高变异DNA 序列的发现1980 年，Wyman 和 White 在进行人体DNA 基因文库的研究中，筛选到一个随机DNA 片段，以其为探针进行RFLPs 分析，检测到8 个等位基因，平均杂合率超过75%，因此推测该位点的多态性来源于DNA 重排而非碱基突变，这是人类基因组中发现的第一个高变区（hypervariable regions，简称HVRs）。此后，人们在人类基因组中又陆续发现了其他一些高变区，如α-珠蛋白基因（Higgs 等 1981，1986）、胰岛素基因（Bell 等 1982）、脂蛋白基因（Knott等 1986）、D-Ha-ras 癌基因（Capon 等 1983）、Zata-珠蛋白基因（Goodbourm 等 1983）等基因的侧翼及肌红蛋白基因（Weller 等1984）的第一个内含子区域，都含有这种HVRs。这些高变区的共同特点为：都是由一短序列（即重复单位）首尾相连、多次重复而成，其多态性来源于重复单位的重复次数不同。同一高变区的这些重复单位还具有高度的保守性，但因重复单位的重复数目不同，形成了众多的等位基因。这些高变区后来被叫做小卫星（minisatellite）（Jeffreys 等 1985a），有的人又称其为可变数目串联重复序列（variable number of tandemrepeat，简称VNTR）（Nakmura 等1987）。在小卫星DNA 内，重复单位数目的高度变异是由于不等交换所造成的，换言之，即在有丝分裂时的姊妹染色单体（sister chromatids）或减数分裂时的同源染色体间互换所致。有时候，发现DNA 链架突变的发生频率高于点突变，其频率为每世代每千个核苷酸对在10－ 5～10－ 2。虽然不等互换导致重复单位数目增加或减少，但不同重复的形成却是由于点突变造成的。此外，基因转换（gene conversion）与重组似乎在同源性的维持上扮演着重要的角色。在DNA 复制期间的滑动复制（slippage）是重复单位内简单序列 （1～4 个核苷酸对）演化的机制（Wolf 等 1989）。故有丝分裂或减数分裂时不等互换、基因转换及滑动复制，均足以导致重复单位间同源性的维持及重复单位数目的变化。大多数重复序列单位共有一个约 10～15 个核苷酸对的核心序列（core sequence），此核心序列高度地保留于相关的小卫星DNA 家族中，它是重组信号，可能是真核生物DNA 重组交换的热点，可促进小卫星DNA 的不等交换（Jeffreys 等 1985a；Wyman 等 1990）。核心序列是重复单位间序列相似的基础。在小卫星DNA 区域内，同源染色体可能有不同数目的重复单位，利用限制性内切酶可产生DNA 指纹。由此可见，串联重复序列的高度变异性与其特殊的结构密切相关。然而，基因组中此类串联重复序列的真实生物学功能至今仍不清楚。 DNA 指纹图谱的发现1985 年，英国来斯特大学遗传系的Jeffreys（1985a）及其同事在《Nature》杂志上报道了他们对人体基因组高变区的突破性研究。他们用肌红蛋白基因第一个内含子中的串联重复序列（重复单位长33bp）作探针，从人的基因文库中筛选出8 个含有串联重复序列（小卫星）的重组克隆。经序列分析，发现每个克隆都含有一个长～、由重复单位重复3～29 次组成的小卫星DNA。尽管这8 个小卫星的重复单位的长度（16～64bp）和序列不完全相同，但都含有一段相同的核心序列，其碱基顺序为 GGGCAGGAA。他们用 16bp 重复单位（主要为核心序列）重复29 次而成的小卫星做探针，与人基因组酶切片段进行Southern 杂交，在低严谨条件下杂交产生由10 多条带组成的杂交图谱，不同个体杂交图谱上带的位置是千差万别的。随后他们用另外一个小卫星探针 进行测试，获得了类似的图谱。这种杂交图谱就像人的指纹一样因人而异，因而Jeffreys（1985b）等人称之为DNA 指纹图谱（DNA finger print），又名遗传指纹图谱（genetic finger print）。产生DNA 指纹图谱的过程就叫做DNA 指纹分析（DNA finger printing）。 DNA 指纹图谱的特点DNA 指纹图谱具有以下3 个基本特点：（1）多位点性：基因组中存在着上千个小卫星位点，某些位点的小卫星重复单位含有相同或相似的核心序列。在一定的杂交条件下，一个小卫星探针可以同时与十几个甚至几十个小卫星位点上的等位基因杂交。一般来说，一个DNA 指纹探针（又称多位点探针）产生的某个个体DNA 指纹图谱由10～20 多条肉眼可分辨的图带组成。由于大部分杂合小卫星位点，仅一个等位基因出现在图谱的可分辨区内（两个等位基因由于重复单位、重复次数不同，在长度上差异很大），因而每条可分辨图带代表一个位点。很多的研究表明，个体DNA 指纹图谱中的带很少成对连锁遗传，所代表的位点广泛地分布于整个基因组中（Burke 等1987；Hiu 等1985）。一个传统的RFLPs 探针一次只能检测一个特异性位点的变异性，所产生的图谱一般由l～2 条带组成，仅代表一个位点。因此两者比较而言，DNA指纹图谱更能全面地反映基因组的变异性。（2）高变异性：DNA 指纹图谱的变异性由两个因素所决定，一是可分辨的图带数，二是每条带在群体中出现的频率。DNA 指纹图谱反映的是基因组中高变区，由多个位点上的等位基因所组成的图谱必然具有很高的变异性。DNA 指纹图谱在个体或群体之间表现出高度的变异性，即不同的个体或群体有不同的DNA 指纹图谱。一般选用任何一种识别4 个碱基的限制性内切酶，这种变异性就能表现出来。Jeffreys 等 （1985b）对人的DNA 指纹图谱的研究表明，DNA 指纹图谱中的大部分谱带都以杂合状态存在，平均杂合率大于70%，某些大片段的杂合率甚至高达100%。用探针 进行DNA 指纹分析时，发现两个无血缘关系的个体具有相同DNA 指纹图谱的概率仅为3× 10－11；而将探针 和 产生的DNA 指纹图谱综合起来分析时，则这种概率为5×10－19，可见DNA 指纹图谱具有高度的个体特异性。但是，同卵双胞胎的DNA 指纹图谱是相同的，因其有完全相同的基因组（Hiu 等1985）。值得注意的是，由于琼脂糖凝胶电泳分辨率的限制，DNA 指纹图谱大片段区域的变异性往往很高，而小片段区域的变异性则很低，因此在实际操作时往往将小于 2kb 的小片段跑出胶外或不作统计。（3）简单而稳定的遗传性：Jeffreys 等（1985a）通过家系分析表明，DNA 指纹图谱中的谱带能够稳定地从上一代遗传给下一代。子代DNA 指纹图谱中的每一条带都能在其双亲之一的图带中找到，而产生新带的概率（由基因突变产生）仅在～ 之间。DNA 指纹图谱中的杂合带遵守盂德尔遗传规律，双亲的各图带平均传递给50%的子代。DNA 指纹图谱还具有体细胞稳定性，即用同一个体的不同组织如血液、肌肉、毛发、精液等的DNA 做出的DNA 指纹图谱是一致的（Gill 等1985），但组织细胞的病变或组织特异性碱基甲基化可导致个别图带的不同。 DNA 指纹图谱的应用由于DNA 指纹图谱具有多位点性、高变异性、简单而稳定的遗传性，因而自其诞生就引起了人们的重视，表现出巨大的实用价值。DNA 指纹图谱的高变异性和体细胞稳定性可用于鉴定个体，这对法医学上鉴别犯罪分子和确定个体间的血缘关系极有价值（Jeffreys 等1985b，1985c）。如我国公安部利用DNA 指纹图谱已侦破数百例疑难案件。其简单的遗传性可用来鉴定亲子关系，其多位点性可用来检测目标基因组的病变及治疗等过程中的改变情况。1987 年Burke、Jeffreys 和Wetton 等报道了用人源核心序列小卫星探针 和 检测到哺乳动物到鸟类、爬行动物、两栖动物、鱼、昆虫等的高变异小卫星，产生具有个体特异性或类群特异性的DNA 指纹图谱。1988 年，Dallas 用人源小卫星探针 获得了水稻的DNA 指纹图谱。随后，美国华盛顿大学生物系Nybom 等人对果树植物的DNA 指纹图谱进行了大量的研究。1989年，Braithwaite 和Manners 首次将人源小卫星探针 和 用作真菌的DNA 指纹分析获得了成功，从而进一步证明DNA 指纹技术具有广泛的适用性。这些发现使DNA 指纹图谱成为研究动植物群体遗传结构、生态与进化、分类等很有价值的遗传标记。 DNA 指纹图谱的研究进展 DNA 指纹分析的探针两个最早的DNA 指纹探针是1985 年Jeffreys 及其同事所发现的人源小卫星探针 和（Jeffreys 等 1985a）。1987 年，Vassart 等发现无外源DNA 片段的细菌噬菌体M13 本身就能够作为一个DNA 指纹探针检测出人和动物基因组中的高变异小卫星DNA，其有效序列是蛋白质 Ⅲ 编码区内的两个小卫星序列。从此，M13 便也成为各种动植物重要的DNA 指纹探针（Gatei 等 1991；Kuhnlein 等 1989）。另一个在人和动物上广泛应用的 DNA 指纹探针是3´HVR（Jarman 等 1986），它来源于人α-珠蛋白的3´端的一个高度重复区。以上4 个小卫星探针的重复单位的序列结构如下所示：（AGGGCTGGAGG）（AGAGGTGGGCAGGTGG）M13（GAGGGTGGNGGNTCT）3´HVR（GNGGGGNACAG）从迄今已有的报道来看，在DNA 指纹分析中用得最多的多位点小卫星探针为、、M13 及3´HVR。此外，人们还从某些动物的基因组中分离克隆了一些小卫星DNA 用作DNA 指纹探针。如牛的小卫星探针PSRC-7（ Plante 等 1991）和猪的小卫星探针pS35（Coppieters 等 1990）。人工合成的简单重复序列微卫星探针也广泛地用于DNA 指纹分析，如（GTG）5 、（TG）8、（AT）8、（TCC）5 、（GACA）4。从基因组中分离克隆的微卫星DNA 指纹探针有PGB725 （牛）（Kashi 等 1990）和 （猪）（Haberfield 等 1991）。 孟安明（1993）发现，任何一个动物个体的基因组总DNA 可标记作为DNA 指纹探针（基因组探针），在该个体所属物种及其他相关物种上产生具有个体特异性的杂交图谱。以基因组探针进行DNA 指纹分析不需通过复杂的操作来获得探针DNA，有利于DNA 指纹技术的推广。 DNA 指纹图谱的重要发展DNA 指纹图谱的重要发展是微卫星DNA 指纹图谱。微卫星（microsatellite）是由2～6 个核苷酸组成的重复单位串联排列而成的DNA 序列。据估计，在真核生物基因组每10kb 的DNA 序列中至少有一个微卫星（Tautz 1989），如人体基因组中仅二核苷酸串联重复的微卫星就多达 50 000～100 000 个。大多数微卫星的长度小于 200bp，但也有更长的微卫星。微卫星不同于小卫星，它们广泛分布于很多结构基因的内含子、基因间隔区甚至调控序列中（Tautz 等 1984；Weising 1989；Ishii 等 1985）。早在1974 年，Skinner 等就在寄居蟹（hermit crab）基因组中发现了微卫星DNA，当时叫做简单串联重复序列（simple tandem repeat）。Singh 等人在1980 年发现蛇的W 性染色体上也存在着这种序列，它是由GATA/GACA 重复单位组成的。以后的研究表明，在真核生物甚至原核生物的基因组中都普遍存在这种序列（Jones 等 1981；Tautz 等 1986）。直到1986 年，Ali 等人首次用合成的GATA/GACA 寡聚核苷酸作探针用于人的DNA 指纹分析，成功地开创了利用微卫星DNA 探针进行DNA 指纹分析这一新的领域。微卫星探针易于合成，可直接与固定在干胶中的DNA 片段杂交，所检测的位点普遍具有高度的变异性。1988 年，Schafer 等人进一步发展了这门技术，使寡聚核苷酸（微卫星）分析技术又一次得到了完善。迄今为止，合成的各种寡聚核苷酸（微卫星）已成功地应用于人和近百种动植物的DNA 指纹分析（Buitkamp 等 1991a，1991b；Schafer 等1988；May 等 1991；Nuraburg 等 1989；Hubert 等 1990；Lonn 等1992；Biermerth 等 1992；Caetano-Anolles 等 1991）。从已有的报道来看，适用范围广、变异性高的微卫星探针主要有（GTG）n、（GT）n、（GATA）n、（GACA）n、（GAG）n 等（Buitkamp 等1991a，1991b）。 PCR 在DNA 指纹分析中的应用PCR 是一种在体外大量扩增DNA 的方法。在法医研究上，由于所检验的材料量（如血斑、精斑、发梢）极微，因此很难获得常规Southern 杂交所需的DNA 量，利用PCR 就可以解决这一问题。Jeffreys 等（1988）根据多个小卫星的已知侧翼序列来合成引物（每个小卫星两个引物）。先以极微量（ 甚至单个细胞 ）的人类基因组DNA 为模板进行体外扩增（产物可长达10kb），然后再用这些小卫星的混合探针进行Southern 杂交，得到了可以重复做出的具有高度变异性的DNA 指纹图谱。 单位点高变异性小卫星和微卫星探针的开发DNA 指纹图谱虽然具有很多的优点，但并非完整无缺。第一，DNA 指纹图谱中每一个个所含图带数很多，给统计分析带来了许多麻烦。例如，在比较个体之间的DNA 指纹图谱时，如果某两条带的位置相差很小，那么就很难判断它们是否来自同一位点上的同一等位基因，也许是由于实验操作过程中凝胶变形等引起的误差影响了分析结果的准确性。第二，DNA 指纹图带的分辨率很难提高，特别是较小的DNA 片段因难以分开而呈现很低的变异性；长度相差不大的DNA 片段无法通过电泳分开。第三，DNA 指纹图谱不能区分杂合体和纯合体。在进行DNA 指纹图谱统计分析时，人们假定图中每一条带分别代表不同的位点，但实际上，如果某一位点是杂合的，那么此位点在DNA 指纹图谱上会拥有两条带，也就是说在DNA 指纹图谱上应有两条带代表同一个杂合位点上的不同等位基因。因此，有时以DNA 指纹图谱分析得到的结果与真实情况也会有所不同。第四，对于某一个位点来说，往往只有一个等位基因出现在DNA 指纹图谱上，因此无法根据DNA 指纹图谱确定个体在该位点上的基因型。为了克服DNA 指纹图谱的上述缺点，人们已开始重视单位点探针的开发。所谓单位点探针，是指只是特异性与某一位点上的等位基因杂交的探针。由于真核基因组中的小卫星和微卫星位点普遍具有高度的变异性，因此它们是高变异单位点探针的重要来源。基因组中的小卫星位点有数千个，微卫星位点更达数十万个，通过用现有的多位点小卫星和微卫星探针筛选基因文库，可以得到众多的高变异单位点探针。迄今为止，国外一些单位已从猪、马、鸡、牛等的基因组中分离、克隆了数百个小卫星和微卫星探针，这些探针将是构建有关畜禽基因图谱的基础。 其他方面的进展双向电泳（two-dimensional electrophoresis）的应用，使 DNA 指纹图谱的容量大大增加（Uitterlinden 等 1989）。变性凝胶电泳可以更有效地分辨等位基因（Uitterlinden 等1989）；电极反转电泳（field inversion gel electrophoresis）提高了 DNA 指纹图谱中大片段的分辨率（Fowler 等 1988）。由于DNA 指纹图谱在实验技术和统计方法上一直处于不断的改进之中，因此我们深信在不远的将来，DNA 指纹分析技术必将在医学、畜牧业、农业乃至整个生物领域得到更加广泛的应用。
中国有自己的现代生物化学是本世纪20 年代的事。最初是个别医学院(北京协和医学院、济南齐鲁大学医学院）开始讲授生物化学。1924 年吴宪主持协和医学院生物化学系后，才开始有生物化学的研究。随后各医学院(上海医学院、同济大学医学院、中央大学医学院、湘雅医学院、华西医学院）亦先后开设生物化学课程并从事研究，少数农学院亦开始讲授生物化学或营养学。此外，个别研究单位如上海雷斯德研究所、中央研究院化学研究所、南京中国科学社生物研究所等分别设置了生物化学研究室。1945 年内迁成都的中央大学医学院创设了中国教育史上第一个生物化学研究所，正式招收攻读硕士学位的研究生。1949 年后，生物化学教学在国内全面展开。各医学院校都开设生物化学课程，不少综合性大学(如北京大学、南京大学、复旦大学）都相继设立了生物化学专业，中国科学院成立了专门从事科研的生物化学研究所，中国医学科学院也设立了生物化学研究室，还有几个大学设立了生物化学或分子生物化学研究室。在这里，我们要特别指出，王应睐是1949 年后把生物化学作为一门独立的边缘学科建立起来的主要奠基人之一。他在亲自参加实验室工作的同时，以更大的精力从事培养人才、组织队伍、制定规划，以发展我国的生物化学事业。1949 年以前，中国的生物化学研究，主要在血液和营养分析研究上。从国际上看，生物化学在三四十年代发展很快，尤其在酶、中间代谢、蛋白质和核酸的研究方面有很大进展。50 年代，核酸、DNA 双螺旋结构的发现，蛋白质晶体衍射的进展，使生物化学研究处于一个大飞跃的时期。从国内情况来看，各方面的基础十分薄弱，不仅人才少，仪器设备也十分缺乏。王应睐感到，要迅速扭转这种状况，仅仅依靠个人的努力是不行的，必须组织一支有实力的队伍，要有一个坚强的集体。因此，王应睐首先争取一批在国外工作的学者回国，以他们为骨干，逐步组织和培养一支自己的生物化学专业队伍。王应睐设法与国外的老同学、老朋友取得联系。第一位是邹承鲁，邹承鲁和王应睐是同学，王应睐曾介绍邹承鲁到他的导师凯林教授实验室当研究生。1951 年，邹承鲁回国，立即在王应睐任副所长的上海生理生化研究所开辟了酶化学研究工作。经过邹承鲁的介绍，王应睐又认识了曹天钦。1952 年，曹天钦也从英国回来，在王应睐的所里开展了蛋白质研究工作。王德宝和王应睐在中央大学共事过，王德宝去美国后，两人还经常保持联系。1954 年，王德宝历经曲折回到祖国，王应睐立即让他组织力量，开展了核酸的研究工作。接着钮经义、周光宇等科学家也陆续到上海生理生化研究所工作。这样，在上海生理生化研究所逐渐形成了一个包括酶、蛋白质、核酸、代谢等方面的研究体系，并培养了如彭加木和伍钦荣等一批年轻专家。1958 年中国科学院上海生物化学研究所成立，王应睐任所长。从此，生物化学获得了长足的发展，中国先后于1965 年和1981 年在世界上首次成功地完成了具有生物活性的人工合成牛胰岛素和酵母丙氨酸转移核糖核酸两项重大的基础理论研究工作(王应睐分别担任这两个协作组的组长），使中国人工合成生物大分子的水平保持着世界领先地位，受到了国际同行的高度评价。这两项研究成果分别获1982 年国家自然科学一等奖和1989 年国家自然科学一等奖。王应睐积极参加并主持制订了全国历次科技规划中生物化学和分子生物学部分的规划，并主动承担任务。他所领导的生物化学学会、学报积极开展学术活动，对组织推动全国的生物化学研究工作起了重要作用。
玉米“DNA指纹”鉴定应用前景广阔 农博网2005年1月26日讯 山东某公司从东北某地买了几火车皮玉米种子,经北京市农林科学院玉米研究中心检测,结果令人大吃一惊,原来这是报废的种子,如果播到地里,轻则减产,重则颗粒无收,农民还将白白赔上施肥、浇水等人力、财力。所幸的是,该公司根据玉米“DNA指纹”鉴定结果,及时进行了妥善处理,避免了巨大的经济损失。玉米“DNA指纹”鉴定作为一项新技术,在应用中正发挥出越来越大的作用。玉米打假维权新途径当前出现了两种令种子研发、生产、使用者头疼的现象,一是假种子屡禁不止,主要使广大农民蒙受巨大损失。二是窃取良种,非法进行生产、销售,主要侵害着良种研发、生产者的利益。某一国审玉米品种由于没能及时进行品种权保护,被大面积侵权,已无计可施。究其原因,首先是玉米品种鉴别难度很大,凭肉眼,不仅农民,连专家也分不清。其次,暴利使得违法者铤而走险。北京市农林科学院玉米研究中心主任赵久然博士介绍,玉米种子生产利润很高 每斤种子按四五元、利润按2元算,每亩利润可达10元,若种植面积上百万亩,利润可达上千万元。而以次充好、以假充真的利润就更高。至于侵权者,不难从田间得到良种,仅逃避的种子转让费就高达几十万、上百万元。随着玉米“DNA指纹”鉴定技术日益成熟,越来越多的人们通过这一新途径辨识种子真实身份,用以打假维权。该中心承担玉米“DNA指纹”司法鉴定任务已四五年,近两年客户猛增,至今承担此类侵权案鉴定已达40多起。同时,该中心提供大量鉴别假冒伪劣的服务,几年来为全国科研、生产、经营、管理及执法部门提供种子纯度检测、真伪鉴定已达5000多样次。作为“超级玉米种质创新及DNA指纹库构建”项目主持人,赵久然博士指出,如果“超级玉米”研究成功,每年种植4000万亩,我国每年玉米产量就能增加60亿公斤,相当于新增1500万亩土地。但需要玉米“DNA指纹”鉴定帮助打假、推广良种,这一效益才能真正实现。“指纹”鉴定市场需求大玉米“DNA指纹”之所以称为“指纹”,是因其像人类指纹可以准确区分不同的人一样,也具有准确的鉴别能力,可以准确区别不同品种的玉米。玉米“DNA指纹”长在玉米哪个部位,什么“模样” 赵久然说,DNA存在于各种生物体的每个细胞内,存在于玉米的根、茎、叶、花、果实各处。不同的玉米品种具有不同的DNA,但肉眼是看不到的。在北京市农林科学院玉米研究中心实验室内,记者看到,科研人员取出玉米种子内乳白色的胚,加入试剂,制成玉米DNA溶液,运用一系列生物分子检测技术,通过数量扩增、电泳、染色等一系列环节,放大的呈带状的千姿百态的玉米“DNA指纹”图谱在玻璃板上一一呈现。近年来到该中心鉴定玉米“DNA指纹”的客户,几乎遍及全国所有玉米主产区,还有国际大种子公司。赵久然认为,随着该项技术的普及推广,其应用前景将很可观。不仅限于维权、打假两方面,玉米“DNA指纹”鉴定的应用领域还很多,这体现在该中心承担完成的多项国家、地方项目上。比如,受农业部种子质量监督检测中心委托,确定了我国200多个主要杂交种的纯度鉴定专用“DNA指纹”;受农业部有关主管部门委托,负责每年200多个参加国家区试玉米品种的监测;受国家植物新品种保护办公室委托,负责玉米品种特异性DNA标准制定和检测;受科技部知识产权事务中心委托,承担品种真实性鉴定等。“指纹”库不可或缺面对迅速扩大的市场需求,提供玉米“DNA指纹”鉴定的科研人员也有苦恼。在这项研究中达到国际领先水平的北京市农林科学院介绍,目前全国推广使用的国审 适用生态区较广 品种有100多种,省审 在省内推广使用 品种上千种。而他们目前只掌握500多种样本。苦于没有“指纹”库,遇到没接触过的品种,只能增加检测位点,多时高达四五十个,既重复浪费,也影响效率。有了“指纹”库,就能掌握“指纹”概率,只检测一二十个位点即可。构建玉米“DNA指纹”库成为当务之急。适应这一需要,作为由北京市科委倡议发起的“北京农业育种基础研究创新平台”首批启动项目,全国第一个玉米“DNA指纹”库日前在北京市农林科学院开始构建。该平台由北京多家部门与国家有关部委共建,协作攻关,力度很大。专家认为,该“指纹”库在玉米种子和品种的纯度及真实性鉴定、新品种测试、品种权登记保护、品种质量监控、新品种侵权司法鉴定等方面具有广阔的应用前景;对理清我国玉米种质的血缘关系、解决品种多、乱、杂问题、种质创新等有重要意义;将在玉米“DNA指纹”鉴定应用中发挥重大的推动作用。 指纹技术分析畜禽亲缘关系的原理及应用指纹技术是分子生物学各种新兴技术中的一种，目前已被广泛应用于法医学、疾病诊断、肿瘤研究等领域。本文就DNA指纹技术的建立、发展及其应用作一综述。1 DNA指纹图的建立及发展 近百年来的研究认为，任何遗传分析都是以遗传标志为基础的，而任何一个遗传标志的价值又在于其变异 性(即多态性)的大小。有关遗传多态性的研究对促进人类学、遗传学、免疫学以及法医学的发展， 以及对阐明某些疾病的发病机理乃至协助诊断等方面都起了十分重要的作用。但以往的研究都是利用各种外部表现型、生理缺陷型、同工酶、多态蛋白等作为遗传标志，用间接分析来推论相应的遗传基因。70年代末，限制性内切酶和重组体DNA技术的出现以及分子生物学的飞速发展，使人们对遗传标志的研究转向DNA分子本身。由于各种遗传信息都蕴藏在DNA分子上，生物个体间的差异在本质上是DNA分子的差异，因此DNA被认为是最可靠的遗传标志。某些DNA序列的差异可通过限制性酶切片段长度的改变来反映，此即限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphisms,RFLP),其产生是由于点突变、DNA重排、插入或缺失引起的〔1〕。随着对RFLP研究的深入，人们发现了基因组中最有变异性的一类序列——高变异DNA序列，使DNA遗传标志的发展和应用得到了一次飞跃。 1980年，Wyman和White描述了第一个多等位性的具有高度多态性的人类DNA标志。不久，在胰岛素基因(Insulingene)的5′端区域、致癌基因(C-Haras I Oncogene)的3′端分别发现了相同的高度可变的标志(hypervariable marker)。在α-球蛋白(α-globin)基因群周围还发现了其它三个标志〔2〕。1982年，Bell等〔3〕证实：这些高度多态性区域串联着重复的短序列单位，重复单位数目的差异导致了这种高度的可变性，由于这些结构特征，人们称这些区域为小卫星(minisatellite)或高度可变区域(hypervariable)或可变数目的串联重复(variable number of tandem repeats)。 1985年，Jeffreys 等〔4〕用肌红蛋白基因第一内含子中的串联重复序列(重复单位含33bp)作探针，从人的基因文库中筛选出8个含有串联重复序列(小卫星)的重组克隆。序列分析表明，这8个小卫星重复单位的长度和序列不完全相同，但都有相同的核心序列(core sequence)即GGCCAGGA/GGG。他们先后用两个多核心小卫星(poly coreminisate-llite)和探针进行southern杂交，在低严谨条件下杂交得到了包含10多条带的杂交图谱，不同个体杂交图谱上带的位置就象人的指纹一样千差万别，Jeffrey称之为DNA指纹(DNA fingerprint)〔5〕，又名遗传指纹(genetic fingerprint)。 RFLP DNA指纹分析技术由于方法繁杂、周期长、实验条件高等缺陷而无法大范围推广。1990年，Williams等〔6〕首次报道了AP-PCR技术，Welsh和McCelland〔7〕亦独立地进行了这方面的工作，从而使DNA指纹技术应用更加广泛。AP-PCR技术是采用随意设计的1个或2个引物，对模板DNA进行PCR扩增，一般先是在低严格条件，即在高Mg2+浓度(大于传统PCR Mg2+浓度)、较低退火温度(36℃～50℃)下进行1～6个循环的PCR扩增，随后在严格条件下进行PCR扩增，产物经2%琼脂糖凝胶电泳或6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，可得到DNA指纹图谱。其基本原理是：在低严格复性条件下，引物与模板DNA非完全互补序列形成错配，错配引物在DNA聚合酶作用下沿模板链延伸，合成新链，当在一定距离内模板DNA另一单链也发生引物错配时，即可对两错配引物间的DNA进行扩增。但是此种错配并非随机发生，引物和模板间，特别是在引物3′端必须存在一定的互补序列，即可产生不同的扩增片段或组合，通过DNA指纹图谱，可得到配对DNA样品中的差异片段，用于克隆、测序、染色体定位和基因片段的生物学功能研究。 我国杨建厂等〔8〕利用PCR的原理成功地建立了一种全新的DNA指纹检测技术，称之为随机引物PCR人DNA指纹检测技术(arbitrarily primed PCR human DNA fingerprinting,APHDP)，此外还开发出处理DNA指纹数据应用软件，应用于个人识别、遗传素质与疾病的相关特征研究等。2 DNA指纹技术所用的探针 自DNA指纹技术建立以来，这一技术迅速在动植物的进化关系、亲缘关系分析以及法医学方面得到广泛应用。也正是由于DNA指纹技术在核酸分析中显示出了强大的生命力，因而许多学者围绕此技术所用的探针作了大量的工作，除Jeffrey等〔5〕的探针外，用人工化学合成或从生物组织中提取后再扩增的办法生产出了一批高水平的探针。迄今，在DNA指纹技术中所用的探针大概有、〔5〕、bacteriophage MB〔9〕、pig repetitire clone p83、PGB 725、poly(GT) containing 、(GTG)5/(CAC)5〔10，11〕、(CAC/TA)4及(GT)12等。同时，在探针的标志上也有了很大的发展，根据它们的结构可大致分为小卫星探针和简单重复序列探针，简单重复序列包括微卫星探针(microsatellite probe)和寡聚核苷酸探针。小卫星探针的核心序列为33bp，常定位在人常染色体前的末端(proterminal)区域，微卫星探针则在10～20bp之间，而寡聚核苷酸探针在10bp以下，普遍散布在人类整条染色体上，或者在基因间区域或者位于内含子内。 1988年，我国伍新尧等〔12〕根据DNA指纹是人基因组中重复序列的RFLP的原理和人与鼠的髓鞘碱性蛋白(MBP)基因cDNA同源序列性高于90%的事实，选用鼠MBP cDNA3′端的一段序列(非表达区高度重序列，与人基因组中该类重复序列几乎完全同源)，长度为的片段作探针，检测用HaeⅢ酶解的人DNA限制性片段(RF)，在人群中可分出22条谱带，受检 的30例无血缘关系的个体之间没有两个人的谱带是完全相同的，显示这一方法的高度个体特异性，这是国内首次用自已的力量找到DNA指纹的探针。3 DNA指纹的应用 法医学方面 同以往的血型测定法相比，DNA指纹技术在法医学领域上具有无可比拟的优越性。已成为鉴定犯罪、亲子鉴定和确定个体间亲缘关系的工具〔5，13〕。随后，国内学者李伯龄〔14〕、姜先华〔15〕、伍新尧等〔12〕也先后对此项技术进行了研究，并应用于实际案件的鉴定中，解决了过去无法解决的疑难案例，如微量血痕、部分腐败的碎尸块的个人认定等。 在动植物科学中的应用 生物种群学研究 利用DNA指纹图可以估算连锁不平衡，比较等位基因的频率，还能估计不同个体之间的重组率，在种群学研究上有助于建立某一个体在种群中的地位和关系，特别是对真菌的种群研究，有很多真菌可以通过有性和无性的方式繁殖，但是何时以何种方式繁殖，程度如何，并不清楚，而利用DNA指纹图就能区分以有性和无性方式产生的后代，并能确定某一区域真菌的自然分布〔1，16〕。 测定物种之间的遗传距离、物种分类鉴定 Jeffreys等〔5〕认为在一个群体的不同成员间拷贝数的串联重复序列(VNTR)由于多态性程度高，在遗传分析中尤其适合作为多态性标志，简单重复的不稳定性可导致VNTR长度的迅速变化，根据家族中或育种群体中VNTR的分离重组频率，可以测定出遗传距离，可用统计学公式确定个体间的亲缘关系：D=2Nab/(Na+Nb),，D值越大，亲缘关系越近，遗传距离就越小；D值越小，亲缘关系越远，遗传距离就越大。为此，运用DNA指纹技术可检测不同物种、同种及同种不同个体的亲缘关系，用于物种分类鉴定，也可用于杂交后代亲本决定，杂交后代群体分开，检测近等基因系(或同类系)种的多态性，并对检测基因进行定位。Welsh等〔7〕对布氏疏螺旋体菌株的DNA指纹进行分析，发现这种lyme病的病原菌实际上是由三个不同的种群组成。罗超权等〔12〕运用AP-PCR鉴定弓形虫虫株，在国内开创了运用DNA指纹技术作生物分类的先例。 在流行病学方面的运用 由于DNA指纹具有以下几个特点：①能反映基因组的变异性；②具有高度的变异性；③具有简单的稳定的遗传性；④DNA指纹谱具有体细胞稳定性。所以，它同一般的流行病学方法相比较而言，具有无比的优越性，使其成为流行病调查的一种有效工具。Jan DA等〔17〕，Denise Chevrel-Dellagi等〔18〕运用IS6110序列作探针对结核病分支杆菌株进行DNA指纹分析，调查国际间结核病的种型、分析流行情况，改进了控制结核病的方法。而ZhenHua Yang等〔19〕从67个病人中分离出结核病分支杆菌株进行DNA指纹分析，发现分离到PTBN12型时易查明流行环节，从而为快速进行疾病控制提供了一个有力证据。在我国，童笑梅等〔20〕采用随机扩增多态DNA指纹图技术对医院内感染的14例新生儿进行病原流行病学分析，发现患儿体内携带的与医务人员鼻中携带的华纳葡萄球菌菌株的DNA指纹图完全一致，从而证明此次感染的病原菌为华纳葡萄球菌，传染源是携带病菌的医务人员。郭永建等〔21〕在6个月内对121名产科新生儿中的30名检出的31株铜绿假单胞菌进行RAPD指纹图谱分析和血清学分型，结果表明，铜绿假单胞菌在产科新生儿中暴发流行，0∶6/R∶1型为暴发流行性菌株，对医院感染病原菌分型、精确确定传染源、阻断传播途径、控制和预防医院感染具有重要的指导意义。 疾病诊断及治疗 鉴于DNA指纹所具有的上述特点，故DNA指纹广泛应用于一些疾病的诊断及治疗。Morral〔22〕等发现CF基因9号外显子侧翼含有一小卫星区，且此等位基因带常与△F508连锁，相伴率为、，△F508是最主要的致病突变，可疑患者电泳图只要发现等位基因，就可对此病进行初步诊断。现已在Wilson病、外周神经纤维瘤、成人多束肾、多巴性肌紧张、Frecbreich共济失调、Kallmunm综合征性连锁、视网膜病等基因内或旁侧发现有高度的小卫星区域，从而可进行基因诊断。Okamoto R〔23〕用DNA指纹法预测慢性粒cell性白血病骨髓移植术后复发，取得了成功。 肿瘤的研究 肿瘤是多因素、多阶段的变化过程，病因复杂、变化多样，但归根到底还是在DNA的变化上。一般说来，癌组织、转移灶与正常组织或外周血细胞DNA指纹有差别，常见的是某条带或几条带的缺失，某一条或某几条带密度降低，或者癌组织中出现新的带。Thein等〔24〕用和为探针研究患者DNA指纹谱变化，发现胃肠肿瘤患者癌组织DNA指纹谱全有改变，并认为体细胞突 变还有种属特异性。刘霜等〔25〕应用RAPD(随机扩增多态性DNA)分析技术对6例肝癌患者的癌组织与非癌组织进行分析，发现所有肝癌组织基因组DNA的RAPD指纹图谱均存在差异，其中3例配对肝癌基因组中均存在一相同的的随机扩增片段。杨建厂等〔8〕用APHDFF技术对28例确诊为鼻咽癌病人血DNA指纹图的检测，发现有3条DNA片段出现的频率明显低于健康人群。王黛等〔26〕用、MYO和Mb探针，经Southern杂交法检测12例儿童急性粒cell白血病患者的外周血或骨髓细胞的基因重排，结果发现初始或复发与完全缓解时的DNA指纹图相比，谱带有增加或减少，从而认为急性粒细胞白血病患儿的白血病细胞存在基因重排。林文珍(广西医科大学生化教研室 南宁市 530021)舒雨雁(广西医科大学生化教研室 南宁市 530021)参考文献1，Goodwin SB,Drenth A,Fry and genetic analyses of two highly polymorphic,moderately repetitive nuclear DNAs from phytophthora Genet,1992,22(2):1072，Copon DJ,Chen EY,Levinson nucletide sequences of the T24 human bladder carcinoma oncogene and its normal ，Bell GI,Selby MJ,Rutter highly polymorphic region near the human insulin gene is composed of simple tandemly repeating ，Jeffreys AJ,Wilson V,Thein `minisatellite' regions in human ，Jeffreys AJ,Wilson V,Thein specific `fingerprints' of human ，Williams JG,Kubelik AR,Livak KJ,et polymorphisms amplified by arbityary primers are useful as genetic Acids Res,1990,18:65317，Welsh J,McCelland genomes using PCR with arbitrary Acids Res,1990,24:72138，杨建厂，伍新尧，罗超权，等.一种全新的人脱氧核糖核酸指纹检测技术及其初步应用.新医学，1997，28(10)：5629，Vassart G,Georges M,Monsieui in M13 phage detects hypervariable minisatellitrs in human and animal ，Renate Schafer,Hans Zischler and Jorg T Epplen.(CAC)5,a very informative oligonuclectidde probe for DNA Acids Res,1988,16:519611，蓝翎，张小为，霍振义，等.用寡核苷酸探针DNA指纹分析在法医学上应用的评价.遗传学报，1993，20(5)，40412，伍新尧，杨英浩，罗超权，等.基因工程DNA多态性分析及应用.中山医科大学学报，1994，15(4)：24113，Gill P,Jeffreys AJ,Werrett application of DNA `fingerprints'.Nature,1985,318:57714，李伯龄，叶 健，丁 焰，等.DNA指纹技术在强奸案和亲子鉴定中的应用.中国法医学杂志，1989，4(4)：21015，姜先华，吕世惠，王国林，等.DNA指纹图在法医鉴定中应用的研究(Ⅰ).中国法医学杂志，1990，5(1)：1116，Milgroom MG,Lipari SE,Powell fingerprinting and analysis of population structure in the chestnut blight fungus,cryphonectria (2):29717，Jan DA,Cave MD,Crawford identification of mycobacterium tuberculosis by DNA fingerprinting:recommendations for a standardized Clin Mic,1993,31(2):40618，Denise Chevrel-Dellagi,Amel Abderrahman,Raji DNA fingerprinting of mycobacterium tuberculosis strains as a tool for epidemiological studies of Clin Mic,1993,31(9):244619，Zhenhua Yang,Fernando Chaves,Barenes of method for secondary DNA typing of mycobacterium tuberculosis with PTBN12 in epidemiologic study of Clin Mic,1996,34(12):304420，童笑梅，鲁凤民，范凤立，等.一次新生儿医院内获得性葡萄球菌感染的分子流行病学调查.中华儿科杂志，1997，35(7)：38121，郭永建，戴以聪，周惠平.新生儿铜绿假单胞菌随机扩增多态DNA分子流行病学研究.中华医院感染学杂志，1997，7(2)：6922，Morral N,Nunes V,Casals microsatellite alleles within the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) gene are not generated by unequal (3):69223，李国雄.以Bcr-ab1 mRNA和DNA指纹法预测慢性粒细胞性白血病骨髓移植术后复发.国外医学遗传学分册，1997，20(2)：11124，Thein SL,Jefferys AJ,Gooi of somatic changes in human (4):35325，刘 霜，芮静安，王少斌，等.配对肝癌组织与非癌肝组织基因组差异的随机扩增多态DNA分析.北京医科大学学报，1996，28(6)：40826，王 黛，辛德丽，张小为，等.用DNA指纹技术检测儿童急性粒细胞白血病的基因重排.北京医科大学学报，1997，29(2)：129
物理发展得深一些，意味着遇到的未知更多。化学和生物主要是在境遇上有一定可比性，发展程度上你去看看物理化学都在搞些什么好了。反正，物理学家经过一个世纪的艰苦努力和烧钱，让天上从两朵乌云变成了台风登陆。能谈的大抵是“生物缺少牛顿定律级别的成果”，中心法则日常被RNA和蛋白质暴揍，打肿脸充胖子地谈人家那是“对中心法则的补充”。其实这事完全取决于我们人类自己主要使用的遗传物质是哪一种，而人类之所以为人类的许多基因是逆转录病毒给我们的。朊毒体：蛋白质通过改变其他蛋白质的构象来增加同类。逆转录：病毒RNA通过逆转录酶的催化以RNA为模板逆转录合成cDNA，由cDNA转录出RNA。植物、动物等细胞生物的基因组里也有从DNA转录为RNA再逆转录成cDNA再插入基因组内新位点上的逆转座子。一些研究证明植物体内的逆转座子在植株受不良环境影响时激活，而果蝇等动物体内的逆转座子一直激活，持续地改变基因组。拟逆转录：病毒DNA插入宿主基因组进行复制。目前只在植物身上发现。RNA催化：核糖核酸酶P是一种核酶，由一个RNA分子发挥催化活性，它是第一个被发现的蛋白质以外的具催化活性的生物大分子。后续研究中，人类自己制造出了比自然界的RNA更强大的催化性RNA，能将任何RNA片段大量扩增。RNA可以不通过蛋白质而直接表现出本身的某些遗传信息，这种信息并不是以核苷酸三联密码来编码。DNA催化：1994年乔依斯等人发现一个人工合成的DNA分子具有磷酸二酯酶活性。此后，人们多次发现人工合成的DNA序列具有各种酶活性。1995年中国学者王身立等人发现从多种生物中提取的DNA均具有较弱的酯酶活性，催化乙酸萘酯水解为乙酸和萘酚。该活性是非特异性DNA的一般性质，根本不依赖于序列。RNA直接复制：一些RNA病毒通过RNA复制扩增。DNA直接翻译：蛋白质生物合成抑制剂类抗生素，例如各种滥用的链霉素和新霉素，允许核糖体搂住单链DNA分子作为模板。用了药的学生可能一边读着中心法则一边在体内进行DNA直接翻译。另有研究表明，细胞核DNA偶尔会转移到细胞质核糖体上，不需要RNA、直接开始蛋白质合成。蛋白质指导DNA合成：Rev1 DNA聚合酶可以以自身为模板在复制链上加一个胞嘧啶，不管有没有鸟嘌呤。Rev1/Polζ复合物通过直接参与DSB修复和TLS通路来保持基因组稳定。这其实就是科幻小说谈了几十年的“纳米机器人修复受损DNA”，只不过可控性远低于预期。这是第一次发现蛋白质可以作为合成DNA的模板。
《法学杂志》创刊于1980年，是我国改革开放之后最早的法学期刊之一，1980年由司法部确定为国家一级法学期刊；法律类核心期刊表：1、法学研究 2、中国法学 3、法学 4、法商研究 5、政法论坛 6、现代法学 7、中外法学 8、法学评论 9、法律科学 10、法制与社会发展 11、法学家 12、比较法研究 13、环球法律评论 14、当代法学 15、法学论坛16、政治与法律 17、河北法学 18、法学杂志 19、法律适用 20、行政法学研究 21、中国刑事法杂志 22、人民司法 23、华东政法学院学报（改名为：华东政法大学学报） 24、人民检察 25、知识产权 26、中国法医学杂志 27、中国司法鉴定
《法医学杂志》能加急。《法医学杂志》是一本拥有正规书号的学术期刊,可以加急发表文章,需要收取一定金额的审稿费、加急费、代理费。
一般认为最具有影响力的是《法学研究》、《中国法学》和《中国社会科学》
我认为脚被车轮压到会非常的疼，会导致自己脚的骨骼断裂，非常的难受。
脚被车轮轧到当时是很疼了，如果轧到骨头上，那真是钻心的疼，所以大家平时要注意安全哦！
在一般印象中，被车子轧到脚，轻则骨折，重则血肉模糊。
但实际上，一般只有皮肉伤，而且不咋疼，并且没有我们想象中这么严重。
期刊《国际法医学杂志》上面有篇论文的，《汽车碾轧人脚的实验研究》上面提到。
他们研究人员是从一些57到90岁人的尸体上面，截了十几只脚，然后套上各种鞋子。
再用吨的大众帕萨特轿车，以左右的速度，「哇」这么轧过脚面。
经过解剖和X光检查发现：除了脚面裸露的皮肤有破裂之外，其余的软组织没有什么异常，骨头也没有受损。
也就是说：被普通轿车慢慢轧过脚，并不会骨折或者是血肉模糊，一般只是个皮外伤。
这个时候有些朋友就可能好奇了，「哎」脚被1吨多的车子轧了都没事啊？那脚上到底压了多少重量？
正新轮胎官网我们去看了下，有个介绍的：轮胎与路面接触的面积，大概就我们一个手掌的大小。
如果说，手掌按照中码算，面积大概是200cm²，实验的车子吨，那么车轮对地面的压力，大概是²。
如果脚按照40码来算，脚背面积大概是125cm²，这数学题是不是听着有点晕了？
反正就是这样：车轮轧到脚的时候，脚上面承受了大概211kg的重量。
大致相当于同时被2个211斤的人，「欸」这么踩了一下脚。
你较真起来，轮胎压强的变化、车身倾斜程度等等各种条件，我们就没算，反正有个数就好。
这个时候有些朋友还是有可能会担心，脚是没什么大事，但是毕竟被重物这么轧过了，会不会很疼啊？会不会留下什么后遗症啊？
期刊《解放军护理杂志》论文，《“长海痛尺”在疼痛评估中的应用》上面提到的。
比如说：0级是无痛，2级是轻度疼痛，能够忍受，能够正常地生活、睡眠等等。
参考期刊《中外医学研究》的论文，《“长海痛尺”在骨折术后疼痛管理中的应用体会》上面说。
它是这么讲的：235个骨折患者当中，59%的患者觉得是“4级中度疼痛”。
但车轮轧脚一般不会骨折，疼痛等级显然是更低的。所以说：车轮轧脚，大概是“2级轻度疼痛”这么一个程度。
虽然不咋疼，但还是疼，而且也最好到医院去检查一下，以防万一。万一有小骨裂什么的，不同的角度轧了不一样的，对不对？
每个人脚型都还不一样呢，是吧？检查一下比较好。
至于后遗症，都不用太担心。
之后经过检查，受伤不是那么严重，回家静养几天就能恢复了。
就好像：头「啪」磕一下，不是会磕出一个包来的嘛？对不对？差不多。
脚被轧到，肿上几天，但是也不会有什么太大事，几天就恢复了。
不过刚才说的这些，都是被轿车以比较慢的速度轧到脚的情况。
万一换成大车，卡车，比如说：公交车之类的，是不是？那就危险了。
我住的杭州，比较常见的比亚迪K9公交车，举个例子，整备质量吨，6个车轮，每个车轮承重吨。
而且还没算上面那么多司机和乘客的重量了，可想而知，这个「呱」一下，是真·血肉模糊了。
但是被轧脚还不是最可怕的，万一轧脚之后，人被车子带倒了，卷到车轮里面去了，就是比较可怕了。搞了不好有可能就……是吧？
这时候有个人摔倒在地上，被卷到车轮下面了，还好是没有生命危险，但是听起来也是心里头一紧。
所以说，平常上下公交车就不要急，哪怕错过1趟车，就错过1趟车，也不要追着车边跑。
或者说，你走路、骑车的时候，也离大车远一点。
所以总得来讲，普通汽车慢慢开，轧到脚，不会骨折或者血肉模糊的。
不会「哇」一下：“我的脚没有了。”这不会，一般只是皮肉伤，轻度疼痛，去医院好好检查，基本上过两天也就好了。
如果是大车，你就别想着：“我轧到了要不要紧？”离它远一点！保证安全才要紧，碰到都不会是有什么小事。
编号 发表时间 论 文 题 目 杂 志 位次 1 家兔死后玻璃体液离子浓度检测的微量重复取样法 《中国法医学杂志》 21卷第3期 1 2 A Preliminary study for vitreous humor sampling methodologies on rabbits Z Huazhong Uni Sci (Med Sci), volume 26, 4. 1 3 家兔玻璃体液间隔多次微量取样方法研究 《中国法医学杂志》 21卷第6期 1 4 家兔玻璃体液微量取样与一次取样的比较 《法律与学杂志》13卷第6期 2 5 人工神经网络的法医学应用 《中国法医学杂志》 1 6 APM染色法在羊水栓塞诊断中的应用价值 《中国法医学杂志》 1 7 阿尔辛蓝－荧光桃红－马休黄染色在羊水栓塞病理诊断中的应用价值 《中华病理学杂志》 2 8 羊水栓塞研究进展（综述） 《人民法院法医学理论与实践学术交流会论文集》、人民法院法医学理论与实践学术交流会 “优秀论文” 1 9 浅析视力减弱补偿率在伤残等级评定中的应用 《法律与医学杂志》 1 10 医疗事故处理处理条例相关法律问题探讨 《人民法院法医学理论与实践学术交流会论文集》 2 11 蛛网膜囊肿的法医学鉴定 《山东省法院司法鉴定学术交流会论文集》 2 12 陈阳性海绵瘘误鉴1例讨论分析 《山东省法院司法鉴定学术交流会论文集》 2 13 羊水栓塞研究 《山东省法院司法鉴定学术交流会论文集》 1 14 AB-P-MY双重组化染色法法在羊水栓塞病理诊断中的应用价值研究 《山东省法院司法鉴定学术交流会论文集》 1 15 1例以抗癌药物投毒致畸胎的法医学鉴定 《法律与医学杂志》 1 16 视力减弱补偿率法医学参考价值的探讨 《山东省法院司法鉴定学术交流会论文集》 1 17 1例以抗癌药物投毒致畸胎的法医学鉴定 《山东省法院司法鉴定学术交流会论文集》 1 18 五例外伤性硬膜下积液的法医学鉴定 《中国法医学杂志》 3 19 二例外伤性鼓膜穿孔原因分析 《中国法医学杂志》 2 汪岚（周子涵饰）28岁，允杰的前妻。允杰是汪岚大学时代同社团的学长，两人因社团活动渐生情愫，甚至在双方父母都不在身边的状况下跑去登记了。汪岚向往记者工作，在大学刚毕业报考 电视台的新闻记者，意外成为电视台储备主播。正准备大展身手之际却发现她怀孕了！完全没有准备的她，一度想把孩子拿掉，犹豫不决的心境下找到了手术资料。想等理清思绪后告诉允杰，但在阴错阳差之下允杰误以为汪岚拿掉小孩，两人起了严重争执离婚收场，之后她选择生下小孩。一次出差，与允杰意外重逢，才明白她还爱着允杰，也就说此次重逢，允杰一家人得知项家有个八岁大的孙子。更没有想到，再次相遇后，不是一段重拾旧爱的选择而是一场亲子争夺战。
书籍封面设计的要求分析？做任何一件事情之前,都要有一个计划,做书籍设计也是如此,要做好书籍的封面,先要了解设计的要求。以下是我为你整理推荐,希望你喜欢。书籍封面设计的要求有哪些一.尺寸设计封面之前一定首先决定并记清尺寸,一旦日后有改动则极其麻烦,其中包括:成品尺寸、勒口尺寸、书脊尺寸。书籍整体尺寸计算:勒口×2+成品尺寸×2+书脊宽度+出血***各向3mm***二.出血出血一般为各方向3mm,需特别注意离特殊内容至少25px的距离,如标识标志、条形码、文字、重要图案等。三.文字1.文字边缘属性有“无、锐利、犀利、浑厚、平滑”,选择“无”,否则虚。2.所有文字都尽量是单色,尤其是小字则必须单色***单黑为主***。若底不是白色,则必须正片叠底***单黑为主***。若不是单色***单黑为主***,拼版时字会模糊,小字就更模糊。若不正片叠底,则会留有白色空隙,一旦有误差则十分明显。3.正片叠底的意义:以单黑字和Y20黄底为例,若没有正片叠底,则黑字颜色为K100,去除黑版这里为白色空隙,一旦拼版有误差则十分明显;若有正片叠底则黑字颜色为Y20K100,去除黑版这里为Y20,与周边黄底相同,不会出现白色空隙。4.另外,正片叠底会使此处颜色发生改变,若是黑色叠底下一层则无明显差别,若是其他颜色则会有明显改变。四.书脊计算方法:1.***码数÷2***××纸张克数=书脊厚度2.***码数÷2***×内页所用纸的厚度=书脊厚度÷52×印张数×纸张克数如果是轻型纸则+2016开则÷2其中也需要涉及到印张的知识,1印张×开本=码数。码数即是页数制作书脊时需要注意书脊内容的宽度,以免出线。***不同出版社和书商计算方法不同,需另用公式***。五.条形码如果没有现成的条形码,则需自己根据ISBN书号来生成,目前可以生成条形码的软体有“蒙泰彩色电子出版系统***专业版***”六.校对编辑校对前需设计师自我校对一遍以减少错误,提升信任度,具体校对内容为:文字***包括书名、文字说明、著作者、作者介绍等***。插图***包括插图位置是否有误、内容与书名是否有差、与出血线和书脊线之间关系、颜色是否正确等***。条形码***条形码与书名是否有差,摆放是否整齐和谐***。七.丛书设计丛书封面时,一定要在各项资讯和版式皆准确无误并获得认可时再往下套模板,否则丛书数量越大往后改动越是麻烦,其中重要的资讯包括以除第六条之外的上全部。如果有勒口的话,封面应向勒口出血2mm,便于印刷。封面设计的要求有哪些1、构思2、构图3、制作首先,谈谈第一点:构思。“构思”是整个封面设计的开端。当我们接到任务单的时候,就要首先了解该书稿的内容,书籍属于的型别,是文学类还是科技类,以及该书籍所面对是什么样的读者群,该书籍的市场定位,还有客户的期望要求等等。作为一名书籍封面设计者,假如对于书籍内容都不了解,或者知之甚少,那怎能做好书籍封面的设计工作呢?可以讲,书籍的封面,是整本书的一个重要门面,当读者面对书籍的时候,首先看到的就是书籍的封面,并通过书籍的封面来对该书的内容有一个大概的了解,并会由此慢慢对该书产生兴趣,最终决定是否购买。所以,我们在进行书籍封面构思的时候,就要确保封面和内容的相符,以简洁的设计语言,表达出作者的思想,并吸引读者的注意力。在构思的过程中,我们的脑海会浮现一个或者若干个想法或者构思,这些想法或者构思也许会在脑海很快闪现。但是,都是很有必要把这一个或者若干个想法和构思,仔细考虑,深入的考量和探讨挖掘,并形成清晰的思路,而不应当单独选择一个想法或者构思独立的考量和挖掘。这样的设计人员,本人以为不是一个好的设计人员。这就是“构思”的重要性,正所谓好的开端是成功的一半。因此在本人的设计中,总是宁愿多花些时间用在构思之上,以不错过任何一个好的设计要素或者一个好的设计方案!接下来,我们谈谈第二点:构图。前面我们谈到的第一点“构思”可以说只是一种“想像”,是一种抽象的东西、一种思维和思想。那么,接下来的“构图”就是一种具象的,一种现实的了。就是把抽象转换成一种具象、一种实际上的东西。“构图”可是说是一种版面的“排版”,也可以讲是介于现实和半现实这两者之间的。简单的讲,就是“找图”、“找内容”!另外,除封面的图文排版之外,纸张和颜色方面的了解也非常的重要。不同的纸张,配以不同颜色的变化,不同的开本应用同样的内容都会有不同的效果。多一个点,少一个点一样有着不同的视觉效果,有时会有事半功倍的效果的。诸如上述这些,都是在构图的时候有必要好好了解的!还有一点需要提醒的就是:把需要用到的图先找出来归档,以备将来具体设计的需要。“构思”和“构图”如同一对孪生兄弟,血脉相连,相互辅佐。不同的只是一个抽象的,还没付诸于行动,另外一个是具象的,已经是可以付诸于现实的了。最后,我们来谈谈“制作”。“制作”是书籍封面设计的最后一道工序了。在完成“构思”和“构图”这对孪生兄弟的打造之后,接下来就是要把这些付诸于现实了。在上机,开启设计软体进行具体的设计制作之前,我认为很有必要使用一下原始工具。首先用纸和铅笔把自己要制作的东西实际的、简单的描绘出来。把前面自己构思处理的若干个想法在纸上进行描绘排版,并加以完善。将后期的工作都在这里进行斟酌、比较、选择并完善,上机后就会如鱼得水,有针对性的进行书籍封面的制作,以很快的速度完成书籍封面的设计工作了。封面设计三要素是什么封面设计三要素如下:1.装帧:设计方案是否符合记事本意图2.版面设计:a***记事本的封面、内页和图片尺寸是否协调;设计风格是否贯穿记事本始终,包括扉页和附录版面是否易翻阅书写,是否和内页相适应***具体到内页的行距、行长之间的关系,左右两边整齐或者只有左边整齐等***b***整个内页设计是否适应记事本的整体风格?c***设计方案的执行情况如何***工艺难度、制作成本、材料是否适应***d***版面的字安排是否一目了然、合适和符合目的***书写文字的醒目***3.美术设计:a***封面设计和内页设计是否符合整个公司的形象与要求,脊位上是否正位b***封面设计和内页设计是否组合在整体方案之中***例如文字、色彩***c***封面选用的材料是否合理e***封面设计是否适应书籍装订的工艺要求***例如:封面与书脊连线处,平装书的折痕和精装书的凹槽等***d***图片***照片、插图、技术插图、装饰等***是否组合在基本方案之中,是否符合书籍的要求经过选择的f***技术:版面是否均衡***字距有没有太宽或太窄***名著书籍封面设计?建议用欧洲古典绘画常用的珍珠灰色和灰绿,灰蓝等等做底色,格调高雅,并且什么画也不要有,保持简约大方高贵.在上面中间处装饰以希腊柱,文艺复兴或拉斐尔前派的花纹,要用有光泽的亮银色,然后在花纹中间用同样的亮银色写上书名作者名.这样显得朴素而庄重,封壳要厚而硬,质地应略微有凹突感,像植物的肌理一样.如何制作图书封面选图配文编辑设计印刷具体过程如下:1,选择好适合书籍内容的图片,拟好书名。以及准备需要在封面上出现的文字内容,如:出版单位等。2,按照封面需求计算好封面的尺寸,封面一般包括封面、封底、和书脊。3,就是设计封面了,最好请专业的设计人员(设计公司)设计,一般封面设计都是在CorelDRAWAdobeIllustratorPhotoshop平面设计软件里面排版设计的,做到排版美观,图文并茂,主题突出,有视觉冲击力,吸引读者,封面与书的内容相吻合。这个就要求出书人与设计者的沟通情况以及设计师的水平而定了。4,设计好的封面需要输出打印及印刷了。要联系好印刷公司及出版社。
书籍的该如何排版设计书籍排版设计技巧:1、留白进行排版设计不一定非要排布得满满当当的,留一些空白,才不会显得拥挤。2、字体首先是注意字体的选择,其次是注意字体不要过多。对于杂志排版设计,一定要注意英文字体与中文字体的搭配。中英文字体一定要高调保持一致的风格,粗宋体的英文与中等线的中文是无法组合。面中的字体最好少于三种,大小起码要三种,背景颜色最好少于三种。3、分栏文字部分多的。可以先分栏。分栏会让人很轻松的看完整篇文字。其次,注意字号、行距、字间要保持一样,但不要做的过于拥挤。就算删减文字也要如此。4、版式版面设计中要有隐形矩形框、隐形对齐线条。5、排版排版设计中的统一、均衡、韵律。6、色块版面设计中的色块运用,往往选取图形中的颜色。7、阅读习惯注意人们看图习惯于从上至下,从走至右。8、图片布局当图片多了就把他们格起来。图片要保持原有的形状,切记不可把有静物的图片随意拉伸缩放,除非你是在做抽象的东西。否则物体变形了会非常的难看。扩展资料:书籍封面设计要素:图书的封面设计主要考虑到的有三要素:书名、作者名、出版社。一般来说,书名的位置居于封面的正中偏上,字体最大。如果有副书名,那么必须紧跟着主书名,字体一般来说比主书名小1~2号。如果书名为竖排,装订方向为从左至右的话,则通常将书名排至左侧上方,紧贴书脊位置。装订方向从左至右,则反之。作者名一般较小,书名横排的图书,作者名应置于书名的右下方或者书名的下方正中。作者名的字号应小于主书名和副书名。出版社名称之前,通常有社标。出版社名称位于图书正中最下方,距离封面最下方的成品线以上。出版社名称的字号,通常由出版社规定,若无具体规定,则根据图书开本尺寸进行合理调整。如何自己排版一本书排版见下面:用WORD排版做一本书,把一张A4纸设成横向,然后弄成左右两半,在一个页面上能有两个页码,奇数页的页码居左,偶数页的页码居右。编辑完成后,点击电脑屏幕右侧的“预览”,可以看到3D效果图。书籍该如何设计排版？(1)封面(又称封一、前封面、封皮、书面)封面印有书名、作者、译者姓名和出版社的名称。封面起着美化书刊和保护书芯的作用。(2)封里(又称封二)是指封面的背页。封里一般是空白的,但在期刊中常用它来印目录,或有关的图片。(3)封底里(又称封三)是指封底的里面一页。封底里一般为空白页,但期刊中常用它来印正文或其他正文以外的文字、图片。(4)封底(又称封四、底封)图书在封底的右下方印统一书号和定价,期刊在封底印版权页,或用来印目录及其他非正文部分的文字、图片。(5)书脊(又称封脊)书脊是指联接封面和封底的书脊部。书脊上一般印有书名、册次(卷、集、册)、作者、译者姓名和出版社名,以便于查找。(6)书冠书冠是指封面上方印书名文字的部分。(7)书脚书脚是指封面下方印出版单位名称的部分。(8)扉页(又称里封面或副封面)扉页是指在书籍封面或衬页之后、正文之前的一页。扉页上一般印有书名、作者或译者姓名、出版社和出版的年月等。扉页也起装饰作用,增加书籍的美观。(9)插页插页是指凡版面超过开本范围的、单独印刷插装在书刊内、印有图或表的单页。有时也指版面不超过开本,纸张与开本尺寸相同,但用不同于正文的纸张或颜色印刷的书页。(10)篇章页(又称中扉页或隔页)篇章页是指在正文各篇、章起始前排的,印有篇、编或章名称的一面单页。篇章页只能利用单码、双码留空白。篇章页插在双码之后,一般作暗码计算或不计页码。篇章页有时用带色的纸印刷来显示区别。(11)目录目录是书刊中章、节标题的记录,起到主题索引的作用,便于读者查找。目录一般放在书刊正文之前(期刊中因印张所限,常将目录放在封二、封三或封四上)。(12)版权页版权页是指版本的记录页。
《法医学杂志》能加急。《法医学杂志》是一本拥有正规书号的学术期刊,可以加急发表文章,需要收取一定金额的审稿费、加急费、代理费。