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第16卷第4期2006年8月 江苏大学学报(医学版) JournalofJiangsuUniversity(MedicineEdition) 葡萄糖脱氢酶法测定血清葡萄糖的方法学评价 周丽萍,姜旭淦,徐军 1 1 2 (江苏大学1.医学技术学院,江苏镇江212001;2.附属人民医院,江苏镇江212002) [摘要]目的:通过方法学试验对葡萄糖脱氢酶法测定血清葡萄糖方法进行评价。方法:用已建立的方法进行重 复性试验、回收试验、干扰试验、线性范围试验,并和HK法进行比较。结果:重复性试验批内CV值为,批间 CV值为,总CV值为;回收试验中回收样品I、Ⅱ、Ⅲ的回收率分别为105%,,平均为 ;干扰试验表明一般浓度的抗凝剂、防腐剂、尿酸、,与HK法比较 其相关性为Y=;。结论:[关键词]方法学评价;[.1]A[文章编号]1671-7783(2006)04-0301-03 Evaluationofglucosedehydrogenasemethod fordeterminationofserumglucose ZHOULi2ping,JIANGXu2gan,XU2jun 1 1 2 (;′sHospitalofJiangsuUniversity,ZhenjiangJiangsu,212002,China) [Abstract]Objective:Glucosedehydrogenase(GDH)、、;;anticoag2ulant、septic、. [Keywords]methodevaluation;glucosedehydrogenasemethod;glucose 临床生化检验方法的选择和评价,是临床生化 检验质量控制的重要基础工作。目前用于临床血糖 [1] 测定的主要方法是酶法,葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,GOD)法以其经济、实用而作为血糖测定的常规方法,己糖激酶(hexokinase,HK)法以其高准确度和高精密度而作为血糖测定的参考方法。GOD法的测定原理为 β2D2葡萄糖+O2H2O2+42AAP+酚 GOD 其颜色的深浅和葡萄糖含量成正比。 GOD法作为血糖测定的常规方法,第一步反应相当特异,GOD仅作用于β2D葡萄糖,特异性很高,由于过氧化物酶(peroxidase,POD)特异性较差,可作用于血中其他过氧化物,使结果偏高。 HK法的作用原理为: 葡萄糖+ATP HK 葡萄糖酸+H2O2G262P+ADPG262GA+NADPH POD G262P+NADP + G262PDH NADPH在340nm处光密度与血糖浓度成正比。 [基金项目]镇江市科技计划社会发展资助项目(SH2005028) [作者简介]周丽萍(1968-),女,江苏宜兴人,硕士,讲师,主要从事生物化学和分子生物学教学与研究。 302江苏大学学报(医学版)第16卷 HK特异性低,不仅作用于葡萄糖,也作用于其他单 糖生成相应的62磷酸衍生物,但由于62磷酸葡萄糖 脱氢酶(glucose262phosphatedehydrogenase,G262PDH)的高度特异性,选择性地作用于G262P,结果 司;HK法测血糖试剂盒购自复旦张江科技发展有 限公司;80mmol/L葡萄糖标准液等其他试剂均为国产试剂。方法 HK法按《全国临床检验操作规程》操作, [8] 十分准确,一直作为血糖测定的参考方法。 以上两种测定血糖的方法均需两种酶的参与,自从Merck公司制备了纯度较高的葡萄糖脱氢酶 (glucosedehydrogenase,GDH,),就建立起了具有高度特异的测定葡萄糖的GDH法。 ++ GDH能特异的催化β2D葡萄糖和NAD(NADP)生成D2葡萄糖酸内酯和NADH(NADPH)。 +β2D2葡萄糖+NADD2葡) [2] 报道的方法操作。 重复性试验按NCCLS评价要求选择含量为的标本三份,20次,另,,连续20天,将GDH法按梁志超等 [9] DH NADH(nm处增高的光密度可 2、无溶血、无脂,用GDH法测定求得血糖浓度,的血糖浓度备用。 基础样品:血清生理盐水回收样品1:血清葡萄糖标准液+生理盐水 回收样品Ⅱ:血清葡萄糖标准液+生理盐水 回收样品Ⅲ:血清葡萄糖标准液+生理盐水 每份样品作双份检测,结果取平均值。干扰试验采用NCCLS关于干扰试验评价方法,取血糖浓度为的血清分成8份,2份分别加入抗凝管与非抗凝管中,其余6管分别加入终浓度为20mg/L,60mg/L和100mg/L的尿酸样品及终浓度为10mg/L,30mg/L和50mg/L的胆红素样品,用GDH法测定血糖浓度。方法比较试验收集无溶血、无脂浊、无感染病人的血清标本20例,分别用GDH法和HK法做双份测定血清葡萄糖含量,记录并计算两法的测定结果。线性范围试验80mmol/L葡萄糖标准液用生理盐水分别稀释成浓度为0,和40mmol/L的葡萄糖应用液,用GDH法测定反应产物光密度。以葡萄糖浓度为横坐标,以其对应的光密度为纵坐标绘制曲线。2结果重复性试验 以对该酶(GDH)活性或其底物(葡萄糖)进行定量分析。用GDH法测定葡萄糖,不仅特异性高,且只需GDH一种酶参与,一步完成,用NAD作为辅酶的酶促效率尽管低于NADP,但NAD远比NADP价格便宜,也不影响其最终结果,因而被人 + + + + 们广泛接受和应用 [3] 。 GDH法目前被大多数人认为可以作为血糖测 定的参考方法,与GOD法和HK法比较,以其更简便、准确、经济而在国外被广泛应用 [4] ,但在我国由 于目前没有自主生产的GDH纯酶制品至今未推广使用。国外研究者主要从牛的心脏以及多种微生物的发酵、分离获得GDH。枯草芽孢杆菌来源的GDH以其产酶量高、纯化方便而被人们广泛地接受和应用。为了获得高产量的GDH,我们通过基因重组技术,从枯草芽孢杆菌成功克隆到GDH基因,转化至大肠杆菌进行表达 [5] ,并对培养条件进行优化,获 [6] 得了较高活力的GDH ,为自主开发GDH提供了 技术储备。我们利用酶促反应动力学原理,按照连续监测法的要求,建立了快速、简便、结果可靠的。本研究采用美国临床 实验室标准委员会(NCCLS)评价方案对葡萄糖脱GDH活性的连续监测法 [7] 氢酶法测定血清葡萄糖进行初步评价以确定其在临床诊断中的地位。1材料和方法材料 血清标本来自江苏大学附属人民医院18～70周岁的门诊及住院病人;葡萄糖脱氢酶()、NAD购自Sigma公 + 批内CV值为,批间CV值为,总 CV值为。该结果 第4期周丽萍,等.葡萄糖脱氢酶法测定血清葡萄糖的方法学评价303 回收试验 回收数据见表1。 表1回收试验的数据处理 样品基础样品回收样品Ⅰ回收样品Ⅱ回收样品Ⅲ平均回收率 测得浓度 mmol/L 方法测血糖随机误差的大小,在测定过程中尽量排除由于仪器、温度、试剂、标准品缺乏稳定性等因素,保持吸量、计时、混匀等操作的一致性,以排除这些因素带来的随机误差;回收试验用于测定实验方法的比例系统误差,这种误差常随分析物的浓度增加而增加,常因样品中其他物质与分析物竞争分析试剂并与之反应而引起。回收试验是发现分析方法比例系统误差的有效评价方法,通过测定GDH法测血糖的回收率,,;,产生的误差是恒定系统,误差的实际大小随干扰物的浓度而异。常以偏差(Bias)作为统计量,表示系统误差的大小,其值为干扰样品测定值与基础样品测定值之差;方法比较试验是用两种方法同时测定一批标本计算出两种方法间测定结果的差异,以此来估计被评价方法在实际测定病人标本时可能引入的总系统误差的水平,本实验以HK法测血糖的参考方法做对比来评价GDH法测定血糖的总系统误差。在方法比较试验中,相关系数(r)可作为被评价方法可否被接受的一项统计学指标,只有当r≥才能说明两者的相关性良好。 运用以上方法学评价方案评价葡萄糖脱氢酶法测定血糖浓度,结果提示:GDH法可以作为临床血糖测定的方法,结果可靠,抗干扰能力强,完全能满足临床血糖检测的要求。[参考文献] [1]林其燧,文庆成.临床化学诊断方法大全[M].北 回收浓度 加入浓度回收率(%) 如表1所示,计算回收样品Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的回收率分别为105%,和,平均为以下、胆红素浓度在50mg/L以下和加入一般浓度的抗凝剂、防腐剂时,Bias 对测定结果分别用SPSS统计软件进行相关性分析,结果显示,其相关性为Y=。说明两法的相关性良好。线性范围试验结果如图1,由图可知,葡萄糖浓度在20mmol/L以下呈现良好的线性,该浓度覆盖临床上的参考值和常见疾病的医学决定水平 ,因此可以满足临床检验的需要。 京:北京大学出版社,1990:178-184. 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[2]岳林先,邓立强,刘军,等.前列腺外周带血流高阻力 更清晰。 仅根据二维图像有时较难对PC做出诊断,应用彩色多普勒技术更有利于PC的检出。由于前列腺是少血供器官,经腹壁探头由于距离远,彩色血流显示往往不够清晰,经直肠探头由于距离近,探头频率高,CDFI与PDI显示清晰,更易对病变性质做出准确的判断。CDFI和PDI对于PSA异常升高的患者检查前列腺癌具有很大的诊断价值,血流的显示使其敏感性增加了3～4倍。多数前列腺癌起源于外周带,如此区域内病灶或其周围血流信号增加,血流速度加快或阻力增高,癌,可进一步进行穿刺活检。 MRI扫描,学方法,[11] 段。动态对比增强MRI因能快速显示前列腺增强类型及有关肿瘤血管情况而被应用于前列腺癌的诊断,但有时对良性前列腺增生与前列腺癌的鉴别仍有一定困难,而且造影剂费用昂贵,有过敏可能,不适宜作为常规筛查手段用于前列腺癌的诊断。CT平扫对早期前列腺癌的诊断基本无帮助,不能用于诊断A、B期前列腺癌,但可用于前列腺癌的临床分期,动态增强CT可能有一定意义,但也通常不作为诊断前列腺癌首选的检查方法。 综上所述,由于TRUS安全、准确、无痛苦、不需特殊准备、重复性强,较CT、MRI等其他影像学检查更易让病人接受,同时TRUS清晰度高,能清晰显示前列腺内部细小病变,明显优于经腹超声,结合CD2FI与CDE以及DRE与PSA测值可对病变性质做出 [10] 指数对前列腺癌的诊断价值[J].临床超声医学杂志,2004,6(3):133-135. [3]刘跃新,焦志友,陈山,等.腔内超声图像对前列腺 增生诊断标准的初步探讨[J].中国超声医学杂志, 1997,13(8):43-45. [4]RoehrbomCG,McConnellJD,LieberM, prostate2speceficantigenconcentrationisapowerfulpre2dictofacuteurinaryandneedforsurgeryinprhyperplasiaPLESSoup[JU(3):473-480. [],顾文涛.临床特种检验医学[M].天津: 天津科学技术出版社,2004:97. [6]杨全成,李凯,张晓光,等.f/T2PSA比值和PSA密度 对TPSA灰区前列腺癌的诊断意义[J].现代肿瘤医学,2006,14(2):188-190. 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武汉碧海蓝天
胃食管反流病是孕妇的常见疾病，通常由于激素变化引起的胃肠蠕动变化。近期，由越南胡志明市医药大学发表于《临床胃肠病学杂志》上的一项横断面研究显示，研究进食后短时间内入睡与GERD发病率增加有关，特别是在孕妇群体中。根据400名妇女的数据，MTBT会使孕期GERD的风险增加约12％。在该研究中，随机纳入了在孕期不同阶段的400名孕妇。短暂的MTBT定义为进食后在2小时或更短时间内入睡。评估参与者在近7天出现胃食管反流症状的天数和与反流相关的失眠的频率。在该研究人群中，共有154名参与者被诊断为GERD，总发病率为％，研究人员指出，在患有GERD的参与者中，有20名参与者报告了反流相关性失眠。胃灼热、反流、伴或不伴呕吐的恶心和上腹痛的总发病率分别为％、％、％和％。，共有139名妇女报告了在过去7天中至少有2天有反流症状，白天和夜间都有反流症状的共有40例。在多变量分析中，较短的MTBT是GERD的最强预测因子；既往有反流症状史，并且在妊娠中期或妊娠晚期在多变量分析中仍然是重要的预测指标。此外，夜间多元MTBT是反流相关性失眠的最强危险因素，尽管在多变量分析中饮酒和反流相关症状的病史也仍然很重要。研究人员发现，有趣的是，在没有短时间MTBT、白天或夜间短时间MTBT、白天和晚上均MTBT的参与者亚组中，最近7天出现反流症状的天数依次增加。在4至7天时，没有短暂MTBT的患者均未报告反流症状，相比之下，白天或夜间MTBT的患者有反流症状为％，白天和夜间均MTBT的患者有反流症状为％。但该研究仍有一些局限性，包括无法准确记录参与者的饮食以及由于反流相关性失眠患者的人数少而可能高估危险因素的比值。但是研究人员总结说，结果支持了以前研究的结论，并表明饮食的调整可以为控制孕妇的GERD提供非药物治疗的目标。这项研究有重要意义，因为胃食管反流是孕期的常见问题。了解这些情况的危险因素可能有助于设计行为和药物治疗干预措施。”短时间的MTBT与GERD风险增加之间的关联几乎是公认的。因此，常规建议GERD患者延长饭后仰卧的时间，并已包含在已发表的GERD指南中。尽管孕妇可能已被排除在指南和建议所依据的试验之外，但可以合理地预期研究结果会转化为该人群反流风险较高的人群。在该研究中观察到MTBT与反流之间的剂量反应，在一个短期时间内中，白天和夜间均有短时MTBT的患者比短暂的MTBT的患者更容易出现反流。此前，在今年1月份，据波士顿的马萨诸塞州总医院和哈佛医学院发表在JAMAInternalMedicine的涉及万名女性的一项大型前瞻性研究中，结果就表明，改善饮食和生活方式可大大降低胃食管反流病的风险。研究最终认为，即使使用质子泵抑制剂和/或组胺受体拮抗剂进行治疗，坚持五种抗GERD相关的生活方式依然对改善GERD症状的风险有有益影响，可以预防近40％GERD发病率。这项研究的追踪率超过90％，于1989年开始，目前仍在进行中。参与者完成每两年一次的问卷调查，其中包括各种健康和生活方式因素。目前的分析包括来自42955名年龄在42-62岁之间的女性的数据。最终的数据集包括392215人年的随访，以及9291例GERD症状事件。对于每位参与者，将五种抗GERD生活方式按不同因素计算得分，得分从0到5：每天不超过两杯苏打水，茶或咖啡；不吸烟；正常体重；合理饮食；每天至少30分钟的中度到剧烈运动。多元logistic回归模型显示，与没有坚持这五个因素的女性相比，报告了所有五种抗GERD生活方式因素的女性患GERD症状的风险降低了50％。进一步的分析表明，所有五个因素的共同作用可以使GERD症状病例减少37％。不遵守每种抗反流生活方式因素与GERD症状的风险增加独立相关。在对其他变量进行相互调整之后，BMI与最高的人群归因风险相关，其次是体育锻炼，食物摄入，饮料摄入量和不吸烟状态。研究者还进一步探讨了GERD症状与抗反流药物和生活方式因素之间的关系。所有五种抗反流因素的存在与GERD症状或PPI和/或H2RA治疗开始的风险降低53％有关。在报告定期使用PPI和/或H2RA且基线无GERD症状的3625名女性中，坚持所有五种生活方式因素可使GERD症状的风险降低68％。这是一项重要研究，进一步支持了某些生活方式因素的调整在降低GERD风险方面的价值。对临床医生而言，无论怀孕与否，对于所有个人而言，避免夜间进食和缩短进餐时间是建议的适当行为干预措施，以推荐给患有烧心或反流困难的患者。但是，在某些领域还需要更多的研究，实施该研究将有助于患者或普通人通过行为改变来预防和改善胃食管反流病。原文出处：：：
首先，要确定好发什么级别和研究方向的文章，然后找到相应的期刊、杂志。然后投稿过去，等到收录用通知即可。 但是，想发医学类核心期刊，确实是比较困难，原因：
未央1895 6人参与回答 2023-12-07 不是，都是国家级期刊 1.慢性病学-期刊级别： 国家级期刊 《慢性病学杂志》以从事慢性病学研究的科研人员、临床医师和药师、制药工程技术人员、护理人员、医院管理人
Arsenalzoe 3人参与回答 2023-12-06 hyjhuj
烽火馋眠 4人参与回答 2023-12-07 医学杂志期刊有：1、《中国社区医师》：国内发行量最大的国家级综合性医学期刊、中国知网收录期刊、旬刊。2、《医学信息》：国内发行速度最快的国家级综合性医学期刊、中
aimyforever 5人参与回答 2023-12-10 医学四大期刊名单：1、新英格兰医学杂志（NEM）。2、柳叶刀（ Lancet）。3、美国医学会杂志（JAMA）。4、英国医学期刊（BMJ）。作为医学界的四大期刊
和平海棠 3人参与回答 2023-12-05 