帕金森病毕业论文投稿

帕金森病（parkinson’s disease, PD）是继阿尔茨海默病（Alzheimer's disease，AD）之后第二常见的一种神经退行性疾病，多见于中老年人，患者主要表现为震颤、行动迟缓、肌强直等运动症状和一系列非运动症状。其目前的治疗方案只能缓解患者的症状，并不能阻止PD的进展，而PD是一种进行性恶化的疾病，因此找到能阻止PD进展的治疗方案十分重要。

2018年11月2日美国约翰霍普金斯大学医学院神经退行性疾病和干细胞研究中心Valina L. Dawson和Ted M. Dawson团队在 Science 杂志发表了题为 Poly(ADP-ribose) drives pathologic α-synuclein neurodegeneration in Parkinson’s disease 的研究论文，发现 Poly(ADP-ribose)可以增强α-synuclein毒性，促进α-synuclein聚集，并参与病理性α-synuclein介导的细胞损伤，促进PD进展 。这一发现或许能为阻止PD的进展提供治疗靶点[1]。 Science 杂志同时对此研究结果发表了评论文章[2]。

有没有觉得哪个分子很眼熟？对了，Poly(ADP-ribose) 就是PAR，上一篇文章也有提到哦。

现在咱们一起学习下这篇文章吧。

帕金森病和α-突触核蛋白

帕金森病是一种进行性的神经退行性疾病，患者主要表现为静止性震颤、行动迟缓、肌强直和姿势步态障碍四大运动症状，有的还伴有焦虑、抑郁、睡眠障碍、自主神经功能障碍、认知障碍等非运动症状。

帕金森病主要的病理改变是中脑黑质部多巴胺（dopamine, DA）能神经元减少，残存神经元胞质内出现嗜酸性包涵体，即路易小体（Lewy body）。纤维样的α-突触核蛋白（α-synuclein, α-syn）是路易小体的主要成分。

α-syn是在大脑中广泛表达的一种突触前蛋白，生理状态下呈可溶的蛋白单体形式，当其聚集成不溶的纤维样寡聚体，则具有致病性，可引起神经元细胞死亡。病理性的α-syn可以像朊病毒一样在细胞间传播，促进PD进展。

然而是什么引起α-syn的病理性聚集呢？病理性聚集的α-syn又是如何引起细胞死亡的？这些都还不清楚。

PAR与PARP1

Poly(ADP-ribose) （PAR）是Poly(ADP-ribose) polymerase-1（PARP-1）以NAD+为底物合成的产物。细胞核PARP-1和PAR的主要功能是发现各种原因引起的DNA损伤，并启动相应的DNA修复机制。

PARP-1依赖性细胞死亡

PARP-1依赖性细胞死亡（Parthanatos）是一种由于PARP-1激活引起的程序性细胞坏死形式，Parthanatos是根据“par”（PARP-1的酶学产物）+ “thanatos”（希腊语的死亡之神）而命名。

Parthanatos这种细胞死亡形式广泛存在于神经系统疾病、心脏病等疾病中。

因为Parthanatos中PARP-1和PAR可引起细胞死亡，故作者 拟探究PARP-1和PAR是否参与PD中病理性α-syn引起的DA神经元丢失 。

1  α-syn PFF的神经毒性依赖于PARP-1

α-syn预制纤维（a-syn preformed fibrils, α-syn PFF）是一种体外重组的α-syn，能够像体内的α-syn一样聚集成纤维，并能像朊病毒一样在神经元细胞间传播，当其被注射进小鼠的脑内，其S129位点可发生磷酸化，形成p-α-syn（病理性α-syn的一个标志），因此是研究α-syn的一个良好模型。

为了探究α-syn PFF能否激活PARP-1，作者用α-syn PFF处理鼠的原代皮质神经元细胞，WB检测PAR的变化，发现第3-7d PAR的表达逐渐增加直至最高峰，并维持增加状态直到第14d。

PI染色发现PAR的增加伴随着细胞死亡的增加。

用三种PARP抑制剂（ABT-888, AG-014699, BMN 673）处理细胞，则发现可以阻止α-syn PFF诱导的细胞PARP激活和细胞死亡。

α-syn PFF处理细胞能够促进α-syn进行 S129位点的磷酸化形成p-α-syn，并促进水溶性α-syn形成不溶性α-syn，两者都是病理性α-syn的特征。而PARP抑制剂能够明显阻止这些效应。

敲低或敲除PARP-1亦能明显阻止α-syn PFF诱导的PARP激活和细胞凋亡。

敲除PARP-1能够阻止α-syn PFF诱导的α-syn的磷酸化及不溶性α-syn的形成。

用广谱的caspase抑制剂Z-VAD能部分减轻α-syn PFF的毒性，而坏死性凋亡抑制剂Nec-1和自噬抑制剂3-MA无法减轻α-syn PFF诱导的细胞死亡，PARP抑制剂ABT-888则能够阻止α-syn PFF诱导的细胞死亡，说明 α-syn PFF诱导的细胞死亡主要依赖于PARP-1，即parthanatos，而不是通过激活细胞凋亡、坏死或自噬。

上述实验结果显示敲除PARP-1或药物抑制PARP-1能够减少p-α-syn的形成，这种减少会不会是因为细胞内吞的α-syn PFF减少呢？

作者富集细胞内吞体，检测PARP-1敲除和药物抑制条件下内吞体内biotin标记的α-syn PFF含量，发现均与对照组无明显差异，说明PARP-1不影响细胞对α-syn PFF的摄入。

背景介绍中提到α-syn PFF能像朊病毒般在细胞间传播，促进PD进展，那它的这种细胞间传播的特性是否也依赖于PARP-1呢？

作者进行了微流控室实验，首先通过微流体装置将α-syn PFF加入到chamber 1 (C1)，第14d再检测chamber 2 (C2) 和chamber 3 (C3)中是否出现α-syn，即α-syn PFF是否有传播功能。

结果显示WT神经元组第14d可在C2和C3中可检测到p-α-syn， 而PARP-1 KO组基本检测不到，说明 α-syn PFF的传播功能也依赖于PARP-1。

2  α-syn PFF通过NO诱导的DNA损伤激活PARP-1

第一部分已经证明α-syn PFF能够激活PARP-1，并通过PARP-1发挥其神经毒性作用，那么α-syn PFF是如何激活PARP-1的呢？

作者发现用α-syn PFF处理神经元细胞或将其直接注射到小鼠脑内，可引起细胞的NO水平增加及DNA损伤增加。

用NO合成酶抑制剂L-NAME处理神经元细胞或小鼠大脑，则可以抑制α-syn PFF诱导的NO合成、DNA损伤及PARP-1激活。

此外NO合成酶抑制剂还可以抑制α-syn PFF诱导的细胞死亡。

以上说明 α-syn PFF通过激活NO合成酶，引起DNA损伤，激活PARP-1，通过parthanatos引起细胞死亡。

3  α-syn PFF通过PAR介导DA神经元丢失

前面已经证明α-syn PFF通过parthanatos引起细胞死亡，那么这一通路会不会跟PD中DA神经元的丢失有关？

向小鼠一侧的纹状体内注射α-syn PFF可激活PARP-1，增加PAR水平，而敲除PARP-1或用PARP-1抑制剂处理后，可阻止α-syn PFF诱导的PAR水平增加，减轻α-syn PFF的神经毒性。

同时，注射α-syn PFF 6个月后，WT小鼠注射侧DA神经元减少约50%，而PARP-1敲除组和PARP-1抑制剂处理组小鼠的DA神经元无明显减少。

酪氨酸羟化酶（Tyrosine hydroxylase, TH）是DA合成的关键酶，作者发现用α-syn PFF处理WT小鼠后，TH和多巴胺转运子（DA transporter, DAT）水平均明显降低，而敲除或抑制PARP-1，可阻止该现象。

此外，α-syn PFF处理的WT小鼠纹状体DA和DA代谢产物含量明显减少，PARP-1 KO组和PARP-1抑制剂处理组无明显变化。

向WT小鼠大脑注射α-syn PFF可引起小鼠爬杆试验（pole test）时间延长，握力试验（grip strength）力量降低，敲除PARP-1或PARP-1抑制剂处理则可缓解α-syn PFF引起的PD运动症状。

4  PAR促进α-syn纤维化

既往研究显示PAR能够导致固有无序蛋白液体分层，引起其聚集，那么PAR能否促进α-syn聚集呢？

在加或不加PAR的条件下，作者观察α-syn单体孵育一段时间后聚合物的生成情况，发现不加PAR时，α-syn单体孵育72h才出现不同分子量的α-syn聚合物，而加了PAR，24h即出现不同分子量的α-syn聚合物。

不同孵育温度或不同浓度的PAR可引起α-syn纤维化效率的不同（原文Fig. S7A-C）。

荧光染料硫黄素T（thioflavin T fluorescence, ThT）可用于淀粉样纤维聚集过程的定性定量监测。通过ThT荧光监测可见PAR能明显促进α-syn聚集。

透射电镜观察到不加PAR时，α-syn单体孵育72h才出现α-syn寡聚体纤维，而加了PAR，12h即可看到α-syn寡聚体的形成。

因为PAR是个高度带负电的分子，为排除PAR引起的α-syn聚集是由于蛋白间的电荷相互作用，作者研究了同样带负电的PolyA分子对α-syn聚集的影响，发现其并没有显著促进α-syn聚集。

Overlay assay显示PAR与α-syn之间有相互作用，而ADP ribose（ADPr）单体与α-syn之间没有相互作用，也不影响α-syn的聚集。

PARP-1能够促使蛋白发生ADP核糖基化，那么它会使α-syn发生核糖基化吗？

体外核糖基化实验（IVRA）显示不会。

Overlay assay和Co-IP均显示α-syn与PAR之间存在相互作用，作者运用deletion analysis和Co-IP确认α-syn通过其氨基端与PAR作用。

为了探究内源性的PAR生成是否能促进α-syn聚集，作者用N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)处理过表达α-syn的原代鼠皮质神经元细胞，发现NMDA可激活PARP，引起α-syn聚集，而敲除PARP-1或用PARP-1抑制剂处理后，α-syn不再聚集。

在过表达α-syn的PARP-1 WT型和PARP-1 KO型细胞中外源给予PAR，均可rescue α-syn的聚集。

在过表达WT型α-syn和α-syn A53T的神经母细胞瘤SH-SY5Y中，给予PARP激活剂MNNG可促进α-syn聚集，敲除PARP-1或给予PARP-1抑制剂后，α-syn聚集减少，外源补充PAR则可同样rescue PARP-1敲除或抑制引起的α-syn聚集减少。

5  PAR增强α-syn PFF的体外毒性

前面证明了PAR与α-syn PFF结合，那么这种结合会改变α-syn PFF的生物物理属性吗？

作者用蛋白酶K（proteinase K）消化α-syn PFF处理的和PAR-α-syn PFF处理的细胞，发现PAR-α-syn PFF处理的细胞更能抵抗PK的消化，提示PAR-α-syn PFF可能折叠的更紧密。

第一部分已经证明了α-syn具有神经毒性，作者大致重复第一部分的实验，如PAR促进细胞死亡（原文Fig. S10）、促进p-α-syn生成、促进不溶性α-syn生成、促进α-syn的内吞和传播（原文Fig. S11），证明PAR能明显增强α-syn的体外毒性。

6  PAR增强α-syn PFF的体内毒性

为了探究PAR对α-syn PFF体内毒性的影响，作者将α-syn PFF或PAR–α-syn PFF注射到小鼠一侧的纹状体内，发现注射PAR–α-syn PFF组更早出现DA神经元的丢失，更早形成p-α-syn，且p-α-syn的水平明显高于注射α-syn PFF组。

此外，与α-syn PFF相比，PAR–α-syn PFF明显促进DA及其代谢产物的丢失（原文Fig. S13），TH和DAT水平下降（原文Fig. S14），小鼠爬杆实验和握力实验表现变得更差。

7  PD患者脑脊液PAR水平增加

作者检测两个独立队列的PD患者和对照者的脑脊液（CSF）的PAR水平，均发现PD患者CSF的PAR水平明显增加，且PAR的水平与疾病持续时间和Hoehn & Yahr分期呈正相关。

此外，作者发现PD患者黒质（substantia nigra, SN）的PAR水平也明显增加，这一点与既往的研究结果一致。

病理性α-syn通过激活NO合成酶，诱导DNA损伤，激活PARP-1，产生的PAR促进病理性α-syn的生成，通过parthanatos引起细胞死亡。敲除或降低PARP-1可抑制病理性α-syn的毒性。PAR可在体内和体外增强病理性α-syn的毒性，形成前馈循环。PD患者的脑脊液和黒质的PAR含量明显增加。以上提示PARP-1的激活参与PD的进展，因此抑制PARP-1的激活有望阻止PD中DA神经元的进行性丢失。

此图为全文的故事图解。

本文套路如下图所示。

希望本文能给你启发。

参考文献

[1] Kam TI, et al. Poly(ADP-ribose) drives pathologic alpha-synuclein neurodegeneration in Parkinson's disease [J]. Science (New York, NY), 2018, 362(6414).

[2] Brundin P, et al. Cancer enzyme affects Parkinson's disease [J]. Science (New York, NY), 2018, 362(6414): 521-522.

帕金森病（ Parkinson's disease）是一种常见的神经系统变性疾病，老年人多见。其主要病理改变是中脑黑质多巴胺能神经元的变性死亡，由此进一步导致纹状体多巴胺含量显著减少而致病。然而，这一病理改变的具体分子机制仍没有搞清楚，多认为与异常因素、环境因素、衰老、氧化还原应激等有关。治疗主要是改善临床症状，不能根治或阻止疾病进展。此外，该病具有高度异质性，不同的人疾病进展缓慢以及对药物的反应也不一样。晚期存在很多并发症也增加处理的难度。

帕金森是人身衰老的表现当然难治。除非用中医的方法返本还原。

帕金森病目前无法治愈。预防和治疗都十分困难。

首先，200多年了，我们都没搞懂它到底是怎么回事。

1817年，嘉庆皇帝在位的时候，远在英国伦敦，有一位医生James Parkinson发表了 世界上第一篇关于帕金森病的论文 ，在这个论文中他记述了他在诊断的过程中经历的6个他认为非常相似的案例，后人把它命名为 帕金森病 。

1817年到2017年，经过200年的漫长的时间，我们 现在知道帕金森病是基因和环境共同作用的结果 ，但是 我们不清楚基因和环境究竟是如何共同作用导致了帕金森病的产生 ， 甚至有一些环境因素对于我们来说是相当不可理解的 。

比如说我们通常认为“多喝牛奶少抽烟”是一种非常 健康 的生活方式，然而对于帕金森病来说，多喝牛奶是会增加致病风险，而抽烟，你抽的越多、抽得时间越长反而会减少致病风险……我们至今还不明白这到底是为什么，希望我们以后的科学能够解决这样的疑问。

然后，帕金森病和通常的躯体疾病有很大的不同在于治疗方面 。

我们平时有个头痛脑热，可能吃几天药就好了，因为这是对症下药。但是帕金森病不同，它的症状以及病理改变都非常复杂。

现在常规的治疗方法，不管是你看到的这个药物还是右边通过手术在大脑中植入电极，也就是所谓的深部脑刺激，或者是损毁手术，也就是通过手术去损毁你大脑中的某个部分，以便能够治疗你的症状。

希望我的回答对您有所帮助。

治疗时药不对症！只看表相，未治根本！只要保持身体阴阳平衡，何惧帕金森？按摩太渊穴，少府穴，各1至3分钟，轻症立止！重症坚持定有奇效！信不信由你！只遇有缘人！

帕金森病是一种神经变性疾病，目前的治疗方法并不能阻止病情的发展，只能改善症状。目前对于帕金森病的治疗多采用药物治疗、手术治疗、康复治疗、心理治疗相结合的方法。左旋多巴制剂是目前治疗帕金森病最主要的药物。药物治疗必须坚持长期服用，一旦停用，症状容易复发。药物治疗无效或不能忍受药物副作用，可采用手术治疗。可配合运动疗法、针灸、推拿、按摩等康复治疗。

帕金森病无法治愈、难治的5大原因：

如果我们要设计一种从源头上阻止这种情况的治疗方法，我们真的需要知道为什么脑细胞死亡首先发生。

在 历史 上，盲目的运气导致科学家偶然发现有效的治疗方法，如天花和对青霉素有反应的感染。但对于像帕金森氏症这样复杂的疾病，我们应该投资于填补我们对大脑内部正在发生的事情的不完整看法的研究，因为这将为我们提供最好的机会来开发治疗方法，解决脑细胞丢失的根本原因。幸运的是，有一些极富天赋和献身精神的研究人员，与尖端 科技 合作，试图更好地了解帕金森氏症——他们一直在不断地做出新的发现。

发现我们的博客文章关于最新的帕金森氏症研究新闻，并阅读有关研究人员如何使用开创性的技术来了解帕金森氏症的病因和寻找新的治疗方法。

有效治疗绝大多数人类疾病的诀窍是及早发现。这个想法是在造成太多损害之前进行干预，并使用解决问题根源的治疗方法。这不仅对治疗质量很重要，而且使寻找减缓病情的治疗变得更容易。

如果在帕金森氏症的早期阶段使用药物，当有更多的 健康 脑细胞残留时，这种药物将是最有效的。但是诊断帕金森氏症，特别是在早期，是很棘手的。我们需要的是一个明确的诊断测试，在疾病的早期阶段是准确的。这项测试也可能有助于解决另一个问题，即我们也无法测量帕金森氏症的进展。这可能看起来微不足道，但如果你想证明一种新的治疗方法可以减缓进展，你需要做的一件事就是测量进展是否真的减缓了。

帕金森氏症的测试将基于身体的可测量变化，即生物标记物。研究人员正开始在寻找一种足够敏感和准确的生物标记物来诊断帕金森氏症方面取得进展，并对从脑部扫描到血液测试，甚至呼吸分析等多种方法检测变化感兴趣。我们正在资助这一领域的研究，以便有朝一日能够明确诊断、准确监测甚至预测帕金森氏症，因为所有这些都将有助于我们开发一种治疗方法。

与癌症一样，我们也开始认识到对帕金森氏症进行亚型的重要性，并开发出比“一刀切”方法更为成功的量身定制治疗方法。随着时间的推移，对大量患有这种疾病的人进行跟踪的大规模研究正在加深人们的理解。我们开始了解帕金森氏症的亚型是如何有不同的症状、进展率甚至对药物的不同反应的。

为了有效地治疗帕金森氏症，我们可能需要以不同的方式处理每一种亚型，提供合适的治疗和支持，以适应帕金森氏症的个体和他们的形式。这首先要了解我们如何分类和识别这些不同的类型。

你知道吗，在早期帕金森氏症的临床试验中，有10%的人可能没有这种情况。因为他们不会从治疗中获益，他们很可能会影响结果，甚至导致这些试验的失败。

幸运的是，通过像帕金森氏症的关键路径这样的计划，我们正在朝着更可能成功的更好的临床试验的方向前进。

今天，我们开始确定脑细胞丢失的原因，临床试验也在进行中，试图解决从α-突触核蛋白积累到炎症的所有问题。但是，如果没有有效的临床试验，我们就有失败的风险，因为我们没有以正确的方式测试治疗方法。

你可以在这个博客中阅读更多关于帕金森氏症临床试验的问题和解决方案。

在过去的几十年里，有许多帕金森氏症的大规模临床试验在最后关口失败了。这些失望导致一些公司将投资转向其他研究领域，这些领域可能被视为风险更低、潜在利润更高的领域。如果没有投资，那些有前途的想法就会在货架上堆积如山，没有前进的机会，朝着更好的治疗方向发展的速度就会减慢，最终会停滞。

对于帕金森氏症，有一些有希望的科学发现并没有被商业公司发现和开发。我们相信我们可以在这里加快新疗法的进展。通过我们的帕金森虚拟生物技术公司，我们的运作方式与一家小型生物技术公司类似。然而，与商业公司不同，我们致力于开发一种新的治疗方法-帕金森氏症，并尽快这样做。

我们走了多远？

通过解决导致细胞丢失的潜在问题，我们相信有可能开发出减缓帕金森氏症进展的新疗法。这些疗法，再加上对细胞疗法的研究，也许有一天能够逆转细胞丢失，而目前有助于缓解症状的疗法可以一起成为一种有效的治疗方法。

历史 上只有少数几个例子表明，单一的治疗方法可以治愈每个有病的人，帕金森氏症也不会有什么不同。它将涉及不同的人在不同的时间进行不同的治疗和治疗。但这个谜题的多个部分开始结合在一起，我们也开始取得突破性进展，可以缓解后半辈子的症状。

帕金森氏症是一种进行性神经疾病，估计全世界有700-1400万人受到影响。目前还没有治愈方法，我们迫切需要更好的治疗！

帕金森症是西医的代名词，俗称舞蹈病及多动症，病理的根原在脑部神经原无法控制，至今高端的西医往头脑部装控制器，但普通人装不起，不我今天要说的关于此话题的命题不对，此类病要在中医里治疗的话，这都不算个病，三天就拿下了，实际治疗手段就按寒症来治，找到病因，迎刃而解。

为什么帕金森那么难治？因为人类目前的能力是有限的，人类并不是万能的。

帕金森疾病多发于老年人，其病因错综复杂，至今没有明确的定论。帕金森疾病为什么难治呢？因为老年人的大脑萎缩，脑细胞如果发生病变就脑子修复，呈不可逆性。也许帕金森病人的脑细胞的变异性不同于普通人，脑电波放射非常独特而且不容易改变，所以对于大脑的伤害就呈现顽固性。希望现代医疗 科技 能够攻克这一难关，造福众多病患者。

治不了