淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产的疗效分析

摘　要：目的：探讨采用配偶淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产（RSA）的临床疗效。方法：将临床筛查确诊为封闭抗体缺乏所致的复发性流产患者84例随机分为治疗组和对照组各42例，治疗组采用其配偶外周血淋巴细胞进行主动免疫治疗，对照组采用传统保胎治疗（黄体酮加HCG），比较两组的妊娠结局。结果：治疗组妊娠成功33例，成功率为78.6%，其中足月分娩16例（48.5%），妊娠中期17例，9例流产；对照组妊娠成功17例，成功率为40.5%，其中足月分娩6例（35.3%），妊娠中期11例，25例流产，两组比较，差异有统计学意义（P＜0.01）。免疫治疗后，32例患者封闭抗体转为阳性，其中妊娠成功28例，成功率为87.5%；10例封闭抗体仍为阴性者，妊娠成功5例，成功率为50.0%，两组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论：淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产安全、有效，具有可靠的临床应用价值。

关键词：淋巴细胞；免疫治疗；复发性流产；封闭抗体
    连续自然流产2次或2次以上，称为复发性流产（Recurrent Spontaneous Abortion，RSA），发生率占育龄妇女的0.4%～0.8%，是妇产科常见并发症^[1]。其病因复杂，除染色体异常、生殖系统结构畸形、内分泌失调以及生殖道感染、自身免疫外，封闭抗体缺乏也是引起复发性流产的重要原因之一。另有近50%的复发性流产原因不明，其中又有40%～60%的不明原因复发性流产与免疫因素有关^[2]。目前，采用淋巴细胞主动免疫治疗RSA成为热点，但关于主动免疫的作用机制至今尚未完全清楚，国内外对主动免疫治疗RSA再次妊娠成功率的报道也不一^[3-5]。2009年6月～2011年6月，对42例临床筛查确诊为封闭抗体缺乏所致的RSA患者，采用淋巴细胞主动免疫进行治疗，取得满意疗效。现报告如下。

1 资料与方法

1.1  一般资料：选取广西医科大学第一附属医院2009年6月～2011年6月门诊及住院连续自然流产2次或2次以上，且临床筛查确诊为封闭抗体缺乏所致的RSA患者84例，随机分为治疗组和对照组各42例。治疗组采用淋巴细胞主动免疫进行治疗，对照组采用传统保胎治疗。治疗组年龄20～42岁，平均29.5岁；有2次自然流产者28例，3次流产8例，4次以上流产6例。对照组年龄22～43岁，平均30.5岁；有2次自然流产者30例，3次流产7例，4次以上流产5例。两组在年龄、流产次数等方面比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。治疗前夫妻双方均筛查梅毒、HIV、乙型肝炎、丙型肝炎，且均为阴性。

1.2  方法

1.2.1 流产的病因筛查及方法：本研究经本院伦理委员会批准，所有研究对象均签署知情同意书。所有RSA 患者符合以下条件：①早期自然流产史≥2次，无活产史；②排除生殖道畸形和形态学异常；③抗体ASAb（-），EmAb（-），AcpAb（-）；④内分泌检查PRL、FSH、LH、E₂、P、T、T₃、T₄、TSH及空腹血糖正常；⑤封闭抗体（-）；⑥双方行TORCH（包括巨细胞病毒、风疹病毒、单纯疱疹病毒和弓形体）、衣原体、支原体等检查均为阴性；⑦夫妇双方染色体检查正常，无家族遗传病史；⑧男方精液分析正常；⑨治疗前3个月未使用过调节免疫功能药物，未经任何免疫治疗。

1.2.2 治疗方法：对照组采用传统保胎治疗（黄体酮加HCG）。治疗组采用淋巴细胞主动免疫治疗法：抽取患者丈夫静脉血10 ml，在无菌条件下分离淋巴细胞，将淋巴细胞悬液装于注射器中，给予患者前臂内侧行多点皮下注射，每支胳膊三针。3周治疗1次，4次为1个疗程。治疗1疗程后复查封闭抗体，若已转为阳性，即可考虑怀孕；确诊怀孕后，每隔2周注射丈夫的淋巴细胞1次，直至孕16周。若转阳后，仍未能怀孕，应每隔8周注射1次丈夫的淋巴细胞，以使封闭抗体不转阴。部分复查封闭抗体阴性者，应加强免疫治疗1个疗程后考虑怀孕。

1.2.3 统计学分析：采用统计软件SPSS 13.0进行统计分析，计数资料用χ²检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1  两组妊娠成功率比较：治疗组妊娠成功33例，9例流产，成功率为78.6%；对照组妊娠成功17例，25例流产，成功率为40.5%。两组妊娠成功率比较，差异有统计学意义（P＜0.01），治疗组明显优于对照组。详见表1。

表1  两组妊娠成功率比较（例）

2.2  封闭抗体阳性组与阴性组妊娠结局比较：主动免疫治疗后，32例患者封闭抗体转为阳性，其中妊娠成功28例，成功率为87.5%；10例封闭抗体仍为阴性者，妊娠成功5例，成功率为50.0%，两组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表2。

表2  封闭抗体阳性组与阴性组妊娠结局比较

3 讨论

    现代生殖免疫学认为，妊娠是半同种异体移植过程，胚胎所携带的来自父系的一半基因抗原对于母体而言属外来非己物质，可刺激母体的免疫系统，被母体免疫系统识别和杀伤。正常妊娠时，夫妇HLA抗原不相容，胚胎所携带的来自父系的一半基因抗原能刺激母体产生一种称为封闭抗体的IgG抗体，保护胚胎免受排斥，使胚胎继续存在^[6]。越来越多的证据表明，缺乏封闭性抗体可导致复发性流产的发生。目前，关于淋巴细胞主动免疫治疗RSA的作用机制尚未完全清楚。

    目前认为，人类白细胞抗原组织相容性及Th₁/Th₂的失衡与RSA密切相关。正常妊娠时以Th₂型细胞因子为主，而RSA患者血清则为Th₂型细胞因子占优势。采用配偶淋巴细胞主动免疫治疗RSA，可下调Th₁型细胞因子，提高母体Th₂型细胞因子，从而诱导免疫耐受。国内外对淋巴细胞主动免疫治疗RSA后妊娠成功率的报道不一。我国的彭桂元等对991例RSA患者行淋巴细胞主动免疫治疗，与对照组比较，成功率及治疗后的妊娠成功率均明显提高，提示淋巴细胞主动免疫治疗对RSA疗效确切^[7]。本研究结果显示，治疗组妊娠成功率为78.6%，明显高于对照组的成功率40.5%（P＜0.01）；主动免疫治疗后，32例患者封闭抗体转为阳性，封闭抗体阳性组的妊娠成功率明显高于封闭抗体阴性组（P＜0.05），与Nonaka等的研究结果相似^[4]。可见用配偶淋巴细胞主动免疫治疗对封闭抗体缺乏的RSA，其免疫反应强，无明显不良反应，能有效提高妊娠率，是一种简单可行、安全可靠的方法。

4 参考文献

[1] Szekeres-Bartho terone-mediated immunomodulation in pregnancy:its relevance to leukocyte immunotherapy of recurrent miscarriage[J].Immunotherapy,2009,1(5):873.

[2] 吴成平,张秦芳,白  静,等.淋巴细胞主动免疫综合治疗复发性流产疗效分析[J].中国妇幼保健,2010,25(5):687.

[3] 林其德.原因不明复发性流产的基础与临床研究进展[J].中华妇产科杂志,2003,38(8):481.

[4] Nonaka T,Takakuwa K,Ooki I,et s of Immunotherapy for Patients with Unexplained Primary Recurrent Abortions-Prospective Non-Randomized Cohort Study[J].Am J Reprod Immunol,2007,58(6):530.

[5] 秦卫兵,杨  宁,王一峰,等.不同来源的淋巴细胞主动免疫治疗原因不明复发性流产[J].广东医学,2010,31(2):64.

[6] 陆丽华,戴钟英.复发性流产的原因及治疗初步探讨[J].实用妇产科杂志,2001,17(4):213.