壹只头俩只脑
参考文献:城市广场绿化中植物配置与造景的探讨推荐 下载阅读CAJ格式全文 下载阅读PDF格式全文【英文篇名】 Research on Plants Arrangement and Landscapein Construction in the Greening of City Square【作者中文名】 王光新; 李静; 张浪;【作者英文名】 Wang Guangxin Li Jing(College of Forest and Landscape Architecture Anhui Agriculture University; Hefei 230036);【作者单位】 安徽农业大学林学与园林学院; 安徽农业大学林学与园林学院 安徽合肥; 安徽合肥;【文献出处】 安徽农学通报, Anhui Agricultural Science Bulletin, 编辑部邮箱 2007年 02期期刊荣誉:ASPT来源刊 CJFD收录刊【关键词】 城市广场; 植物配置; 造景;【英文关键词】 city square; plants arrangement; construction of landscape;【摘要】 针对目前城市广场建设中存在的生态问题,提出了广场绿化的植物配置与造景的一些方法,特别探讨了如何进行广场植物景观布局,城市广场草坪区的植物如何配置以及如何突出广场植物的季相变化等热点问题。【英文摘要】 In view of the problems of present construction of city square,the paper offered some methods of plants arrangement and construction of landscape in square especially discussed some hot issues on how to arrange plant landscape in square,how to arrange plants on lawn area of square,and how to stress the changing with seasons of plants in the square.浅谈城市屋顶绿化的植物配置与设计推荐 下载阅读CAJ格式全文 下载阅读PDF格式全文【英文篇名】 A preliminary study on greening plant arrangement and design on roofs of the city houses【作者中文名】 叶瑞兴;【作者英文名】 YE Rui-xing(Landscape Management Office of Zhangzhou City; zhangzhou; Fujian 363000; China);【作者单位】 漳州市园林管理处 福建漳州;【文献出处】 福建林业科技, Journal of Fujian Forestry Science and Technology, 编辑部邮箱 2007年 01期期刊荣誉:中文核心期刊要目总览 ASPT来源刊 CJFD收录刊【关键词】 屋顶花园; 植物配置; 园林规划设计;【英文关键词】 roof garden; plant arrangement; landscape plan and design;【摘要】 随着城市园林绿化的发展,造景植物作为园林绿化的主体在城市绿化中得到广泛应用。根据屋顶绿化的特点,着重阐述造景植物的配置形式和屋面设计施工中应解决的几方面特殊技术问题,为更好建设屋顶花园,提高城市的绿化覆盖率,改善城市生态环境提供参考。【英文摘要】 With the development of urban greening,the landscape plants are extensively applied in urban greening as the main body of landscape paper discussed the arrangement form of the landscape plants and few special techniques that should be settled during the construction implement according to the special condition of the provides the references to make a better roof garden,enhance the cover rate of city greening and improve the city ecological environment.试论园林植物配置与养护管理推荐 下载阅读CAJ格式全文 下载阅读PDF格式全文【作者中文名】 段丽倩;【作者单位】 山西师范大学生物技术与工程学院农艺系 山西临汾;【文献出处】 化工之友, Friend of Chemical Industry, 编辑部邮箱 2007年 03期期刊荣誉:ASPT来源刊 CJFD收录刊【关键词】 自然环境; 植物配置; 园艺科学;【摘要】 园林绿化观赏效果和艺术水平的高低,在很大程度上取决于园林植物环境的选择和配置,因此,应从不同的园林植物特有的观赏性考虑园林植物配置,以便创造优美长效的风景。一个好的园林作品需要植物的合理配置,与植物和环境息息相关,作为一个园林设计者,必须了解植物的生理特点和配置,使它和周围环境相互衬托,形成一件具有观赏价值和经济价值的艺术品,使它给人以现实生活美的享受,因为它是自然风景的再现和空间艺术的展示。城乡园林绿化植物配置方法探讨推荐 下载阅读CAJ格式全文 下载阅读PDF格式全文【英文篇名】 Arrangement Methods of City Landscaping Plants【作者中文名】 白维滨;【作者英文名】 Bai Weibin;【作者单位】 太原市园林建设开发中心;【文献出处】 山西科技, Shanxi Science and Technology, 编辑部邮箱 2007年 02期期刊荣誉:ASPT来源刊 CJFD收录刊【关键词】 园林绿化; 植物; 配置方法;【英文关键词】 landscaping; plant; arrangement method;【摘要】 城乡园林绿化是园林绿化的重要组成部分,是林业可持续发展的基础,越来越受到人们的关注。文章着重介绍了城乡园林绿化的植物配置方法、原则和具体措施。【英文摘要】 City landscaping is an important component of landscaping and the base for the sustainable development of forestry,it is gaining more and more article has introduced some arrangement methods,principles and specific measures.上海城郊别墅庭园绿化的植物配置初探推荐 下载阅读CAJ格式全文 下载阅读PDF格式全文【英文篇名】 Preliminary research on the planting arrangement of villa gardens in Shanghai suburbs【作者中文名】 曹洪虎; 刘承珊;【作者英文名】 CAO Hong-hu~(1; 2); LIU Cheng-shan~2(~1College of Agriculture and Biotechnology; Zhejiang University; Hangzhou 310029; China; ~2Shanghai Vocational Technical College of Agriculture and Forestry; Shanghai 201600; China);【作者单位】 浙江大学农业与生物技术学院; 上海农林职业技术学院 杭州; 上海农林职业技术学院;【文献出处】 上海农业学报, Acta Agriculturae Shanghai, 编辑部邮箱 2006年 01期期刊荣誉:ASPT来源刊 中国期刊方阵 CJFD收录刊【关键词】 别墅; 庭园绿化; 植物配置; 植物选择;【英文关键词】 Villa; Garden greening; Planting arrangement; Plant species selection;【摘要】 结合上海地区的气候、植物、文化等条件,运用群落生态学原理,分析了上海市松江区别墅绿化状况,提出了上海城郊别墅庭园绿化植物配置的原则和方法。【英文摘要】 Based on the climatic,botanical and cultural conditions of Shanghai area,the situation of garden greening in Songjiang District was analysed,and the principles and methods of the planting arrangement of villa gardens in Shanghai suburbs were put forward in terms of the theory of community ecology.浅谈植物造景与包头市园林建设推荐 下载阅读CAJ格式全文 下载阅读PDF格式全文【作者中文名】 陈书荔; 李秀琴; 张秀敏;【作者单位】 内蒙古包头市青山区建设局; 内蒙古包头市青山区建设局 青山区;【文献出处】 内蒙古林业调查设计, Inner Mongolia Forestry Investigation and Design, 编辑部邮箱 2007年 02期期刊荣誉:ASPT来源刊 CJFD收录刊【关键词】 植物造景; 园林建设; 包头市;【摘要】 文章通过包头市容市貌发生的巨大变化,说明了植物造景在现代城市建设中的重要作用公园绿地植物造景初探在线阅读 整本下载 分章下载 分页下载【英文题名】 Study on the Design of Planting Landscape in Public Greenbelt【作者中文名】 李宏星;【导师】 邹志荣;【学位授予单位】 西北农林科技大学;【学科专业名称】 园林植物与观赏园艺【学位年度】 2006【论文级别】 硕士【网络出版投稿人】 西北农林科技大学【网络出版投稿时间】 2007-04-04【关键词】 公园绿地; 植物造景; 植物群落; 生态; 游憩;【英文关键词】 Public greenbelt; Planting landscape; Plant community; Ecological; recreation;【中文摘要】 本文通过对公园绿地植物造景与视觉景观形象、环境生态绿化、大众行为心理之间相互关系的分析,探讨公园绿地植物造景的景观、生态与游憩结合的三位一体设计。为城市公共绿地植物造景实现向生态设计方向转化,向可持续发展道路前进提供了新思路,有一定的理论研究意义和实用价值。通过公园绿地植物材料选择和植物比例搭配,在公园绿地植物配置类型设计的基础上提出公园绿地植物造景群落类型设计,分析公园绿地植物景观在空间、时间、思维上的布置,同时以公园绿地的植物为研究对象,从公园绿地植物造景的营建途径进行探讨,通过理论知识的收集总结与实地的调研分析,结合归纳演绎与推理论证等方法,构建比较系统的公园绿地植物造景景观、生态与游憩结合的三位一体设计途径,提出公园绿地植物造景三位一体设计目标。 1公园绿地植物景观、生态与游憩结合的三位一体设计途径: 在植物材料选择方面应合理选择植物组合的生态位,合理选择不同生态效益植物,合理选择耐荫植物,构建复层结构以及合理确定各类植物比例。在植物景观布置方面应在空间、时间、思维轴向探讨植物景观的合理布置。 2公园绿地植物造景目标:将AVC理论即景区吸引力(Attraction)、...【英文摘要】 This article tries to analyze the relationship between vision, ecological design and the masses action of planting design in public greenbelt, and sets forth the way of the planting landscape in public greenbelt, which thinking about of the sight, ecological design and public recreation. In order to provide the new theory on the ecological design and continuance theory of planting landscape in urban public greenbelt,this article studies the choosing of plants and deciding the ratio of different types. ...居住区绿地植物造景推荐 下载阅读CAJ格式全文 下载阅读PDF格式全文【作者中文名】 肖湘东; 陈伟杰;【文献出处】 湖南林业, , 编辑部邮箱 2006年 02期期刊荣誉:ASPT来源刊 中国期刊方阵 CJFD收录刊【摘要】 <正>居住区绿地是城市绿地的重要组成部分,而加强居住区绿地建设的首要任务是做好植物造景设计。笔者认为, 植物造景设计应在尊重传统、尊重科学基础上,摒弃原有落后的环境,注重生态及景观设计。居住区的绿地植物造景规划,必须以城市生态系统为基础,注重生态效益。一是提高居住区绿地的绿地率和绿视率。设计时,应合理分配园林诸要素 (植物、道路、建筑、山石、水体)的比例关系,重点突出植物造景,同时充分利用植物覆盖所有可以覆盖的黄土,努力提高单位面积的绿地率和绿视率。二是提浅谈城市园林植物造景推荐 下载阅读CAJ格式全文 下载阅读PDF格式全文【英文篇名】 Preliminary Probing into Landscape Building of Plant in City【作者中文名】 高祥斌;【作者英文名】 GAO Xiang-bin(College of Agronomy; Liaocheng University; Liaocheng 252059; China);【作者单位】 聊城大学农学院 山东聊城;【文献出处】 江西农业学报, Acta Agriculturae Jiangxi, 编辑部邮箱 2006年 04期期刊荣誉:ASPT来源刊 CJFD收录刊【关键词】 城市; 植物造景; 存在问题; 建议;【英文关键词】 City; Landscape of plant; Existing problem; Suggestion;【摘要】 对现阶段城市植物造景过程中存在问题做了一些总结,并提出几点建议,希望营建富有景感、美感的生态健全的城市园林植物景观。【英文摘要】 This paper sums up a few problems existing in landscape building of plant in city and proposes some suggestions on building the ecological landscape of plant with scenery views and beauties.浅谈城区植物造景推荐 下载阅读CAJ格式全文 下载阅读PDF格式全文【作者中文名】 苏小萍; 樊剑锋; 卢国成;【作者单位】 广东佛山市三水园建绿化工程有限公司; 528100;【文献出处】 科技资讯, Science & Technology Information, 编辑部邮箱 2006年 26期期刊荣誉:ASPT来源刊 CJFD收录刊【关键词】 植物造景; 城市住宅区; 布局; 材料选择;【摘要】 随着现代化城市的飞速发展,城镇环境已成为各方面关注的问题。改善城镇生态环境,是人们共同追求的目标。本文从植物造景的原则;植物造景的布局;植物造景的材料选择三个方面阐述了植物造景的过程以及造景的创新手法。上海城市绿地植物造景研究在线阅读 整本下载 分章下载 分页下载【英文题名】 Studies on Planting Design of Urban Green Space in Shanghai【副题名】 以延安中路绿地和徐家汇公园为例A Case Study of Yan'an Zhonglu Greenbelt and Xujiahui Park【作者中文名】 江哲炜;【导师】 包志毅;【学位授予单位】 浙江大学;【学科专业名称】 园林植物与观赏园艺【学位年度】 2006【论文级别】 硕士【网络出版投稿人】 浙江大学【网络出版投稿时间】 2006-07-24【关键词】 上海; 城市绿地; 植物造景; 案例; 延安中路绿地; 徐家汇公园;【英文关键词】 Shanghai; Urban Green Space; Case; Planting Design; Yan'an Zhonglu Greenbelt; Xu Jiahui Park;【中文摘要】 我国的植物造景具有几千年的悠久历史,素来以崇尚自然、重视传统文化的民族风格屹立于世界园林艺术之林。近几十年来随着西方现代景观设计思想的引入,我国现代植物造景的发展有了长足的进步,却始终未能形成具有中国地域文化特色的现代植物造景风格。 以上海为代表的许多现代城市,处于中西文化交流的前沿,这些城市的植物造景表现出兼收并蓄、广撷博取的海派文化脉络,既借鉴地吸收先进的设计理念,又注重挖掘传统文化的现实意义,并在一定程度上对具有地域文化特征的现代植物造景思想和手法进行了有益的探索,是现代植物造景研究的最佳切入点。 本文在对上海延安中路绿地和徐家汇公园的植物造景进行大量实地调研的基础上,依据植物景观的不同类型选取了19个各具特色的植物造景案例,包括建筑小品植物景观、水体植物景观、道路植物景观、空间植物景观以及主题植物景观等。通过对这些案例进行深入细致的调查实测与研究分析,探讨其有借鉴和参考意义的植物造景思想和手法。由此总结出上海城市绿地植物造景的风格特色、存在的不足之处以及常用植物种类,并针对存在的相应问题提出一些建议。此外,通过研究现代植物造景对传统文化的传承和借鉴,探讨现代植物造景的创作策略和...【英文摘要】 China has thousands of history in planting design and it is outstanding among the world landscape art because of its nationality style is advocation of the nature, valuation of the traditional culture. Due to the introduction of western landscape thoughts in recent decades, the gardening of China got great progress. However, it still havn't form a style which contains Chinese regional culture modern cities, like Shanghai, in the foreland of cultural intercommunion between China and West...园林植物与造景推荐 下载阅读CAJ格式全文 下载阅读PDF格式全文【作者中文名】 徐燕; 薛立; 陈锡沐;【作者单位】 华南农业大学;【文献出处】 广东园林, Journal of Guangdong Landscape Architecture, 编辑部邮箱 2005年 02期期刊荣誉:ASPT来源刊 CJFD收录刊【关键词】 园林植物; 造景; 传统园林; 现代园林; 造景原则;【摘要】 传统园林植物造景有“自然性、文化性、生态性、精练性”的艺术特征,而现代园林植物造景则注重生态效益和生态景观,注意科学配置耐荫植物、植物造景功能多样化、重写实、大量应用草坪、花卉和植物材料丰富多彩。造景中应用的园林植物有乔木、灌木、草本3大类。园林植物造景原则有根据植物的生态学原理、植物配置的美学原理、多样统一、协调与对比、对称与平衡、均衡、韵律和节奏及统筹安排等原则。植物造景中存在的问题包括绿量与景观质量不成比例、植物造景中形式与功能的冲突、没有对植物造景的效果进行正确预见。最后提出了解决对策。现代城市园林植物造景特色的探讨推荐 下载阅读CAJ格式全文 下载阅读PDF格式全文【英文篇名】 Research on the Characteristic of Landscape Plants Design in Modern Urban【作者中文名】 韩远彬;【作者英文名】 HAN Yuan-bin (Lishui University; Lishui; Zhejiang323000);【作者单位】 丽水学院应用生物系 浙江丽水;【文献出处】 安徽农业科学, Journal of Anhui Agricultural Sciences, 编辑部邮箱 2005年 08期期刊荣誉:中文核心期刊要目总览 ASPT来源刊 CJFD收录刊【关键词】 园林植物; 造景; 特色;【英文关键词】 Landscape plant; Design; Characteristic;【摘要】 通过对城市公园、道路、单位附属绿地和居住区植物造景的生态效益、生态景观、造景原则和特色等的剖析,指出了城市园林植物造景的发展方向。【英文摘要】 In this paper, the ecological benefits, ecological landscape, principle of design and characteristic in the urban park, the road, theunit accessoryand the inhabited district were analyzed, and the developingdirection oflandscape plants design in modern urban was pointed out.植物造景在现代城市景观设计中的应用推荐 下载阅读CAJ格式全文 下载阅读PDF格式全文【英文篇名】 The Application of Plant Landscaping in the Scenery Designing in Modern Cities【作者中文名】 武勇;【作者英文名】 Wu Yong;【作者单位】 太原市龙潭公园;【文献出处】 山西科技, Shanxi Science and Technology, 编辑部邮箱 2005年 05期期刊荣誉:ASPT来源刊 CJFD收录刊【关键词】 植物; 造景; 景观; 设计; 园林; 绿化;【英文关键词】 plant; landscaping; design; garden; afforestation;【摘要】 文章通过园林中植物造景的现状,结合现代城市景观设计中建筑与植物造景、室内庭园与植物造景、水体与植物造景、道路与植物造景等例子,说明植物造景在现代城市景观设计中的应用,提高植物造景的科学性与艺术性。【英文摘要】 This article, after analyzing the current situation of plant landscaping in gardens and considering the examples of scenery designing in modern cities in which plant landscaping is used in architecture, chamber gardens, water and roads, has explained the application of plant landscaping in the scenery designing in modern cities to improve its artistry.论园林中的植物造景推荐 下载阅读CAJ格式全文 下载阅读PDF格式全文【作者中文名】 李金明;【作者单位】 怀化市钟坡风景名胜管理处 湖南怀化;【文献出处】 湖南农业科学, Hunan Agricultural Sciences, 编辑部邮箱 2004年 04期期刊荣誉:ASPT来源刊 CJFD收录刊【关键词】 园林艺术; 景观; 植物造景;【摘要】 植物造景有着独特的时空序列节奏和自然美,并有其独立的景观和表现形式。园林植物通过与其它造园景观材料的有机结合,可营造出高深的意境和地方特色。没有植物造景就没有园林艺术。浅谈现代园林中的植物造景方法推荐 下载阅读CAJ格式全文 下载阅读PDF格式全文【作者中文名】 周景斌; 吕宁; 李小明;【作者单位】 杨凌职业技术学院; 杨凌职业技术学院 陕西杨凌 712100; 陕西杨凌 712100; 陕西杨凌;【文献出处】 陕西林业科技, Shanxi Forest Science and Technology, 编辑部邮箱 2004年 04期期刊荣誉:ASPT来源刊 CJFD收录刊【关键词】 植物; 观赏特性; 生态要求; 艺术原则; 造景方法;【摘要】 本文介绍了植物的观赏特性、植物造景时须满足的生态要求和遵循的艺术原则以及现代园林中的植物造景方法。现代滨水居住小区绿化造景探析推荐 下载阅读CAJ格式全文 下载阅读PDF格式全文【作者中文名】 陈敏; 秦华;【作者单位】 西南农业大学园艺园林学院;【文献出处】 城市开发, Urban Development, 编辑部邮箱 2003年 05期期刊荣誉:ASPT来源刊 CJFD收录刊【摘要】 现代城市房地产的快速发展推动着小区建设的发展,促进现代人对更加清新的环境空间的追求。滨水绿带具有先决的良好环境空间,因此,滨水居住小区即成为现代房地产开发的热点。本文从滨水绿带的开发条件、环境条件等优势出发,结合“以人为本”的原则,从生态科学的角度探讨了现代滨水小区的绿化与景观营建应注意的问题,并提出相应的建议。居住区绿化植物配置与树种选择推荐 下载阅读CAJ格式全文 下载阅读PDF格式全文【作者中文名】 加林;【文献出处】 湖南林业, , 编辑部邮箱 2006年 05期谈城市园林中的植物配置原则推荐 下载阅读CAJ格式全文 下载阅读PDF格式全文【英文篇名】 Discussion on design principles for plant disposition in urban landscape architecture【作者中文名】 刘谊; 凌玲; 罗明哲;【作者英文名】 LIU Yi~1; LING Ling~2; LUO Ming-zhe~3( Environmental Art Design; Zhengzhou University of Light Industry; Zhengzhou 450002; China; Environmental Art Design; Shenyang University of Aeronautical Industry; Shenyang 110161; Institute of Forestry Science; Dalian 116039; China);【作者单位】 郑州轻工业学院环境艺术设计系; 沈阳航空工业学院环境艺术设计系; 大连市林业科学研究所 河南郑州; 辽宁沈阳; 辽宁大连;【文献出处】 山东建筑工程学院学报, Journal of Shandong University of Architecture and Engineering, 编辑部邮箱 2006年 02期期刊荣誉:ASPT来源刊 CJFD收录刊【关键词】 园林; 植物景观; 植物配置;【英文关键词】 landscape architecture; plant landscape; plant disposition;【摘要】 合理的植物配置是科学与艺术的完美结合,本文根据城市园林建设中存在的不足,对植物配置概念进行完善,并分析了配置原则,认为城市园林植物群落的构建应结合植物的形态、习性以及设计要求,遵从“生态学”、“艺术性”、“功能性”原则,才能实现生态、观赏、文化等多种功能,获取最佳综合效益。【英文摘要】 Rational plant disposition is the combination of science and on the problems existed in development of urban landscape architecture,the concept of plant disposition is renewed,and the design principle of plant disposition is is put forward that plant disposition should be carried out in accordance with ecologic,artistic and functional principle,in order to design the plant community having various functions and getting the most benefits.
CATLION123
植物保护专业本科毕业论文(设计)开题报告
紧张又充实的大学生活即将结束,大学生们马上就要开始最难熬的毕业设计阶段,而我们做毕业设计之前要先写好开题报告,快来参考开题报告是怎么写的吧!以下是我整理的植物保护专业本科毕业论文(设计)开题报告,欢迎大家借鉴与参考,希望对大家有所帮助。
毕业论文题目:
菌寄生真菌纤细齿梗孢蛋白酶基因的克隆与表达
姓名: xx 学号: xxxx
年级: xxx 专业: 植物保护
指导教师:姓名 xxx 职称 教授
学科 植物病理
山东农业大学教务处
20XX年x月x日
一、选题依据(拟开展研究项目的研究目的、意义)
菌寄生(Mycoparasitism)是发生在菌寄生真菌与寄主真菌之间的一种寄生方式,是自然界普遍存在的一种真菌与真菌之间的相互作用。一直以来,生物间相互作用及信号传导的分子机制,是当今生命科学研究的热门。利用菌寄生真菌与寄主真菌作为研究的模式系统来揭示生物相互之间的相互作用机制有重要理论和实践意义。李多川(Li,1996)先生发现纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)和串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme)的菌寄生关系以来,我们实验室试图通过研究纤细齿梗孢和串珠镰刀菌,来建立菌寄生真菌与寄主真菌相互作用机制研究的模式系统,从而揭示菌寄生真菌与寄主真菌之间相互作用的分子机制。纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)是串珠镰刀菌的一种重寄生真菌,该菌是一种接触性活体重寄生菌,离体试验发现其分生孢子只有在串珠镰刀菌细胞壁提取物刺激下才能萌发。这说明两者之间的重寄生关系是建立在二者识别与互作的分子机制上的(Li,2004)。在纤细齿梗孢和串珠镰刀菌相互作用过程中,几丁质酶、蛋白酶等细胞壁裂解酶可能起到重要作用。其中,蛋白酶在木霉属菌寄生真菌中的功能已经得到初步证明,而纤细齿梗孢的蛋白酶的研究还未见报道。因此,克隆纤细齿梗孢蛋白酶编码基因对于从分子水平上研究重寄生真菌和寄主识别和互作机制有着重要的意义。
二、文献综述内容(在充分收集研究主题相关资料的基础上,分析国内外研究现状,提出问题,找到研究主题的切入点,附主要参考文献)
纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)是李多川教授分离得到的一种活体营养接触型菌寄生真菌[1~3],其寄主包括Fusarium moniliformeAlternaria alternata等。近年来,我们实验室一直在努力以其为基础研究菌寄生真菌与寄主真菌之间的相互作用的分子机制。经过多年的研究,人们渐渐认识到真菌细胞壁蛋白在细胞与外界的相互作用过程中扮演着重要的角色。细胞壁蛋白研究已经成为生物间相互识别机制研究的热点。鉴于以上原因,我们实验室成功分离纯化了纤细齿梗孢的寄主之一Alternaria alternata菌丝细胞壁上的一种特异性糖蛋白——凝集素,并初步证明其在和孢子吸附过程中起到识别因子的作用[4]。近年来,菌寄生真菌细胞壁裂解蛋白酶在菌寄生过程中的作用被人们逐渐重视起来。克隆和表达菌寄生真菌的蛋白酶编码基因变得很有意义。本研究试图以菌寄生真菌纤细齿梗孢(Olpitrichumtenellum)作为研究材料克隆了其蛋白酶基因。根据氨基酸的保守序列设计兼并引物,然后采用RT-PCR和RACE是一个较为快速、简单和高效的方法。本实验根据同源保守序列设计兼并引物,通过RT-PCR及RACE-PCR的方法,克隆了蛋白酶的编码基因的全长cDNA序列,并对该基因进行了序列分析,为后续试验打下了基础。
由于Olpitrichum tenellum在离开寄主的人工培养基中很难生长,纯化其蛋白酶变得非常困难。因此,我们需要使用外源蛋白表达系统得到蛋白,进一步研究其性质,从而搞清楚其在重寄生过程中的作用。在过去的几十年间,随着DNA重组技术的不断发展,通过构建遗传工程菌株,人们可以较容易地使各种各样的天然酶的基因在微生物系统中高效表达,从而在很大程度上摆脱对天然酶源的依赖。
基因工程的表达系统有原核表达系统和真核表达系统两大类。在原核表达系统中,大肠杆菌表达系统是目前了解最深入,实际应用最为广泛的表达系统。与其他表达系统相比,大肠杆菌表达系统具有遗传背景清楚、目标基因表达水平高、培养周期短、抗污染能力强等特点。在基因表达技术中占有重要的地位,是分子生物学研究和生物技术产业化发展进程中的重要工具[5]。
Pichia pastoris基因表达系统经过十几年发展,已基本成为较完善的外源基因表达系统,具有易于高密度发酵,表达基因在宿主基因组中稳定整合,能使产物有效分泌并适当糖基化,培养方便经济等特点。利用强效可调控启动子AOX1,已高效表达了HBsAg、TNF、EGF、破伤风毒素C片段、基因工程抗体等多种外源基因[6],证实该系统是高效、实用、简便,能提高表达量并保持产物生物学活性的外源基因表达系统。表达系统在生物工程领域将发挥越来越重要的作用,促进更多外源基因在该系统的高效表达,提供更为广泛的基因工程产品[7]。
我们已经分离到蛋白酶的编码基因,本研究中将该基因的去掉信号肽序列的正确阅读框融合于原核表达载体pET-22b(+)和毕赤酵母表达载体pPIC9K上,分别转化 BL21及Pichia pastoris GSxx5,以期在这些菌株中有效表达该基因的编码产物,从而为以后功能研究打下基础。
1 李多川.1998.菌寄生真菌分子生物学研究进展.吉林农业大学学报,20:37~65.
2 21.李多川.1998.菌寄生真菌分子生物学研究进展.微生物学通报,25:345~347.
3 .李多川,沈崇尧.1997.菌寄生菌物与寄主菌物相互作用的研究进展.西北农业学报,6:94~98.
4 张成省,李多川,孔凡玉. alternata菌丝细胞壁凝集素的纯化与特性研究.植物病理学报,35(2):141~147.
5 .xx.何诚,朱运松.1998.甲醇营养型酵母表达系统的研究进展.生物工程进展,18:7~xx.
6 彭毅,杨希才,康良仪.2000.影响甲醇酵母外源蛋白表达的因素.生物技术通报,4:33~36.
7 韩雪清,刘湘涛,尹双.2003.毕赤酵母表达系统.微生物学杂志,3:35~40.
三、研究方案(主要研究内容、目标,研究方法、进度):
1、研究内容:
本课题选择纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)做为研究对象,通过RT-PCR及RACE技术分离克隆了其丝氨酸蛋白酶基因,并进行原核及真核表达,并对其的性质进行了研究,为进一步的研究工作打下基础。
2、研究的目标:
克隆了纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)的丝氨酸蛋白酶基因,进行原核及真核表达,并对其的性质进行了研究。
3、研究方法:
将纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)接种到LB培养基上,培养14个小时后,收集菌丝,然后采用总Trizol法提取RNA。再从GenBank数据库中搜索到大量的蛋白酶氨基酸序列,并根据同源性进行分类,分别设计兼并引物。再通过RT-PCR、3’-RACE、5’-RACE获得全长cDNA、DNA克隆,并将其连接到载体上,然后采用电击法将将重组质粒转入到全长cDNA、DNA克隆中,通过透析纯化蛋白酶,最后研究其特性。
四、研究进度:
20xx年5月23日~20xx年5月29日 整理收集资料,并跟着研究生学习基本实验技术。
20xx年5月30日~20xx年6月18日 提取RNA,设计引物、全长cDNA、DNA克隆 。
20xx年6月19日~20xx年7月15日 转化大肠杆菌、毕赤酵母表达,获得纯纯产物,并研究其特性。
20xx年3月~20xx年6月 对实验结果不理想的实验重做,整理实验数据,完成毕业论文,并准备毕业答辩。
五、技术路线:
收集菌丝
总RNA提取
同源序列 设计引物
特性研究
RT-PCR、
3’-RACE、5’-RACE
纯化表达产物
全长cDNA、DNA克隆 转化大肠杆菌、毕赤酵母
四、进程计划(各研究环节的时间安排、实施进度、完成程度)
20xx年5月23日~20xx年5月29日 整理收集资料,并跟着研究生学习基本实验技术。完成实验的1%。
20xx年5月30日~20xx年6月18日 提取RNA,设计引物、全长cDNA、DNA克隆。完成实验的50%。
20xx年6月19日~20xx年7月15日 转化大肠杆菌、毕赤酵母表达,获得纯纯产物,并研究其特性。完成实验的95%。
20xx年3月~20xx年6月 对实验结果不理想的实验重做,整理实验数据,完成毕业论文,并准备毕业答辩。完成100%。
五、导师对文献综述的评语
签字:
20xx年xx月xx日
六、专业意见
专业主任签字:
20xx 年 月 日
七、学院意见
学院(章): 负责人签字:
20xx年xx月xx日
摘要:
针对目前浙江农林大学植物保护研究法实验教学方法、内容及手段等方面存在的一系列问题,提出了相关改革对策:优化实验课程内容,整合实验模块,学生自行设计实验方案等教学方法和手段的改革,以及课程考核方式和时间安排的调整,旨在培养学生的科研兴趣及创新能力。
关键词:
目前,国内外很多农业院校的植物保护专业均开设了昆虫研究法和植病研究法课程。为优化本科培养方案,浙江农林大学通过调整教学大纲,将植病研究法、昆虫研究法和农药研究法合并成一门植物保护研究法课程。植物保护研究法是植物保护专业重要的专业限选课程之一,是植物保护研究的重要组成部分,也是培养和提高学生专业实验技能和学习兴趣的重要课程,是一门专业性、实践性很强的实验学科。通过这门课程的教学,能使学生掌握植物保护研究的基本方法及基本原理,培养植物保护研究常规操作能力,以及查阅资料、设计实验方案和实际操作能力,提高学生的逻辑思维、整理资料、总结归纳和论文撰写的能力。笔者分析了浙江农林大学植物保护研究法实验教学中存在的问题,提出教学改革内容,并总结了改革成效。
1.实验教学存在的问题
传统实验教学的弊端传统实验教学的主要特征是“灌输式”“填鸭式”,学生在2个小时的实验过程中就是简单地按照实验指导书和实验大纲中的实验方法和步骤依葫芦画瓢,实验完成后,又按照统一的模式填写实验报告。在整个实验过程中,学生无需独立思考和分析,更谈不上发挥创新能力了。因此,很难让学生对实验产生兴趣,培养学生的创造性思维就更无从谈起了。虽然这种传统实验模式简明、清晰,有利于学生对相关结论的认可、理解和记忆,也有利于教师对整个教学过程的控制,教师和学生很轻松愉快地就能完成实验教学任务。学生走上工作岗位后,传统实验教学的弊端立即显现。学生缺乏设计实验的能力,在实验过程中缺乏发现问题、分析问题和解决问题的能力,实验后缺乏正确分析实验结果的能力。因此,传统的实验教学模式急需改革。
实验教学内容系统性不强植物保护研究法是植物保护专业本科学生的一门专业课程,其涉及的内容有昆虫研究法、植病研究法和农药研究法。在以往的实验课程中,只是简单地把这3门课的实验合在一起上,并没有把内容紧密联系在一起,如昆虫实验时,指导教师一般是教授昆虫学科的教师;而在进行植病实验时,则由讲授植病学科的教师指导。这样的实验模式难以使植物病虫害系统联系起来,学生学习专业知识不够系统和深入,容易造成理解上的片面性和孤立性,不利于掌握该专业的系统知识和技能。
实验考核不科学以往实验课程成绩评定的主要依据是实验报告,而每次实验课结束后,学生递交的实验报告只是把实验大纲(包括实验口的、原理、仪器与试剂、内容及方法)原文不动地抄一遍,实验结果更是千篇一律,这样实验就变成了预演过程,学生在实验中缺乏思考,不利于培养发现问题、提出问题、分析问题和解决问题的能力,背离了实验课教学的初衷。同时,还会导致每位学生的实验成绩差异微乎其微,不具有良好的区分度。
2.教学改革内容
重视教学环节在以往的实验课程中,实验教学所需要的实验用具和材料大多数都是实验教辅人员提前准备,导致他们的工作量非常大。让学生参与实验材料的准备和管理,一方面提高了教辅人员的工作效率;另一方面可以让学生对实验过程有全面了解,获得整个科研实践过程的训练,从而养成好的实验习惯,在未来的科研工作中做到计划周密、有条不紊地安排和实施实验计划。同时,在实验教学过程中,必须教育学生认真操作、仔细观察、实事求是地记录实验结果,并对实验进行科学分析。一日_发现弄虚作假的学生,一定要严厉批评,同时帮助他们分析失败的原因,找出解决的方法,有条件的情况下,让其重新做实验,让学生充分意识到科学研究允许失败,但是不能有半l从虚假。提高学生的实践能力实践教学是培养和训练学生实践操作能力,独立分析问题、解决问题能力的重要手段,尤其对于学生创新能力的培养,具有其独特的地位和作用。该项口分别以某种农作物病虫害为主轴展开一系列的实践性实验教学,要求学生自主设计实验和执行各项实验内容,指导教师负责答疑和提供技术帮助。学生通过自己分组、调查、取样、鉴定、查阅资料、讨论制订实验方案和动手实验等一系列步骤,不仅可以很好地将课堂上所学的理论知识与实践相结合,而且还有助于提高自学能力、实践能力和团队协作能力,进一步培养科学思维和创新能力。优化实验教学内容结构将整个实验课程设置成一个综合性的大实验:分别以某个农作物上的病虫害发生规律及防治措施贯穿整个课程。将口前昆虫研究法的昆虫标本的采集与制作、昆虫人工饲养技术、昆虫生态学研究方法、昆虫生理生化研究方法、昆虫分子生物学研究方法和害虫综合治理研究方法5个实验和植病研究法的植物病害调查、植物病原菌分离与鉴定技术、植物病原菌分子生物学鉴定技术、植物病原真菌遗传转化技术和植物病害综合治理技术5个实验合并成1个综合性大实验,将植物病虫害研究以故事的形式紧密地整合在一起,让学生将课堂知识与田间实际应用有机地联系在一起,加深对理论知识的理解,提高学习兴趣。整个实验就是以具体的作物病虫害发生为时间轴,具有很强的连贯性和系统性,学生只有认真完成每一个实验,才能很好地保证后续实验的顺利进行,有助于增强学生的责任感和团队合作精神,同时也改变了学生实验报告千篇一律的`现象。改革成绩评定方式实验课成绩一方面是对学生实验完成好坏的肯定,另一方面也对学生起到了一定的督促作用。为了做到对学生的全面评价,实验成绩除实验报告和考勤成绩外,应将实验过程中学生的学习主动性、动手操作能力、实验结果记录规范性量化纳入成绩考核。在实验过程中,教师应主动观察并记录每个学生的实际动手、操作能力,量化后按一定比例记入总成绩,对那些既有独立操作能力,又有创新意识的学生,适当给予创新学分。实验过程中,学生是否遵守实验室规则、是否具有团队合作精神,实验结束后,学生是否打扫卫生、是否清洗实验器材等,这些看似小问题,但也体现着一个人的品质和素养,做得好的学生也可以适当加分。
3.改革成效
提高学生的专业技能及其对专业知识重要性的认识学生能在同一时间完成植病研究法、昆虫研究法和农药研究法3门实验课程,体现了实验课程很强的连贯性和系统性。学生在实践过程中将这3门课程的相关内容紧密、有机地联系起来,对植物病虫害防治有了更深入的认识,同时也提高了学生的专业技能及其对专业知识重要性的认识。在实验的过程中,强调把学生的动手能力放在首位,让学生更多地参与到实验中,切身体会到所学专业的意义。
培养学生发现、提出、分析和解决问题的能力植物保护研究法实验教学模式具有系统化和整体化特点,同时涉及昆虫研究法、植病研究法、农药研究法等相关学科课程。在实验过程中,学生在对病虫害的认知及其防治等问题的处理上始终处于主体地位,在独立思考、查找资料、咨询专业教师、综合分析之后,拟定出具体的处理方案,能够融会贯通地掌握植物保护学科的理论知识和基本实践技能。
提高指导教师的业务水平新的实验教学模式综合运用了3门相关课程的理论知识,加强了课程的综合实践环节,因此指导教师自身的知识面、操作技术、实践应用和协调能力都需要提升。所以,这种实验教学模式促使教师在教学过程中同学生一起不断学习,丰富专业理论知识,完善专业实践体系,提高发现、提出、分析和解决问题的能力,了解和掌握学科及相关学科的发展动态、研究的新进展、出现的新技术,从而提高了指导教师的业务水平。
4.结语
植物保护研究法在植物保护专业2013级和2014级本科生实验课程教学中进行了实践,通过问卷调查,95%的学生认为在实验过程中有较多的动手机会,激发了自己对实验的兴趣,提高了自己分析和解决问题的能力。因此,认为该教学方法可以发挥学生的主观能动性、拓展学生的科研思路、激发学生的创新创造力和提高学生的独立应用实践能力,具有良好的教学效果。
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