淀粉酶酶学性质研究实验论文

淀粉酶是可以水解淀粉的一类酶的总称，从对淀粉水解方式的不同，淀粉酶可以分为内切型、外切型、脱枝和转移4个种类。在淀粉酶家族中，a-淀粉酶具有来源丰富和催化特性多样等特征，在淀粉质的加工处理工业过程中具有极为重要的应用。

a-淀粉酶的来源极为丰富，包括动物、植物和微生物。其中，微生物来源的a-淀粉酶可满足多种工业应用需求，在现在工业中发挥着极为重要的作用。在现代工业的淀粉质处理过程中，微生物a-淀粉酶的水解方法已经彻底取代了传统的化学水解方法。

真菌来源的a-淀粉酶有很多种，目前工业上应用的真菌a-淀粉酶几乎全部来源于丝状真菌中的曲霉属微生物，如米曲霉（Aspergillus oryzae）等，多数真菌a-淀粉酶的作用温度和pH比较温和，如最适作用pH在～之间，最适作用温度为50～55℃之间，当温度超过60℃酶开始失活，最近也有关于木霉产生a-淀粉酶的报道。

日本的Noguchi A等（2008）最先报道了从1株 JCM22452中克隆到a-淀粉酶同系物TRa2的cDNA序列，其氨基酸序列与其他子囊菌a-淀粉酶序列高度同源，也可产生儿茶酸和儿茶素糖苷（EGCG）。该木霉菌株产生的TRa2可以使儿茶素等自然黄酮类物质糖化，可以将麦芽低聚糖水解为麦芽三糖、麦芽四糖等。

Mohamed等（2011）研究了以金柑皮为培养基，发酵生产a-淀粉酶A3的纯化方法及酶学性质，通过凝胶过滤和SDS-PAGE电泳分析发现纯化获得的酶的大小为70kDa，在pH 和40℃条件下，对马铃薯可溶性淀粉的酶活最大，在40℃温浴30min可保持稳定酶活，但在50℃和60℃只能保持70%和50%的酶活，Ca2+可显著提高酶活性，而其他金属离子和金属螯合剂、EDTA、柠檬酸钠、草酸钠等均对酶活有抑制作用。

Khan等（2012）研究发现，可以产生大量的a-淀粉酶，以3%麸皮加1%葡萄糖作为碳源的培养基中，30℃培养12 d，a-淀粉酶产量达到最佳，为6U/mL；若换做1%的淀粉作为碳源，在同样的培养条件下，显示该木霉菌株产生的a-淀粉酶量很低，最大产生量发生在第4 d，产量仅为。

丹尼斯科美国公司分别在美国和中国申请了发明专利“里氏木霉a-淀粉酶增强玉米淀粉的糖化”（中国专利号：；美国专利号：20120129226），显示来自的生麦芽糖a-淀粉酶（TrAA）在麦芽糖生产工艺中，可单独使用或与支链淀粉酶组合，TrAA在低pH和高温条件下可催化麦芽糖的产生；在从液化淀粉产生高葡萄糖糖浆的过程中，TrAA可有力地抑制葡萄糖逆转成麦芽低聚糖，从而使得加工的玉米淀粉混合物中的葡萄浓度达到约96%（w/v）。