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CRISPR (Clustered Regularly Interspersed Short Palindromic Repeats)是细菌用来抵御病毒侵袭/躲避哺乳动物免疫反应的基因系统。科学家们利用RNA引导Cas9核酸酶可在多种细胞(包括iPS)的特定的基因组位点上进行切割,修饰。 Rudolf Jaenisch 研究组将Cas9与Te1和Tet2特异的sgRNA共注射到小鼠的受精卵中,成功得到双基因敲除的纯合子小鼠,效率高达80%。 他们将Cas9/sgRNA 与带突变序列的引物共注射,能准确在小鼠两个基因引入所要的点突变。在ES细胞中他们更是成功的一次敲除了五个基因。与ZFN/TALEN相比,CRISPR/Cas更易于操作,效率更高,更容易得到纯合子突变体,而且可以在不同的位点同时引入多个突变。但该系统是否有脱靶效应尚需进一步的研究。 传统的转基因和基因打靶技术,由于技术稳定成熟,可以对小鼠和大鼠的基因组序列进行各种修饰,仍将是模式动物的构建的主要技术。 核酸酶ZFN/TALEN 尤其是CRISPR/Cas技术如果能解决脱靶效应的话,有可能会广泛应用于小鼠,大鼠及其他模式动物的制备和研究中,成为传统的转基因和基因打靶技术的重要补充。

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xiaoyizhu8

Crispr是一套正在改变世界的分子剪刀。这是一种切割DNA的酶,科学家们在2012年发现,他们可以将其用于廉价、有效的基因编辑:只需在CRISPR分子上标记一点RNA(一种粘在DNA上的基因物质的薄片)来引导它,而且它可以切割并“重写”持用者想要瞄准的任何DNA片段。

研究人员多年来一直在与CRISPR合作,对付艾滋病毒,从实验人类胚胎细胞中删除遗传疾病,提高跨物种器官移植的可能性。一些科学家甚至认真地讨论在CRISPR的帮助下复活这只早已灭绝的猛犸象。

,但直到现在,科学家们还没有直接观察到CRISPR的活动。他们知道这是有效的,因为如果CRISPR被用于某些细胞,这些细胞会产生DNA,并进行编辑。但是因为分子参与的规模很小,所以在行动中直接观察它们是非常困难的。科学家们刚刚用CRISPR做了10件了不起的事情:

但是“困难”并不意味着不可能。在11月10日发表在《自然通讯》杂志上的一篇论文中,由金泽大学的Shibata Mikihiro和东京大学的Hiroshi Nishimasu领导的一个研究小组对CRISPR的运行进行了可视化观察,Nishimasu在Twitter上分享了一个GIF,它显示了近乎实时的动作展开。

分析这里发生的事情有点困难,但是研究人员添加的箭头提供了帮助。那些长长的咖啡棕色线条?这些是DNA链。太阳黄的斑点?这就是CRISPR-Cas9酶,简称CRISPR,以及它的引导RNA。紫色箭头指向CRISPR咬入的链上的点,灰色箭头指示的第二段DNA在CRISPR吞下后分离。整个过程在GIF中加速,大约需要30秒。

研究人员使用一种称为原子力显微镜的技术拍摄了视频。在佐治亚理工学院纳米研究小组的一篇博客文章中,没有参与这篇新论文的研究员文杰·迈解释说,原子力显微镜涉及到一个课题,一个接一个地,非常快地,用一根非常锋利的针头,记录针头遇到的力。它允许研究人员建立粗糙但非常尖锐的纳米级图像和视频的影响区域。

这段视频揭示了第一次直接观察CRISPR行为,正如研究人员长期以来怀疑的那样。《大西洋月刊》昨天(11月13日)报道说,当研究人员在蒙大拿州Big Sky的一次会议上展示他们的视频时,全场都是经验丰富的CRISPR用户,他们喘不过气来。

是关于生命科学的原创文章。

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水云间秋忆

到底该不该对人类胚胎进行基因编辑近日广州医科大学范勇团队发表论文,宣布他们用基因编辑技术制造出一个能对艾滋病毒免疫的人类胚胎。艾滋病毒要人体内存活、繁衍,需要跟人体免疫细胞表面上的一种蛋白质结合,进入免疫细胞。有极少数人这个蛋白质的基因发生了突变,艾滋病毒没法进入免疫细胞,这些人天生就对艾滋病毒免疫。范勇团队用一种称为CRISPR/Cas9的基因编辑技术对人类胚胎细胞里头的基因组进行改造,人为让该蛋白质基因发生突变,理论上这样产生的胚胎细胞将会对艾滋病毒具有免疫力。这是史上第二例用这种基因编辑技术改造人类胚胎细胞。第一例也是中国科学家完成的。那是在去年,中山大学生物学副教授黄军就团队用该技术修改了人类胚胎细胞中与β型地中海贫血症有关的基因。发表这两篇论文的学术期刊都没有什么影响力,然而它们都在国际上引起了广泛的关注,称得上是一年来中国生物医学领域在国际上最著名的成果,比国内那些动不动就号称有望获得诺贝尔奖的成果著名多了。然而它们之所以著名,并非因为它们有多高的学术价值。它们的意义只是证明了CRISPR/Cas9这种基因编辑技术可以用来改造人类胚胎细胞。但是这是我们预料中的。这种基因编辑技术是近年来生物医学研究的一大热门,此前已被其他实验室用于修改其他动物细胞的基因,包括猴子胚胎细胞的基因,人类胚胎细胞的基因也能被改造一点也不意外。它们之所以引起关注,就在于竟然“敢于”也改造人类胚胎细胞的基因,这在国外、特别是在西方国家,是一个很有争议的、甚至可以说是禁忌的课题。在黄军就团队的论文发表后,国际上甚至还专门开了一次会议,讨论基因编辑技术涉及的伦理问题,要求暂停用它来改造人类胚胎,禁止用于辅助生殖。

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