粪大肠菌群检测的论文

粪大肠菌群 粪大肠菌群是大肠菌群的一种，又名耐热大肠菌群 粪大肠菌群是生长于人和温血动物肠道中的一组肠道细菌,随粪便排出体外,约占粪便干重的1/3以上,故称为粪大肠菌群。受粪便污染的水、食品、化妆品和土壤等物质均含有大量的这类菌群。若检出粪大肠菌群即表明已被粪便污染。大肠菌群 1、大肠菌群是指一群好氧及兼性厌氧,在37℃、24h能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌,它主要来源于人畜粪便,通常可作为水体粪便污染的指标菌大肠菌群 2、大肠菌群是指37℃生长时能发酵乳糖,在24h内产酸产气的革兰阴性无芽孢杆菌,除包括大肠埃希氏杆菌属外,还包括肠杆菌科的肠杆菌属、枸椽酸菌属、克雷伯菌属 3、大肠菌群是指一群能在36℃,24h内发酵乳糖产酸产气,需氧和兼性厌氧的革兰阴性无芽胞杆菌.它主要包括肠杆菌科的大肠埃希氏菌、枸椽酸杆菌、克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌 文献来源 大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致，其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。 大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界广泛存在。调查研究表明，大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则以大肠菌群其他型别较多。 大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。粪便是人类肠道排泄物，其中有健康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除一般正常细菌外，同时也会有一些肠道致病菌存在（如沙门氏菌、志贺氏菌等），因而食品中有粪便污染，则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，必须看作对人体健康具有潜在的危险性。粪大肠菌群和饮用水 国家饮用水标准规定，饮用水中大肠菌群数每升中不超过3个，细菌总数每mL不超过100个。 青岛第一海水浴场粪大肠菌群超标 青岛第一海水浴场粪大肠菌群超标环保总局公布了上周全国16个沿海城市28个海水浴场的水质报告。报告显示，青岛的第一海水浴场因粪大肠菌群超过2000个/升，水质差，不适宜游泳。 粪大肠菌群检测方法 粪大肠菌为总大肠菌群的一个亚种；直接来自粪便，除了它耐热，在44-44．5℃的高温条件下仍可生长繁殖并将色氨酸代谢成吲哚，其他特性均与总大肠菌群相同。 总大肠菌群中的细菌除生活在肠道中外，在自然环境中的水与土壤中也经常存在，但此等在自然环境中生活的大肠菌群培养的最合适温度为25℃左右，如在37℃培养则仍可生长，但如将培养温度再升高至44．5℃，则不再生长，而直接来自粪便的大肠菌群细菌，习惯于37℃左右生长，如将培养温度升高至44．5℃仍可继续生长。因此，可用提高培养温度方法将自然环境中的大肠菌群与粪便中的大肠菌群区分。在37℃培养生长的大肠菌群，包括在粪便内生长的大肠菌群称为“总大肠菌群”(Total coliform)；在44．5℃仍能生长的大肠菌群，称为“粪大肠菌群”(Fecal coliform)，粪大肠菌群细菌在卫生学上具有重要的意义。 1．5检验注意事项 (1)将接种好的样品放人恒温水浴箱或隔水式恒温培养箱时，箱内温度一定要求达到所要求的温度(44±1℃)时，方可放入。如用恒温水浴箱其水面要高于接种物面，放滤膜的培养皿要沉到水浴箱底部。 (2)MFC培养基中苯胺蓝的纯度和质量往往影响菌落的颜色，根据试验结果用进口苯胺蓝加O．1g，用国产苯胺蓝加0．2g，培养出的粪大肠菌菌落颜色较典型。但国产苯胺蓝的性能是否同样稳定尚不能肯定。因此，制好的培养基在使用前，最好先接种典型粪大肠菌，以观察对比菌落的颜色。 玫红酸高压后会分解，配好的试液应在2-lO℃保存不超过2周，如颜色由暗红变成棕色沉淀时应弃去。如杂菌污染少，且加与不加玫红酸对菌落计数无影响时，可不加。． (3)在滤膜上生长的菌落除挑取蓝色菌落外，浅蓝色菌落或浅蓝色中心较深的菌落也应挑取。 (4)生活饮用水通常都是经氯处理消毒的，水中含有一定量的余氯，使大肠菌群处于受损或受抑制状态，在采集水样时应加硫代硫酸钠脱氯，使此受损的细菌得以复苏与修复，从而避免计数结果偏低甚至假阴性出现。 (5)采样后水样的正确保存很重要，如保存不当可使检样中的大肠菌群细菌死亡或在一定条件下再生长，这些都将影响检验结果的准确性。检验室接到水样后，应立即检验。如因故不能检验时，应立即置于冰箱内并于2小时内检验。 关于水样储存时间与温度对大肠菌群数的影响，Lonsans等报告认为水样中大肠菌群数不多时，则冰箱保存与室温保存相差不大；如水样中菌数多时，则在室温(23-39．5℃)内保存比在冰箱(0-1O℃)中保存菌数的减少速度快。 水质粪大肠菌群检测仪器 JMS2009型大肠菌群在线快速监测仪,可以对大肠杆菌,总大肠菌群,粪大肠菌群,总粪大肠杆菌等多种生活中常见菌类进行快速检测. 仪器特点 自动检测 操作简便，不需要复杂、昂贵的实验室器材和专业人员即可现测试 自动取样频率可编程设定：从每小时一次～每24小时一次 检测周期短，小于12小时（分析速度快） 可高通量连续检测 真正做到实时、在线、自动检测 多种输出功能 粪大肠菌群检测仪 测量原理 FC培养液是最适宜大肠菌群和粪大菌群生长的 微生物培养基，大肠菌群和粪大肠菌群含有一种特异 性酶，本系统采用的底物可被这种特异性酶分解释放 出一种化合物，使培养基的颜色发生变化。本系统通 过检测培养基的颜色变化，检测水体中的大肠菌群及 粪大肠菌群。FC培养液是专利产品。 应用范围 适用于饮用水、地表水、地下水及污水等大肠菌群、 粪大肠菌群的自动监测。 样品分析方法 将水样注入FC培养液，在一定温度下进行细菌培养 （大肠菌群需恒温°C，粪大肠菌需恒温°C）。通 过连续光度测量，检测水样中的大肠菌群和粪大肠菌群。 每个样品测量结束后，仪器自动对管路进行灭菌处理。 技术参数 采样体积： 检出限：1个/100ml 采样频率：1小时（可调） 测量周期：最长12小时 检测时间：少于12小时 培养温度：°C或°C 管路消毒：每次测量前，污染后 管路清洗：每次管路消毒后 试剂：培养液：1瓶/样品 次氯酸钠（有效氯：）：5L星期 零点校正：每次进样前自动校正 参比溶液：培养液 通讯接口：RS232或485 报警信号：控制器故障、温度故障、微处理 故障、仪器故障 远程控制：远程控制启动和待机 环境：防潮、防尘、温度0～40°C 电源：220VAC/50HZ 防护等级：IP55 外型尺寸： 重量：100kg

其实按照相关水的环境质量标准进行监测项目选定就可以了，比如地表水监测内容可以是pH、CODCr、高锰酸盐指数、BOD5、氨氮、砷、氟化物、挥发酚、阴离子表面活性剂、总氮、总磷、粪大肠菌群、铅、镉、汞、锌、铜、石油类、硫化物、六价铬、氰化物等；地下水可以是PH、总硬度、溶解性总固体、高锰酸盐指数、氨氮、硝酸盐氮、亚硝酸盐氮、氟化物、氯化物、硫酸盐、阴离子表面活性剂、氰化物、挥发酚、六价铬、铜、铅、锌、铁、锰、镉、总汞、总砷、硒、总大肠菌群、细菌总数及矿化度等。

最新有标准的：CJ/T-2018 城镇污水水质标准检测方法 中有新增酶底物法检测粪大肠菌群

粪大肠菌群Fecal Coliforms1 定义 本规范采用下列定义 粪大肠菌群（Fecal coliforms）系一群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌，在℃±℃培养24h～48h能发酵乳糖产酸并产气。 该菌直接来自粪便，是重要的卫生指示菌。3 仪器 恒温水浴箱或隔水式恒温箱：44℃±℃。 温度计。 显微镜。 载玻片。 接种环。 电磁炉。 三角瓶，250mL。 试管：15×150mm。 小倒管。 pH计或pH试纸。 高压灭菌器。 灭菌吸管，10mL、1mL。 灭菌平皿：直径90mm。4 培养基和试剂 双倍乳糖胆盐（含中和剂）培养基 成分：蛋白胨 40g 猪胆盐 10g 乳糖 10g ％溴甲酚紫水溶液 5mL 卵磷脂 2g 吐温80 14g 蒸馏水 1000mL 制法：将卵磷脂、吐温80溶解到少量蒸馏水中。将蛋白胨、胆盐及乳糖溶解到其余的蒸馏水中，加到一起混匀，调pH到，加入％溴甲酚紫水溶液，混匀，分装试管（每支试管中加一个小倒管）。（115℃ 10 lb）20min灭菌。 伊红美兰（EMB）琼脂 成分：蛋白胨 10g 乳糖 10g 磷酸氢二钾 2g 琼脂 20g 2％伊红水溶液 20mL ％美蓝水溶液 13mL 蒸馏水 1000mL 制法：先将琼脂加到900mL蒸馏水中，加热溶解，然后加入磷酸氢二钾蛋白胨，混匀，使之溶解。再以蒸馏水补足至1000mL。校正pH值为～，分装于三角瓶内，（121℃ 15 lb）15min高压灭菌备用。临用时加入乳糖并加热融化琼脂。冷至60℃左右无菌操作加入灭菌的伊红美蓝溶液，摇匀。倾注平皿备用。 蛋白胨水（作靛基质试验用） 成分：蛋白胨（或胰蛋白胨） 20g 氯化钠 5g 蒸馏水 1000mL 制法：将上述成分加热融化，调pH值为～，分装小试管，（121℃ 15 lb）15min高压灭菌。 靛基质试剂 柯凡克试剂：将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中，然后缓慢加入浓盐酸25mL。 试验方法：接种细菌于蛋白胨水中，于44℃±℃培养24h±2h。沿管壁加柯凡克试剂～，轻摇试管。阳性者于试剂层显深玫瑰红色。 注：蛋白胨应含有丰富的色氨酸，每批蛋白胨买来后，应先用已知菌种鉴定后方可使用。 革兰氏染色液： 染液制备 结晶紫染色液： 结晶紫 1g 95％乙醇 20mL 1％草酸铵水溶液 80mL将结晶紫溶于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。 革兰氏碘液： 碘 1g 碘化钾 2g 蒸馏水加至 300mL 将碘与碘化钾先进行混合，加入蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馏水至300mL。 脱色液：95％乙醇。 复染液： a 沙黄复染液： 沙黄 95％乙醇 10mL 蒸馏水 90mL 将沙黄溶解于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。 b 稀石碳酸复红液：称取碱性复红10g，研细，加95％乙醇100mL，放置过夜，滤纸过滤。取该液10mL，加5％石碳酸水溶液90mL混合，即为石碳酸复红液。再取此液10mL加水90mL，即为稀石碳酸复红液。 染色法 将涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染色液，染1min，水洗。 滴加革兰氏碘液，作用1min，水洗。 滴加95％乙醇脱色，约30s，或将乙醇滴满整个涂片，立即倾去，再用乙醇滴满整个涂片，脱色10s，水洗。 滴加复染液，复染1min，水洗，待干，镜检。 染色结果 革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。注：如用1:10稀释石碳酸复红染色液作复染，复染时间仅需10s。5 操作步骤 取10mL 1:10稀释的检液，加到10mL双倍乳糖胆盐（含中和剂）培养基中，置44℃±℃培养箱中培养24h～48h，如不产酸也不产气，则报告为粪大肠菌群阴性。 如产酸产气，划线接种到伊红美蓝琼脂平板上，置36℃±1℃培养18h～24h。同时取该培养液1～2滴接种到蛋白胨水中，置44℃±℃培养24h±2h。 经培养后，在上述平板上观察有无典型菌落生长。粪大肠菌群在伊红美蓝琼脂培养基上的典型菌落呈深紫黑色，圆形，边缘整齐，表面光滑湿润，常具有金属光泽。也有的呈紫黑色，不带或略带金属光泽，或粉紫色，中心较深的菌落，亦常为粪大肠菌群，应注意挑选。 挑取上述可疑菌落，涂片作革兰氏染色镜检。 在蛋白胨水培养液中，加入靛基质试剂约，观察靛基质反应。阳性者液面呈玫瑰红色；阴性反应液面呈试剂本色。6 检验结果报告根据发酵乳糖产酸产气，平板上有典型菌落，并经证实为革兰氏阴性短杆菌，靛基质试验阳性，则可报告被检样品中检出粪大肠菌群。

按照相关水的环境质量标准进行监测项目选定就可以了，比如地表水监测内容可以是PH、DO、高锰酸盐指数、CODCr(高锰酸盐<6才做)、BOD5、氨氮、总磷、总氮、砷、硒、汞、氟化物、氰化物、挥发酚、阴离子表面活性剂、粪大肠菌群、铅、镉、锌、铜、石油类、硫化物、六价铬等；地下水可以是PH、总硬度、溶解性总固体、高锰酸盐指数、氨氮、硝酸盐氮、亚硝酸盐氮、氟化物、氯化物、硫酸盐、阴离子表面活性剂、氰化物、挥发酚、六价铬、铜、铅、锌、铁、锰、镉、总汞、总砷、硒、总大肠菌群、细菌总数及矿化度等;污水主要:PH、氨氮、总磷、CODCr、SS等.