最美遇见微风
1.(1)从亚硝酸盐含量较高的环境中采集土样;(2)配置培养基,制备平板,一种仅以亚硝酸盐作为唯一氮源(A),另一种不含任何氮源作为对照(B);(3)将样品适当稀释(十倍稀释法),涂布A平板;(4)将平板至于适当温度条件下培养,观察是否有菌落产生;(5)将A平板上的菌落编号并分别转接至B平板,至于相同温度条件下培养;(6)挑去在A平板上生长而不在B平板上生长的菌落,在一个新的A平板上划线、培养,获得单菌落,初步确定为可利用亚硝酸盐作为唯一氮源的微生物除培养将他们混合培养,在培养基上长出的菌落为重组菌株。B如果在混合培养期间加入DNAase,在培养基上无重组菌落出现这说明上述重组是因细胞间的接触转化所致;如果仍有重组菌落长生,说明可能是由于接合和转导所致。C利用只能持留细菌的滤板相隔的U型管进行试验,如果在基本培养基上不产生重组菌落,则判断为接合作用,如果产生重组菌落,则又有两种可能,即转化或转导。D利用能持留细菌和细菌病毒而不能持留DNA的滤板相隔的U型管进行试验,如果不产生重组菌落则为转导,如果仍产生重组菌落则为转化
xiaoqiao945
我认为两者都可以用构建基因文库的方法来筛选出其相关的基因。基因文库的构建,大致可分为5个步骤:(1)染色体DNA的片段化 从某菌株中提取其染色体DNA,将其切割成一定大小的片段,插入噬菌体载体后被包装成噬菌体颗粒。(2)载体DNA的制备 选择适当的噬菌体载体用限制酶切开,得到左、右两臂,以便分别与染色体DNA片段的两端连接。(3)体外连接与包装 将染色体DNA片段与载体DNA片段用T4 DNA连接酶连接。然后重组体DNA与噬菌体包装蛋白在体外进行包装。(4)重组噬菌体感染大肠杆菌 将包装得到的重组噬菌体在大肠杆菌内经增殖并裂解宿主细胞,产生的溶菌产物组成重组噬菌体克隆库,即基因文库。(5)基因文库的鉴定和扩增 对于文库的鉴定,可以随机挑选一定数量的克隆,用限制酶切、PCR或其他方法分析其重组体DNA来进行。仅供参考!!!
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摘要:目的 了解纯净水在饮用期间微生物指标的污染情况。 方法 将同批次抽检合格的纯净水放置到20个家庭饮用,同时在1d、3d、5d、7d、10d以无菌方式进行采
高通量测序技术在肠道菌群多样性研究中的应用在人体肠道中生活着数以万亿的共生菌群,它们的种类繁多,可达上千种,数量也很惊人,是人体细胞总量的10倍以上,迄今为止,
是不算好写,但是只要你还算聪明,也没有很难。就是熟悉你的内容,多找一些相关的文献,多看看他们写的。 把知网上跟你的研究对象相关的内容都看一看,总结一下,整理好研
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