药学动物实验的论文

1 材料与方法 实验材料雄性4～5周龄ICR小鼠80只，购自长春高新医学动物实验研究中心，合格证号：SCXK�（吉）2003�0004，平均体重 g，饲养1周后用于实验。环磷酰胺(山西普德制药有限公司，批号：H14023686， g/支)，白消安(Busulfan，B2635，10 g，Sigma，美国)，二甲基亚砜(DMSO，天津基准化学试剂有限公司，500 ml)，多聚赖氨酸(poly�L�lysine，福州迈新公司，编号：GLU�0040，8 ml，10×)。 实验动物分组及给药方法实验动物按注射药物及给药方式不同分为4组，分别为：环磷酰胺组22只腹腔内单次注射环磷酰胺(200 mg/kg)、白消安组24只同法给白消安(40 mg/kg)、复合组20只同法给环磷酰胺(120 mg/kg)和白消安(20 mg/kg)、空白组14只给生理盐水。每只小鼠统一腹腔内单次给药 ml。先将环磷酰胺和白消安配成母液：环磷酰胺 g/支，每支加生理盐水5 ml完全溶解成浓度为40 mg/ml；白消安准确称取100 mg，充分溶解于DMSO 10 ml中成浓度为10 mg/ml，给药时根据体重计算每只小鼠给药量，并将母液稀释成相应浓度工作液，注射后常规饲养，并每天做好观察记录。 精子涂片的制作及分析给药后第35天、45天和60天各组分别取5只小鼠20%乌拉坦7 ml/kg麻醉，取双侧附睾头置于培养皿中(培养皿中放预温37℃ 生理盐水1 ml)，用手术刀片统一将附睾头纵向切3～5刀，静置5 min，使精子充分游出。取10 μl悬液滴于洁净载玻片上，推片，自然风干，然后置固定液中固定5 min（固定液预先配好，无水乙醇与冰醋酸体积比2∶1），苏木精液中染色5 min〔2〕，1%弱氨水返蓝，伊红染色片刻。脱水透明后中性树胶封片。各组涂片在40×10 HP下随机取15个视野，计数各组所取视野内完整精子数目以作进一步统计分析。 睾丸组织切片的制作注射后第35天、45天和60天各组分别处理部分小鼠，制作睾丸组织切片。小鼠20%乌拉坦7 ml/kg麻醉，4℃ 4%多聚甲醛心脏灌流预固定，然后取双侧睾丸，4%多聚甲醛4℃固定12～18 h后，梯度酒精脱水，常规石蜡包埋，制成4 μm厚的石蜡切片进行HE染色。中性树胶封片后光学显微镜下观察各组组织切片中生精小管形态结构改变、内源性生精状况改变以及间质细胞等的改变。 数据处理用Spss 软件包进行数据分析。2 结 果 各化疗药物处理组小鼠一般状态环磷酰胺组、白消安组及复合组小鼠给药后活动状况、饮食饮水及毛发整洁度、光泽度均不同程度较空白组差，其中白消安组、复合组除上述状况外，体重也较空白组显著减轻。 各组注射后精子涂片分析各组精子涂片计数分析见表1。白消安组、复合组在给药后第35天和45天涂片仅见稀薄的黏液(轻微的淡粉色)和细胞碎片，在60天时可见完整精子。环磷酰胺组、空白组涂片中完整精子较多，偶可见完整细胞。 各组注射后HE染色分析各组注射后HE染色结果见图1～6。对照组睾丸组织正常，生精小管完整，呈饱满椭圆形。小管内细胞层数多，各级生精细胞排列紧密有序，基底层可清晰分辨深染的精母细胞，腔内含大量的精子及精子细胞，各给药组均可见生精小管萎缩，间质细胞成分减少，相邻生精小管间隙增大，小管内细胞层数减少甚至缺失，其中环磷酰胺组始终变化不大，白消安组、复合组在第35天和45天睾丸生精小管内精子、精子细胞及精母细胞消失，仅可见少量的初级精母细胞和精原细胞，小管基底层有断裂现象，在第60天管腔内可见少量精子，细胞层数略增加，但仍基本保持无生精状态，没有明显恢复。表1 各组精子涂片计数分析

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别傻了 写一篇论文100分 别说100分了 现实生活中貌似听说几百块呢劳心劳力的