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含有醛基或酮基的糖,在碱性条件下可转变成非常活泼的烯二醇结构,具有一定的还原性,可被弱氧化剂氧化成相应的糖酸。这类糖称为还原糖。单糖均是还原糖,双糖中的乳糖、麦芽糖也具有还原性。还原糖常用的测定方法有直接滴定法、高锰酸钾滴定法和比色法。直接滴定法原理在加热条件下,以次甲基蓝为指示剂,以已除去蛋白质的被测样品溶液,直接滴定已标定过的费林氏液,样品中的还原糖与斐林试剂中的酒石酸钾钠铜络合物反应,生成红色的氧化亚铜沉淀,氧化亚铜再与试剂中的亚铁氰化钾反应,生成可溶性化合物,到达终点时,稍过量的还原糖立即将次甲基蓝还原,使蓝色褪色,呈现出原样品溶液的颜色,即为终点。根据样品消耗体积,计算还原糖量。本方法测定的是一大类具有还原性的糖,包括葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等,只是结果用葡萄糖或其他转化糖表示而已。本法是国家标准分析方法,适用于所有食品中还原糖的快速测定。检出限。高锰酸钾滴定法原理样品经除去蛋白质后,其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜,加硫酸铁后,氧化亚铜被氧化为铜盐,以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐,根据高锰酸钾消耗量计算氧化亚同含量,再查表得还原糖量。本法为国家标准方法(),适用于所有食品中还原糖的测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖的非还原性糖类物质的测定。准确度和重现性均优于直接滴定法。
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还原糖的测定:
由于还原糖分子中的醛基或酮基能被二价铜、铁氰化钾等氧化剂氧化,所以还原糖的检测以滴定法为主,主要有斐林试剂法、高锰酸钾滴定法,铁氰化钾法、奥氏试剂法。
其中斐林试剂法使用最为广泛。但是当测定白砂糖、绵白糖这类还原糖含量特别低的样品时,斐林试剂法就不太适用了,我们可以采用奥氏试剂法来测定微量的还原糖。
总糖的测定:
总糖的测定方法有很多种,不同类型的食品都有其对应的测定方法,但其原理基本相同,测定总糖的经典化学方法都是以其能被各种试剂氧化为基础的。这些方法中,斐林试剂法的应用范围最广。
其他主要方法有铁氰化钾法,蒽铜比色法。斐林试剂法由于反应复杂,影响因素比较多,所以不如铁氰化钾法准确。
但斐林试剂法操作简单迅速,所用的试剂也相对稳定,所以在食品总糖的测定中是最常用的方法。
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