力。只有教师能够更多的关注学生内在情感的体验，并施以适当的的激励教育，我国的教育改革才能够真正的得到进一步的推进和发展。
注释
①[美]Robert ， wendy 著.教育心理学[M].张厚粲,译.北京:中国轻工业出版社,2003.
②丁观夫.中学生成就动机的分析与教育对策[A].山东教育科研,.
③施良方.学习论[M].北京人民教育出版社,1994.
很多学生学习都是要老师或者家长来监督的，学习的积极性不高，那么教师要如何调动学生的积极性呢?下面是我带来的关于教师调动学生的积极性的对策论文内容，欢迎阅读参考!教师调动学生的积极性的对策论文篇1：《谈教师如何激发学生浓厚的兴趣调动学生学习的积极性》 【摘要】 中学生知识尚浅,感受、领悟能力较差,情感难以形成和调动。教师在教学中,要重视开导学生,利用学生原有的知识去分析、识别事物,自钻自感,以形成丰富的情感。教师首先让学生认识、了解感知新的内容,采取行之有效的 方法 达到一定的程度,为学生情感的产生夯实基础。要想学生有的,首先必须自己得有。教师应将自己置身于那情那景中,来感染、诱发学生,触及学生心灵,引起关爱、憎恨,从而达到“一花引来万花开”的效果,激发学生的情感。 【关键词】 中学语文 学生情感 教学 方法和过程 教师首先让学生认识、了解感知新的内容,采取行之有效的方法达到一定的程度,为学生情感的产生夯实基础。要想学生有的,首先必须自己得有。教师应将自己置身于那情那景中,来感染、诱发学生,触及学生心灵,引起关爱、憎恨,从而达到“一花引来万花开”的效果,激发学生的情感。 1.激发情感 中学生知识尚浅,感受、领悟能力较差,情感难以形成和调动。教师在教学中,要重视开导学生,利用学生原有的知识去分析、识别事物,自钻自感,以形成丰富的情感。多年来的语文教学,使我充分地认识到:语文教师的情感投入更为重要,一定要在备课时千方百计地考虑如何调动起学生的积极性,激发学生的学习情趣,使他们一上课就进入“角色”,投入到良好语文论文的教学情境之中。 同时还要创设良好的知识情境,问题情境和竞争情境,充分满足学生的求知欲,使学生有新鲜感,时时处于学习的最佳情绪状态,从而产生师生间的情感沟通,使教与学升华为愉悦的情感交流。教学中的情感,往往是因课文的内容而产生的,学生对于这些新的内容大多是局外者,经历少,未能及时产生教师所希望的情感。 为此,教师首先让学生认识、了解感知新的内容,采取行之有效的方法达到一定的程度,为学生情感的产生夯实基础。要想学生有的,首先必须自己得有。教师应将自己置身于那情那景中,来感染、诱发学生,触及学生心灵,引起关爱、憎恨,从而达到"一花引来万花开"的效果,激发学生的情感。 2.转化情感 情感也有好、坏之分。不是说有情感就能达到目的,就意味着成功。符合理想的、适应客观规律、符合原则的情感,才是高尚的情感。课文中所选取内容大多是名家经典的优秀之作, 文章 渗浸情感是多样的、复杂的:悲、乐、喜、忧……不一而足。这就对情感提出多样化的形式。现在的课文,特别是更高年级的课文对学生的情感要求更多了,这就要求教师在教学中注重情感的转化。如:在教学《我的叔叔于勒》一文中,对于勒的悲惨命运,学生们深切同情。一些学生在课堂上读完此文情不自禁地流下了同情的泪水,但我们不能满足把学生置于这悲伤、惋惜的情感之中,必须引导:是谁造成于勒如此悲惨的命运?挖出祸根,转而对资本主义社会人与人之间冷漠的那种金钱关系表示无比愤恨;同时还要进一步引导学生,让其感受到社会主义社会人与人之间那种和谐的人际关系,使学生热爱祖国,热爱党,勤奋学习,激励学生树雄心,立壮志。这里学生的悲――恨――喜――爱就是情感不断转化的过程。当然情感的转化不是一说就成功的事,关键是教师如何引导学生,如何激发学生,让学生的心灵经过一次次的碰撞。 3.掀起情感的高潮 激情是打开知识宝库的钥匙,教师以饱满的热情参与教学很重要,教师如何抓住作者的情感发展变化投入进去与作者情感融为一体更重要。每篇文章,每个 句子 都饱含着作者的思想感情,教师要细细体会,自己先进入角色,再引导学生进入角色。以文章饱含的真情打动学生,感染学生,从而产生情感共鸣。随着文章高潮的出现,师生情感进入高潮,课堂教学也就自然出现了高潮。定制论文例如:高尔基《海燕》最后一句"让暴风雨来得更猛烈些吧!"掷地有声,是海燕的战斗宣言,体现一种豪情与力量之美,是全 散文 诗豪壮之美最高点。让学生自身揣摩,如何去读,从读中听出学生的感情是否和作者一样进入高潮,是否蓄积力量以最豪壮的语气,最强烈的感情一字一顿读完这个感情十分强烈的祈使句,并戛然而止,来体会到作品所表达的感情及浓厚的抒情性色彩,在一次次的朗读与感悟中,从而掀起情感的高潮。 4.教师必须挖掘自身潜能,全面提高个体素质 语文不仅是一种技能,同时还是一种 文化 积淀,具有深层次的民族文化背景。应试 教育 下的语文教学,过分强调了教学环节的整齐划一,同样的教师、教材、课本、教室、时间表带来了一个同样的答案语文论文来符合所谓的“标准答案”,这就抹煞了语文人文性学科的特点。素质教育以人为本,目标是实现人的现代化。为实现这一教育目标,必须打破传统的、单一的教学模式,探讨一些新的、与教学目标相适应的教学模式以体现素质教育的特征。 5.真正发挥学生在教学过程中的主体作用 教师要树立与新的教学理念相适应的学生观,充分尊重学生在学习过程中的主体地位,采取多种形式的方法和手段,促进学生语文能力的发挥,从而提高学生的整体素质。要重视学生的个性发展,研究教学与发展的关系,把教学立足点转向学生,不能千篇一律按一个教学模式教。而是通过学习主体本身的活动与实践,培养学生的语言素质和人文素质,而不是在教师的指挥下,家长的压迫下机械从事 语文学习 的应考机器。 6.必须改变传统的 教学方法 一是采用多种方法,营造创造性的学习环境。兴趣是最好的老师。没有兴趣,即使简单的知识也难以掌握。教师可以故意设置障碍,诱发学生思维,激发学生学习兴趣。二是创设良好的心理环境,给学生以充分的心理安全感和自由的空间,使学生进入敢于说话、敢于争辩的学习状态。三是改变语文学习中非对即错的简单化评价方法,留有创造空间。四是允许不同观点的存在,如果强求统一,就会堵塞思维。 7. 创设情境,使课堂成为语文积累、释放、组合、撞击的舞台 教学情境的创设,应十分重视媒体的中介作用定制论文,如实物、录音、录像、幻灯、电脑等。现代化教学设施的应用,使静止、平面、单一的情境转化为活动、立体、多维的情境,从而给学生以全方位的视听冲击和强烈的心灵震撼,使整个课堂成为一个巨大的教学磁场,激发学生浓厚的兴趣,极大地调动学生学习的积极性。 当前的语文教学是死板的,缺少激情,缺少活力。“填鸭式”“封闭式”“强授式”和“分析式”教学,不能真正实现“以学生的发展为中心”的教育理念,学生没有真正成为课堂的主人。如果把语文学习与丰富自己的心灵世界联系起来,语文学习才可能是件有意义的事情“学习语文有什么用?”有学生用这种怀疑的口吻问我这个问题。论考试得分,语文远不如数理化那样来得直接。 教师调动学生的积极性的对策论文篇2：《试论教师在推行语文阅读教学的过程如何调动学生积极性》 摘要：提高学生学习的效率，是提高语文阅读教学效果的基础，充分调动学生学习的积极性是提高学生学习效率的重要手段。本文从课堂导入、课堂环境、实践活动、竞争机制、学习评价等方面阐述了在语文阅读教学的过程中提高学生学习积极性的 措施 ，并对这些措施进行了详细地探究。 关键词;阅读教学;学习积极性;语文教学 教师在教学过程中不断改进教学模式，不断丰富教学手段，不断更新科学理念，有助于学生综合素质的提升和阅读课程课堂效率的提高。本文将从提高课堂导入的趣味性，创造良好的课堂环境，设计丰富的实践活动，充分运用多媒体手段，引入竞争机制，开展激励性评价这几个方面来调动学生对语文阅读的积极性。 一、提高课堂导入的趣味性 语文阅读课堂的教学充的导入分印证着“千里之行，始于足下”这句话的正确性。美国著名学者布鲁姆曾说;对学习材料的好奇心，是学生学习的最大动力。语文教师应该将阅读学习文章的过程变为一个探索解谜的过程，运用 谜语 、报道、 传说 、神话等材料进行引入，从而调动学生学习的积极性。例如;在《圆明园的毁灭》这篇文章的阅读教学过程中，朗诵《圆明园兽头国宝流失海外多年终归国》的新闻报道，通过新闻报道引入圆明园毁灭的主题，提问：“大家对圆明园有怎样的了解?有着天价国宝的圆明园为什么会毁灭呢?”通过报道材料和提问，学生一下就产生了学习的积极性。因此，生动有趣的引入能最大限度地调动学生的好奇心和探索热情，这样学生自觉或不自觉地就对文章的阅读产生了兴趣，求知欲的产生，能促进学生参与课堂积极性。 二、创造良好的阅读课堂环境 阅读课堂环境包括教师教育环境和学生学习的环境，就教育环境而言，一方面，教师要提升自身水平，多学习，多积累，了解当下的社会 热点 和学生感兴趣的话题，平时注意加强材料的积攒。将这些材料运用到阅读课堂教学过程中去，使得教学的内容更加生动有趣，从而提高学生学习语文的积极性。另一方面，要综合运用多种教学方法，针对学习的不同阶段的学生不同的学习特点，依据实际情况运用不同的教学手段，避免课堂内容单调枯燥。从营造良好的学习环境来说，教师要充分尊重学生的主体地位，为学生提供自主学习的机会，为学生搭建小组合作和学习交流的平台。只有教学环境和学习环境都好了，才能让学生爱上语文阅读，爱上语文阅读课堂。 三、设计丰富的实践活动 语文学习是一个学以致用的过程，只有教师架起知识和生活的桥梁，才能达到优化课堂教学，提升学生自主性和积极性的目的。教师要适当组织学习实践活动，从而加深学生对知识的理解和印象。例如，组织学生将课文改编成小短剧，分角色进行表演。用这种活动方式，既能调动学生的参与热情，又能便于学生充分理解作者的情感。再如：组织与阅读教材内容相关的名胜景点的参观活动，要求学生在参观后完成表格，对比作者笔下的景观与自己看到的景观的异同，从而丰富学生的主观感受，便于学生体会到作者要表达的情感。通过多彩的实践活动，达到理论与实际相结合的目的，真正做到学以致用，提升学生的综合素质。 四、充分运用多媒体手段，引入竞争机制 传统教学的缺陷在于，教师一味地讲，学生一味地听，课堂沉闷无趣，教学手段也极为单一，因此学生学习效率低下，主动性不高。通过图片、音乐、电影、等多媒体工具，增加学习的趣味性。例如，在学习《桂林山水》这篇课文时，播放记录片《印象刘三姐》的选段，加深学生对“桂林山水甲天下”隽永的景观的认识，同时也增强了学生阅读课文的兴趣，达到提升课堂效率的目的。 在语文课堂教学中，引入竞争机制，教师将学生分成不同的小组，生生之间、组组之间进行竞争。例如，在进行阅读学习时，看哪一组能用最少的语言更充分地概括文章的中心内容。在进行问题回答时，看哪一组给出的回答更合理，更贴近作者的意图。以竞赛的方式进行学习，从而鼓励学生相互竞争，共同学习，不断进步。 五、开展激励性评价 学习是一个循序渐进的过程，学习中遇到难题和挫折也是非常正常的现象。阅读是一项主观性非常强的活动，“一千个人眼中有一千个哈姆雷特。”的情况时有发生，对句子或段落的有不一样的见解也很正常，教师要对学生发表自己意见的行为进行鼓励，来提升学生学习的信心和积极性。从而拓展学生的思维模式，培养学生的 创新思维 。 例如：学习成绩好，各方面较优异的学生，通常自尊心较强，我们在纠正他们错误的同时，还应该合理地对其进行心理引导，避免一蹶不振的情况的发生。而那些成绩较差，各方面较为落后的学生，常常因为对学习没有什么自信，害怕老师点他回答问题，担心说错了会丢脸，我们在语文阅读教学过程中，要做到宽容耐心，引导学生战胜自我，正确掌握 学习方法 ，从而提高其学习的能动性。 “不积跬步无以至千里;不积小流，无以成江海。”语文阅读的学习也是一点一滴不断积累不断完善，最后从量变到质变的过程，教师在进行语文阅读教学时，既要充分发挥学生的主体作用，也要充分发挥自身在教学活动中引导者和组织者的作用，只有这样，才能从根本上调动学生的积极性，提高学生的语文阅读能力。 总结 ：只有充分调动学生学习的积极性，才能促进学生积极提问，勤于思索。本文从创造良好的课堂环境，设计丰富的实践活动，充分运用多媒体手段，引入竞争机制，开展激励性评价这五种手段来调动学生对语文阅读学习的积极性。学生学习的积极性提高，其学习效率和学习能力才会得到提高。 参考文献： [1]曲晶.关于小学语文创造性教学的实践[J].中国校外教育(基教版),2013(5). [2]张玲玲.如何提高小学语文学生积极性[J].读写算(教研版),2013,(12). [3]刘柏林.浅谈小学语文课堂激发学生积极性的创意[J].神州(下旬刊),2012(12). [4]赵明杰.小学生 作文 积极性培养策略之思考[J].阅读与鉴赏：中旬,2011(11). 教师调动学生的积极性的对策论文篇3：《浅谈政治教师如何调动学生的课堂积极性》 [摘要]在政治课教学过程中，学生在课堂上是否有积极性是衡量教学成功与否的标准之一，也是觉得政治教学质量好坏的因素之一。良好的课堂氛围可以让学生享受到学习的乐趣，同时也可以提高学生学习政治的积极性。本文针对学生上课堂的积极性不高的问题，结合自身教学实践 经验 ，从教师自身、学生以及课堂设计方面探讨调动学生上课积极性的有效办法。 [关键词]教师 学生 课堂 积极性 对于政治教师而言，能否把握课堂的教学氛围，能否有效调动学生积极性，是评价教师是否合格的关键所在，也是衡量学生参与度的重要的评价标准之一。现在的教师不应再是知识的灌输者，而是知识的传播者和引导者。如何突出学生的主体地位，提高和调动学生积极参与的能力，即如何才能有效调动学生的课堂积极性，这是政治教师必须思考的问题。我结合自己教学心得，从以下几个方面与大家共同探讨： 首先，教师自身要热爱教育教学事业。 俗话说，干一行、爱一行。作为教育工作者，就要热爱教育教学事业，工作上尽心尽责。既然选择了这份职业就要尽力去做，注重师德修养，保持良好的教师形象，这样学生才能从心里认同你，并对你所教的学科感兴趣。教师要以发展的眼光看学生，爱护学生，关心学生，与学生平等相处，尊重他们的人格，;注意教育教学要严而有格，爱而有度，既反对高高在上威严地苛责学生，也反对为追求高满意率而放松原则的放任自流;遵纪守法，严守工作纪律，不能说你要求学生不迟到，而自己有迟缺现象;另外教师应不断丰富自己的专业知识，关注本学科及教育领域的前沿动向，避免出现太多的“一问三不知”。教师渊博的学识，能赢得学生的信赖和敬佩，从而对学习产生浓厚的兴趣，这也是所谓"爱屋及乌"的效应。 其次要了解学生，做到因材施教。 众所周知，因材施教，就是根据不同的材质选择不同的裁制方法。一个老师要教好学生，首要的任务该是了解学生，只有对学生有一个客观的，全面的了解才能做到因材施教，学生也才能更好的配合你的教学。而了解学生对一个老师来说并不是一件容易的事。选用恰当的方法去了解学生会收到事半功倍的效果，但如是选择了不合适的方法，老师很可能会失去和学生沟通的机会，也很有可能遇到被学生不信任，学生不愿或害怕与之沟通的难题，我认为教师可以通过以下几种方式了解学生： 1.观察法这是一种在自然条件下，随时随地的对学生的动作、神态、学习情况等进行的有目的的观察。我们可以通过学生的作业情况、听课的状态、学生平时对教师的态度、一言一行等方面观察和了解，做到心中有数，对症下药。 2.提问法这既是一种教学方法，也是了解学生的一条重要途径。有经验的教师，通过课堂提问能够探测到学生诸多方面情况，如本堂课学习内容的预习、掌握情况，知识基础，智力水平， 学习态度 等等，灵活调整课堂教学方法，让学生在轻松愉快的氛围中获取知识、消化知识。 3.课后交谈这是一种了解学生内心活动的极好方式。它不拘泥于形式，气氛更为轻松融洽，容易缩短师生距离，让学生产生信任感，使其在无拘无束的状态下向对方敞开心扉。教师应有热情、真诚的态度和亲切信任的语言。要尊重学生，把自己摆在与学生平等地位上，消除学生的顾虑;语言诚恳，注意倾听，不指责教训，不随意打断学生的话……，讲究自己的仪表、风度，以给学生尽可能完美的形象，得到学生更多的信任和尊敬。 4.通过与其他教师的交流中了解。作为任课教师对学生的了解没有班主任全面，而学生在任课教师面前可能回展现更多的缺点，所以教师之间的交流也是了解学生的重要方式，这可以让教师对自己的教学进行 反思 ，做到心中有数，实时改进教法。 第三、精心设计课堂教学，让学生变被动为主动。 回到最重要的课堂环节，调动学生学习积极性从根本上讲是要提高老师的教学水平，增强课堂教学的吸引力。在教学中我们可以通过以下方法调动学生积极性。 1.情景教学法，让学生动起来。在课堂上，改变教师"一言堂"的传统做法，做到师生互动。根据教材的内容，设计一些生活小情景，以小组为单位，团队学习、讨论，培养学生的社会能力。比如在上《政治权利与义务》这一课时，设计了两个个生活小情景，每个小组讨论自己感兴趣情景，然后每组将学习结果派代表上讲台进行展示。通过这样的活动，既提高了他们上课的兴趣又培养了他们合作学习的能力。 2.鼓励学生主动提问，激发学生兴趣。我们要在课堂上应树立“言者无畏”的意识，不管学生所提问题是正确的还是错误的，是幼稚的还是较有深度的，教师都要以积极的态度去倾听，多鼓励、少责难。 3.开展课堂“时事评述”让学生感受政治就在我们身边。随着信息时代的到来，学生获取信息的 渠道 越来越多，他们普遍非常关注社会上的时政热点，国内外大事，并以最先得到信息为自豪。针对学生的这种特点，我在政治课堂上设置了“时事评述”的环节。每节课利用几分钟的时间，学生陈述国内外大事，并加以点评。通过“时事评述”，既巩固了书本知识，又让学生感受到学好政治课可以很好地理解社会事件，充分感受到学习政治能够提高他们分析、解决问题的能力，从而调动了学生学习政治的兴趣。 4.视频音乐的加入。例如在我的政治课中也尝试课中穿插视频、音乐，这可以在一定程度上吸引学生注意力，改变学生长期以来对政治课枯燥无聊的看法，调动学生学习政治课的积极性。 最后要关注课堂变化适时做出调整 传统的课堂教学，其主要弊端是过于强调教师的主导作用，知识的呈现――灌输――接受的教学模式依然在很大程度上存在。教师心中想着教案，却没有装着学生。他们对学生的即兴发挥、当堂灵感无动于衷、置之不理。新课程理念下的政治课堂教学，要求我们老师不断捕捉、判断、重组、课堂教学中涌现出来的各种信息，推动教学过程在具体情境中的动态生成。教师并不能预见课的所有细节，这就要求教师在课堂上能够巧妙的在不知不觉中作出相应的变动”。课堂上的不可测因素很多，预设在实施中难免会遇到意外。或者预设超越了学生的知识基础，学生力不从心，或者预设未曾顾及学生的认识特点，学生不感兴趣，或者预设滞后于学生的实际水平，课堂教学缺少张力。在课堂上，不管遇到什么情况，都需要教师对预设进行适时调整，使它更加切合实际，切合课堂，切合学生。促进政治课堂的有效生成。 总之，调动学生积极参与到政治教育教学活动中来，即是新课改对我们教师提出的要求，也是提高学生学习政治的积极性的有效方法。抛去传统，更新观念，引导学生主动学习，才能让他们学有所得，学有所乐，学有所用。 [参考文献] [1]《中学教学参考》李琪. [2]《教学研究》李素华. [3]《考试周刊》朱慧燕. 猜你喜欢： 1. 教师的职业道德论文1500字 2. 浅谈教师职业道德修养的论文 3. 关于激励教育论文 4. 教育教学心得体会
中小学教师激励问题与对策论析论文
论文关键词：激励：中小学：教师
论文摘要：文章针对当前中小学激励过程中存在的问题，借鉴组织行为学的激励理论，提出了中小学教师管理工作中的激励措施建议。
激励一词译自英文Motivation。美国管理学家罗宾斯把激励定义为:通过高水平的努力实现组织目标的意愿，而这种努力以能够满足个体的某些需要为条件。在该定义中包含三个关键因素:努力、组织目标和需要。努力是强度指标，我们不仅要考虑努丈的强度，还必须考虑努力的质量;组织目标是努力的方向和目的;需要是一种内驱力，它会产生寻求行为，去寻找能满足需要的特定目标。
1中小学教师激励中存在的问题
激励理念存在的问题
过于注重物质激励
当前，许多学校的激励机制还是物性化激励，在学校领导眼里激励只不过是多给教师一些钱，他们不懂得尊重人以及实现人的自我价值追求的重大意义，他们没有认识到激励制度好坏将关系到学校的目标能否顺利实现。根据经济学的边际效益递减原则，当报酬提高到一定程度就会失去其作为激励因素的价值，而且过多的物质激励会导致急功近利、人才泡沫等负面现象的产生。对学校教师而言，如果仅通过经济手段来激励，就会使他们对经济报酬的预期越来越高，教师在某个时期得到了某种水平的报酬后，他会对下一时期的报酬有更多的期望值，如果下一期的报酬低于其预期值，他们就会感到沮丧和不满，从而降低激励的效果。
忽视情感激励
如上所述，目前中小学教师管理中存在的一个比较突出的问题就是片面强调满足教师的物质需要层面，加大物质激励的力度，而忽视了对教师的情感激励。须知情感激励也是稳定教师的重要因素之一。目前在很多中小学里不重视民主管理，领导拍板、“一言堂”等现象还比较严重，这不利于调动教师的工作情绪，激发教师的工作热情。学校教师属于高级知识分子，对他们而言，不仅需要较高的物质激励，同样需要较高的精神激励。
激励即奖励
许多学校简单的认为激励就是奖励，因此在设计激励机制时，往往只片面的考虑正面的奖励措施，而轻视或不考虑约束与惩罚措施，有时即使制定了约束与惩罚措施，也没有得到正确的实行。
激励过程中存在的问题
激励群体不能区别对待
当前许多学校并没有因为教师类型的改变而改变激励方式，而是对所有的教师采取相同的激励方式，这些管理者没有认真思考和了解教师的内心需要，在激励时不分层次、不分对象、不分时期，都给予相同激励，形式太单一造成激励的边际效应逐年递减。这种做法的最终结果是既浪费了激励成本，又没有收到良好的激励效果。
激励的“急功近利”
在学校管理工作中，激励一般比较看重教师的工作绩效，这本无可厚非，而且对于营造竞争气氛，激发教师潜能功莫大焉。但是，这也是一把双刃剑。这表现为:(1)学校和教师均把“升学”、“竞赛”等硬指标看成是重要的目标，而把学生发展成了第二位的目标。(2)教师对自己的期望一味集中在学科课堂教学质量提高，忽略了更高的专业成长目标，不重视教育学、心理学、人类学等非任教学科知识的吸取，使自己的知识、技能结构单一，视野不开阔。
缺乏有效的人才竞争机制
缺乏有效的人才竞争机制主要表现在两个方面:一是教师聘任制度不健全，二是激励机制的公平性与科学性。目前很多学校还沿袭着原来的教师职称评聘制度，即“一次评定，终身享用”，并且与教师的.各项福利、待遇相挂钩。为此出现了“有条件要评，没有条件创造条件也要评”的现象。教师管理部门为了平衡各方面的利益，往往采用论资排辈的方法评聘，这种人事管理体制的限制妨碍了评聘的公平性和竞争性，也妨碍了教师优胜劣汰的激励机制。
2提高中小学教师激励性的对策
教师需要的复杂性决定了激励手段的复杂性，只有充分认识不同层次、不同类型教师的需要层次结构和不同时期的主导需要，设置不同的激励诱导因素，才能持续有效地调动教师的积极性和创造睦。
物质刺激和精神激励相结合
(1)物质激励。教师是社会人，和其他社会成员一样需要生存和发展，这些都需要一定的外在物质条件做支撑，这是客观存在。物质激励就是从满足人们的物质需要出发，对物质利益关系进行调节，从而激发人的向上动机并控制其行为趋势，主要以增加薪水、奖金、津贴和减薪、罚款等形式出现。物质激励对强化按劳取酬的分配原则和调动教师的劳动热情有很大作用，也是目前我国中小学内部使用得非常普遍的一种激励模式。 (2)精神激励。单纯的物质激励难以取得好的效果，教师除了物质需求外，更多的是来自精神层面的需要。教师具有强烈的求知欲，强烈的自尊需要和成就需要，他们的工作热情，相当一部分来自于教育工作本身。因此，在我国的教师管理中，要坚决摈弃“经济人”假设的思想，在运用工资、奖金等经济手段和方式激励教师的同时，还要满足教师情感、发展、成就等较高层次的需要，以调动广大教师的积极性。学校可以为教师营造更加优良的人际环境和学术环境，缓释教师的工作压力;可以为教师提供更多参与学校管理的机会，增加其对学校目标的认同;学校还可通过信任、关怀、提升、提供进修机会等方式，增强教师的自我实现感。
(3)在管理科学中，激励不能等同于奖励。虽然从字面上看，激励有激发、鼓励、诱导、驱使、使振作等，但并不意味着激励就是正面的奖励。只强调利益引导这一方面是不正确的，用于指导实践则是有害的。管理激励，从完整的意义上说，应当包括激发与约束两层含义。因此，在实际工作中要坚持激励的正反两个方面，只有做到奖功罚过、奖优罚劣、奖勤罚懒，才能真正调动起员工们的工作热情，形成人人争先的竞争局面。
优化激励过程
充分考虑教师的个体差异，实行差别激励的原则
根据人本管理的基本原则，不同人的需求是不同的，同一个人在不同时期和不同发展阶段的需求也是不相同的，相同的激励措施对于不同的人所起的效果也是不同的。所以学校管理者应该对教师的需要进行细致的分析和划分，找到激励的切人点，对其最强烈的需求进行激励，才能使教师产生最强的动机。为此，学校可以根据自身特点和实际情况，采取因人而异的奖励制度。针对不同教师的需要和动机采用不同的激励措施。
全面地评价教师，建立智力激励体系
教师劳动是复杂的脑力劳动，教师劳动具有独特的创造性，教师劳动的价值具有明显的滞后性和隐含性。因此，对教师进行激励时，要根据教师劳动的特点，科学地、全面地评价教师劳动的价值、成果、贡献。在评价过程中要着眼于教师专业化水平的发展和教师职业道德建设的加强，建立有利于实施素质教育、发挥教师创造性的多元的、新型的中小学教师评价体系;在评价方法上要建立以教师自评为主，不能以考试成绩作为评价教师的唯一标准，要注重学生的意见和家长的反馈，通过多方面的评价，使教师从多种渠道获得改进教学行为和进行自身修养的信息，不断提高教学水平和人格魅力。
智力激励体系具体可以从以下方面来实施:大力提倡中小学教师的继续教育，终身学习，制定有利于各级教师自觉参加继续教育的政策法规，把教师参加培训的内容、成绩、次数、实效，作为各级教师的聘用、晋升的一个依据，以激励教师主动参加继续教育。
建立有效的人才竞争机制
改革职称评聘制度
改革学校的教师职称评聘制度，需要注意以下几个问题:首先，要根据学校的具体定位和需要，来设置教师岗位，在公平、公正、公开的环境中竞争上岗，择优聘任;其次，学校要与教师签订聘任合同，在合同中要明确学校和教师双方的责、权、利，根据岗位不同，职责和津贴均不相同;第三，教师要能上能下，动态管理。教师聘任的各个岗位尤其是关键岗位是有限的，在这些岗位上要认真考核，对于无法履行职责的教师要及时根据合同让其下岗，或更换职位闭。
制定精确、公平的激励机制。
激励制度首先要体现公平的原则，首先要在广泛征求教师意见的基础上出台一套大多数人认可的制度;其次要和考核制度结合起来，这样能激发教师的竞争意识，使这种外部的推动力量转化成一种自我努力工作的动力，充分发挥人的潜能;最后是在制定制度时要体现科学性，也就是做到工作细化。学校必须系统地分析、搜集与激励有关的信息，全面了解教师的需求和工作质量的好坏，不断根据情况的改变制定出相应的策略，并通过实践不断地检验和修正，进一步丰富和发展，从而提高指标的客观性和科学性。