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收稿日期：2007-10-25基金项目：深圳市科技和信息局基金资助项目作者简介：王丹（1982-），女，辽宁本溪人，硕士研究生，从事植物生物技术研究。注：雷江丽为通讯作者。大花美人蕉茎尖组织培养技术研究王 丹1,2，雷江丽2，吴燕民3，吕 慧2，郁继华1(1.甘肃农业大学 农学院，甘肃 兰州 730070；2.深圳市园林科学研究所，广东 深圳 518003；3.中国农业科学院 生物技术研究所，北京 100081)摘 要：以大花美人蕉（Canna×generalis）根茎茎尖为外植体进行组织培养技术研究，筛选出芽诱导适宜的培养基为MS + 6-BA 8.0mg/L（单位下同）+ TDZ 0.03；MS + 6-BA 8.0 + TDZ 0.03 + NAA 0.1 培养基能较好地诱导分化出丛生芽, 继代增殖培养中与MS + 6-BA 3.0 + TDZ 0.03 + NAA 0.1 培养基交替使用可减少畸形芽，增殖系数达1.67；适宜的生根培养基为MS + 6-BA 1.0 + NAA 0.5，生根率达66.67%，且植株生长健壮，移栽易成活。关键词：大花美人蕉；茎尖；组织培养中图分类号：Q943.1 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2008)01-0033-04Research on Shoot-tip Culture of Canna×generalisWANG Dan1,2, LEI Jiang-li2, WU Yan-min3, LÜ Hui2, YU Ji-hua1(1.College of Agronomy, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, Gansu China; 2.Shenzhen Institute of LandscapeGardening, Shenzhen 518003, Guangdong China; 3.Biotechnology Research Institute, Chinese Academy of AgriculturalSciences, Beijing 100081, China)Abstract: The paper mainly studied on tissue culture of Canna×generalis with the stem tips asexplants. The results showed that the bud inoculation medium was MS + 6-BA 8.0mg/L+ TDZ0.03mg/L; the best of clump shoot induction and differentiation medium was MS + 6-BA 8.0mg/L +TDZ 0.03mg/L + NAA 0.1mg/L; using MS + 6-BA 3.0mg/L + TDZ 0.03mg/L + NAA 0.1mg/L asproliferation medium, an optimal proliferation rate was obtained. When the two kinds of mediumused alternatively, the effect was better. The optimum rooting medium was MS + 6-BA 1.0mg/L +NAA 0.5mg/L, the rate of rooting could reach 66.67%, and cultured in this medium, the plant grewwell and easy to survival.Key words: Canna×generalis; shoot-tip; tissue culture大花美人蕉(Canna×generalis)属美人蕉科(Cannaceae)美人蕉属(Canna)的园艺杂交种[1]，是多年生喜光宿根草本花卉，原产美洲热带和非洲等地。其枝叶茂盛、花朵艳丽、姿态优美、花期长，在深圳地区几乎全年开花，是配置大型花坛的优良品种。大花美人蕉不仅观赏价值高，而且能吸收硫、氯、氟、汞等有害物质，具有净化空气、保护环境的作用，因此，世界许多城市的园林绿化中都广泛应用。美人蕉传统的繁殖方式主要采用分切地下根茎的方法，繁殖速度慢、增殖效率低，而且连续营养繁殖造成病毒积累致使病毒病在各地相当普遍，严重影响其观赏价值。利用茎尖组织培养进行脱毒试管苗快繁，是目前大力繁殖与推广美人蕉的主要手段。关于美人蕉组织培养的研究报道较少[2,3]，本研究探索其组织培养高效的再生体系，以期为品种提纯复壮及遗传转化、性状改良奠定基础。2008,37(1):33-36.Subtropical Plant Science第·34· 37 卷1 材料与方法1.1 材料供试材料为目前城市绿化中普遍应用的大花美人蕉‘President’品种。1.2 外植体选择与处理选择生长健壮、无病虫害的优良母株，挖取带芽胞的根茎，去除表面老皮并用肥皂水清洗。用75%乙醇棉擦拭，然后采用不同的消毒剂及处理时间（0.1%升汞10min、2%次氯酸钠10min、2%次氯酸钠20min、2%次氯酸钠 + 0.1%升汞5min、2%次氯酸钠 + 0.1%升汞10min），封闭式振摇灭菌。无菌水冲洗5 次，置于超净工作台上备用。接种前，剥去外部叶片，露出生长点，立即切取茎尖进行接种。1.3 培养方法及培养条件试验于2006 年10 月在深圳市园林科学研究所组培室进行。诱导、增殖和生根培养基均选用MS为基本培养基，在不同培养阶段附加不同种类、不同浓度配比的植物生长调节剂（表2～表4），蔗糖3%，pH 5.8。培养温度(28±2)℃，光照强度2 500 lx，光照周期为14h/d，相对湿度70%～80%。每处理接种30 瓶。定期观察试管苗生长与分化情况。2 结果与分析2.1 不同消毒处理方式对外植体无菌化的影响因供试外植体取自美人蕉地下根茎，表面污染物较多，不易消毒，且不同植物及外植体的成熟度对消毒剂的反应不同，故本试验选用升汞和次氯酸钠进行灭菌效果比较，以筛选合适的消毒剂及消毒处理时间。由表1 可知，2%次氯酸钠20min 处理的无菌化效果较好，但茎尖褐化较严重，说明灭菌时间过长对去老皮后的幼嫩根茎影响较大。0.1%升汞10min 处理与2%次氯酸钠 + 0.1%升汞 10min处理，无菌化效果差异不大，但2%次氯酸钠 + 0.1%升汞 10min 处理有轻微药害。因此，后续实验选用0.1%升汞处理10min 进行外植体消毒。2.2 不同生长调节剂配比对芽诱导的影响以MS 为基本培养基，附加不同浓度6-BA、NAA、2,4-D、KT、TDZ 等（表2），以筛选出较适宜美人蕉茎尖诱导分化的配方。因美人蕉根茎具有休眠特性，芽诱导分化较难。TDZ 具有很强的促进细胞分裂活性，0.05～1.0μmol/L 即可有效促进分化[4]，因此，本实验对TDZ 的诱导效果进行初步探索。试验表明，在不添加任何生长调节剂的MS 基本培养基（1 号）上，茎尖接种10d 后开始生长，叶片展开后，生长停止；15d 后转接到新的MS 培养基上无明显生长，随后叶片逐渐变黄、萎蔫，说明基本培养基中添加生长调节剂是美人蕉离体培养的必要条件。在仅添加6-BA 的2、3、4 号培养基中，高浓度的2 号培养基分化率为33.33%，明显好于3、4号培养基，说明美人蕉启动芽诱导分化需要高浓度的细胞分裂素（表2）。11～16 号培养基添加物为不同生长调节剂与TDZ 组合（表2）。仅添加TDZ 的培养基分化率为0，而多种生长调节剂配合使用分化效果更好[5]。其中15 号培养基的侧芽分化率最高，达63.33%，且每个茎尖可增殖2～3 个侧芽，但个别茎尖经多次转接后有畸形芽；与2 号培养基相比，分化率明显提高，说明添加低浓度TDZ 可促进芽诱导分化（表2）（图版-a）。5、6、7 号培养基为生根培养基，探讨NAA 对美人蕉茎尖生长和生根的影响。试验结果初步说明美人蕉在6-BA/NAA 小于2/0.5 时生根率可达50%以上（表2）。8、9、10 号培养基，探讨美人蕉脱分化，诱导愈伤组织，但结果均不理想。因此，建立高效的美表1 不同消毒剂及处理时间对外植体无菌化的影响处 理 接种数污染数污染率(%) 药害情况0.1%升汞10min 30 5 16.67 基本无药害2%次氯酸钠10min 30 12 40.00 无药害2%次氯酸钠20min 30 4 13.33 20%有轻微药害2%次氯酸钠+0.1%升汞5min 30 10 33.33 3%有轻微药害2%次氯酸钠+0.1%升汞10min 30 5 16.67 7%有药害第1 期 王丹,等：大花美人蕉茎尖组织培养技术研究 ·35·人蕉遗传转化再生体系还需进一步探索愈伤组织诱导途径。2.3 芽继代增殖为了探讨优化的芽继代增殖培养基配方，按表3 设计6-BA、NAA、TDZ 的正交实验，以15 号培养基上分化出的丛生芽为接种材料，进行继代增殖培养（图版-b）。由表3 可见，除17、18 号培养基外，低浓度TDZ（0.03mg/L）的分化促进作用较高浓度（0.3mg/L）的效果好，说明高活性的TDZ 浓度过高反而抑制分化。当TDZ0.03mg/L 时, NAA 0.1mg/L 促分化作用显著优于NAA0.5mg/L。在TDZ、NAA 浓度相同的情况下，随着6-BA 浓度的升高，分化率提高。但随着继代次数的增多，含高浓度6-BA的27 号培养基分化率略有下降，甚至有个别畸形芽产生，说明高浓度细胞分裂素对短期的分化有促进作用[9]，但继代数次后，芽已经萌动，自身具有分化能力，需适当降低6-BA 浓度进行壮苗，以避免畸形芽产生。因此，在增殖过程中交替使用分化增殖系数较高的19 号培养基和27 号培养基，既可保证较高的芽分化率，又可使继代苗生长健壮，减少畸形芽。2.4 生根诱导增殖芽3～5cm 长时，转接到生根培养基上培养约10d 后，可见到根生成（图版-c）。接种20d 后统计生根结果（表4）。从表4可见，所用培养基上都有根生成，说明美人蕉生根较容易；结合生根率和生长势，我们认为MS + 6-BA 1.0 + NAA 0.5培养基较适宜美人蕉生根。表2 不同植物生长调节剂组合的比较植物生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA 2,4-D KT TDZ分化率(%) 生根率(%) 备注1 0 0 0 0 02 9 0 0 0 0 33.33 参考[2]3 5 0 0 0 0 23.33 参考[3]4 3 0 0 0 0 6.675 2 1 0 0 0 60.006 2 0.5 0 0 0 56.677 2 0.2 0 0 0 08 0 0 4 0 09 0 0 2 1 0 参考[6]10 0 0.2 0 2 0 参考[7]11 0 0 0 0 0.2 012 0 0.1 0 0 0.2 23.33 参考[8]13 0 0 0.5 0 0.1 3.3314 0 0 1 0 0.1 6.6715 8 0 0 0 0.03 63.3316 5 0 0.5 0 0.03 50.00表3 不同生长调节剂配比对芽继代繁殖的影响生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA TDZ接种数分化率(%)增值系数 生长势17 3.0 0.5 0.03 30 30.00d 1.20d ++18 3.0 0.5 0.30 30 36.67cd 1.50bc ++19 3.0 0.1 0.03 30 56.67a 1.67a ++20 3.0 0.1 0.30 30 33.33cd 1.46bc ++21 5.0 0.5 0.03 30 43.33c 1.60ab ++22 5.0 0.5 0.30 30 26.67d 1.33c ++23 5.0 0.1 0.03 30 56.67a 1.60ab ++24 5.0 0.1 0.30 30 53.33ab 1.57b +25 8.0 0.5 0.03 30 50.00b 1.53b ++26 8.0 0.5 0.30 30 26.67d 1.37c +27 8.0 0.1 0.03 30 60.00a 1.73a ++28 8.0 0.1 0.30 30 26.67d 1.37c +注：++ 表示生长势强；+表示生长势弱。同列中不同字母表示差异显著(P＜0.05＝，表4 同。表4 不同的生长调节剂配比对组培苗生根的影响生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA接种数生根苗数生根率(%)植株生长势29 0 0.5 30 19 63.33b +30 0 1.0 30 21 70.00a ++31 1.0 0.5 30 20 66.67ab +++32 1.0 1.0 30 16 53.33c ++注：+++ 表示生长势强；++表示生长势中等；+表示生长势弱。第·36· 37 卷3 结 论美人蕉根茎生长在土壤中，无菌化操作较困难。灭菌试验表明，0.1%升汞震荡灭菌10min 效果较好，采回的外植体应尽快处理接种，放置时间过长伤口处易染菌，导致接种后褐化较严重。MS + 6-BA 8.0 + ZDT 0.03 + NAA 0.1 培养基能较好地诱导分化丛生芽，MS + 6-BA 3.0 + TDZ 0.03+ NAA 0.1 为较好的增殖培养基，在增殖培养过程中这两种配方交替使用效果更好；短时间使用高浓度生长调节剂对增殖有促进作用，但长时间使用高浓度生长调节剂会使组培苗质量下降。在试验中还发现，转接次数多的茎尖较转接次数少的分化率大，建议在接种后的10～20d 内及时转接。选用MS + 6-BA 1.0 + NAA 0.5 为生根培养基，生根率较高，根系粗壮、根毛密集，植株生长健壮（图版-d），且移栽成活率较高。参考文献:[1] Segeren W, et al. The genus Canna in Northern South America[J]. Acta Bot Neerl., 1971,20(6): 663-680.[2] 刘文萍,等. 美人蕉茎尖组织培养及快繁技术[J]. 北方园艺, 2001(6): 32.[3] 丁爱萍,等. 美人蕉组织培养及快速繁殖技术[J]. 园林科技, 2006(1): 11-12.[4] Singh N D, et al. The effect of TDZ on organogenesis and somatic embryogenesis in pigeonpea (Cajanus cajan L. Millsp)[J].Plant Science, 2003,164(3): 341-347.[5] 王关林,等. 高活性细胞激动素TDZ 在植物组织培养中的应用[J]. 植物学通报, 1997,14(3): 47-53.[6] 宣朴,等. 生姜茎尖组培快繁技术研究[J]. 西南农业学报, 2004,17(4): 484-486.[7] Kromer K, et al. In vitro cultures of meristem tips of Canna indica L.[J]. Acta Horticulturace, 1985,167: 279-286.[8] Vendrame W A, et al. In vitro propagation and plantlet regeneration from Doritaenopsis Purple Gem 'Ching Hua' flowerexplants[J]. HortScience, 2007,42(5): 1 256-1 258.[9] 刘敏. 花卉组织培养与工厂化生产[M]. 北京: 地质出版社, 2002: 101-102.
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1．基本定位以“综合性、高水平”为办刊方针，求新、求快，及时、准确地反映我国植物科学领域科学家最新研究成果（新发现和新方法等）、系统评述国际研究热点（新理论、新发展）。2．刊登内容发表涵盖植物科学各领域（包括农学、林学和园艺学等）具有重要学术价值的创造性的研究成果。3．栏目设置研究论文、研究报告、研究快报、技术方法、特邀综述和专题论坛。4．服务对象中国国内从事科学研究和高等教育的中高级专业人员。《植物学报》主要刊登植物学各学科有创新的原始研究论文和快讯，并发表植物科学重要领域的综述国际最新进展的文章；期刊的定位是以中文（英文摘要）及时、快速和全面地反映我国植物科学及其相关学科研究的最新成果。《植物学报》是由中国科学院植物研究所和中国植物学会主办的中文版综合性学术期刊。双月刊，128页，国内外公开发行。发表涵盖植物科学各领域（包括农学、林学和园艺学等）具有重要学术价值的创造性的研究成果。服务对象为中国国内从事科学研究和高等教育的中高级专业人员。《植物学报》是全国优秀期刊、中国自然科学核心期刊和中国期刊方阵“双效”期刊。已被国内外多家著名检索系统收录，包括CAB、AGRIS、CSCD、CSTPCD、CNKI和CAJCED等。在新一届编委会（主编：种康）成立的契机下，为了将刊物推向一个新的高度，2006年起，我刊开始了跨越式改革：新增主编评述文章（每年1篇）；2006年5期组织出版了“激素香山会议专辑”，2007年又陆续出版了“植物进化发育”和“植物生殖生物学”专辑。期刊名称：植物学报出版地：北京市历史沿革：现用刊名：植物学报曾用刊名：植物学通报创刊时间：1983植物学报被以下数据库收录：CA 化学文摘(美)(2011)JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)(2012年计划收录)中国科学引文数据库(CSCD—2008)核心期刊：中文核心期刊(2011)中文核心期刊(2008)中文核心期刊(2004)中文核心期刊(1992)
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6 稿件格式 6.1 单位 使用 SI 或派生于 SI 的单位系统。 时间单位：天、秒、分钟、小时 ( 正文中用中文，表格中用 d 、 s 、 min 、 h) 6.2 缩写 为了使读者轻松阅读，减少重复，请在词语首次出现时，给出全称，圆括号中列出其缩写，其后均用缩写。 6.3 商业名 化学物质均用普通名，不用商业名。 6.4 拉丁名 除常用名（如水稻、拟南芥等）在题目中出现可以省略拉丁名外，其他用名首次出现时（题目、摘要、正文），均应写出英文名，圆括号中正确书写拉丁学名 ( 应包括属名、种加词 ) ，如： tobocco ( Nicotiana tabacum ) 。如无英文名，则只写拉丁名。 如出现品种名，请用单引号标示并在括号中注明其品种名全称（栽培品种的品种名全称表示为：种名 + 雅名）。 6.5 遗传学术语 应使用标准的遗传学术语。请参见 Trends in Genetics (Elsevier Science, 1998) 。 7 稿件组成 提交稿件时应按如下顺序：（ 1 ）标题页，（ 2 ）摘要和关键词，（ 3 ）正文，（ 4 ）致谢，（ 5 ）参考文献，（ 6 ）附录，（ 7 ）表（含表头和注释），（ 8 ）图和图注。 7.1 标题页 含（ 1 ）文章标题，（ 2 ）全部作者名，（ 3 ）完成单位名称，（ 4 ）通讯作者和写作作者的地址、电话、传真、和 E-mail 等联系方式。标题应短小精悍，含主要关键词，不含缩写词。 7.2 摘要和关键词 摘要中要概述研究目的、方法、结果和主要结论，特别要突出创新的结果。摘要中不要用缩写和标引参考文献。关键词 4－5 个，按英文关键词的字母排序，中文关键词调整为与英文关键词对应排序。 中文摘要 研究论文要求写成报道性摘要（突出论文的创新点）；综述建议写成报道 — 指示性摘要；理论类论文和论坛摘要可以根据论文内容需要调整写作结构。研究论文中文摘要 400 字以内，其他栏目文章根据篇幅相应调整。 英文摘要 要求突出论文的主题和应用范围，充分反映并突出该研究的创新之处 , 字数 300 - 400 字。摘要内容包括研究背景、目的、方法和结论，不使用引文、图表和公式。 7.3 基金 省部级以上基金资助请注明基金名称及项目编号。 7.4 正文 一般应分前言、材料与方法、结果和讨论四个部分写作。 7.5 致谢 含对研究者和机构的感谢。 7.6 参考文献 本刊采用“著者出版年制”，只列出与本文有关的近期主要文献。作者应对所引文献的准确性负责。具体格式请参照网站介绍。 7.7 附录 置于正文后，以罗马数字编号并于文中提到，如果其不是由本文作者所做，请将附录作者名加在附录标题下。 7.8 表 表不是文章内容的简单复制，应力求准确完整和具有自明性，即在没有正文提示的情况下，读者单见此表即可理解其含义。表应用阿拉伯数字连续编号，采用三线表，表中字号为 8 磅 。表题和表注中英文双释，单位括在圆括号中，表格内容仅用英文。所有缩写和所定义符号应在表注中予以说明，注解内容应用“；”隔开。 p 差异性检验应以 * 、 ** 和 *** 标注，统计指标如 SD 或 SEM 应在表头中写明。 7.9 图 图力求准确完整并有自明性。图应用阿拉伯数字连续编号，图号在正文中也应连续出现。照片图应使用清晰的原照片，多个照片应制成图版。 图的大小分单栏 ( ≤ 6.8 cm ) 和通栏 ( ≤ 14 cm ) ，低于 300 dpi 的图片不能用于出版。多个照片应制成图版，图版内小图用大写英文字母连续编号，字号为 10 磅 。图版宽不超过 14 cm ，高 ( 包括图版说明 ) 不超过 21 cm ，图版在文中的位置用方框表示。线条图请用计算机绘制并请提供激光样，分辨率≥ 600dpi 。坐标图主线 ( 函数线 ) 粗 0.25 ～ 0 .50 mm ，辅线 ( 坐标轴 ) 为主线的一半。图表中的文字以及图注的字号为 8 磅 。放大倍数应以 bar 的形式在图和图注中标明。调整后的图分辨率应在 300 ～ 396(pixels/inch) 之间，并存为 .tif 格式文件，彩色图以蓝绿、紫红、黄、黑为宜，不宜用红、绿、蓝，以更接近于印刷后的效果。 7.10 综述类文章图表中内容请用中文表述，化学合成途径中间产物以及不能用中文表达的情况例外；研究类文章图表中内容用英文表述。 2007 年《植物学通报》参考文献规范 一、关于标点符号的格式 所有中、英文文献中（包括文中对文献的引用）涉及的标点符号都使用英文标点符号。逗号、分号和圆点后加一个英文空格；年代的前括号前加一个英文空格。中文用宋体，英文用Arial字体。二、文中参考文献引用标准规范 1. 文献引用格式为著者年代制。2. 中英文文献中只有一位作者的文献在文中的引用格式如下: (王晓刚, 2000)， (Smale,2001) 或王晓刚(2000)， Smale(2001) ；两位作者的文献在文中引用格式：如：(于江川和武维华, 1999)，(Clough and Bent, 1998) 或于江川和武维华(1999)， Clough 和 Bent(1998) ；有 3 位或 3 位以上作者的文献在文中的引用格式如：(王晓刚等, 2000)， (Moore et al., 2001) 或王晓刚等(1999)，Moore 等(2001) 。 3. 同一作者文献在文中同一处引用，不同的年代用逗号分开，并按年代由远及近的顺序排列，如 : ( 王晓刚, 1999, 2000, 2001) 。 4. 不同作者文献在文中同一处引用，按年代由远及近的顺序排列，文献之间用分号隔开，如: ( 李荣等, 1985; 刘珈, 1990）。 5. 未出版的会议论文 ( 集 ) 不能作为正式文献引用。未出版数据及个人信息的相关文献，请勿在文后列出。 6. 博士学位论文不能作为正式文献引用，但可以脚注形式在其引用页面下方标出，引用处用 ①② 等以上标形式标出；硕士论文不作为正式文献引用，也不列在脚注中 。 三、文后参考文献著录格式 1. 正文及图表中所有正式引用的文献，必须在文后列出；且文后参考文献必须与文中的引用一一 对应 ，准确性请作者负责。 2. 文后文献排列顺序应按中、中文译著、日、西文编排。 3. 中文按第一作者姓氏的字母排序，日文按第一作者的姓氏笔画、西文按第一作者的姓氏字母排序。 4. 请列出全部著者、作者姓名。西文期刊名缩写 ( 请登录我刊网站：友情链接（ NCBI ）查询 ) ，斜体。 5. 西文作者的姓名写法：姓全拼，名首字母大写并连写。 6. 连续编码期刊，不标注期号；非连续编码的期刊，需标注期号。 7. 段落格式为悬挂缩进，缩进度量值为一个中文字符（两个英文字符）。
44、孙莉莉 邮编：100027 地址：北京市东直门外斜街小关56号《中国劳动保障报》社《新世纪周刊》 办电：010－64663541 传真：010－64675
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浪费粮食的满福 4人参与回答 2023-12-11 国内的汉斯出版社就不错，开源期刊的，你可以去试试。
楼兰陶瓷 4人参与回答 2023-12-05 国际植物治疗和植物药理学杂志（Interna－tionalJournalofPhytotherapyandPhy－toPharmacology）简称植物医学（P
吃了个肚歪 3人参与回答 2023-12-07 这里不让写网址的，所以无法写出来。不过你去万维书刊网吧，这是一个期刊大全网站，都是真实的杂志社网址、邮箱、电话、通讯地址等。包括下面那位朋友列举的那么多刊物的真
Ilovesmile 4人参与回答 2023-12-06 
