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氢氧化钾提高尿液干化学白细胞的检出率【摘要】 目的 探讨氢氧化钾(KOH)对尿液干化学白细胞(WBC)检出率的影响。方法 将UF�100尿沉渣仪检测提示WBC升高且镜检确认为阳性,而干化学试纸检测为阴性的标本70份,加入 ml的 mol·L-1 KOH溶液混匀后重新检测;将尿沉渣仪检测、镜检、干化学都为阴性的标本30份(男、女各15份)加入 ml的 mol·L-1KOH溶液作对照。结果 70份假阴性标本滴加KOH重新检测后全部为阳性;30份阴性标本重测结果仍均为阴性。结论 加入KOH可有效提高干化学白细胞的检出率,降低假阴性率 【关键词】 白细胞;尿液干化学法;氢氧化钾尿液干化学法具有检测速度快、项目多的特点,尤其对尿路感染具有较迅速的诊断价值,但在试纸灵敏度不够或存在干扰因素的情况下会产生假阴性,引起误、漏诊。有文献报道,尿液干化学白细胞(WBC)检测的灵敏度与尿液pH值有关〔1〕。本研究旨在探索在尿液中加入氢氧化钾(KOH)溶液,以提高WBC检出率,降低假阴性率。 1 材料和方法 材料 标本来自1 468例本院10 d门诊患者的随机尿液样本。 仪器和试剂 UF�100尿沉渣仪及其配套试剂、质控品(批号:A7010)均为日本Sysmex公司生产,H10Ⅱ尿液分析仪及其配套试纸(批号:20071020和20071120)、质控品(批号:20070629)均为长春迪瑞实业有限公司生产。Olympus双筒显微镜为日本奥林巴斯光学工业株式会社生产。分析纯KOH由上海第二试剂厂生产。 方法 仪器操作均按操作手册进行,手工离心镜检按《全国临床检验操作规程》进行,阳性标本判断以参考文献〔2〕标准:UF�100尿沉渣分析仪计数WBC>26个·μl-1,且手工离心镜检每高倍镜下WBC数>5个;尿干化学试纸检测WBC为1+或以上。阴性判断标准:UF�100尿沉渣分析仪计数WBC<14个·μl-1,尿干化学分析试纸检测WBC阴性,手工离心镜检每高倍镜下WBC数<4个。两者之间的可疑样本不选用。假阴性判断标准:UF�100尿沉渣分析仪检测提示WBC升高并镜检确认为阳性,而干化学试纸检测为阴性的标本。每日做完质控后进行样本检测。 2 结 果 提高检测率的最佳浓度 (1)取阴性标本30份,每份分成4小份,每小份尿液6 ml,分别加入 mol·L-1的KOH 、、和 ml混匀后重新检测,结果见表1。(2)取假阴性标本30份,操作方法同阴性标本,结果见表2。表1 阴性标本加KOH后重测WBC结果(n=30)份表2 假阴性标本加KOH重测WBC结果(n=30)份 由表1、2可见,6 ml尿液中加入 mol·L-1的KOH ml为最佳浓度,既可以保证阳性标本全部被检出,又可以减少假阳性的出现。 加KOH后的重测结果 1 468份尿标本中UF�100尿沉渣分析仪和离心涂片镜检阳性者560例,尿干化学试纸检测假阴性203例,假阴性率为。我们取其中的70份假阴性标本,每份取6 ml尿液加入 mol·L-1 KOH ml混匀后重检测,结果见表3。表3 假阴性标本加KOH重测WBC结果由表3可见,加入KOH后,70例假阴性标本重新检测后全部为阳性。 3 讨 论 尿干化学法检测WBC是利用中性粒细胞中的酯酶水解试纸中的吡咯酚酯产生游离酚,游离酚与苯酚基重氮盐偶联,生成紫色偶氮染料。但如果中性粒细胞中的酯酶没有释放出来(或释放较少),则不能快速水解吡咯酚酯,在较短时间内不能充分反应而使试纸检测WBC成假阴性。 从本试验结果可以看出,单用尿干化学法检测假阴性率达,对于糖尿病病人,尿路感染是较常见的并发症,反复发作后可以转为慢性。慢性感染后的尿液可能以淋巴细胞为主,而淋巴细胞中不存在中性粒细胞酯酶,也会导致WBC检测假阴性使检测率降低。本实验中有5例(5/203)尿糖(3+)~(4+)的阴性标本,加入KOH混匀重新检测后均为阳性。与文献报道〔3�4〕的尿糖对WBC检测有影响的结果不符。因此,笔者认为,尿糖对尿液WBC的检测结果没有影响,这仅是试纸检测的局限造成的假阴性。 从本试验WBC假阴性的203例标本中,亚硝酸盐(NIT)、隐血(Bld)、蛋白(Pro)也都为阴性的标本有90例。如果以1996年的标准〔5〕:干化学检测NIT、Bld、Pro、WBC都为阴性的标本就可以免镜检,那本研究中将有(90/1 468)的阳性漏检率(加上Bld的假阴性,实际上漏检率将高于)。因此,笔者认为,尿试纸干化学NIT、Bld、Pro、WBC四项都为阴性的标本就可以免镜检的决定有待商榷,赞同张晓宁〔6〕提出的干化学加混匀一滴尿镜检作为过筛的观点。 在进行干化学检测中,本科都是在室内质控在控的前提下进行样本检测,而室内质控是一种中性粒细胞酯酶已释放的溶液,因此做质控时能很快与试纸反应。当测定标本时,试纸中的白细胞破坏剂量不足(或没有破坏),中性粒细胞酯酶释放较慢,则在较短时间内不能充分反应而使结果出现假阴性。因此,笔者认为,在试纸白细胞膜块中加入破坏白细胞的试剂KOH可使白细胞酯酶快速释放,结合定量加入尿液的尿液分析仪检测,能较好地控制KOH的浓度使其达到WBC完全破坏,而不至于产生假阳性。从而有效地提高WBC检测的灵敏度,也能解决室内质控品与尿样本之间的差异。【参考文献】 〔1〕郭东洁,安国瑞,聪慧.尿液的pH对干化学比重与白细胞的影响〔J〕.河北医药,1998,20(2):113.〔2〕刘成玉.临床基础检验学实验指导〔M〕.2版.北京:人民卫生出版社,2003:110�111.〔3〕陈春华.尿液中葡萄糖对干化学检测白细胞的影响〔J〕.临床检验杂志,2007,25(5):340�340.〔4〕杨妍,贾林,贾惠琳.尿糖对尿液分析仪血细胞干化学检测的影响〔J〕.医学检验,2006,27(4):53�53.〔5〕朱忠勇.中华医学会检验学会临床血液与尿分析专题研讨会纪要〔J〕.中华检验医学杂志,1996,19(2):122�124.〔6〕张晓宁.摒弃尿干化学法筛选标准,推行干化学法+混匀一滴尿镜检作为过筛〔J〕.中华检验医学杂志,2007,30(7):828�829.
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氢氧化钾(化学式:KOH),俗称苛性钾,白色固体,溶于水、醇,但不溶于醚。在空气中极易吸湿而潮解。可与二氧化碳反应生成碳酸钾。所以它会被用作吸收二氧化碳之用。制备可从电解高纯度的氯化钾水溶液制得。有强烈腐蚀性,常用于制取碳酸钾,固体氢氧化钾为白色正交结晶,有块状和片状两种,溶于水放出大量热。吸入后强烈刺激呼吸道或造成灼伤。皮肤和眼直接接触可引起灼伤,一旦眼睛或皮肤接触到氢氧化钾,迅速将受伤部位以水不断冲洗15 分钟以上;口服会灼伤消化道,可致死。
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目录:杨超, 杨传秀. 王锦蛇( Elaphe carinata) Sox 基因保守区的克隆及测序. 安徽师范大学学报(自然科学版),2008,31(1):53-56.杨超, 花兆合,周伍,张贺京,王媛,李志红,孙凯. 智能发育不全患者的跖纹研究. 安徽师范大学学报(自然科学版),2007,30(5):580-583杨 超,蔡亚非,龚仁敏,邵登辉,孙影芝.莴苣皮生物材料吸附水溶液中阳离子染料的研究. 南京农业大学学报,2006, 29 (2) : 45-49.杨超,柯丽霞,龚仁敏,刘慧君,孙影芝.花生壳粉作为生物吸附剂去除水溶液中偶氮染料的研究. 生物学杂志, 2005,22(2):45-48.杨超,龚仁敏,刘必融,刘慧君,孙影芝,柯丽霞.花生壳粉生物吸附水溶液中阴离子染料的研究. 应用生态学报, 2004,11(15):2195-2198.杨 超,杨传秀,聂刘旺.赤链蛇不同组织Sox基因表达的RT-PCR分析.激光生物学报, 2004,13(5):334-338.杨 超,杨传秀 聂刘旺.两种蛇Sox基因的PCR-SSCP分析. 动物学杂志, 2003, 38(1): 8-12.杨 超,聂刘旺. 两栖爬行动物性别决定的研究进展. 安徽师范大学学报(自然科学版),2003,26(2):169-172.杨 超,聂刘旺.赤链蛇Sox基因的克隆及序列分析.激光生物学报, 2002, 11(1):15-18.杨 超,聂刘旺.乌梢蛇赤链蛇Sox基因的PCR扩增研究.皖南医学院学报,2002, 21(3):174-176.杨 超,聂刘旺.乌梢蛇Sox基因的克隆及测序.两栖爬行动物学研究,2002, 10.杨 超,聂刘旺.虎斑颈槽蛇Sox基因的克隆及测序.发育与生殖生物学报, 2002,12.孙影芝,张小平,龚仁敏,刘慧君,杨超.化学修饰对花生壳吸附染料能力的影响. 安徽师范大学学报(自然科学版),2006,29(1): Gong, Yi Ding, Mei Li, Chao Yang, Huijun Liu, Yingzhi Sun. Utilization of powdered peanut hull as biosorbent for removal of anionic dyes from aqueous solution. Dyes Pigments, 2005. 64: 187-192.孙影芝,龚仁敏,张小平,刘慧君,杨 超.甘蓝皮生物吸附去除水中的阳离子染料. 中国环境科学 2005(suppl.),2005,25(Suppl.): Gong, Yingzhi Sun, Jian Chen, Huijun Liu, Chao Yang. Effect of chemical modification on dye adsorption capacity of peanut hull. Dyes Pigments, 2005. 67: Gong, Mei Li, Chao Yang, Yingzhi Sun, Jian Chen, Removal of cationic dyes from aqueous solution by adsorption on peanut hull. J. Hazard. Mater., 2005. 121: 247-250.孙影芝,龚仁敏,张小平,刘慧君,杨超.苤蓝皮生物吸附去除水体中的阴离子染料 安徽师范大学学报(自然科学版),2005,28(1):80-83.杨传秀杨超陈壁辉 扬子鳄大脑皮层后期胚胎发育的超微结构.解剖学杂志, 2004,27(2):152-156.杨传秀杨超陈壁辉 扬子鳄胚胎大脑皮层神经元核内包涵体的超微结构特征.动物学杂志, 2003,38(2):20-22.柯丽霞,杨 超. 安徽清凉峰自然保护区大型真菌的生态分布.应用生态学报, 2003, 14(10):1739-1742.花兆合, 周伍, 杨 超, 张贺京, 王媛, 李志红, 孙凯. 智力低下患者的手纹分析. 人类学学报,2002 , 21(3):239-244.杨传秀杨超.陈壁辉初孵扬子鳄端脑基底中枢的组织学研究. 安徽师范大学学报(自然科学版),2002,25(3):270-273.杨传秀,杨超.陈壁辉初孵扬子鳄大脑皮层组织学结构观察. 安徽师范大学学报(自然科学版),2000,23(1):43-46.杨传秀,杨超,陈壁辉.初生扬子鳄嗅球、嗅束的组织学结构研究 安徽师范大学学报(自然科学版)1999,22(4):321-323蔡亚非 杨 超 李君陈壁辉. 虎斑颈槽蛇Duvernoy腺超微结构.解剖学杂志,1999, 22(6): 492-495.
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