和胃调中汤对大鼠胃动力及胃肠激素的影响

作者：李君，艾瑛，喻国华，黄军兵

【摘要】 目的观察和胃调中汤对大鼠胃动力及胃肠激素的影响。方法通过观察大鼠胃内色素相对残留率，观察和胃调中汤对胃排空作用的影响，通过测定血中胃动素(motilin，mtl)、胃泌素(gastrin，gas)、生长抑素(somatostatin，ss)、p物质(substance，sp)和血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide，vip)，判定和胃调中汤对大鼠胃肠激素的影响。结果和胃调中汤使胃内色素相对残留率下降，也可以使大鼠血中vip水平下降、sp水平下降、ss水平升高、mtl水平升高和gas水平升高。结论和胃调中汤具有促进胃排空和调节胃肠激素的作用。

【关键词】 和胃调中汤; 胃肠运动; 胃肠激素; 大鼠

　　abstract：objectiveto observe the effects of hewei tiaozhong decoction on gastrointestinal movement sthe relative remain rate of intragastric dye was investigated and gastrointestinal hormones in rats , mlt,gas,ss,sp and vip in rat plasm were shewei tiaozhong decoction lowered relative remain rate of intragastric dye in rats and levels of vip,sp,and increased the levels of ss,mtl and gas .conclusionhewei tiaozhong decoction is able to promote gastric motility and regulate gastrointestinal hormones.

　　key words：hewei tiaozhong decoction; gastric movement; gastrointestinal hormones; rat

　　笔者多年临床使用和胃调中汤 治疗 慢性胃炎，胃食管反流病，功能性胃肠病等疗效满意，这些疾病的发生均与胃动力及胃肠激素密切相关，本研究旨在观察和胃调中汤对大鼠胃动力及胃肠激素调节情况。

　　 1 材料与仪器

　　1.1 药物和胃调中汤(姜半夏、黄芩各10 g，党参、枳壳、丹参、莱菔子、白芍、白术各12 g，茯苓、蒲公英、海螵蛸各15 g，黄连5 g，干姜、吴茱萸各3 g)制备：所有药物均购于江西中医药高等专 科学 校附属 医院 药房，经中药教研室鉴定，称取和胃调中汤30付，加8倍量水，1.5 h，煎煮两次，滤过，成为流浸膏，水浴继续浓缩至稠浸膏，真空干燥(80℃)得干浸膏。

　　1.2 动物sd大鼠，雌雄兼用，13周龄，200～220 g，由南昌大学医学院实验动物中心提供，合格证号：scxk-2008-0004。

　　1.3 仪器与试剂葡聚糖蓝-2000(pharmacia公司)。wfz 800-dz型紫外可见分光光度计(北京第二光学仪器厂)。n682b型r计数器(中科院原子能研究所)，tgl-16g型冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂)。edta、抑肽酶、胃动素放免试剂盒、胃泌素放免试剂盒(解放军总医院科技 发展 中心东亚放免所提供)，血管活性肠肽放免试剂盒、p物质放免试剂盒、生长抑素放免试剂盒(北京海科锐生物技术中心提供)，其他试剂如丙酮、冰醋酸、醋酸乙酯、乙醚等均为国产分析纯试剂。

　　 2 方法

　　2.1 和胃调中汤对大鼠胃排空作用的影响30只大鼠随机分为正常对照组和和胃调中汤组，大鼠连续灌药7 d，剂量为成人量7倍，对照组给水。实验前，禁食不禁水24 h，末次灌药后1 h，灌入2%的葡聚糖蓝-2000 0.5 ml，经20 min后，开腹取出胃，沿胃大弯剪开，将胃内色素残留物充分洗于4 ml去离子水中，4 000 r/min离心15 min，取上清液，用wfz 800-dz型紫外可见分光光度计在620 nm波长测吸光度即为胃内色素残留量吸光度，求出和胃调中汤和对照组吸光度均值的百分比即为两组的胃内色素相对残留率。

　　和胃调中汤相对胃内残留率(%)=和胃调中汤的胃内色素残留吸光度/对照组胃内色素残留吸光度均值×100%

　　2.2 和胃调中汤对大鼠胃肠激素的影响30只大鼠随机分为对照组和和胃调中汤组，大鼠连续灌药7 d，剂量为成人量7倍，对照组给水。实验前，禁食不禁水24 h，末次灌药后1 h，腹主动脉采血5 ml。4 ml置入预先用60 μl 10%edta和80μl抑肽酶抗凝的试管中，颠倒混匀后静置，1 ml放入无任何抗凝的试管中，均静置1 h，4 000 r/min离心15 min，分离出血浆和血清，-20℃保存备用。

　　血样的处理：mtl测定直接用血浆，gas测定直接用血清，vip、p物质、ss用血浆需要进一步提取。

　　vip血浆的处理：1 ml血浆缓慢加入4℃预冷的丙酮2 ml，混匀，低温以1 500 r/min离心15 min，将上清液倒入另一试管中，将盛有上清液的的各管置入凉风下，将丙酮吹干后所余的液体用冷冻抽干机抽干，样品置于-20℃保存。

　　p物质的血浆处理：1 ml血浆缓慢加入4℃预冷的丙酮2 ml，混匀，低温离心2 000 r/min离心20 min，取上清液加入4 ml 4℃预冷石油醚，混匀后再次离心，吸弃上相，下相用凉风将残余的丙酮吹掉后，所余的液体用冷冻抽干机抽干，样品置于-20℃保存。

　　ss血浆的处理：0.5 ml血浆加入50 μl冰醋酸，混匀，加入2 ml 4℃预冷的丙酮，边滴边摇，最后在旋转混匀器上混匀，4℃下离心4 000 r/min 15 min，将上清液倒入另一试管中，该试管预先用0.1%白明胶涂层，在60 ℃下烘干处理过，沉渣中加入80% 4℃预冷丙酮1 ml摇匀后，再次离心1 500 r/min 10 min，合并两次上清液，加蒸馏水0.5 ml、醋酸乙酯-乙醚合液(3∶1)3 ml，加塞，上下振荡约50次，静置分层，吸去上层有机溶剂，保留水相。将水溶液管置凉风下将有机溶剂吹掉后所余液体用冷冻抽干机抽干，样品置于-20℃保存。vip和ss还需要做回收实验：取vip和ss的标准品，用缓冲液稀释成为5 120 pg/ml。然后倍比稀释成640 pg/ml，取试管加入浓度为640 pg/ml的ss标准液100 μl，再加入无激素人血浆500 μl混合，按血浆标本法与标本管同时提取。

　　2.3 统计方法实验数据以±s表示，经spss10.0软件统计，组间进行t检验。

　 　3 结果

　　和胃调中汤对大鼠相对胃内色素残留率的影响见表1，对大鼠血中胃肠激素的影响见表2。表1 和胃调中汤对大鼠相对胃内色素残留率的影响表2 和胃调中汤对大鼠血中胃肠激素的影响

　 　4 讨论

　　胃排空异常所导致的紊乱性疾病临床较为常见，胃排空异常可分为排空加速和排空延迟,而以胃排空延迟为多见。许多疾病可以导致胃排空延长,尤其是消化系统疾病。和胃调中汤为半夏泻心汤合左金丸加减，多年临床观察发现，其 治疗 因胃肠运动功能障碍导致的疾病，如慢性胃炎、胆汁返流性胃炎、胃溃疡等有很好的疗效。方中柴胡疏肝解郁,疏泄肝胆气机;枳壳行气宽中消胀，与柴胡配伍，一升一降，共同调畅中焦气机;白芍养阴柔肝，缓急止痛;黄芩、黄连苦降泻热开痞以和阳;半夏、干姜辛开散结温热以和阴;以上四药相伍，寒热互用以调和阴阳，苦辛并进以顺其升降。黄连与吴茱萸为左金丸，既能降逆，又能疏肝调达;白术、茯苓健脾化湿;丹参、蒲公英活血解毒;莱菔子引气下行;海螵蛸制酸收涩;诸药合用，共奏疏肝利胆、泄热和胃之功。 现代 临床研究表明,半夏泻心汤对呕吐、腹泻、便秘、消化不良等消化系统疾病有明显疗效，提示该方对胃肠动力功能具有调节作用。本试验以胃内色素相对残留率为指标，观察和胃调中汤对大鼠胃排空作用的影响。结果显示，和胃调中汤有促进胃排空作用。胃动力调节因素主要包括：神经性调节、体液因素的调节。体液调节主要为胃肠激素的调节，胃肠激素是胃肠调控的重要因素。其发挥作用主要通过两种途径：其一为通过血液循环以内分泌形式作用于胃肠平滑肌细胞受体;其二为经胃肠肽神经释放的递质，对胃肠运动起调节作用。本试验通过观察大鼠血中与几种胃肠运动有关的激素水平变化，进而分析影响胃动力的可能机制。最近证明，mtl可诱发强烈收缩和小肠明显的分节运动，加速胃的固体和液体排空[1]。实验已证明嗜酸性粒细胞和巨噬细胞可产生p物质，p物质在外周对肠胃纵肌和环肌有双重收缩效应，具有促进胃肠平滑肌收缩的作用[2]。ss在胃和结肠广泛存在，通过与这些特定的、高亲和力的膜结合受体相结合而发挥作用。vip在体内分布很广泛，其中以神经系统和胃肠道浓度最高。在胃肠道主要分布于粘膜固有层和肌层神经纤维[3]。gas是研究最早、最多的胃肠激素。它主要由胃窦及小肠粘膜的g细胞分泌。对消化系统除刺激胃酸分泌外，还有促胃肠运动的作用。本实验结果显示，和胃调中汤可以使大鼠vip水平下降、sp水平下降、ss水平升高，mtl和gas升高，明显优于对照组(p<0.05)，实验证明和胃调中汤具有促胃动力作用。

【 参考 文献 】
　　[1] 王志刚，刘凤林.胃动素受体的研究进展[j].国外医学·药学分册，2001，28(6)：344.

　　[2] 石 欣，宿士智，高乃荣.急性坏死性胰腺炎时p物质在肠壁的表达及与肠黏膜通透性之间的关系[j].