都比较难发，可以先投预防医学试试。
都是2011版的北大核心 R1 预防医学,卫生学1.中华流行病学杂志 2.中华医院感染学杂志 3.中国公共卫生 4.中华预防医学杂志 都非常难发表
医学综述投稿最快见刊的期刊：《当代医学》、《医学检验与临床》、《预防医学》、《实验与检验医学》、《循证医学》。
1、《当代医学》
1994年4月创刊，旬刊。以各级临床医师为主要读者对象，兼顾各科，通过形式多样的栏目，帮助读者及时掌握医学新信息、新技术，提高临床诊疗水平，同时为我国医学学术的经验交流搭建平台，以促进我国医学科学发展为办刊宗旨。
2、《医学检验与临床》
1990年创刊，现已出刊30卷171期，共100万余万册。2002年以前以内部刊物发行，至2002年取得中国新闻出版总局国家正式刊号，正式面向全国发行。主要报道本专业领域中的研究成果，促进国内外学术交流。以专论、论著、综述、实验研究等栏目为主。
3、《预防医学》
杂志创刊于1989年9月，是中华预防医学会系列杂志、中国科技核心期刊和《中国学术期刊影响因子年报》统计源期刊。报道预防医学科学研究的新理论、新技术、新方法和新成果。栏目有专家论坛、论著、综述、疾病控制、疾病监测、妇幼保健、健康教育、卫生管理和实验技术等。
4、《实验与检验医学》
1983年6月创刊，是我国中部地区唯一的、综合性实验及检验医学大型期刊。近年来，经过编委会与编辑部的共同努力，学术质量、业内影响逐年增强，近三年连续获得全国医学期刊协作网优秀期刊和江西省优秀科技期刊荣誉称号。
5、《循证医学》
杂志以广大医药卫生技术人员和医疗、教学、科研管理工作者为读者对象，立足临床医学，介绍循证医学的理念、方法及相关知识，探讨符合中国国情的循证医学实践，促进国内外医学学术交流和医学科学发展。
首先，登录中国期刊全文数据库、万方数据库或者 维普数据库（此为中国三大专业文献数据库）或国外Pubmed/Medline等国外专业数据库，然后搜索相关的文献，写出您的文章。其次，再去以上数据库中搜索相关专业期刊编辑部信息（国家级或是非国家级，核心或者非核心，统计源或者非统计源期刊等等），找到投稿联系方式，这样的方法避免网上很多钓鱼网站，确保您投稿的期刊是合法的。最后,祝好运。欢迎交流。静石医疗，竭诚为您服务。
现代预防医学杂志由中华预防医学会、四川华西医院主办，要想在杂志上加急发表，必须满足如下条件：论文涉及国家、省部级基金资助项目或者重点攻关项目的论文，包括基础医学、预防医学和临床医学方面的论著等，满足这类条件可以优先发表，只有这类稿件可以加急，审核通过的稿件不收取加急审稿费，这类稿件的版面费一般都是从基金中扣除;上述条件不满足的投稿，一般是不会有加急发表资格的。
1.预防医学科学研究的新理论、新技术、新成果和新方法介绍。2.劳动卫生、环境卫生、营养与食品卫生、儿童青少年卫生、放射卫生、卫生毒理、流行病学、卫生统计、社会医学、疾病监测与计划免疫、疾病预防与健康促进、卫生保健,以及卫生化学与检验技术等科学研究和有效的预防控制经验总结。3.具有指导意义的述评和专论，有实际参考价值的国内外文献综述、学术讲座、专题讨论、笔谈和书评。4.与预防医学有关的边缘科学、软科学和基础理论研究的文稿。5.国内外学术交流信息、会议纪要、科研动态和产品信息、广告等。二、对文稿的要求1.有严谨的科学性和逻辑性，能重点说明一个或几个问题，有理论或实际意义。论点明确，资料可靠，数据无误，文字精炼，层次清楚，书写工整规范。2.篇幅：论著以不超过4000字，综述、讲座、方法学介绍等以不超过5000字，短篇报道以不超过1500字为宜。3.文题：力求简明准确地反映文章主题。一般不超过20个汉字，以不设副标题为好。一般不使用缩略语。4.作者：论文署名不宜过多，应是参与选题和设计、参与具体工作、能对研究结果负责者，仅参与获得资金或收集资料者不能列为作者，仅对科研小组进行一般性管理者也不宜列为作者。以脚注形式（置于文题页左下方）注明作者单位名称及邮政编码。集体署名的文章必须明确对该文负责的关键人物。虽对本文有贡献，但不具备作者条件者可在文后志谢。作者姓名排序需在投稿时确定，需要变更时必须出示单位证明，一经编排，不得更改。5.摘要：论著需附400字左右的中、英文摘要，内容必须包括目的、方法、结果、结论四部分，各部分冠以相应的标题，方法与结果部分应给出主要数据。不分段，用第三人称撰写。英文摘要应包括文题、作者姓名(汉语拼音)、单位名称、所在城市名和邮政编码；作者应全部列出，当作者不属于同一单位时，在第一作者姓名右上角加“*”，同时在第一作者工作单位左上角加“*”。例如：LIN Xian-yan*, WU Jian-ping, QIN Jiong, LIU Qun.*Department of Pediatrics, First Hospital, Peking University, Beijing 100034，China6.关键词：论著需标引2～5个关键词。请尽量使用美国国立医学图书馆编辑的最新版《Index Medicus》中医学主题词表(MeSH)内所列的词。如果无相应词，处理办法：(1)选用直接相关的几个主题词进行组配；(2)根据树状结构表选用最直接的上位主题词；(3)必要时，可采用习用的自由词，但要置于最后。关键词不能用缩写，如“HBsAg”应标引为“乙型肝炎表面抗原”。7.医学名词：以1989年及其后由全国自然科学名词审定委员会审定公布、科学出版社出版的《医学名词》和相关学科的名词为准，暂未公布者仍以人民卫生出版社编写的《英汉医学词汇》为准。中文药物名称应使用1995年版药典(法定药物)或卫生部药典委员会编写的《药名词汇》(非法定药物)中的名称，英文药物名称则采用国际非专利药名，不用商品名。8.科研论文中，当报告以人为研究对象的试验时，作者应该说明其遵循的程序是否符合负责人体试验的委员会(单位性、地区性或国家性)所制定的伦理学标准并得到该委员会的批准，是否取得受试对象的知情同意。9.图表：图表集中附于文后，分别按其在正文中出现的先后顺序连续编码。每幅图表应冠有文字简明准确的图(表)题。说明性的文字应置于图表下方，并需注明图表中使用的全部非公知公用的缩写。本刊采用三横线表，如遇有合计和统计学处理行(如t值、P值等)，在这行上面加一条分界横线。要求表内数据同一指标有效位数一致；如果出现均值±标准差，一定要写明样本量。间断性资料用条形图，连续性资料用线图。照片图要求有良好的清晰度和对比度。10.计量单位：实行国务院1984年2月颁布的《中华人民共和国法定计量单位》，并以单位符号表示，具体使用参照2001年中华医学会编辑出版部编辑的《法定计量单位在医学上的应用》一书第3版。注意单位名称与单位符号不可混用，如：ng·kg-1·天-1应改为ng·kg-1·d-1；组合单位符号中表示相除的斜线多于1条时应采用负数幂的形式表示，如：ng/kg/min应采用ng·kg-1·min-1的形式；组合单位中斜线和负数幂亦不可混用，如前例不宜采用ng/kg·min-1的形式。量的符号一律用斜体字，如体积的符号应为斜体V。11.数字：执行GB/T 15835-1995《关于出版物上数字用法的规定》。公历世纪、年代、年、月、日、时刻和计数、计量均用阿拉伯数字。序数词和年份、页数、部队番号、仪表型号和标准号不分节。百分数的范围和偏差，前一个数字的百分符号不能省略，如：5～95%要写成5%～95%，±要写成(±)%，± mg/L要写成(±) mg/L。附带尺寸的数值相乘，按下列方式书写：4 cm×3 cm×5 cm，而不写成4×3×5 cm3。 ? 12.统计学符号：按GB3358-82《统计学名词及符号》中的有关规定书写，常用的有：（1）样本的算术平均数用英文小写 (中位数仍用M)；（2）标准差用英文小写s；（3）标准误用英文小写；（4）t检验用英文小写t；（5）F检验用英文大写F；（6）卡方检验用希文小写；（7）相关系数用英文小写r；（8）自由度用希文小写；（9）概率用英文大写P(P值前应给出具体检验值，如t值、q值等)。以上符号均用斜体。13.缩略语：文中尽量少用。必须使用时于首次出现处先注明汉字全称，再在其后的括号内写出汉字缩略语或英文全称及英文缩略语，后两者间用“，”分开。缩略语不得移行。14.参考文献：以亲自阅读主要者为限，应尽量精选。按GB/T7714-2005《文后参考文献著录规则》，采用顺序编码方法，依照其在文中出现的先后顺序用阿拉伯数字标出。尽量避免引用摘要作为参考文献。确需引用个人通信时，可将通信者姓名和通信时间写在括号内插入正文相应处。不得引用未公开发表的文章作为参考文献。参考文献中的作者，1～3名全部列出，3名以上只列前3名，后加“，等”或者其他与之相应的文字(西文加“, et al”；日文加“，他”)。外文期刊名称用缩写，以《Index Medicus》中的格式为准；中文期刊用全名。参考文献为期刊者均须著录起止页。参考文献必须由作者与原文核对无误，按引用先后顺序排列于文后。
《中华预防医学杂志》是我国预防医学界的高级学术期刊，是学界中历史最悠久的公认的核心期刊。该刊编委会由全国著名的预防医学专家组成，审稿专家涉及预防医学及临床医学、基础医学各个领域，他们均是活跃在第一线的学术带头人和学术造诣很高的专家教授，学风严谨、事业心强，是该刊特具权威性的保证。 多年来一直被国内外20余种重要数据库收录，如：美国医学索引（Medline）、化学文摘（CA）、生物学文摘（BA）、俄罗斯文摘、中国科技论文与引文数据库（CSTPCD）、中国期刊网（CNKI）、中国学术期刊（光盘版）、中国期刊全文数据库（CJFD）、中国学术期刊综合评价数据库（CAJCED）、中国生物医学文献数据库CBM）、中文生物医学期刊文献数据库（CMCC）、万方数据库，中国学术期刊文摘（中英文版），等等。
主要承担与参加的课题：1.桥梁人群传播艾滋病的模式吸毒人群的队列研究，项目编号：2004BA719A02国家十五攻关项目，2006～2007，参加者，2.广东省艾滋病病毒阳性者自杀未遂研究，美国中华医学基金项目，2006～2007，课题次负责人3.广东省流动人口的艾滋病健康教育与行为干预研究。项目编号：2003134，卫生厅，2004～2006，课题负责人；4.广东省艾滋病病毒感染者和病人医学管理模式研究。项目编号：A2004071，卫生厅，2004～2006，课题负责人5.全球艾滋病项目（GAP）广东项目，美国CDC，2004开始，课题负责人6.联合国第三期加速基金项目，联合国，2005年，主要参加者7．Sociocultural Factors on Syringe Sharing and HIV risks. 项目编号：1R03DA14705-01，8.美国NIDA，2001～2002，课题负责人9.在吸毒人群中开展针具消毒和供给预防HIV传播的试点研究。项目编号：01－粤－IV－1，卫生部，2001～2002，课题负责人10.吸毒人群预防艾滋病宣传教育干预试点。项目编号：粤－III－2，卫生部，2000～2001，主要参加者11.加强艾滋病检测工作管理、提高检测工作质量。项目编号：粤－VII－7，卫生部，1999，主要负责人12.高危人群预防艾滋病宣传教育干预试点。项目编号：粤－III－8，卫生部，1999～2000，主要参加者，13.广东省HIV与TB相关性研究，省科委，1998～2000，主要参加者。发表的论文：1. 王晔，林矛，林鹏等 在娱乐场所服务小姐预防STD/AIDS干预措施研究.中国性病艾滋病防治.2002，8（3）166～168。2. 林矛，林鹏等.广东省HIV/AIDS流行病学研究.中国性病艾滋病防治.2001，1,11-133. 曾常红，冯蝶仪,林鹏等. 艾滋病与结核病相关性研究.中国性病艾滋病防治.2001，1,5-64.王晔，林鹏，黄云等.酒店服务员艾滋病预防知识宣传干预试点研究.广东卫生防疫.（4）33－35。5.林鹏,李艳，王晔等.吸毒人群HIV知识和高危行为调查及防制知识健康教育探讨.中国性病艾滋病防治.(1)24-276.许锐恒，林鹏.预防艾滋病，减少危害势在必行.华南预防医学.(1)5－67.许锐恒,林鹏，邓爱萍.2001年全球艾滋病流行概况.华南预防医学.(2)3-48.林鹏，许锐恒，王晔，刘勇鹰.广东省艾滋病流行现状及控制策略.华南预防医学.(2)5-89.王晔,林矛,林鹏等.在娱乐场所服务小姐中开展艾滋病预防干预试点研究.中国性病艾滋病防治.(3)171-17310.刘勇鹰,林鹏,王晔,万卓越,颜瑾.广东省2000－2001年HIV/AIDS监测结果分析 华南预防医学.(5) 21-2311.曾常红,林鹏,姚敏,周海,赵茜茜,廖和乐,林矛.吸毒人群中MTB与HIV感染关系的调查.中国公共卫生.(12) 1465-146612.付笑冰，林鹏.职业性HIV暴露后预防.华南预防医学.2003,29(1) 21-2313.徐勇，林鹏，赵茜茜，许锐恒，何群.广东省AIDS自动语音应答、传真咨询热线电话系统.中国性病艾滋病防治.2003（9）2，121－122。14.林鹏，刘勇鹰，王晔，付笑冰，许锐恒，万卓越，颜瑾，赵茜茜.广东省珠江三角洲地区吸毒者HIV感染状况调查.华南预防医学.2003,29(2) 12-1415.何群，林鹏，许锐恒，杨放，王晔，刘勇鹰.广东省艾滋病防治策略分析.华南预防医学.2003,29(2)15-1716.何群，袁建华，许屹，林鹏.广东省HIV/AIDS流行趋势预测.中国艾滋病性病.2003，9（3）142－14417. 何群，杨放，林鹏，王晔，刘勇鹰，付笑冰.城市一般人群艾滋病相关知识、态度及其影响因素调查.华南预防医学.2003,29(5) 17－1918. 颜瑾，林鹏，曾常红，王晔，赵茜茜，林恺生，万卓越.广东省1995～2001年HIV抗体阳性献血员合并HBV、HCV、梅毒感染状况调查.华南预防医学.2003,29(5) 20－2219.邓艾萍，许锐恒，林鹏.女性吸毒者HIV相关危险行为特征研究.中国公共卫生.2003，19（5）544－54620. 刘勇鹰，林鹏，许锐恒，王晔，万卓越，付笑冰，赵茜茜，颜瑾.广东省吸毒者HIV感染状况和危险因素调查.中国公共卫生.2003，19（11）1351－135221. 林鹏，孙宝山，梁立环，刘海东，付笑冰，何群，杨放，刘勇鹰，王晔，赵茜茜，许锐恒.社区女性工作者性病艾滋病知识与性行为特征分析.疾病控制杂志.2004，8（2）118-12026. 杨放，林鹏，何群，吕莉，王晔，刘勇鹰，付笑冰，赵茜茜.应用NUD*IST定性分析软件对艾滋病相关法律的分析.中国性病艾滋病防治.2004,10(2)，86－8927.林鹏.艾滋病流行病学.华南预防医学.2004,30(1),1-228.林鹏.艾滋病疫情调查和处理原则.华南预防医学.2004,30(4),1-329.林鹏.艾滋病预防控制策略.华南预防医学.2004,30(4),3-430.林鹏.艾滋病的实验室检查,华南预防医学.(5)1-331. 赵茜茜，林鹏，刘勇鹰，王晔，付笑冰，何群，杨放，孙宝山.广东省艾滋病面对面咨询情况分析.华南预防医学.2004,30(2) 22-2332. 刘树芳，许锐恒，王声涌，何群，林鹏.工厂外来女工艾滋病干预模式研究.疾病预防控制杂志.2004，8（3）202－20433.孙宝山，林鹏，王声涌，何群，许锐恒.性服务小姐性病艾滋病知识调查及安全套使用影响因素分析.广东医学，2004，25（6）709－71034.赵茜茜，刘勇鹰，林鹏，王晔，何群，付笑冰，杨放.广东省2001～2002年HIV监测结果分析.华南预防医学.2004,30(3)19-2034. 刘勇鹰，林鹏，许锐恒，吴宝燕，何群，王晔，付笑冰，杨放，赵茜茜.珠江三角洲地区乡镇中学生AIDS/性相关知识态度及行为调查.中国艾滋病性病.2004，10（4）260－26236.何群，袁建华，许屹，林鹏.广东省AIDS 病人的医疗保健费用预测.中国艾滋病性病.2004，10（4）271－27437.何群，王晔，刘树芳，林鹏，刘勇鹰，王晔，杨放，赵茜茜.工厂外来女工艾滋病知识、态度、行为调查分析.中华中西医杂志.2004，5（14）1524－152638.刘树芳，许锐恒，王声涌，何群，林鹏，工厂外来女工艾滋病干预前后分析.中国公共卫生.2004，20(8)945-94639.林鹏，范子凡，杨放，吴尊友，王晔，刘勇鹰，明中强，李文杰，罗巍，付笑冰，麦新荣，许锐恒，冯文悦，何群.广东省社区吸毒者针具交换项目试点效果评价.中华预防医学杂志.2004,38(5)305-30840.付笑冰，何群，林鹏，刘勇鹰，王晔，杨放，赵茜茜.城市市民和旅客艾滋病KABP调查及对比分析.中华中西医杂志.2004，5（19）2198－220241.李文杰，范子凡，林鹏，王晔，颜瑾，麦荣建.阳江市静脉吸毒人群艾滋病、丙型肝炎感染情况及相关知识、行为调查.华南预防医学.2004,30(5) 17-1942.何群，刘树芳，王晔，林鹏, 刘勇鹰，王晔，杨放，赵茜茜.东莞市工厂外来女工艾滋病KAB调查.中华性传播感染杂志英文版.2004,4(2) 63-6643.林鹏、何群、万卓越主编.艾滋病预防与控制.2004年3月1日第一版，广东科技出版社44.杨放，林鹏，王晔，李江虹， 付笑冰，钟文龙，刘勇鹰，何群，赵茜茜，Michael Duke，孙宝山，许锐恒.广东省静脉吸毒人群吸毒行为及针具共用影响因素的定性研究.华南预防医学.2004，30（6）1－445.林鹏，邓爱萍，许锐恒，付笑冰，刘勇鹰，王晔.广东省女性吸毒者HIV感染相关危险行为及因素定性研究.华南预防医学.2004，30（6）5－746.付笑冰，林鹏，李江虹，王晔，钟文龙，Merrill Singer，许锐恒，杨放，刘勇鹰，Michael Duke，赵茜茜，何群，孙宝山，陈茂于，范湛丽，黄丽英.广东省静脉吸毒者多种成瘾物质滥用的流行病学研究.华南预防医学.2004，30（6）8－1147.林鹏，孙宝山，梁立环,刘海东，付笑冰，何群，杨放，刘勇鹰，王晔，赵茜茜，许锐恒.社区女性性工作者性病艾滋病干预效果评估. 华南预防医学.2004，30（6）12－1448.王晔，付笑冰，林鹏等.社区女性性工作者艾滋病相关知识与行为调查分析.华南预防医学.2004，30（6）18－1049.刘海东，孙宝山，林鹏，梁立环，付笑冰，杨放，赵茜茜，何群，刘勇鹰，王晔，许锐恒.社区女性性工作者艾滋病综合干预研究.中华中西医杂志.2004，5（23）2817－281950.李文杰,范子凡,林鹏,王晔,颜瑾,麦荣建,阳江市静脉吸毒人群艾滋病、丙型肝炎感染情况及相关知识、行为调查.华南预防医学.2004,30(5)17-1951.刘勇鹰,林鹏,王晔,明中强,万卓越,付笑冰,赵茜茜,颜瑾.广东省不同地区吸毒者HIV相关危险行为的研究.中国艾滋病性病.2004，10（1）7－952.颜瑾,邢辉,魏民,林鹏,李杰,刁丽梅,邵一鸣.1例男性同性恋HIV感染者基因序列分析.中国公共卫生.2004，20（9），1126-112753.颜瑾,王玉,李杰,马鹏飞,林鹏,邢辉,刁丽梅,邵一鸣.艾滋病病毒1型流行株分子流行病学调查.中国公共卫生.2005，21（1），90-9154.颜瑾,王玉,李杰,马鹏飞,林鹏,邢辉,刁丽梅,邵一明.广东省女性吸毒者中流行的HIV-1基因序列分析,中国艾滋病性病.2005，11（1），9-1255.何群,王晔,林鹏,张周斌,赵茜茜,徐慧芳,广东省广州市男同性性接触人群艾滋病KAP调查.疾病控制杂志.2005,9(2)106-10856．LIN Peng(林鹏)，LIU Yongying(刘勇鹰)，WANG Ye(王晔)，FU Xiaobing（付笑冰），XU Ruiheng（许锐恒），WANG Zhuoyue（万卓越），YAN Jin（颜瑾）ZHAO Xixi（赵茜茜）. Survey of HIV Infection among Injection Drug Users in Guangdong, China. Chinese Journal of Sexually Transmitted Infection 2005,5(1):5-957.林鹏，孙宝山，梁立环，刘海东，付笑冰，杨放，赵茜茜，何群，刘勇鹰，王晔，杨杏芬.社区女性性工作者性行为特征与安全套使用影响因素分析.华南预防医学.2005，31（5）4～658.李文杰，林鹏,范子凡,王晔,付笑冰，麦新荣,李诺鸣,谢才华,刘昌锦，柯兴发.在吸毒人群中开展健康教育干预预防艾滋病试点的研究.实用预防医学.2005，12（3）：471～47359.刘勇鹰，林鹏，付笑冰，何群，赵茜茜，王晔，杨放，李艳，孙宝山.广东省艾滋病病毒职业性暴露应急系统响应情况分析.华南预防医学.2006，32（1）4～960.杨放，林鹏，何群，许锐恒，余大年，莫开笋，周伴群，刘勇鹰，王晔，付笑冰，赵茜茜，孙宝山，刘文锦，许建明，蒋建新.广东省3个综合示范区五类人群艾滋病相关KABP情况调查. 华南预防医学.2006，32（1）10～1361.李文杰，李艳，麦荣建，林鹏，杨流苗，刘勇鹰，罗元英.应用简易乘数法估计吸毒人群基数.华南预防医学.2006，32（1）14～1662.林鹏,杨放,范子凡,麦新荣,王晔,刘勇鹰,付笑冰,赵茜茜,何群,许锐恒.广东省静脉吸毒人群吸毒行为的定性研究.华南预防医学.2006，32（1）23～2663.林鹏，付笑冰，李江虹，王晔，钟文龙，Merrill Singer，Michael Duke，许锐恒，杨放，刘勇鹰，赵茜茜，何群，孙宝山，陈茂于，范湛丽，黄丽英. 广东省静脉吸毒者吸毒行为和性行为特征研究.中国艾滋病性病.2006，12（2）117～11964.刘勇鹰，林鹏，许锐恒，吴宝燕，王晔，付笑冰，孙宝山，赵茜茜，杨放.乡镇中学生开展艾滋病性病知识同伴教育效果评估.2006，12（2）140～14265.李艳，李文杰，林鹏，麦荣建，刘勇鹰，杨流苗，付笑冰，罗元英.广东省某地女性性工作者的基数估计研究.华南预防医学.2006，32（4）18～2066．林鹏，孙宝山，梁立环，刘海东，付笑冰，杨放，赵茜茜，刘雪梅，何群，刘勇鹰，王晔.社区女性性工作者商业性行为中安全套使用的影响因素.疾病控制.2006,10(5):462～46567.李艳，李文杰，林鹏，麦荣建，刘勇鹰，杨流苗，罗元英，赵金扣，叶雷.用三种基数估计方法对广东省某市吸毒人群规模的估计研究.中国艾滋病性病.2007,13(1):31～3268.张玉润，王晔，林鹏，何群，刘勇鹰，李艳.艾滋病疫情报告数据中人口学特征与感染途径的探索性分析.华南预防医学.2007,33(3):1-4参编教材与论著：艾滋病预防与控制，广东科技出版社，，林鹏，何群，万卓越主编最新艾滋病知识读本，领南美术出版社，，黄飞主编，林鹏编写
最新国内医学期刊影响因子序号 期刊名称 被引频次 影响因子 预防医学、卫生学类 1、 中国地方病学杂志 1172 2、 中华结核和呼吸杂志 2829 3、 中华流行病学杂志 1875 4、 中华传染病杂志 953 5、 中华预防医学杂志 968 6、 中国消毒学杂志 438 7、 中国艾滋病性病 569 8、 营养学报 773 9、 中华实验和临床病毒学杂志 531 10、环境与健康杂志 562 11、卫生研究 751 12、中华劳动卫生职业病杂志 681 13、中国防痨杂志 473 14、中国卫生统计 293 15、中国食品卫生杂志 264 16、中国职业医学 386 17、中国学校卫生 852 18、中华卫生杀虫药械 95 19、中国寄生虫病防治杂志 421 20、中国公共卫生 1662 20、环境与职业医学 251 22、中国慢性病预防与控制 421 23、工业卫生与职业病 333 24、华南预防医学 230 25、疾病控制杂志 249 26、中国工业医学杂志 317 27、中国地方病防治杂志 351 28、解放军预防医学杂志 287 29、热带医学杂志 107 30、实用预防医学 442 31、现代预防医学 411 32、预防医学情报杂志 235 33、职业与健康 337 基础、医学综合类 1、 中华医院管理杂志 2015 2、 中华病理学杂志 1425 3、 中华医学杂志 3792 4、 中国危重病急救医学 1634 5、 实用诊断与治疗杂志 690 6、 中华麻醉学杂志 1487 7、 生理学报 697 8、 高血压杂志 689 9、 免疫学杂志 544 10、中华血液学杂志 1452 11、中国现代医学杂志 2994 12、中华医学遗传学杂志 768 13、细胞与分子免疫学杂志 644 14、CHINESE MEDICAL JOURNAL 1501 15、中国计划免疫 455 16、中华男科学杂志 526 17、中国病理生理杂志 1621 18、医学研究生学报 569 19、解放军医院管理杂志 661 20、临床与实验病理学杂志 658 21、中国寄生虫学与寄生虫病杂志 573 22、中华微生物学和免疫学杂志 901 23、解放军医学杂志 1023 24、解剖学报 586 25、重庆医学 968 26、诊断病理学杂志 411 27、基础医学与临床 485 28、生理科学进展 443 29、中国医学伦理学 405 30、中国实验血液学杂志 285 31、中国免疫学杂志 718 32、中国急救医学 943 33、中国卫生检验杂志 741 34、医学与哲学 563 35、中国人兽共患病杂志 754 36、中国男科学杂志 263 37、中国组织化学与细胞化学杂志 249 38、生物医学工程学杂志 616 39、中国应用生理学杂志 394 40、医用生物力学 131 41、医疗设备信息 364 42、北京生物医学工程 192 42、微循环学杂志 248 44、解剖学研究 148 45、现代免疫学 469 46、中国医师杂志 544 47、中国生物医学工程学报 362 48、毒理学杂志 295 49、中国疼痛医学杂志 205 50、中国医疗器械杂志 226 51、江苏医药 508 52、解剖科学进展 190 53、中国健康心理学杂志 436 54、中国生物制品学杂志 208 55、生物医学工程与临床 81 56、寄生虫与医学昆虫学报 82 56、中国医刊 299 58、北京医学 282 59、中国医学物理学杂志 226 60、军事医学科学院院刊 277 61、CHINESE MEDICAL SCIENCES JOURNAL 124 62、中日友好医院学报 144 63、解剖学杂志 425 64、上海医学 597 65、医疗卫生装备 224 66、诊断学理论与实践 70 67、西北国防医学杂志 194 68、中国血液流变学杂志 235 69、广东医学 697 70、生物医学工程研究 22 71、天津医药 359 72、华西医学 331 73、现代医学 135 74、医师进修杂志 380 75、山东医药 587 76、华南国防医学杂志 70 77、四川医学 376 78、河北中医药学报 49 79、西南国防医药 109 80、医学分子生物学杂志 35 医科大学学报 1、 北京大学学报医学版 957 2、 浙江大学学报医学版 359 3、 第一军医大学学报 1047 4、 中国医学科学院学报 591 5、 第四军医大学学报 2132 6、 吉林大学学报医学版 788 7、 航天医学与医学工程 443 8、 中山大学学报医学版 481 9、 第三军医大学学报 1477 10、南京医科大学学报 452 11、第二军医大学学报 1190 12、华中科技大学学报医学版 550 13、新乡医学院学报 340 14、复旦学报医学科学版 513 15、四川大学学报医学版 547 16、中南大学学报医学版 575 17、东南大学学报医学版 192 18、山东大学学报医学版 383 19、西安交通大学学报医学版 424 20、军医进修学院学报 272 21、上海第二医科大学学报 450 22、安徽医科大学学报 330 23、武汉大学学报医学版 238 24、重庆医科大学学报 306 25、郑州大学学报医学版 491 26、中国医科大学学报 426 27、福建医科大学学报 244 28、首都医科大学学报 215 29、哈尔滨医科大学学报 267 30、大连医科大学学报 121 31、青岛大学医学院学报 168 32、河北医科大学学报 197 33、蚌埠医学院学报 251 34、山西医科大学学报 252 35、温州医学院学报 176 36、苏州大学学报医学版 327 37、昆明医学院学报 139 38、广西医科大学学报 414 38、江西医学院学报 172 40、徐州医学院学报 202 41、贵阳医学院学报 185 42、广州医学院学报 128 药学类 1、 中国药理学通报 1897 2、 中国药房 1123 3、 ACTA PHARMACOLOGICA SINICA 1350 4、 药物不良反应杂志 287 5、 药学学报 2351 6、 药物流行病学杂志 294 7、 中国药学杂志 1910 8、 中国新药与临床杂志 924 9、 中国药物依赖性杂志 358 10、中国药科大学学报 815 11、中国抗生素杂志 592 12、药物分析杂志 1081 13、沈阳药科大学学报 568 14、中国海洋药物 467 15、中国生化药物杂志 504 16、中国药理学与毒理学杂志 425 17、中国医院药学杂志 1176 18、药物生物技术 254 19、中国药师 364 20、中国药物化学杂志 266 21、中国临床药理学杂志 399 22、中国新药杂志 936 23、中药新药与临床药理 444 24、中国临床药理学与治疗学 310 24、华西药学杂志 511 26、药学服务与研究 115 27、医药导报 448 28、解放军药学学报 270 29、中国基层医药 497 30、中国现代应用药学 423 31、药学实践杂志 238 32、广东药学院学报 221 33、山西医药杂志 185 临床医学类 1、中华医院感染学杂志 3045 2、中华检验医学杂志 1566 3、中国呼吸与危重监护杂志 307 4、中华创伤骨科杂志 582 5、 中华皮肤科杂志 1370 6、 中华急诊医学杂志 874 7、 中国抗感染化疗杂志 343 8、 中华风湿病学杂志 651 9、 中国输血杂志 607 10、中国介入心脏病学杂志 237 11、中国误诊学杂志 2042 12、临床骨科杂志 477 13、中国临床解剖学杂志 738 13、中国临床营养杂志 218 15、中国循环杂志 606 16、临床皮肤科杂志 1082 17、临床麻醉学杂志 996 18、临床泌尿外科杂志 1048 19、中国全科医学 1219 20、临床检验杂志 655 21、中国骨质疏松杂志 607 22、检验医学 497 23、中国皮肤性病学杂志 643 24、中国微循环 311 24、中国血吸虫病防治杂志 485 26、中国临床药学杂志 327 27、中国循证医学杂志 126 28、中国麻风皮肤病杂志 272 29、循证医学 52 29、临床肝胆病杂志 419 31、实用临床医药杂志 399 32、中国综合临床 585 33、血栓与止血学 84 34、中国临床医学影像杂志 256 35、临床心电学杂志 111 36、中国临床医学 356 37、现代泌尿外科杂志 61 38、标记免疫分析与临床 131 39、中国实验诊断学 205 40、实用医学杂志 672 41、现代检验医学杂志 144 41、医学临床研究 269 43、临床输血与检验 86 44、临床肾脏病杂志 43 45、临床急诊杂志 30 康复医学类型 1、 中国康复 420 2、 中华物理医学与康复杂志 801 3、 中国康复医学杂志 881 4、 心血管康复医学杂志 671 5、 中国临床康复 3929 6、 中华老年医学杂志 799 7、 中国康复理论与实践 539 8、 中国运动医学杂志 672 9、 中华老年心脑血管病杂志 222 10、中华老年多器官疾病杂志 71 11、中国老年学杂志 624 12、实用老年医学 207 13、中国临床保健杂志 53 妇、儿科医学类 1、 中华儿科杂志 2909 2、 中华妇产科杂志 2719 3、 实用儿科临床杂志 1827 4、 中华围产医学杂志 353 5、 中国实用妇科与产科杂志 1890 6、 实用妇产科杂志 1091 7、 中国实用儿科杂志 1401 8、 中国儿童保健杂志 649 9、 临床儿科杂志 767 10、现代妇产科进展 331 11、中华小儿外科杂志 695 12、中国当代儿科杂志 385 13、生殖与避孕 317 14、新生儿科杂志 327 15、小儿急救医学 295 16、中国优生与遗传杂志 763
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【综述】几种用于发现未知病毒核酸序列的技术及其应用翁康生 病毒是引发人类传染性疾病的主要病原体之一, 它们极大地威胁着人类健康。目前还存在人类尚未认知或新出现的病毒, 随时可能严重危害人类健康安全〔1 - 3〕。及早地发现,鉴别未知的或新出现的病毒, 是有效的预防和控制的先决条件之一。因此, 建立、储备、改良、发展、乃至创新应用于发现、鉴别未知或新出现病毒的技术方法是十分必要的。近20 多年来, 常采用传统的微生物学技术方法和现代分子生物学技术方法相结合的途径, 发现和鉴别未知病毒。通过细胞培养的方法分离病毒、电镜观察、用已知病毒的抗血清建立的免疫学方法作排他性检测、用已知病毒核酸序列建立的PCR、杂交等方法, 作特异核酸序列的检测、用分子生物学技术获得未知病毒核酸序列, 查询基因数据库, 检出并确定未知病毒基因组序列, 最终发现鉴别出未知病毒。对于无法用细胞分离培养的未知病毒, 有的采用免疫学与分子生物学技术相结合, 筛选获取病毒特异抗原编码基因的克隆, 进而发现鉴别出该病毒。更多的则是采用相应的分子生物学技术, 从被检样品中发现获取未知病毒的核酸序列,进而发现鉴别未知病毒。无论未知病毒是否可以用细胞培养分离, 最终对其基因组序列的测定分析, 是鉴别和判断的决定性依据之一, 而获取未知病毒的核酸序列是前提条件。从少量样品中, 从高度复杂的宿主细胞核酸物质中, 分离、扩增、获取足够量的无基因序列资料的未知病毒的核酸片段, 供进一步克隆、测序、生物信息学分析, 是用分子生物学技术发现、鉴别未知和新出现病毒的关键之一〔4〕, 也是最终测定分析, 拼接出未知和新出现病毒基因组序列的瓶颈步骤。病毒所携核酸物质有DNA 和RNA 之分, 可采用的技术方法也有所不同, 现将有关技术与其应用作一简介, 以供参考。1 代表性差异分析法代表性差异分析法是为寻找分析两个生物样品复杂的基因组间有何差异而发展建立起来的分子生物学技术方法, 并不断得到演化, 发展和应用。病毒感染宿主细胞后, 与未感染的同类细胞相比, 二者核酸物质间的差异主要在于是否存在病毒核酸。消减去二者核酸间相同序列的背景部分, 扩增、比较、选取余下可能存在差异的部分, 进一步分析以发现未知病毒的核酸序列。病毒的核酸结构各有不同, 可选用相应的代表性差异分析法, 见表1 。111 DNA 代表性差异分析法(DNA Representation differenceanalysis , DNA RDA)此方法是Lisitsyn 等〔5〕利用核酸消减杂交技术〔6〕、PCR 方法和双链DNA 热变性后互补链退火复性的二级动力学原理〔7 - 8〕作者单位:上海市疾病预防控制中心 200336表1 病毒核酸类型与各代表性差异分析法的选用病毒核酸类型DNA RDA c DNA RDA非rRNA 序列6 核苷酸引导c DNA RDAds DNA 线状√ds DNA 环状√ss RNA polyA( + ) √ss RNA polyA( - ) 3 √ds RNA polyA( - ) √ 3 负链ss RNA polyA( - ) 视病毒在宿主细胞的转录机制而定。而建立的。方法中将需分析的样品DNA(Test DNA ,T- DNA) 和对照DNA(Driver DNA ,D - DNA) 设为二组,分别用同一种限制性内切酶酶切处理,并接上5′端去磷酸化的人工接头,补齐接头后,加入与接头序列互补的引物作PCR 扩增。切除扩增产物上的人工接头后,切出的T - DNA 连上第二种人工接头,变性后与过量的变性D - DNA 杂交。通过杂交,消减去T- DNA 中与D - DNA 中同源的核酸序列,而只存在于T - DNA 中的靶序列DNA(Target DNA) 则自我退火复性,其两端连有第二种人工接头。加入与第二种接头互补的引物作PCR ,只有靶序列DNA呈指数扩增,因而得到进一步富集。进过如此重复的几个轮回后,以电泳检测比较T- DNA 和D - DNA ,将T- DNA 中呈现的差异部分作分离,克隆,序列分析。Lisitsyn 等以10μg 人淋巴细胞基因组DNA 作为D - DNA ,在相同的人DNA 中加入相当于单拷贝量的120 pg 腺病毒DNA作T- DNA。以此作为实验模型,用DNA 代表性差异分析法成功的寻找、鉴定出外加入的腺病毒DNA 序列。应用此技术,Chang 等〔9〕在艾滋病相关的卡波西肉瘤(Kaposis Sarcoma) 中发现一段类似人类疱疹病毒的基因, 并由此发现一种新的病毒HPV8。以后人们又以此技术发现鉴定了HPV6、TTV 病毒、黄热病毒样基因组、MDV 等〔10 - 13〕DNA 病毒。112 cDNA 代表性差异分析法(cDNA Representation differenceanalysis , cDNA RDA)Hubank 等〔14〕针对mRNA 所含序列相对简单的特点,提出了cDNA 代表性差异分析法。它的基本原理与DNA RDA 相同,主要不同在于,采用识别4 核苷酸序列的限制性内切酶,它的识别位点在mRNA 反转录成的cDNA 中出现的频率更高,平均酶切片段长度约256 bp ,保证了cDNA 序列群中绝大多数序列,至少被切出一个片段可扩增,供差异分析,分离鉴定。cDNA RDA 技术相对经济,可高效灵敏地用于非常少的起始材料而获得结果〔15〕。具有polyA( + ) - RNA 病毒,其核酸可类似于mRNA 分离纯化,因此可应用此技术。利用cDNA RDA技术,发现鉴定了TiV、MenV ,等〔16 ,17〕RNA 病毒。113 非rRNA 序列6 聚核苷酸引导反转录的cDNA RDA中国预防医学杂志2007 年6 月第8 卷第3 期 Chin Prev Med , June 2007 , Vol18 No13 ·317 ·© 1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. ( - ) - RNA 病毒,其核酸物质不似于mRNA ,需和宿主细胞总RNA 同时分离,并用随机引物作反转录。因为宿主细胞总RNA 中rRNA 约占80 % ,由于竞争反应、靶序列信号被湮灭等原因,从这样的总RNA 抽提物中,用随机6 聚核苷酸引物引导反转录的cDNA RDA 技术,发现鉴别polyA( - ) - RNA 病毒核酸序列是困难的。Endoh 等〔18〕罗列了6 聚核苷酸所有可能的排列组合,共计4 096 个序列模式,以大鼠18S、518S、28S 等rRNA、微卫星重复序列、SARS - CoV、BI - 3 病毒等的序列数据为模型,筛选出在rRNA 序列中出现频率极低或不出现的6 聚核苷酸序列模式共96 种。将这些序列分别合成并混合后,称之为非rRNA 序列6 聚核苷酸引物。生物信息学分析96 种序列模式在哺乳动物病毒科具代表性的1 791 个病毒基因组序列中出现的频率,数据表明,非rRNA 序列6 核苷酸引物可引导绝大多数病毒的cDNA 合成。分别用非rRNA 序列6 聚核苷酸引物和随机6 核苷酸引物作cDNA 反转录效率、cDNA RDA 试验,结果表明,二类引物对人工合成的RNA (二类引物在其序列中出现的频率相似) 反转录效率几乎相等,而前者对细胞总RNA反转录效率远低于随机引物。用二类引物作cDNA RDA ,检测人工合成的RNA ,前者灵敏度是用随机引物的30 倍。在模拟实验中用非rRNA 序列6 聚核苷酸引物引导反转录,串联cDNARDA 技术,检测鉴别出感染细胞的BI - 3 和SRAS - Cov 核酸序列片段。此方法能从1μg 总RNA 中检测出3 ng 的外来RNA ,其检测灵敏度不及普通的PCR 检测方法,但对于检测鉴别在宿主细胞中复制,但不知其基因序列的poly A( - ) - RNA 病毒而言,也是一个可选择的方法。114 抑制消减杂交cDNA RDA 技术结合消减杂交和PCR 抑制作用〔19〕的技术原理,Diatchenks 等〔20〕等发展出了抑制消减杂交技术( suppressionsubtractive hybridization ,SSH) 。与前两种RDA 技术不同点在于,SSH 技术将内切酶酶切处理的T - cDNA 分为两份,分别接上不同序列的去磷酸化的接头1 和2 ,分别于过量的D - cDNA作第一轮杂交。杂交过程中两组中的单链T - cDNA 浓度趋同,T- cDNA 中的非靶序列单链cDNA 与D - cDNA 中相应序列形成杂交双链而被消减, T - cDNA 中差异表达的单链cDNA被显著富集。合并一轮杂交物,加入过量变性D - cDNA ,作第二轮杂交。合并的二组份一轮杂交物中剩下的趋同化、经消减杂交后的单链T - cDNA 能互补杂交, 可以形成: 原组内T- cDNA 单链间的杂交、T - cDNA 与D - cDNA 单链间的杂交、二组间T- cDNA 单链间的杂交。补齐杂交反应后双链cD2NA 末端,用分别与接头1 和2 的外侧部分序列互补的寡核苷酸为引物,作PCR 扩增。二组份间T- cDNA 互补单链杂交物,因两端分别具有接头1 和2 ,可被指数扩增;T - cDNA 与D -cDNA 杂交物和剩余单链T- cDNA ,因一端具接头序列,被线性扩增;而同组间T- cDNA 杂交物两端具反转重复长序列,因抑制性PCR 效应,在PCR 反应循环中分子内退火形成稳定的“锅柄结构”〔19〕而不被扩增。因此,SSH 技术通过二轮消减杂交和抑制性PCR 特异扩增,使假阳性大大降低,提高了检出低丰度靶mRNA 的灵敏度。Hu 等〔21〕应用SSH 技术,结合反转录酶的模板切换(tem2plate - switching) 功能, 以HCV RNA 阳性血清体外感染的人MOLT- 4 急性淋巴母细胞白血病T 细胞系为模型,通过反转录合成全长cDNA、抑制性消减杂交、消减的cDNA 文库构建、反相斑点杂交筛选,在被筛的96 个克隆里,T- cDNA 探针杂交呈特异阳性的16 克隆中,序列分析后得到4 个插入HCV 序列的克隆。2 非特异多重引导滚环式扩增法乳头瘤病毒、痘病毒等,其基因物质为环状DNA 分子。在事前未知基因序列的情况下,发现和鉴别这类病毒核酸序列还可选择非特异多重引导滚环式扩增法(multiply primed rolling -circle amplification ,RCA) ,扩增、分离、获取其基因片段供进一步分析。自然状况下,环状DNA 经常以滚环方式进行复制。Dean等〔22〕应用随机6 聚核苷酸作引物,加入φ29 DNA 聚合酶,以质粒DNA 和噬菌体DNA 为模型,建立了多重引物引导的滚环式扩增法。φ29 DNA 聚合酶可长距离( > 70 000 nt) 地结合于DNA模板,进行链置换DNA 合成。而随机6 聚核苷酸引物可多位点的与单链环状DNA 互补复性。在φ29 DNA 聚合酶作用下,以随机引物引导,合成与模板互补的DNA 链。当合成链延伸到与模板结合的随机引物5′端时,在φ29 DNA 聚合酶的链置换活性作用下,下游被延伸的随机引物链被“甩”出模板。而上游的延伸链继续在环状模板上复制合成。同时,被从单链环状模板上“甩”出的互补链,又成为新的模板,随机引物与之结合,在φ29 DNA 聚合酶作用下,继续以枝杈的形式进行链延伸和链置换,最后以双链DNA 串联体形式释放。用此法可使1 ng 纯pCU18 环状DNA 模板延展式地扩增至107倍。Rector 等〔23〕以此原理建立了不依赖已知的特定基因序列(非序列依赖性) 的多重引导滚环式扩增环状DNA 病毒基因组方法,并应用其扩增获取了HPV 16 的基因组DNA。在接近实样的试验样品中,由于稀释倍数和环状DNA 分子较大等原因,将HPV 16 基因组DNA 扩增了214 ×104 倍。3 病毒颗粒相关核酸的非序列依赖性PCR 扩增病毒核酸可包裹于病毒外壳内,病毒的蛋白外壳或脂膜对病毒核酸具有保护作用。而病毒颗粒具有不同于细菌或其他真核细胞的理化特性。利用这样的特点Allender 等〔24〕和Stang等〔25〕各自建立了病毒颗粒相关核酸的非序列依赖性PCR 扩增方法(sequence - independent amplification) 。两种方法的共同点在于,依据病毒颗粒小、具一定密度,用0122μm 滤器过滤、或再串上超速密度梯度离心,从样品中分离出病毒颗粒,DNA 酶酶解游离的DNA ,裂解病毒颗粒,抽提获取较纯的病毒颗粒相关核酸。Allender 等〔24〕借鉴RDA 原理,对病毒颗粒相关核酸用限制性内切酶酶切后,作非序列依赖性单引物PCR 扩增( sequence -independent single primer amplification ,SISPA) :将抽提获取的DNA或RNA 分别补齐,合成第二链DNA ,或反转录,合成双链cDNA。限制性内切酶酶切后,酶切片段两端连接一种接头,并以与接头同序列的单一寡核苷酸为引物,作PCR 扩增。扩增产物进一步克隆与序列分析。用此法检验HBV 阳性血清和GBV - B 阳性血清样品,结果在相当于106/ ml 个基因组拷贝浓度的50μl样品中,可重复试验检出相应的病毒基因片段。Stang 等〔25〕则在得到双链DNA 或双链cDNA 后加入k - 随机引物,此种引物5′端含有20 个固定序列的核苷酸,3′端则有·318 · 中国预防医学杂志2007 年6 月第8 卷第3 期 Chin Prev Med , June 2007 , Vol18 No13© 1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. 核苷酸随机简并序列。与变性模板退火时,6 核苷酸随机简并序列随机地与模板相应序列互补退火,在T4 DNA聚合酶作用下作链延伸。然后在延伸产物中加入k - 随机引物中固定序列部分的20 寡核苷酸作引物,进行PCR 扩增。扩增产物电泳分析、克隆、测序。用此方法检验由实时- PCR 定量,包括病毒颗粒相关核酸及游离核酸在内的病毒基因组拷贝数为109/ ml 的Cox - 3 和MAV - 1 培养物。前者的12 克隆中,9 个克隆插入有肠道病毒的四个不同区域的同源基因片段;而6 个MAV - 1 中分离的克隆内,5 个含有99 % 同源MAV - 1 基因片段。基于病毒颗粒分离纯化、DNase 处理、病毒颗粒相关核酸的非序列依赖性PCR 扩增,获取、鉴定未知病毒的基因片段,尽管灵敏度不够高,但其实验时间较短,步骤相对简单,对于病毒拷贝数高,时间紧急的样品鉴别,是较适宜的一套方法。病毒的种类、结构、特性多种多样,感染病毒后需要检验的样品又各不相同,因此用于发现鉴别未知病毒的核酸序列的技术,也不是固定不变和完全通用的。以上的技术方法各有优缺点和适用范围。而针对扩增获取未知病毒基因组序列片断,这一发现鉴定未知病毒的分子生物学技术的要点或瓶颈,必然还会有新的改进、创新技术出现,将会更快、更灵敏、更简便、更准确的发现鉴别未知病毒。参 考 文 献〔1〕 Drosten C , Gunther S , Preiser W, et al1 Identification of novel corona2virus in patients with severe acute respiratory syndrome1 N Engl J Med ,2003 , 348 : 1967 - 19761〔2〕 ven den Hoogen BG, de Jong JC , Groen J , et al , A newly discoveredhuman pneumovirus isolated from young children with respiratory tractdisease1 Nat Med , 2001 , 7 : 719 - 7241〔3〕 Fouchier RA , Hartwig NG, Bestebroer TM, et al1 A previously unde2scribed coronavirus associated with respiratory disease in human1 ProcNatl Acad Sci U S A , 2004 , 101 : 6212 - 62161〔4〕 Muerhoff AS , Leary TP , Desai SM, et al1 Amplification and subtractionmethods and their application to the discovery at novel human viruses1 JMed Virol , 1997 , 53 : 96 - 1031〔5〕 Lisitsyn N , Lisitsyn N , Wigler M1 Cloning the differences between twocomplex genomes1 Science , 1993 , 259 : 946 - 9511〔6〕 Lamar EE , Palmer E1 Y- encoded1 Species - specific DNA in mice :evidence that the Y chromosome exists in two polymorphic forms in in2bred strains1 Cell , 1984 , 37 : 171 - 1771〔7〕 Wieland I , Bolger G, Asouline G, et al1 A method for differencecloning : geng amplification following subtractive hybridization1 Proc NatlAcad Sci USA , 1990 , 87 : 2720 - 27241〔8〕 Milner JJ , Cecchini E , Doming PD1 A kinetic model for subtractive hy2bridizationg1 Nucleic Acids Res , 1995 , 23 : 176 - 1871〔9〕 Chang Y, Cesarman E , Pessin MS , et al1 Identification of herpesvirus- like DNA sequence in AIDS - Associated Kaposi’s Sarcoma1 Scie2nce , 1994 , 266 : 1865 - 18691〔10〕 Challoner PB , Smith KT , Parker JD , et al1 Plaque - associated expres2sion of human herpesvirus 6 in multiple selerosis1 Proc Natl Acad SciUSA , 1995 , 92 : 7440 - 74441〔11〕 Nishizawa T , Okamoto H , Konishi K, et al1 A novel DNA virus (TTV)associated with elevated transaminase levels in pasttransfusion hepatitisof unknown etiology1 Biochem Biophy Res Commun , 1997 , 24 : 92 -971〔12〕 Simons JN , Pilot - Matios TJ , Leary TP , et al1 Identification of two fla2vivirus - like genomes in the GB hepatitis agent1 Proc Natl Acad SciUSA , 1995 , 92 : 3401 - 34051〔13〕 Endoh D , Cho KO , Tsukamoto K, et al1 Application of representationaldifference analysis to genomic fragments of Mark’s disease virus1 J ClinMicrobiol , 2000 , 38 : 4310 - 43141〔14〕 Hubank M, Schatz DG1 Identifying differences in mRNA - expression byrepresentational difference analysis of cDNA1 Nucleic Acids Res ,1994 , 22 : 5640 - 56481〔15〕 Bowler LD1 Representational difference analysis of cDNA1 Methods MolMed , 2004 , 94 : 49 - 661〔16〕 Chua KB , Wang LF , Lam SK, et al1 Tioman virus , a novel paramyxo2virus isolated fromfruit bats in Malaysia1Virology , 2001 , 283 : 215 -2291〔17〕 Bowden TR , Westenberg M, Wang LF , et al1 Molecular characteriza2tion of Menangle virus , a novel paramyxovirus which infects pigs , frutbats , and humans1 Virology , 2001 , 283 : 358 - 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independent strategyfor detection and cloning of circular DNA virus genomes by using multi2ply primed rolling - circle amplification1 J Virol , 2004 , 78 : 4993 -49981〔24〕 Allander T , Emerson SU , Engle RE , et al1 A virus discovery methodincorporating DNase treatment and its applicationg to the identificationgof two bovine parvovirus species1 Proc Natl Aced Sci USA , 2001 , 98 :11609 - 116141〔25〕 Stang A , Korn K, Wildner O , et al1 Characterization of virus isolates byparticle - associated nucleic acid PCR1 J Clin Microbiol , 2005 , 43 :716 - 7201(收稿日期: 2006 - 05 - 15)中国预防医学杂志2007 年6 月第8 卷第3 期 Chin Prev Med , June 2007 , Vol18 No13 ·319 ·© 1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. 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中国预防医学杂志，其实都还行，望采纳
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1.预防医学科学研究的新理论、新技术、新成果和新方法介绍。2.劳动卫生、环境卫生、营养与食品卫生、儿童青少年卫生、放射卫生、卫生毒理、流行病学、卫生统计、社会医学、疾病监测与计划免疫、疾病预防与健康促进、卫生保健,以及卫生化学与检验技术等科学研究和有效的预防控制经验总结。3.具有指导意义的述评和专论，有实际参考价值的国内外文献综述、学术讲座、专题讨论、笔谈和书评。4.与预防医学有关的边缘科学、软科学和基础理论研究的文稿。5.国内外学术交流信息、会议纪要、科研动态和产品信息、广告等。二、对文稿的要求1.有严谨的科学性和逻辑性，能重点说明一个或几个问题，有理论或实际意义。论点明确，资料可靠，数据无误，文字精炼，层次清楚，书写工整规范。2.篇幅：论著以不超过4000字，综述、讲座、方法学介绍等以不超过5000字，短篇报道以不超过1500字为宜。3.文题：力求简明准确地反映文章主题。一般不超过20个汉字，以不设副标题为好。一般不使用缩略语。4.作者：论文署名不宜过多，应是参与选题和设计、参与具体工作、能对研究结果负责者，仅参与获得资金或收集资料者不能列为作者，仅对科研小组进行一般性管理者也不宜列为作者。以脚注形式（置于文题页左下方）注明作者单位名称及邮政编码。集体署名的文章必须明确对该文负责的关键人物。虽对本文有贡献，但不具备作者条件者可在文后志谢。作者姓名排序需在投稿时确定，需要变更时必须出示单位证明，一经编排，不得更改。5.摘要：论著需附400字左右的中、英文摘要，内容必须包括目的、方法、结果、结论四部分，各部分冠以相应的标题，方法与结果部分应给出主要数据。不分段，用第三人称撰写。英文摘要应包括文题、作者姓名(汉语拼音)、单位名称、所在城市名和邮政编码；作者应全部列出，当作者不属于同一单位时，在第一作者姓名右上角加“*”，同时在第一作者工作单位左上角加“*”。例如：LIN Xian-yan*, WU Jian-ping, QIN Jiong, LIU Qun.*Department of Pediatrics, First Hospital, Peking University, Beijing 100034，China6.关键词：论著需标引2～5个关键词。请尽量使用美国国立医学图书馆编辑的最新版《Index Medicus》中医学主题词表(MeSH)内所列的词。如果无相应词，处理办法：(1)选用直接相关的几个主题词进行组配；(2)根据树状结构表选用最直接的上位主题词；(3)必要时，可采用习用的自由词，但要置于最后。关键词不能用缩写，如“HBsAg”应标引为“乙型肝炎表面抗原”。7.医学名词：以1989年及其后由全国自然科学名词审定委员会审定公布、科学出版社出版的《医学名词》和相关学科的名词为准，暂未公布者仍以人民卫生出版社编写的《英汉医学词汇》为准。中文药物名称应使用1995年版药典(法定药物)或卫生部药典委员会编写的《药名词汇》(非法定药物)中的名称，英文药物名称则采用国际非专利药名，不用商品名。8.科研论文中，当报告以人为研究对象的试验时，作者应该说明其遵循的程序是否符合负责人体试验的委员会(单位性、地区性或国家性)所制定的伦理学标准并得到该委员会的批准，是否取得受试对象的知情同意。9.图表：图表集中附于文后，分别按其在正文中出现的先后顺序连续编码。每幅图表应冠有文字简明准确的图(表)题。说明性的文字应置于图表下方，并需注明图表中使用的全部非公知公用的缩写。本刊采用三横线表，如遇有合计和统计学处理行(如t值、P值等)，在这行上面加一条分界横线。要求表内数据同一指标有效位数一致；如果出现均值±标准差，一定要写明样本量。间断性资料用条形图，连续性资料用线图。照片图要求有良好的清晰度和对比度。10.计量单位：实行国务院1984年2月颁布的《中华人民共和国法定计量单位》，并以单位符号表示，具体使用参照2001年中华医学会编辑出版部编辑的《法定计量单位在医学上的应用》一书第3版。注意单位名称与单位符号不可混用，如：ng·kg-1·天-1应改为ng·kg-1·d-1；组合单位符号中表示相除的斜线多于1条时应采用负数幂的形式表示，如：ng/kg/min应采用ng·kg-1·min-1的形式；组合单位中斜线和负数幂亦不可混用，如前例不宜采用ng/kg·min-1的形式。量的符号一律用斜体字，如体积的符号应为斜体V。11.数字：执行GB/T 15835-1995《关于出版物上数字用法的规定》。公历世纪、年代、年、月、日、时刻和计数、计量均用阿拉伯数字。序数词和年份、页数、部队番号、仪表型号和标准号不分节。百分数的范围和偏差，前一个数字的百分符号不能省略，如：5～95%要写成5%～95%，±要写成(±)%，± mg/L要写成(±) mg/L。附带尺寸的数值相乘，按下列方式书写：4 cm×3 cm×5 cm，而不写成4×3×5 cm3。 ? 12.统计学符号：按GB3358-82《统计学名词及符号》中的有关规定书写，常用的有：（1）样本的算术平均数用英文小写 (中位数仍用M)；（2）标准差用英文小写s；（3）标准误用英文小写；（4）t检验用英文小写t；（5）F检验用英文大写F；（6）卡方检验用希文小写；（7）相关系数用英文小写r；（8）自由度用希文小写；（9）概率用英文大写P(P值前应给出具体检验值，如t值、q值等)。以上符号均用斜体。13.缩略语：文中尽量少用。必须使用时于首次出现处先注明汉字全称，再在其后的括号内写出汉字缩略语或英文全称及英文缩略语，后两者间用“，”分开。缩略语不得移行。14.参考文献：以亲自阅读主要者为限，应尽量精选。按GB/T7714-2005《文后参考文献著录规则》，采用顺序编码方法，依照其在文中出现的先后顺序用阿拉伯数字标出。尽量避免引用摘要作为参考文献。确需引用个人通信时，可将通信者姓名和通信时间写在括号内插入正文相应处。不得引用未公开发表的文章作为参考文献。参考文献中的作者，1～3名全部列出，3名以上只列前3名，后加“，等”或者其他与之相应的文字(西文加“, et al”；日文加“，他”)。外文期刊名称用缩写，以《Index Medicus》中的格式为准；中文期刊用全名。参考文献为期刊者均须著录起止页。参考文献必须由作者与原文核对无误，按引用先后顺序排列于文后。