1. Vongxay K, Wang SN, Zhang XF, Wu BB, Hu HX, Pan ZJ, Cheng SY, Fang WH. Pathogenetic Characterization of Vibrio parahaemolyticus Isolates from Clinical and Seafood Sources. International Journal of Food Microbiology, 2008, . 王淑娜，方维焕。荧光定量PCR法检测副溶血弧菌tdh基因的表达差异。畜牧与兽医，2008，已录用。3. 陈 阳，吴 迪，陈雪燕，赵焕灿，扈鸿霞，Cheick A Diakite，方维焕。猪链球菌2型分离株对野生斑马鱼的致病性。动物医学进展，2008，已录用。4. 刘刚，李肖梁。犬瘟热病毒H基因的序列分析与表达。畜牧与兽医，2008，已录用。5. 陈健舜, 李肖梁，田国明，马有智，方维焕。检测猪链球菌2型的三重PCR方法建立与应用。中国兽医学报, 2008,已录用。6. Vongxay K, Pan ZJ, Zhang XF, Cheng SY, Mei LL, XU C, Wang SN, Fang WH. Occurrence of pandemic clones of Vibrio parahaemolyticus isolates from seafood and clinical samples in a Chinese coasting province. Foodborne Pathogens and Disease, 2008, 5(2):. Yang ZZ, Shuai JB, Dai XJ, Fang WH. A survey on porcine circovirus type 2 infeciton and phylogenetic analysis of its ORF2 gene in Hangzhou, Zhejiang Province. Journal of Zhejiang Univ Science B, 2008, 9(2):. Jiang LL, Chen JS, Xu JJ, Zhang XF, Wang SN, Zhao HC, Vongxay K, Fang WH. Virulence characterization and genotypic analyses of Listeria monocytogenes isolates from food and processing environments in eastern China. International Journal of Food Microbiology, 2008, 21(1): . Shuai JB, Li XL, Chen N, Chen CY, Fang WH. Characterization and potential use of truncated PCV2 capsid protein and its polyclonal antibody for diagnosis of PCV2 infections. Acta Microbiologica Sinica, 2008:4891):. Shuai JB, Wei W, Jiang LL, Li XL, Chen N, Zhang ZF, Fang WH. Mapping of nuclear localization signals in open reading frame 2 protein from porcine circovirus type 1. Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2008, 40(1):. Chen N, Hu HX, Zhang ZF, Shuai JB, Fang WH. Genetic diversity of the envelope glycoprotein E2 of classical swine fever virus: Recent isolates branched away from historic and vaccine strains. Veterinary Microbiology, 2007, 127:. Shuai JB, Wei W, Li XL, Chen N, Zhang ZF, Chen XY, Fang WH. Genetic characterization of porcine circovirus type 2 (PCV2) from pigs in high-seroprevalence areas in southeastern China. Virus Genes, 2007, 35:. 陈健舜,江玲丽,方维焕。李斯特菌毒力因子及其进化探讨。微生物学报，2007, 47(4):738-742。14. 徐 程，陈亚波，方维焕。O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的原核表达与抗原性分析。动物医学进展，2007，28（6）：14-18。15. 应薇芳，赵焕灿，钱 娅，方维焕。浙江部分地区屠宰场待宰猪链球菌的检测及药敏试验。动物医学进展，2007，28（6）：24-26。16. 潘自降，坎 布，沈 飙，娄高明，方维焕。副溶血弧菌海产品和临床分离株的表型及溶血素相关基因分析。微生物学报，2007，47（3）：508-511。17. 田国明，李肖梁，陈健舜，陈雪燕，方维焕。单核细胞增多性李斯特菌LMO1847基因在不同应激条件下的表达。畜牧与兽医，39(7):7-10。18. Chen XY, Xu JJ, Shuai JB, Chen JS, Zhang ZF, Fang WH. The S-layer proteins of Lactobacillus crispatus strain ZJ001 is responsible for competitive exclusion against Escherichia coli O157:H7 and Salmonella typhimurium. International Journal of Food Microbiology，2007,115(3):. Yang ZZ, Habib M, Shuai JB, Fang WH. Detection of PCV2 DNA by SYBR Green I-based quantitative PCR, Journal of Zhejiang University Science B, 2007, 8(3):. Jiang LL, Ke CL, Xu JJ, Chen JS, Chen XY, Chen N, Shuai JB, Fang WH. Listeria monocytogenes mutants carrying Newcastle disease virus F gene fused to its actA and plcB: In vitro expression and immunogenicity in chickens, Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2007, 39(1):57-6621. 陈亚波，徐 程，张桂芝，方维焕。新城疫病毒HN蛋白抗原表位分析及结构域基因原核表达。中国预防兽医学报，2007，29（1）：32-3522. Li XL, Shuai JB, Fang WH*. Protection of Carassius auratus Gibelio against infection by Aeromonas hydrophila using specific immunoglobulins from hen egg yolk. Journal of Zhejiang University Science B, 2006, 7(11):. Yang ZZ, Fang WH, Habib M. First Results of Detection of PRRSV and CSFV RNA by SYBR Green I-based Quantitative PCR. Journal of Veterinary Medicine B, 2006;53(10):. Li L, Fang WH, Li JR, Huang YW, Yu L. Oral DNA vaccination with the polyprotein gene of infectious bursal disease virus (IBDV) delivered by attenuated Salmonella elicits protective immune responses in chickens. Vaccine, 2006, 24(33-34):. John Dikki M, Chen XY, Chen N, Fang WH*. Attenuated Salmonella typhimurium as a carrier for prokaryotic and eukaryotic expression vectors, Journal of Zhejiang University (Agric. & Life Sci., ed), 2006, 32(3):. Fang WH, Birgitte B, Siegumfeldt H. Leucocins 4010 from Leuconostoc carnosum cause a matrix related decrease in intracellular pH of Listeria monocytogenes, FEMS Microbiology Letters, 2006, 258(2): 208-21327. Jiang LL, Xu JJ, Chen N, Shuai JB, Fang WH. Virulence phenotyping and molecular characterization of a low-pathogenicity Listeria monocytogenes isolate from milk, Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2006, 38(4):. 徐晶靓, 江玲丽, 陈 宁, 帅江冰, 方维焕。携带外源基因的重组减毒单核细胞增多性李斯特菌构建与鉴定。微生物学报，2006,46(3):445-450。29. Vongxay KP, Cheng SY, Zhou XY, Shen B, He XL, Zhang GZ, Fang WH Prevalence of Vibrio parahaemolyticus in seafoods and their processing environments as detected by Duplex PCR. Journal of the Science of Food and Agriculture, 2006, 86(12): . 张桂芝，陈亚波，徐 程，张朝政，方维焕。新城疫病毒F蛋白结构域基因原核表达与抗原表位分析。浙江大学学报（农业与生命科学版）2006，32（1）：82-87。31. 杨宗照, 方维焕。猪瘟合并猪繁殖呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)感染。中国兽医学报, 2006,26(3):. Zeng HY, Zhang XF, Sun Z, Fang WH. Multiplex PCR identification of Listeria monocytogenes isolates from milk and milk-processing environments. Journal of the Science of Food and Agriculture, 2006, 86(3):. Yang ZG, Sun HX, Fang WH. Haemolytic activities and adjuvant effect of Astragalus membranaceus saponins (AMS) on the immune responses to ovalbumin in mice. Vaccine, 2005, 23 (44): . 李肖梁, 尹兆正, 钱娅，朱志刚，方维焕。抗嗜水气单胞菌IgY的提纯及体外抑菌效果研究。浙江大学学报（农业与生命科学版）, 2005, 31(4):. 戴贤君, 方维焕。减毒沙门氏菌为载体的口服生长抑素DNA疫苗对草鱼安全性。中国兽医学报, 2005，25(5):. 戴贤君, 方维焕。减毒沙门氏菌为载体的草鱼口服生长抑素DNA疫苗构建及其稳定性。中国兽医学报 , 2005, 25(4):. 马有智，戴贤君,李肖梁，方维焕。表达猪链球菌溶血素基因的减毒沙门氏菌的构建及鉴定。中国兽医学报, 2005,25(5):478-480。38. 陈雪燕, John M. Dikki, 江玲丽, 帅江冰, 方维焕。重组质粒在减毒沙门氏菌中的稳定性及其对细菌侵袭力的影响。微生物学报，2005，45(5):. 贺晓龙, 张桂芝，方维焕。动物性食品中大肠埃希氏菌O157:H7特异性PCR方法的建立。中国兽医科技, 2005, 35(8):. Ke CL, Song HH , Jiang LL, Zeng HY, Zhang GZ, Fang WH. Construction of the recombinant Listeria monocytogenes mutant expressing green fluorescent protein. Journal of Zhejiang University (Agric. & Life Sci., ed), 2005, 31(5): . Jiang LL, Song HH, Chen XY, Ke CL, Xu JJ, Chen N, Fang WH. Characterization of a Mutant Listeria monocytogenes Strain Expressing Green Fluorescent Protein. Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2005, 37(1): 19–2442. Song HH, Wang ZL, Zheng DX, Fang WH, Li Y, Liu YY, Niu ZD, Qiu BS. A novel mucosal vaccine against foot-and-mouth disease virus induces protection in mice and swine. Biotechnology Letters, 2005, 27(21):. Song HH, Fang WH, Wang ZL et al. Detection of foot-and-mouth virus antibodies using a purified protein from the high-level expression of codon-optimized, foot-and-mouth disease virus complex epitopes in Escherichia coli. Biotechnology Letters, 2004, 26(16):1277-128144. 姜中其，陈晓红，方维焕，张应勤，孙建华。规模化猪场仔猪断奶腹泻大肠杆菌耐药性监测。浙江大学学报（农业与生命科学版），2004, 30(5):. 张晓峰，方维焕，程洁，施伟良。李斯特菌选择性增菌培养分离比较研究。中国公共卫生, 2004, 20(6):. 马有智，李肖梁，方维焕。猪链球菌2型溶血素基因PCR快速检测方法研究。浙江大学学报（农业与生命科学版）2004，30（1）：78-8247. 李 龙，方维焕, 樊拥军，许 健，方 立，李建荣，于 涟。减毒沙门氏菌为载体在Vero细胞中表达传染性法氏囊病病毒多聚蛋白基因。生物工程学报，2004，20（3）：437-440。48. Fang WH, Siegumfeldt H, Budde BB, Jakobsen M. Osmotic stresses led to decreased intracellular pH of Listeria monocytogenes as analyzed by fluorescence ratio-imaging microscopy. Applied & Environmental Microbiology, 2004, 70(5):. Song HH, Zhou L., Fang WH, Li Yong et al. High level expression of codon optimized food-and-mouth disease virus complex epitopes and cholera toxin B subunit chimera in Hansenula polymorpha. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2004, 315(1):. Song HH, Li Y., Fang WH, Geng YF et al. Development of a set of expression vectors in Hansenula polymorpha. Biotechnology Letters, 2003, 25:. 谢荣辉，方维焕，李建荣，卢觅佳，于涟。萧山鸡IL-2基因真核表达载体构建及其在VERO细胞中的表达。浙江大学学报，2003，29（6）：649-654。52. 梁雪芽，方维焕，江玲丽。鸡新城疫口服DNA疫苗的安全性、稳定性与免疫效力。 生物工程学报，2003，19（1）：24-29。53. 马有智，方维焕，柯春林，张晓峰。猪链球菌2型JX分离株的生物学特性。中国兽医学报，2003,23（4）：326-328。54. 马有智，方维焕。猪链球菌血清2型JX02株溶血素基因的克隆及序列分析。中国兽医学报， 2003，23（5）：460-46255. 方维焕，梁雪芽，李建荣。减毒沙门氏菌为载体传递DNA疫苗诱导对鸡新城疫病毒的免疫保护。中国兽医学报，2003,23(6):527-529。56. 张晓峰，李爱云，方维焕，江玲丽，柯春林。多重聚合酶链反应鉴别单核细胞增生李斯特菌的研究。中华检验医学杂志，2003，26（2）93。57. 张晓峰，方维焕，江玲丽，杜华华。应用聚合酶链反应检测食品中单核细胞增多性李斯特菌。中国预防医学杂志， 2003，37（3）：199。58. 方维焕。食品安全标准和监控体系建设需尽快与国际接轨。国际学术动态，2003，1：15-18。59. 张晓峰，程 洁，方维焕。抗李斯特菌免疫机理研究进展。中国人兽共患病杂志，2003，19（5）：113-115。60. 方维焕、梁雪芽。减毒沙门氏菌为载体在真核细胞中表达鸡新城疫病毒F蛋白的研究。生物化学与生物物理学报，2002,34(4):488-493。61. Zhong BX, Weng HB, Fang WH. Preparation of protein samples for gel electrophoresis by sequential extraction. Journal of Zhejiang University, Science ed., 2002，3（5）. 宋厚辉，方维焕。猪链球菌ZJ株溶血素基因的克隆和序列分析。中国预防兽医学报，2002，24（2）：103-10563. 梁雪芽，方维焕。猪生殖与呼吸综合征病毒的分子生物学研究进展。中国兽医科技.2001,31(8).14-1764. 宋厚辉，方维焕。 产气荚膜梭菌主要毒力因子的分子生物学研究进展。预防兽医学进展，2001，3（1）：13-16。65. Fang WH, Almeida ., & Oliver . Effects of lactoferrin and milk on adherence of Streptococcus uberis to bovine mammary epithelial cells. American Journal of Veterinary Research, 2000, 3:. Fang WH. & Oliver S. P. Identification of lactoferrin-binding proteins from bovine mastitis causing Streptococcus uberis. FEMS Microbiology Letters, 1999, 176:. Almeida ., Fang WH., & Oliver . Adherence and internalization of Streptococcus uberis to bovine mammary epithelial cells are mediated by host cell proteoglycans. FEMS Microbiology Letters, 1999, 177:. Fang WH., Luther D. A. & Oliver S. P. Protein expression by Streptococcus uberis in co-culture with bovine mammary epithelial cells. FEMS Microbiol. Letters, 1998, 166:. Fang WH., Luther D. A., Almeida R. A. & Oliver S. P. Decreased growth of Streptococcus uberis in milk from mammary glands of cows challenged with the same mastitis pathogen. Journal of Veterinary Medicine B, 1998, 45:. Ali-Vehmas T., Vikerpuur M., Fang WH., and Sandholm M. Giving selenium supplements to dairy cows strengthens the inflammatory response to intramammary infection and induces a growth-suppressing effect on mastitis pathogens in whey. Journal of Veterinary Medicine A, 1997, 44:. Fang WH., Myllys V. & Sandholm M. Resazurin reduction as a function of respiratory burst of bovine polymorphonuclear neutrophils. American Journal of Veterinary Research, 1997, 58(6):. Fang WH. A novel fluorometric method for evaluation of postantibiotic effect on mastitis-causing Staphylococcus aureus and Escherichia coli. Journal of Microbiological Methods, 1996, 26:. Fang WH. Quantification of Staphylococcus aureus and Escherichia coli in the liquid medium by fluorometry and its use in phagocytosis assay. Journal of Appled Bacteriology, 1996, 80:. Koivunen A-L., Maisi P., Fang WH. & Sandholm M. Inhibition of the protease activity in tracheobronchial aspirates of horses with COPD. American Journal of Veterinary Research, 1996, 57(5):. Malbe M., Salonen M., Fang WH., Oopic T., Jalakas M., Klaassen M. & Sandholm M. Disposition of enrofloxacin (BaytrilR) into the udder after intravenous and intra-arterial injections. Journal of Veterinary Medicine A, 1996, 43:. Fang WH., Vikerpuur M. & Sandholm M. Reconstitution of mastitic milk by adding blood plasma and leukocytes into low cell count milk. Veterinary Research (France), 1996, 27:. Fang WH., Shi M., Huang L. & Chen J. Antagonism of the lactic acid bacteria towards Staphylococcus aureus and Escherichia coli on the agar plates and in milk. Veterinary Research (France), 1996, 27:. Fang WH. & Pyorala S. Mastitis-causing Escherichia coli: Serum sensitivity and susceptibility to selected antibacterials in milk. Journal of Dairy Science, 1996, 79:. Fang WH. & Vikerpuur M. Potency of antibacterial drugs in milk as analyzed by the ß-glucuronidase-based fluorometry. Journal of Veterinary Pharmacology & Therapeutics, 1995, 1:. Fang WH., Vikerpuur M. & Sandholm M. A fluorometric ß-glucuronidase assay for analysis of bacterial growth in milk. Veterinary Microbiology, 1995, 46:. Malbe M., Klaassen M., Fang WH., Myllys V., Vikerpuur M., Nyholm K., Sankari S., Suoranta K. & Sandholm M. Comparison of selenite and selenium yeast feed supplements on Se-incorporation, mastitis and leukocyte function in Se-deficient dairy cows. Journal of Veterinary Medicine A, 1995, 42:. Fang WH. & Sandholm M. Inhibition of the proteinase activity in mastitic milk. Journal of Dairy Research, 1995, 64:. Fang WH., Shi M., Chen J., Huang L. & Shao Q. Comparative aspects of bacterial growth in milk and whey. Chinese Veterinary Science (English), 1994, 1(1):. Fang WH., Shi M., Chen J., Huang L. & Shao Q. Turbidometric determination of bacterial growth in whey. Chinese Veterinary Science (English), 1994, 1(1):. Fang WH., Shi M., Huang L. & Shao Q. Growth of lactic acid bacteria, Staphylococcus aureus and Escherichia coli in normal and mastitic milk and whey. Veterinary Microbiology, 1993, 37:. Fang WH., Jiang C. & Liu H. Epidemiological aspects of bovine mastitis and its control in several dairy herds in south-east China. Preventive Veterinary Medicine, 1993, 15(2-3):. Hu SH, Fang WH, Lu HR, et al. Effect Of Teat Dipping And Dry Cow Therapy On Mastitis In A Commercial Dairy-Herd In China. Preventive Veterinary Medicine, 1990, 10:(1-2), 91-96.
1.先自我介绍，问各位评委好2.介绍题目，根据关键词介绍背景资料3.简明扼要讲技术路线图：本文设计以用水提取法和乙醇回流提取法,提取鹿衔草、牛耳大黄、扁蓄、岩陀的有效成分,通过体外抑菌试验筛选抑菌效果最好的中草药进行体内抑菌试验。4.应用步骤详细补充5.结合图表分析结果6.讨论及做出结论
1、特征，嗜水气单胞菌是一种广泛分布于自然界各种水的革兰氏阴性菌， ℃~℃为最适繁殖温度， 普遍存在于盐量较低的河水、海水、湖水、游泳池、下水道等环境中的条件致病菌，可感染多种水生动物和其他动物是人兽鱼共患的条件致病菌。2、鱼类，在水产中发现由嗜水气单胞菌感染的暴发性出血病较多，因嗜水气单胞菌的血清型很多，况且感染的对象不同，所以症状也各异。如白鲢暴发性出血病、甲鱼败血病、黄鳝出血病、鳗鲡红鳍病等。该菌为条件致病菌，当环境骤变，水质恶化时，常会与其它菌（如温和产气单胞菌、弧菌等）混合感染使病情加重。由嗜水气单胞菌感染的疾病一般病势较猛，多为恶性传染病，死亡率很高。3、大部分人感染嗜水气单胞菌一般只会导致急性胃肠炎，该病的发生与误食被污染的水源或食物而引起的肠道感染有关。少部分人由于皮肤的伤口接触到病菌后而发生外伤感染，轻者仅表现为局部的表浅溃疡，严重者感染可达皮肤深部组织，引起蜂窝织炎。免疫缺陷的人群，还可能引发严重的全身性感染性疾病，有较高的致死风险。
嗜肺军团菌是一种细胞兼性寄生的细菌，可入侵变形虫，或是人类的巨噬细胞内。该菌的感染力在抗体和血清补体存在下大大提高（但并非绝对需要两者存在）。该菌会因噬菌作用被伪足包裹进入巨噬细胞，之后，菌体被细胞产生的自噬体包裹起来，这却阻止了溶酶体的溶解。在这层保护之下，细菌大量繁殖。该菌利用一种型为IVB的分泌系统分泌的名为Dot/Icm（细胞器运行缺失/细胞内繁殖）宿主入侵效应蛋白。这些效应器可以提升细菌在宿主细胞的存活力。该菌会在培养液里由II型分泌系统产生一种大小约为39kDa的金属蛋白，这种蛋白对某些组织培养的细胞有毒害。II型分泌系统也是完全毒化作用的必需。[1]1976年，美国宾夕法尼亚州的费城举办了一次退伍军人会议，参加者中超过200人发生肺炎，其中34人遇难。经查明，这次事件的元凶是一种当时尚未发现的细菌——嗜肺军团菌（该病也因此命名为军团病）。这次事件反映了嗜肺军团菌并非小面积的人与人的传染。
阿奇已经不太敏感，应该做菌培养加药敏
嗜肺军团菌属革兰阴性需氧菌，为胞内寄生菌。嗜肺军团菌引起军团病，该病流行于夏秋季，主要通过吸入带菌飞沫而感染。常见的感染来源为污染的空调和供水系统。军团病主要有流感样型和肺炎型两种临床类型，流感样型预后良好，肺炎型死亡率较高（大于15%）。确诊依赖于特异性抗体的检查（应为阳性或强阳性）及在痰、胸腔积液、肺组织活检标本中分离出细菌。红霉素、利福平对本病的治疗效果好。您的妹妹嗜肺军团菌抗体是弱阳性，只能说明肺内寄生着嗜肺军团菌，但不一定致病。如果是嗜肺军团菌引起军团病，胸片检查也应该有病变。所以，我建议您的妹妹拍胸片进一步检查一下。另外，反复咳嗽，需要注意气管炎、咳嗽变异性哮喘的可能。\
这是一种革兰阴性杆菌的病菌，主要是吸烟，酗酒滥用酒精灯行为导致的
1.早发现早确诊早治疗，越快越好!
2.一旦出现临床症状，立即采取肌注的用药方式，此时口服用药效果已经大打折扣，用药时要加倍用量，以保证有足够的药物进入相应的组织和病灶。
3.一圈之中一头有病，全圈治疗。
4.三分治疗七分养，很多慢性病例猪都是由于长时间不吃食，饥饿衰竭而死，要加强饲养管理。
5.对严重病例的猪淘汰处理。
猪副嗜血杆菌病临床症状
猪副嗜血杆菌病发生症状
(1)免疫接种是预防该病的最好方法。选择与当地流行的血清型相符的菌苗。先给母猪接种，通过初乳可使 4 周龄以内的仔猪获得保护力， 仔猪 4周龄时，再接种一次，可获得较高的保护率。种猪每半年预防1次。
(2)加强饲养管理，减少应激。保持清洁卫生，通风良好， 防寒防暑， 尽量减少其他呼吸道病原的入侵，杜绝不同生长期的猪混养于一栏，减少猪的流动和运输，提高猪的抗病力。
(3)早期诊断，正确治疗。急性发病的猪场，不难根据临床症状作出诊断， 合理的使用药物效果理想且不留后遗症。当猪群发现疑似本病病猪，在做好药敏试验的基础上，正确选用药物治疗是至关重要的。
猪副嗜血杆菌病，又称多发性纤维素性浆膜炎和关节炎，也称格拉泽氏病。是由猪副嗜血杆菌引起，临床上以体温升高、关节肿胀、呼吸困难、多发性浆膜炎、关节炎和高死亡率为特征的一种传染病，严重危害仔猪和青年猪的健康。目前，副猪嗜血杆菌病已经在全球范围影响着养猪业的发展，给养猪业带来巨大的经济损失。该病通过呼吸系统传播。饲养环境不良时本病多发。断奶、转群、混群或运输也是常见的诱因。
患猪发病后出现厌食、精神沉郁、被毛粗乱、跛行（后肢一个跗关节肿胀）、呼吸困难、震颤及共济失调等症状。如疾病暴发可能引起较高的死亡率。剖检病变可见心包炎、腹膜炎、胸膜炎，全身浆膜表面出现浆液性纤维素性以及纤维素性化脓性渗出。剖检胸膜以浆液性、纤维素性渗出性炎症为特征。肺间质水肿，最明显是心包积液，心包膜增厚，心肌表面有大量纤维素渗出，喉管内有大量黏液，后肢关节切开有胶冻样物。腹股沟淋巴结呈大理石状，下颌淋巴结出血严重，肝脏边缘出血，脾脏有出血边缘隆起米粒大的血泡。
【防治措施】
（1）加强饲养管理，消除诱因，对全群猪用电解质加维生素C粉饮水5～7天，以增强机体抵抗力，减少应激反应。
（2）彻底清理猪舍卫生，猪圈地面和墙壁可用2%氢氧化钠水溶液喷洒消毒，2小时后用清水冲净，再用复合碘喷雾消毒，连续喷雾消毒4～5天。
（3）隔离病猪，用敏感的抗菌素进行治疗，口服抗菌素进行全群性药物预防。为控制本病的发生发展和耐药菌株出现，应进行药敏试验，科学使用抗菌素。
（4）搞好免疫，使用自家苗（最好是能分离到该菌，增殖、灭活后加入该苗中）、猪副嗜血杆菌多价灭活苗能取得较好效果。种猪用猪副嗜血杆菌多价灭活苗免疫能有效保护仔猪早期发病，降低复发的可能性。对母猪，初免可于产前40天一免，产前20天二免。经免猪产前30天免疫一次即可。受本病严重威胁的猪场，仔猪也要进行免疫，根据猪场发病日龄推断免疫时间，仔猪免疫一般安排在7日龄到30日龄内进行，每次1毫升，最好一免后过15天再重复免疫一次，二免距发病时间要有10天以上的间隔。
本病是由副猪嗜血杆菌引起的猪多发性浆膜炎和关节炎的传染病，主要在保育阶段和断奶前后发病。由于副猪嗜血杆菌是猪体内的常在菌，当外界环境骤变、饲养管理不良，感染其他疾病时，抵抗力下降，该病菌大量繁殖发病。
[症状]
发热、食欲下降，不愿吃食，反应迟钝，没有精神，呼吸困难，咳嗽，四肢疼痛，关节肿胀。瘸腿，起立困难，颤抖，共济失调，结膜发紫，消瘦衰竭死亡。剖检可见胸膜、心包膜和肺表面有脓性纤维蛋白渗出物，腕关节和跗关节有浆液性炎症。
[预防]
（1）阿莫西林粉100克加入1吨饲料中，调匀后饲喂，连喂5天。
（2）泰乐菌素100克+磺胺间甲氧嘧啶200克+TMP40克混入1吨饲料中，每天2次，连喂5天。
（3）氧氟沙星200克混入1吨饲料中，每天2次，连喂5天。
（4）加强饲养管理，搞好环境卫生，严格消毒，减少应激，增强猪的体质，提高免疫力，可预防本病的发生。
[治疗]
（1）头孢噻呋每千克体重3～5毫克+地塞米松每千克体重毫克，肌内注射，每天1次，连用3～5天。
（2）远征药业的强舒西林5～10毫克/千克体重，生理盐水稀释，肌内注射，每天1次，连用3天。
鼠李糖乳杆菌是由美国教授从健康人体分离出来，是全球研究最多的益生菌，属于第3代益生菌。主要功能是调节胃肠道功能，增强人体的免疫力，预防和帮助治疗腹泻，还有预防呼吸道感染、预防龋齿、抗过敏、排除毒素的作用。
1、鼠李糖杆菌简称为LGG)，1983年由美国北卡罗来纳州立大学两名美国教授(Gorbach and Goldin)自健康人体分离出来，并获得专利。2、 是全球研究最多的一种益生菌，属于第三代益生菌。20 年在益生菌方面的集中研究 300多篇研究文献，其中临床研究文献100多篇 20多篇博士论文而目前市场上的益生菌如：双歧杆菌和嗜酸乳杆菌的研究文献要少得多。双歧杆菌是一大类益生菌，包括很多不同的菌株，虽然有关双歧杆菌的研究报道也有不少，但具体到某一特定菌株的双歧杆菌来说，其研究报道就很少了 。二、LGG益生菌主要功能1、 平衡和改善胃肠道功能2、 增强人体自身免疫能力3、 促进双歧杆菌和嗜酸乳杆菌生长和作用4、 预防和帮助治疗腹泻5、 预防呼吸道感染6、 排出毒素7、 预防龋齿8、 预防过敏三、应用范围酸奶、酸奶饮料、牛奶、奶粉、奶酪，果汁饮料、胶囊等。四、知名度LGG是全球最著名的益生菌之一。目前全球已有四十多个国家和地区有LGG产品生产和销售，包括芬兰、美国、澳大利亚、日本、韩国、台湾、中国（伊利独占）等。五、优势1．功能性: 益生菌中研究最多、功能性最多的一种益生菌，且对其的研究一直未间断过。2．知名度: 全球最知名的益生菌之一，40多个国家和地区有LGG产品。3．唯一性: 全球独家拥有LGG的销售和授权，许多其它益生菌则多家公司有售。4．经验性: 全球独家既生产益生菌菌种，又自己生产各种益生菌产品（始于1990年），丰富的生产、销售、市场和全球客户服务经验。5．风味影响性: LGG产乳酸，不会对产品风味带来不利影响，而双歧杆菌以产醋酸为主，会给产品风味带来一些负面影响。6．活菌数稳定性: LGG在产品保质期内活菌数保持稳定，比如酸奶在一个月内LGG活菌数基本不变化。而大部分其它益生菌种则衰减相当迅速。如：嗜酸乳杆菌在两周后，活菌数量就降为原来的25%（不同菌株有所不同）甚至更低，四周后活菌数降为原来的10%以下。双歧杆菌在3-7天后，活菌数可降为原来的10%以下，两周后活菌数就更低，一般在1%以下。7．活体进入人体肠道能力: LGG在耐胃酸和胆汁方面的性能非常突出，可以活体进入人体肠道。而其他大部分益生菌种在进入肠道前就已经因胃酸和胆汁作用而死亡。如：普通酸奶菌种保加利亚乳酸杆菌在条件下，半小时后活菌数降为原来的5%左右，1小时后活菌数降为原来的左右。对双歧杆菌而言，30℃，对双歧杆菌的存活有较大影响，2小时后活菌数可降低70%-90%以上，时则衰减更快。嗜酸乳杆菌的情况接近双歧杆菌。8．人体内定殖（存活）能力: LGG可以定殖在人体内长达两周之久，能有效改善调整人体胃肠道菌群群落，对人体健康非常有益。所以能否定殖于人体对于一个益生菌的生理功能将有很大的影响。其他大部分益生菌种均不能定殖于人体。9、三代益生菌比较：第一代 第二代 第三代产品 酸奶等 AB益菌奶、酸奶等 LGG产品菌种 普通菌种，如嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌等 嗜酸乳杆菌双歧杆菌等 LGG划分依据 技术特性：产乳酸、香味物质等 无临床方面的研究 可能对胃肠道功能有所改善 在已有的研究中或已发表的文章中，并没有针对某一种特定的菌株进行 目前在乳制品中的应用较广泛 临床实验证实具有改善胃肠道功能的作用。所有的研究都是针对LGG这一特定的菌株
1. 益生菌知识小科普 益生菌知识小科普 1.小科普一下：益生菌和益生元的区别 简单的说，益生元就是益生菌的“食物”，只有保障有足够的益生元，才能够使得益生菌有足够的能量生长繁殖，发挥作用。 这样，我们就不难发现两者的区别所在： 1，成分不同，益生菌是具有生物活性的细菌，而益生元则是低聚糖类。2，作用方式不同，益生菌是外部细菌，作用更加直接，我们可以根据身体不同的体质及病因，添加不同的菌种，如双歧杆菌对胃肠道疾病有显著功效等。而益生元是以未经消化的形式进入胃肠道，通过投喂双歧杆菌等益生菌的生长，间接地促进胃肠道健康和营养素的吸收。 3，免疫系统应答，我们的人体具有免疫功能，能够识别外部摄入的细菌，不同的体质可能会因此产生不同的生理反应。 2.何谓益生菌 国际营养学界普遍认可的定义是：益生菌是一种对人体有益的细菌，它们可直接服用，以维持肠道菌丛的平衡。 饮乐多是一种真正的活性乳酸菌发酵乳，是经过韩国科研人员40余年累代培养而成，经过胃和十二指肠时不被胃液和胆汁杀死，能直达肠道发挥作用。在国外又被称为“健康长寿菌”，在韩国和日本已有40多年的历史，每天的饮用量占总人口的1/2以上。 饮乐多中不含任何激素、色素、抗生素、稳定剂、防腐剂，能有效的提高免疫力，预防便秘腹泻，促进消化，改善挑食厌食，健脑益智，美容养颜，利于减肥。 通过每天补充100亿活力菌，能调理肠微生态平衡，激发人体内在力量，从而达到持久保持健康的目的。 建议，一定要适时饮用饮乐多，使体内有益菌占优势，从而保持肠道年轻状态。“肠年轻，则生命常青”。 3.生活中有哪些对人类有益的益生菌,又有哪些对人体健康的有害菌 益生菌是指有益于人类的生命和健康的一类肠道生理细菌，如双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌等乳酸菌。 目前市面上各种酸奶制品品种繁多，有凝固型、搅拌型，还有加入不同的果汁、酸甜可口、适应各人不同口味的果汁型酸奶。不管是何种酸奶，其共同的特点都是含有乳酸菌。 这些乳酸菌在人体的肠道内繁殖时会分泌对人体健康有益的物质，因此酸奶对人体有较多的好处。追问能把它对人体的好处阐述得详细些吗？ 回答①防治腹泻；②缓解不耐乳糖症状；③预防 *** 感染；5增强人体免疫力；⑤缓解过敏作用；⑥降低血清胆固醇；⑦预防癌症和抑制肿瘤生长。 病人经常服用含益生菌的保健食品，可预防与治疗腹泻症。正常人体肠道内栖息着500多种、数十万亿个不同的细菌，它们在绝大多数情况下是互相制约、共存共荣的。 一旦肠道菌丛平衡被打破，就会引起腹泻。其次，滥用抗生素也会引起腹泻。 欧洲一些医疗中心试用以乳杆菌、双歧杆菌与菊糖为主要成分的口服液治疗旅行者腹泻，也取得良好效果。 益生菌的另一作用是，可预防 *** 感染症。 欧洲所做的双盲对照试验（46名有 *** 霉菌感染史的妇女参加了试验）证实了这一点。女病人每人每日口服150毫升含大量益生菌的酸牛奶，结果 *** 感染发生率大大低于安慰剂组妇女。 这是因为酸牛奶中的嗜酸乳杆菌可抑制 *** 内白色念珠菌的繁殖。 科学家认为：益生菌在肠道内的大量繁衍可促进并提高人体的全身免疫能力。 在欧洲一些著名长寿之乡（如高加索山区、地中海沿岸国家），当地人常饮自制的酸牛奶，极少患糖尿病、心血管病、肥胖症，研究认为这与酸牛奶中含大量益生菌有关从70年代到90年代，国外所做的大量试验证实：喝益生菌饮料确实可降低血清胆固醇。 最近国外又有学者发表论文指出：每天喝200毫升加入嗜酸乳杆菌以及菊糖后发酵的酸牛奶，可使高脂血症患者的血脂平均下降4。 4%左右。因为嗜酸乳杆菌与菊糖两者均有降脂作用。 此外，研究性报道说，长期饮用含大量益生菌的饮料，有预防癌症和肿瘤疾病以及防止骨质丢失与骨质疏松症的作用。 有害：大肠杆菌，可致病。 大肠杆菌的致病物质为定居因子，即大肠杆菌的菌毛和肠毒素，此外胞壁脂多糖的类脂A具有毒性，O特异多糖有抵抗宿主防御屏障的作用。大肠杆菌的K抗原有吞噬作用。 由大肠杆菌导致的疾病： 1、肠道外感染。 多为内源性感染，以泌尿系感染为主，如尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎。 也可引起腹膜炎、胆囊炎、阑尾炎等。婴儿、年老体弱、慢性消耗性疾病、大面积烧伤患者，大肠杆菌可侵入血流，引起败血症。 早产儿，尤其是生后30天内的新生儿，易患大肠杆菌性脑膜炎； 2、急性腹泻。某些血清型大肠杆菌能引起人类腹泻。 其中肠产毒性大肠杆菌会引起婴幼儿和旅游者腹泻，出现轻度水泻，也可呈严重的霍乱样症状。 腹泻常为自限性，一般2~3天即愈，营养不良者可达数周，也可反复发作。 肠致病性大肠杆菌是婴儿腹泻的主要病原菌，有高度传染性，严重者可致死。细菌侵入肠道后，主要在十二指肠、空肠和回肠上段大量繁殖。 此外，肠出血性大肠杆菌会引起散发性或暴发性出血性结肠炎，可产生志贺氏毒素样细胞毒素。 有益：乳酸菌，可促消化。 乳酸菌是一种存在于人类体内的益生菌。乳酸菌能够将碳水化合物发酵成乳酸，因而得名。 益生菌能够帮助消化，有助人体肠脏的健康，因此常被视为健康食品，添加在酸奶之内。在人体肠道内栖息着数百种的细菌，其数量超过百万亿个。 其中对人体健康有益的叫益生菌，以乳酸菌、双歧杆菌等为代表，；对人体健康有害的叫有害菌，以大肝杆菌、产气荚膜梭状芽胞杆菌等为代表。 益生菌是一个庞大的菌群，有害菌也是一个不小的菌群，当益生菌占优势时（占总数的80%以上），人体则保持健康状态，否则处于亚健康或非健康状态。 长期科学研究结果表明，以乳酸菌为代表的益生菌是人体必不可少的且具有重要生理功能的有益菌，它们数量的多和少，直接影响到人的健康与否，直接影响到人的寿命长短，科学家长期研究的结果证明，乳酸菌对人的健康与长寿非常重要。 而人体肠道内乳酸菌拥有的数量，随着人的年龄增长会逐渐减少，当人到老年或生病时，乳酸菌数量可能下降100至1000倍，直到老年人临终完全消失。 在平时，健康人比病人多50倍，长寿老人比普通老人多60倍。因此，人体内乳酸菌数量的实际状况，已经成为检验人们是否健康长寿的重要指标。 现在，由于广谱和强力的抗菌素的广泛应用，使人体肠道内以乳酸菌为主的益生菌遭受到严重破坏，抵抗力逐步下降，导致疾病越治越多，健康受到极大的危胁。所以，有意增加人体肠道内乳酸菌的数量就显得非常重要。 目前国际上公认的乳酸菌，被认为是最安全的菌种，也是最具代表性的肠内益生菌，人体肠道内以乳酸菌为代表的益生菌数量越多越好。 也完全符合诺贝尔得奖者生物学家梅契尼柯夫“长寿学说”里所得出的结论，乳酸菌=益生菌=长寿菌。 人类面对抗生素的日渐无能为力的现状，正在不断寻求新的更加有效的生物抗菌产品，世界发达国家首先认识并开创了以使用乳酸菌为代表的免疫疗法革。 4.益生菌的作用 际营养界普遍认定义：益菌系种物益细菌直接作食品添加剂服用维持肠道菌丛平衡外已发数百计益菌保健产品其包括：含益菌酸牛奶、酸乳酪、酸豆奶及含种益菌口服液、片剂、胶囊、粉末剂等等 ①防治腹泻； ②缓解耐乳糖症状； ③预防 *** 染； ④增强体免疫力； ⑤缓解敏作用； ⑥降低血清胆固醇； ⑦预防癌症抑制肿瘤 体肠道内栖息着500种、数十万亿同细菌绝数情况互相制约、共存共荣 第二效性科原理目前临床研究说益菌概念行几乎没负面研究结商家纷纷堂皇卖益菌基于目前家于益菌认识水平商业产能力益菌产品能否实现所宣称功能难保证事情 比歧杆菌糖解乳酸醋酸使肠道呈酸性其结能控制由害菌引起异发酵并且 *** 肠蠕起解除便秘作用双歧杆菌乳制品发酵程产乳糖酶帮助患者消化乳糖占80%乳糖耐受亚洲体制改善作用并且体肠内发酵产乳酸醋酸能提高钙、磷、铁利用率促进铁维素D吸收 嗜乳酸杆菌工作协助蛋白质消化缺乏产胀气、肠及整系统毒性、便秘及吸收良量缺乏导致念珠菌盛 嗜乳酸杆菌助于解毒导致素包括反复使用抗素、口服避孕药、阿司匹灵、皮质类固醇、饮食欠佳、吃甜食、酵母菌、紧张些都造良性菌平衡良性菌容易与些废物结合排体外；嗜乳酸杆菌抗菌作用 比非德氏菌新肠胃早进驻菌种婴6产寡糖益菌始腹泻孩应该重点补比非德氏菌 益菌产品进入商业化产厂家基本贴益菌标签各种益菌功能往罗列目前市场买益菌没实现与际惯例接轨 益菌功能必须特定菌株特定剂量连续食用细菌才能实现许商业宣传说研究表明益菌具功能列堆文献提功能些功能跟细菌能毫关系许广告推销都宣称细菌含量高达少少各种细菌能够产效剂量却相差非每吃亿起作用却要万亿才行由于现于益菌产品没质量标准定检测所厂家宣称能依靠信誉保证律规范权威监测都真空带 需要家注意点：益菌作用治安联防队性质特种部队精英性质 许孩拉肚医给些基于益菌**牌效非难说于益菌治疗拉稀项研究结：吃益菌孩平均拉稀间72负误差36；吃益菌孩平均拉稀间58负误差28疗效于花钱益菌宝贝家说能点难接受差异医所认效其许所说效能点点改善统计析认种改善自于食用益菌总结具该项功能 益菌概念没问题目前科研究于益菌认识限食品药品监管机构没靠依据制定产品标准规范临床研究实验结事各路商家吹花乱坠产品能够实现少所宣称作用却另事。 5.益生菌的作用有哪些 1、维持肠道正常功能 肠道是人体最大的免疫器官和最大的微生态体系，人体通过胃肠道粘膜与外界缓慢进行相互作用，通过其生长及各种代谢作用促进肠内细菌群的正常化，抑制肠内腐败物质产生，保持肠道机能的正常运行。 2、缓解乳糖不耐受症状，促进消化吸收 乳糖不耐受是指人体缺乏代谢乳糖的酶，在摄入奶制品后，出现腹胀，腹痛等不良反应。 全球有75%的成年人体内乳糖酶的活性有减弱的迹象，在一些亚洲国家则超过90%。 研究发现，乳杆菌等具有半乳糖苷酶活性，能够明显降低乳糖的浓度，产生乳酸，有利于人体消化吸收。 3、增强人体免疫力 益生菌进入肠道内，一方面可以在肠道内定殖，维持肠道微生物菌群的平衡；另一方面是益生菌可以直接作用于宿主的免疫系统，诱发肠道免疫，并 *** 胸腺，脾脏等免疫器官，促进巨噬细胞活性，通过增强B、T淋巴细胞对抗原 *** 的反应性，发挥特异性免疫活性，从而增强机体的免疫功能。 4、预防癌症和抑制肿瘤的生长 益生菌可以产生一些抑制肿瘤生长的代谢产物，如多糖、细菌素及乳酸等，通过抑制转化致癌物质的酶的产生，激活机体免疫系统，特别是巨噬细胞、NK细胞、B淋巴细胞的活性以及抑制细胞突变等方式，以及降低肠道内的PH值， *** 肠道蠕动，使肠道内的致病菌毒素和致癌物质排除体外，降低致癌的可能性。 5、缓解过敏反应 研究发现，正常人肠道中益生菌越多，罹患过敏性疾病的机会也就越小。 益生菌可以诱导T细胞产生大量的IL-12，能够抑制Ig E的产生，有效地预防过敏发生。 6、降低血清胆固醇 益生菌主要通过同化作用来降胆固醇的含量、抑制胆固醇合成酶（3-羟基-3-甲基戊二酸CoA还原酶）的活性，通过益生菌的胆盐水解酶的作用，将小肠内水解后的胆盐能与食品中胆固醇发生共沉淀作用，减少机体对胆固醇的吸收，促进由粪便排出体外。 7、益生菌对肥胖的作用 肠道菌群紊乱在肥胖的发生发展过程中发挥着非常重要的作用。有大量实验证实，通过摄入益生菌，可以有效的防治肥胖。 ①抑制食欲，增加饱腹感：益生菌可以通过 *** CCK,GLP-1等饱腹因子的释放，以及减少胃促生长激素的分泌，从而减少食物摄入，降低体重和脂肪的蓄积。 ②降低胆固醇：益生菌可以通过同化作用以及共沉淀作用减少胆固醇的吸收。 ③调节肠道菌相：益生菌进入肠道内后，使失衡的肠道菌相正常化（厚壁菌门减少，拟杆菌门增加），降低肠上皮细胞的通透性，减少循环中LPS的含量，减少炎症因子，进而提高胰岛素敏感性。 8、益生菌对糖尿病的作用研究发现糖尿病患者体内也存在肠道菌群紊乱现象。 益生菌可以通过调节肠道菌相，有益菌等附着在肠道上皮细胞上。益生菌通过吸收葡萄糖进入菌体内，减少宿主的吸收，从而降低血糖水平。 另外，如上所述，益生菌可以降低循环中LPS的浓度，减少炎症反应，提高胰岛素敏感性，改善胰岛素抵抗，进而达到防止糖尿病的目的。
病原菌进入宿主后面临多重挑战，调整基因表达来响应环境变化对于细菌在宿主体内的生存至关重要。哺乳动物宿主的体温通常为37°C左右，是细菌毒力基因表达实现成功定植的关键信号[1]。前期的研究发现将近400个基因在温度变化时（28°C vs 37°C）显示差异表达，其中包括三型分泌系统相关基因。三型分泌系统（Type III Secretion System, T3SS）是革兰氏阴性菌的一个由多组分蛋白复合体形成的跨膜通道，它通过分泌蛋白，或把这些毒力蛋白直接注入宿主细胞中发挥致病作用[2]。 三型分泌系统高度耗能，因此其表达受到严格调控，但具体调控机制尚不十分明确。
近日，南开大学 吴卫辉教授 课题组在 Nucleic Acid Research （IF=) 上发表题为 Acetylation of the CspA family protein CspC controls the type III secretion system through translational regulation of exsA in Pseudomonas aeruginosa 的研究论文， 揭示了铜绿假单胞菌CspA家族蛋白CspC通过与exsA mRNA的5'UTR结合调控exsA的翻译。环境温度变化时，CspC乙酰化修饰增多影响其对核酸的结合能力，从而影响对exsA的翻译作用。 景杰生物为该研究提供了基于 LC-MS/MS的乙酰化修饰组学分析 和乙酰化泛抗体（PTM-101）。
CspA属于冷休克蛋白家族，可与mRNA结合参与调控多种生物学过程及响应环境变化。铜绿假单胞菌野生型菌株PA14含有五个CspA同源基因，分别为PA0456 (CspC) , PA0961, PA1159, PA2622 (cspD)和PA3266 (capB), 它们都受到温度变化的调节。作者发现 CspC的突变可增加肺部感染，且其毒力的增强与细菌的生长速度关系不大。 接下来，作者探究了CspC的突变后细菌的毒力增强的原因。作者比较了突变体和野生型菌株的转录组， 共发现174个差异基因。其中，所有T3SS基因在cspC突变体中表达都升高。 同时，这一结果也在蛋白水平上得到一致的映证。这些结果表明 CspC对T3SS基因有负调控作用。
图 PA0456（CspC）的突变增加了小鼠急性肺炎感染时的细菌毒力
ExsA/C是T3SS的关键基因，CspC调控exsC启动子的活性，但不调控exsA启动子的活性。为了探究CspC对exsA的调节机制，作者在野生型菌株PA14中过表达C端带GST标前的CspC（CspC-GST）或单独的GST蛋白，并进行RIP-seq分析。结果显示， exsA mRNA及其5 'UTR被 CspC-GST显著富集，表明CspC可能在转录后水平对exsA进行调节。 随后，作者构建了Ptac-5’UTR-exsA-FLAG载体，通过不断缩短5’ UTR长度和观测表达量，最终将关键调控区域缩小到74 nt序列。
图 CspC 在转录后水平控制exsA的表达
利用Ptac-74 nt-exsA-FLAG，作者发现野生型PA14在37°C时的ExsA的蛋白水平比在25°C时高倍。在cspC突变体中，exsA的蛋白水平分别比野生型PA14在25°C和37°C时高倍和倍，表明CspC在25°C时对exsA的翻译抑制作用更强。然而，CspC的转录和蛋白水平在两个温度下相差不大，暗示着差异可能由蛋白翻译后修饰引起。通过 LC-MS/MS分析 ，作者发现CspC的K41位有乙酰化修饰，且这种修饰的丰度在37°C中高于25°C（从25°C到37°C，模拟细菌由环境中进入哺乳动物宿主体内)。
图 CspC蛋白K41存在乙酰化修饰
为了探究K41乙酰化是否影响了CspC功能，作者构建了cspC的K41Q和K41R突变体版本，分别用于模拟乙酰化和未乙酰化状态。结果显示K41R CspC-74 nt ssDNA的亲和力比 K41Q CspC-74 nt ssDNA的亲和力约高10倍。过表达K41R cspC降低exsA、exsC和pcrV的mRNA水平，而过表达K41Q cspC 则不影响它们的表达。随后，作者使用Ptac-74-exsA-FLAG检测了cspC突变体对exsA翻译的影响。与野生型cspC相比，cspC K41Q突变后不能抑制exsA-FLAG的翻译，而K41R cspC可抑制exsA-FLAG 的产生，并导致在25°C和37°C下的exsA蛋白水平相当，即 造成了对exsA翻译的组成性抑制。
图 CspC K41乙酰化调控 exsA 翻译
为了确认这种机制是否调控体内感染，作者用CspC天然启动子驱动的cspC-GST的突变体感染小鼠。与细胞实验相比，在从受感染小鼠中分离的CspC有更高水平的乙酰化。与cspC突变体相比，感染表达cspC (K41R) 的cspC突变体导致宿主细菌载量和宿主炎症反应降低。然而，cspC (K41Q) 不影响cspC突变体的细菌载量或宿主炎症反应。 这些结果表明CspC在动物体内的活性受K41乙酰化的影响。
图 CspC K41位点突变影响CspC在体内的功能
综上所述， 该研究确定了CspC的调控目标，并揭示了CspC响应宿主体内环境变化的调控机制。 CspC进入宿主后乙酰化修饰丰度增加，减弱了CspC对于三型分泌系统基因的翻译抑制作用，进而增强了铜绿假单胞菌的毒力。
一、液氯消毒原理和二氧化氯消毒原理 （一）、液氯消毒 氯气加入水中产生一系列化学变化。不同的水质其化学反应的过程也不一样，但最终起消毒作用的产物为次氯酸和次氯酸根离子。 1. 当水中无氨氮存在时 CL2+HO2→HOCL+H++CL– …………………….（1） 次氯酸是一种弱电介质 HOCL→H++OCL– ………………………………（2） 次氯酸与次氯酸根在水里所占的比例主要取决于水的pH值，HOCL和OCL–都具有氧化能力，但HOCL是中性分子，可以扩散到带负电荷细菌的表面，并渗入细菌体内，氯原子氧化作用破坏细菌体内的酶，使细菌死亡；而OCL–带负电，难于靠近带负电荷的细菌，所以虽有氧化能力也难起消毒作用。 从图Ⅰ可以看出，在pH值范围内，水的pH值越低，HOCL的百分含量越大，因而消毒效果越好。 2. 当水中存在氨氮时，（1）式产生的HOCL就会和氨化合，产生一类叫胺的化合物，其成份视水的pH值及CL2和NH3含量的比值而定。 NH3+HOCL →NH2CL+H2O………………….(3) NH3+2HOCL→NHCL2+2H2O…………………(4) NH3+3HOCL →NCL3+3H2O………………….(5) 当水的PH值在之间时，NH2CL和NHCL2同时存在，但PH值低时，NHCL2较多，NHCL2的杀菌能力NH2CL强，所以水的PH值低一些，也是有利于消毒作用的。NCL3要在PH值低 于时才产生，在一般的饮用水中不大可能形成。 所以，无论水中是否存在氨氮，在使用液氯消毒时，在pH值范围内，pH值越低，消毒效果比PH值高的消毒效果好。 （二）、二氧化氯消毒 二氧化氯化学性质活泼，易溶于水，在20℃下溶解度为，是氯气的溶解度的5倍。氧化能力为氯气的2倍。CLO2是中性分子，在水中几乎100%以分子状态存在，所以极易穿透细胞膜，渗入细菌细胞内，将其核酸（DNA或RNA）氧化后，从而阻止细菌的合成代谢，并使细菌死亡。在饮用水中 CLO2灭菌反应如下式.(6)、(7)所示。 CLO2+ e→CLO2–…………………………………………(6) CLO2+2H2O+4e→CL–+4OH–……………………………(7) 实验测知，式(6)式的电极电位 ，式(7) 式的电极电位。所以使用二氧化氯消毒还可以氧化水中的一些还原性金属离子（如Fe2+ Mn2+等），即对水中的铁、锰有着不错的去处效果。CLO2的氧化能力与溶液的酸碱性有关，溶液酸性越强，CLO2的氧化能力越强。但在PH值6-10范围内的杀菌效果几乎不受PH值影响。 综上，在净水工艺条件下，用液氯消毒，起杀菌作用的主要是HOCL，其杀菌效果比OCL–高近80倍。由图表Ⅰ可以看出pH值越高，HOCL离解的越多，当pH值大于8时即达到75%的OCL–，消毒效果就愈发降低。经过众多试验结果得出，CLO2可以在范围内杀灭细菌，液氯只有在近中性条件下才能有效地杀灭细菌。 二、两种消毒剂杀灭饮用水中细菌的情况 在饮用水中投加消毒剂的目的主要是杀灭对人体有害的病原菌、病菌，及其它致病的病原微生物。经过消毒处理的水，不是将水中所有的细菌杀灭，可以允许含有少量的对人体健康无害的细菌，但一定要达到《生活饮用水卫生标准》的要求。 （一）、消毒剂投加量对消毒效果的影响 为了研究消毒剂投加两对消毒效果的影响，对我公司的沉淀水（未加消毒剂）、滤前水（预加 mg/L消毒剂）、滤后水（又加 mg/L消毒剂）进行了细菌学指标的检测，检测结果见图表Ⅱ。 从试验结果可以得出： 1. 二氧化氯和液氯对大肠杆菌均有较好的灭菌效果，且随着投加量增大杀菌率增大；二氧化氯的灭菌效果稍优于液氯。投加量为时，液氯的杀菌率是，二氧化氯的杀菌率则达。 2.二氧化氯杀灭细菌的效果明显优于液氯。 （二）、水温对消毒剂杀菌效果的影响 消毒剂的杀菌能力随着温度的上升而增强，温度低时每上升10℃，细菌死亡率成倍增加。图表Ⅲ为Benarde等试验的不同温度下二氧化氯接触时间与大肠杆菌存活率的关系。由图可见，温度升高，灭菌时间相对缩短，杀菌效果相对增强。 三、两种消毒剂对饮用水中有机卤代物 形成的影响 随着人们对用液氯消毒饮用水所产生的有机卤代物致癌作用的研究，国家自然科学基金资助了对比液氯消毒与二氧化氯消毒处理水中有机物情况的项目。对用液氯消毒和用二氧化氯消毒的四种同一自来水厂饮用水的富集水样进行GC/MS分析,其试验结果见图表Ⅳ。 由试验结果表明，凡是投加液氯消毒，不仅有机物种类多，含量大，且均形成较多的有机卤代物（如CHCl3、CHBr3等）。如投加 mg/L液氯的水样检出2种氯代物和7种溴代物，含量为；而用二氧化氯消毒的水样，未检出有机卤代物。二氧化氯消毒一般只起氧化作用，不起氯化作用，这是二氧化氯消毒几乎不形成有机卤代物的根本原因。可见，源水严重污染或水体中有机物含量高时，二氧化氯是最好的选择。 四、我厂对饮用水消毒剂的合理应用 我厂引进的高效复合二氧化氯发生器，其制备消毒剂的原理是利用氯酸钠水溶液与盐酸溶液在一定温度和负压下充分反应，产生以二氧化氯为主、氯气为辅的消毒气体，来进行饮用水消毒的。 该设备在投入使用初期，由于管垢中的锈蚀物要消耗一些二氧化氯，二氧化氯消耗量较大，运行成本较高。运行一个月左右后，二氧化氯的投加量趋于稳定。统计生产实践所耗用的成本，进行经济技术分析，我们得出，在达到同样的消毒效果时，消耗二氧化氯的量要比液氯的消耗量低一些，但制备二氧化氯的原料成本要比液氯成本高元/吨。为了保证水质，同时兼顾节约成本，我厂在冬季水源污染少、浊度低时，使用液氯消毒；到了夏季，水源污染较重或者水源中有机物含量偏高时，使用二氧化氯消毒。 五、结论 液氯作为经典的饮用水消毒方式，消毒能力强，货源充足，价格低廉，投加设备较为简单，有着价廉物美的优势。但当水中有机物含量高时，会产生有致癌作用的卤化有机物。 二氧化氯作为后发展起来的消毒方式，杀菌能力比液氯消毒强，杀菌效果不受水的pH值影响，只发生氧化作用不发生氯化作用达到消毒效果，避免了有机卤代物的问题。但是二氧化氯制取出来即须应用，不能贮存，制取原料价格较贵。 无论是液氯消毒还是二氧化氯消毒，都有各自的优点和缺点。我应该根据生产实践中的实际情况，因水制宜，合理选用饮用水消毒剂，力争得到最好的性价比 一、兽用消毒剂的种类及机理 消毒剂的种类有多种，常用的兽用消毒药主要是：酚、醛、醇、酸、碱、氯制剂、碘制剂、重金属盐类、表面活性剂等类型消毒剂。 酚类 这类消毒剂能使病原微生物的蛋白变性、沉淀而起杀菌作用，能杀死一般细菌。复合酚能杀灭芽胞、病毒和真菌。主要有苯酚、复合酚、煤酚等。 醛类 醛类的杀菌作用也是较强的，其中以甲醛的效果较好，也最常用。随着生产技术的进步和养殖业的需求，戊二醛、邻苯二甲醛等高效消毒剂也被广泛应用。 酸类 酸类消毒剂的杀菌原理是高浓度的氢离子能使菌体蛋白变性和水解，而低浓度的氢离子可以改变细菌体表蛋白两性物质的离解度，抑制细胞膜的通透性，影响细菌的吸收、排泄、代谢和生长。氢离子还可与其它阳离子在菌体表面竞争性吸附，妨碍细菌的正常活动。 碱类 用于畜禽消毒的碱类消毒药主要有苛性钠、苛性钾、石灰、草木灰、苏打等。碱类消毒作用的机理是阴性氢氧根离子能水解蛋白质和核酸，使细菌酶系统和细胞结构受损害，同时碱还能抑制细菌的正常代谢机能，分解菌体中的糖类，使菌体复活。它对病毒有强大的杀灭作用，可用于许多病毒性传染病的消毒，高浓度碱液亦可杀灭芽胞。碱类消毒剂最常用于畜禽饲养过程中场区及圈舍地面、污染设备(防腐)及各种物品以及含有病原体的排泄物、废弃物的消毒。 醇类 醇类主要用于皮肤、器械以及注射针头、体温计等的消毒，如：75%的酒精。 表面活性剂类 这类消毒药又称除污剂或清洁剂，可降低菌体的表面张力，有利于油的乳化而除去油污，产生一定的清洁作用。另外，表面活性剂还能吸附于细菌表面，改变菌体细胞膜的通透性，使菌体内的酶、辅酶和中间代谢产物选出，阻碍了细菌的呼吸和糖酵解的过程，使菌体蛋白变性，而出现杀菌作用。常用的有新洁尔灭、洗必泰、杜米芬等。 氧化剂类 这是一类含不稳定的结合态氧的化合物，遇到有机物或酶即可放出初生态氧，而后破坏菌体的活性基因，发挥消毒作用。常用的氧化剂消毒剂有高锰酸钾、过氧乙酸等。 卤素类 卤素(包括氯、碘等)对细菌原生质及其它结构成分有高度的亲和力，易渗入细胞，之后和菌体原浆蛋白的氨基或其它基团相结合，使其菌体有机物分解或丧失功能呈现杀菌作用。在卤素中氟、氯的杀菌力最强，依次为溴、碘，但氟和溴一般消毒时不用。常用的该类消毒剂包括：漂白粉精、次氯酸钠溶液、优氯净、强力消毒王、碘酊、复方络合碘等。 二、消毒剂对微生物杀灭效果评价试验现状 评价消毒产品的消毒效果，应以中华人民共和国卫生部2002年颁布的《消毒技术规范》为依据。但是该规范中规定的某些实验方法和操作技术还存在诸多问题。评价消毒效果主要是评价对微生物（细菌、病毒、真菌、芽胞等）的杀灭作用以及有机物、PH值、温度等因素对其效果的影响。 《消毒技术规范》（2006征求意见版）中指出检验消毒产品对细菌、真菌的灭活效果时所选用的基础实验菌种包括:金黄色葡萄球菌ATCC 6538、铜绿假单胞菌ATCC 15442、大肠杆菌 8099、枯草杆菌黑色变种ATCC 9372、龟分枝杆菌脓肿亚种ATCC19977、白色葡萄球菌 8032、白色念珠菌ATCC 10231、黑曲霉菌ATCC 16404。在上述规定的菌株基础上，根据消毒剂特定用途或试验特殊需要，还可增选其他菌株。病毒灭活试验所用试验病毒株为脊髓灰质炎病毒1型（poliovirus-Ⅰ，PV-Ⅰ）疫苗株和艾滋病病毒1型（human immunodeficiency virus，HIV-1）美国株。 评价消毒剂消毒效果的检测方法主要包括中和试验、消毒剂定性消毒试验、消毒剂定量消毒试验、消毒剂杀菌能量试验、乙型肝炎表面抗原抗原性破坏试验。具体试验步骤可参见卫生部提出的《消毒与灭菌效果的评价方法与标准》。 三、兽用消毒药的应用现状 当前我国生产、经营和使用最广泛的兽用消毒药品主要为复合酚类、碘类、季胺盐类和氯制剂四大类。当前养殖单位广泛应用的效果确实的消毒药主要有： 安灭杀 先灵葆雅公司生产，主要成分为15%的戊二醛和10%的COCO季胺盐； 拜净 拜耳动保生产，主要成分为十二烷氧化胺三碘氧化合物； 百胜-30/15 辉瑞动保生产，主要包含碘、磷酸、硫酸等成分； 农福 杜邦化工生产，主要成分为高效复合酚。 兽用消毒药在实际应用中仍存在很多问题，如，忽略清除畜禽舍内的粪便、饲料残渣、体表脱落物等有机物；认为饮水消毒剂对畜禽无害而随意加大浓度，造成损失；认为使用温开水做溶剂能增加所有消毒剂的消毒效果；不能做到交叉应用多种类型消毒剂，造成耐药性的产生；认为消毒剂气味越浓越好，造成畜禽黏膜损伤，影响效益。 四、展望 随着经济贸易的全球化，动物疾病流行也呈现全球化，一些新的疾病的流行给畜禽养殖业造成了巨大损失。由于新型传染病疫苗的研究需要较长周期，因此预防控制新型传染病只能通过加强饲养管理和注重消毒等预防措施来实现。这种形势下，研究一种或多种新型、高效、广谱、安全的消毒药显得十分必要。 理想的兽用消毒药应具有高效、广谱、作用迅速、活性长效、性质稳定、便于储运、抗有机物干扰、高度的安全性、成本适中等几个特点。新型高效复合型消毒剂以及兽用消毒剂专用表面活性剂将成为未来研究的趋势，在此基础上，宠物手术（器械）专用消毒剂、奶牛乳头专用消毒剂、种蛋专用消毒剂、SPF动物屏障设施专用消毒剂、生物安全实验室专用消毒剂、疫苗灭活专用消毒剂等更加细化的专业实用型消毒剂的研究也会逐渐受到人们的关注。 延伸阅读 兽用消毒药监管过程中存在的问题 消毒药品名称繁杂 我国专业和兼产兽用消毒药品的厂家较多，兽药市场销售的消毒剂品种更是繁多。除国产制品外，还有部分进口药品。动物消毒药品品种多而杂，同一个功能的消毒药品，有几十个甚至上百个不同批准文号的产品，给用户在使用消毒药品的选择上造成了一定困难。 生产厂家刻意夸大消毒效果 部分厂家为了迎合消费者消费心理、促进产品销量，刻意的在产品外包装说明中夸大产品的消毒效果，以点盖面，使用绝对化语言，甚至将自己的产品说成“万能药”。 产品质量良莠不齐 由于相关监管体制的不完善，部分经营者利用监管机构的疏忽大意，使大量的劣质消毒药流入兽药市场，既破坏了原有的市场秩序，又给相关养殖单位造成了巨大的经济损失。同时劣质消毒药生产者还利用兽药销售吃回扣的不良心理进入市场，这些受利益驱动的消毒药价格回扣现象,给消毒药品的管理带来消极影响。 缺乏相关药品的科学研究 兽用消毒药的研究涉及消毒学、兽医流行病学、环境卫生学和兽医微生物学等相关方面的知识，研究起来费时费力。同时一个消毒药的问世要经过实验室研究、中试放大和临床等几个步骤，转化为产品的周期较长。目前应用的许多消毒药都是公共卫生部门、防检疫部门研究的，缺乏专门针对兽用消毒药的试验研究。