应该不是吧,首先确定的是A为女子,那么老森就被排出了,李晓云,江娣都不可能,难道吸收他们进组织的东哥和中央政治部的官员都是傻X不成吗,有人说是凌霄儿,也不可能吧,起码她打不过叶慕灵吧,反倒是叶慕灵从一开始就很神秘,而且又那么巧救了肖雅,还有几次行动中他的表现,大家不觉得可疑吗,还有所谓的她和A的决战,难道不会是她事先安排的替身吗?
谢文东的秘书江娣。坏蛋3作者宅阿男最明显的提示是:江娣去安哥拉送帮安盟赢得选举的文件时,阿K说梅花A已经开始行动。后来江娣留在了李晓芸身边,而梅花A的目的是瓦解谢的经济。宅阿男写坏蛋3的时和道哥一直保持着沟通,其实江娣是梅花A是道哥早在坏蛋2就埋下伏笔了。
《坏蛋之风云再起》主要讲述的是2007年,当文东会老大--谢文东彻底消灭南H门,准备向世界H门进发时,意外发生了。
内容简介:
2007年,当文东会老大--谢文东彻底消灭南H门,准备向世界H门进发时,意外发生了,一场悲剧让整个黑道震动,文东会老大死了,这让文东会所有人感觉像天塌了一样,很快,整个黑道一片混乱,文东会四分五裂,要么被吞并,要么被剿灭,无一幸免。
久而久之,文东会的大名也渐渐远去。
2017年,H市一个叫谢天的少年,成立了文东会,并开始着他从小就有着的远大梦想,那就是完成当年文东会老大当年未完成的大业——一统世界黑道。
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结局:
“萧儿,你留下,我有事和你谈。”就在凌萧儿也准备离开的时候,谢文东却突然把她留了下来。其他的人不解地看了一眼凌萧儿,但也没多问,等最后一个人离开,并且把房门关上的时候,谢文东这才重新看向凌萧儿,他声音平淡地说道:“萧儿,我明天要去曰本!你就不要跟着去了。”
“为什么?”凌萧儿好奇地问道。
“我还有更重要的事,需要你去做。”谢文东说着话,掏出香烟,点燃之后,他吸了一口,才说道:“我已经派暗组的人去欧洲,打探死神联盟和罗斯柴尔德家族的信息了。
你以前曾是死神联盟的人,应该比较熟悉对方,我想要你去欧洲,帮他们查清楚对方各地的据点和一些基地,为以后我和他们全面交战打下基础,你愿意吗?”
凌萧儿的身体先是一颤,随即她重重点点头,面色自然地说道:“既然是东哥吩咐的事情,我自然会照办。”
“好!那你准备一下,明天就动身出发吧!”谢文东笑了笑,缓缓说道。
“是!
默默地看着凌萧儿的背影,直到她离开的那一刻,谢文东突然自言自语道:“梅花A,很抱歉!我不能让你跟我一起去曰本,因为子峰,必须坐上山口组组长的位置上。”
翌曰,谢文东一行人踏上了前往曰本的飞机上。
参考资料:百度百科-坏蛋之风云再起
坏蛋之风云再起里的梅花A是江娣。
谢文东的秘书江娣。坏蛋3作者宅阿男最明显的提示是:江娣去安哥拉送帮安盟赢得选举的文件时,阿K说梅花A已经开始行动。后来江娣留在了李晓芸身边,而梅花A的目的是瓦解谢的经济。
宅阿男写坏蛋3的时和道哥一直保持着沟通,其实江娣是梅花A是道哥早在坏蛋2就埋下伏笔了。
《坏蛋之风云再起》主要讲述的是2007年,当文东会老大--谢文东彻底消灭南H门,准备向世界H门进发时,意外发生了。
《坏蛋之风云再起》是连载于17K小说网连载的都市小说,作者是狂妄火焰。
姓 名 姜 玮性 别 男出生日期 1962-11职 称 教授(博导)研究类别 分析化学工作单位 分析化学研究所 毕业于山东大学化学系,获理学学士学位并留校任教,后获理学硕士及理学博士学位 - 山东大学化学系,助教 - 山东大学化学化工学院,讲师 - 山东大学化学化工学院,副教授 - 现在 山东大学化学化工学院,教授
收稿日期:2007-10-25基金项目:深圳市科技和信息局基金资助项目作者简介:王丹(1982-),女,辽宁本溪人,硕士研究生,从事植物生物技术研究。注:雷江丽为通讯作者。大花美人蕉茎尖组织培养技术研究王 丹1,2,雷江丽2,吴燕民3,吕 慧2,郁继华1(1.甘肃农业大学 农学院,甘肃 兰州 730070;2.深圳市园林科学研究所,广东 深圳 518003;3.中国农业科学院 生物技术研究所,北京 100081)摘 要:以大花美人蕉(Canna×generalis)根茎茎尖为外植体进行组织培养技术研究,筛选出芽诱导适宜的培养基为MS + 6-BA (单位下同)+ TDZ ;MS + 6-BA + TDZ + NAA 培养基能较好地诱导分化出丛生芽, 继代增殖培养中与MS + 6-BA + TDZ + NAA 培养基交替使用可减少畸形芽,增殖系数达;适宜的生根培养基为MS + 6-BA + NAA ,生根率达,且植株生长健壮,移栽易成活。关键词:大花美人蕉;茎尖;组织培养中图分类号: 文献标识码:A 文章编号:1009-7791(2008)01-0033-04Research on Shoot-tip Culture of Canna×generalisWANG Dan1,2, LEI Jiang-li2, WU Yan-min3, LÜ Hui2, YU Ji-hua1( of Agronomy, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, Gansu China; Institute of LandscapeGardening, Shenzhen 518003, Guangdong China; Research Institute, Chinese Academy of AgriculturalSciences, Beijing 100081, China)Abstract: The paper mainly studied on tissue culture of Canna×generalis with the stem tips asexplants. The results showed that the bud inoculation medium was MS + 6-BA ; the best of clump shoot induction and differentiation medium was MS + 6-BA +TDZ + NAA ; using MS + 6-BA + TDZ + NAA asproliferation medium, an optimal proliferation rate was obtained. When the two kinds of mediumused alternatively, the effect was better. The optimum rooting medium was MS + 6-BA +NAA , the rate of rooting could reach , and cultured in this medium, the plant grewwell and easy to words: Canna×generalis; shoot-tip; tissue culture大花美人蕉(Canna×generalis)属美人蕉科(Cannaceae)美人蕉属(Canna)的园艺杂交种[1],是多年生喜光宿根草本花卉,原产美洲热带和非洲等地。其枝叶茂盛、花朵艳丽、姿态优美、花期长,在深圳地区几乎全年开花,是配置大型花坛的优良品种。大花美人蕉不仅观赏价值高,而且能吸收硫、氯、氟、汞等有害物质,具有净化空气、保护环境的作用,因此,世界许多城市的园林绿化中都广泛应用。美人蕉传统的繁殖方式主要采用分切地下根茎的方法,繁殖速度慢、增殖效率低,而且连续营养繁殖造成病毒积累致使病毒病在各地相当普遍,严重影响其观赏价值。利用茎尖组织培养进行脱毒试管苗快繁,是目前大力繁殖与推广美人蕉的主要手段。关于美人蕉组织培养的研究报道较少[2,3],本研究探索其组织培养高效的再生体系,以期为品种提纯复壮及遗传转化、性状改良奠定基础。2008,37(1): Plant Science第·34· 37 卷1 材料与方法 材料供试材料为目前城市绿化中普遍应用的大花美人蕉‘President’品种。 外植体选择与处理选择生长健壮、无病虫害的优良母株,挖取带芽胞的根茎,去除表面老皮并用肥皂水清洗。用75%乙醇棉擦拭,然后采用不同的消毒剂及处理时间(升汞10min、2%次氯酸钠10min、2%次氯酸钠20min、2%次氯酸钠 + 升汞5min、2%次氯酸钠 + 升汞10min),封闭式振摇灭菌。无菌水冲洗5 次,置于超净工作台上备用。接种前,剥去外部叶片,露出生长点,立即切取茎尖进行接种。 培养方法及培养条件试验于2006 年10 月在深圳市园林科学研究所组培室进行。诱导、增殖和生根培养基均选用MS为基本培养基,在不同培养阶段附加不同种类、不同浓度配比的植物生长调节剂(表2~表4),蔗糖3%,pH 。培养温度(28±2)℃,光照强度2 500 lx,光照周期为14h/d,相对湿度70%~80%。每处理接种30 瓶。定期观察试管苗生长与分化情况。2 结果与分析 不同消毒处理方式对外植体无菌化的影响因供试外植体取自美人蕉地下根茎,表面污染物较多,不易消毒,且不同植物及外植体的成熟度对消毒剂的反应不同,故本试验选用升汞和次氯酸钠进行灭菌效果比较,以筛选合适的消毒剂及消毒处理时间。由表1 可知,2%次氯酸钠20min 处理的无菌化效果较好,但茎尖褐化较严重,说明灭菌时间过长对去老皮后的幼嫩根茎影响较大。升汞10min 处理与2%次氯酸钠 + 升汞 10min处理,无菌化效果差异不大,但2%次氯酸钠 + 升汞 10min 处理有轻微药害。因此,后续实验选用升汞处理10min 进行外植体消毒。 不同生长调节剂配比对芽诱导的影响以MS 为基本培养基,附加不同浓度6-BA、NAA、2,4-D、KT、TDZ 等(表2),以筛选出较适宜美人蕉茎尖诱导分化的配方。因美人蕉根茎具有休眠特性,芽诱导分化较难。TDZ 具有很强的促进细胞分裂活性,~μmol/L 即可有效促进分化[4],因此,本实验对TDZ 的诱导效果进行初步探索。试验表明,在不添加任何生长调节剂的MS 基本培养基(1 号)上,茎尖接种10d 后开始生长,叶片展开后,生长停止;15d 后转接到新的MS 培养基上无明显生长,随后叶片逐渐变黄、萎蔫,说明基本培养基中添加生长调节剂是美人蕉离体培养的必要条件。在仅添加6-BA 的2、3、4 号培养基中,高浓度的2 号培养基分化率为,明显好于3、4号培养基,说明美人蕉启动芽诱导分化需要高浓度的细胞分裂素(表2)。11~16 号培养基添加物为不同生长调节剂与TDZ 组合(表2)。仅添加TDZ 的培养基分化率为0,而多种生长调节剂配合使用分化效果更好[5]。其中15 号培养基的侧芽分化率最高,达,且每个茎尖可增殖2~3 个侧芽,但个别茎尖经多次转接后有畸形芽;与2 号培养基相比,分化率明显提高,说明添加低浓度TDZ 可促进芽诱导分化(表2)(图版-a)。5、6、7 号培养基为生根培养基,探讨NAA 对美人蕉茎尖生长和生根的影响。试验结果初步说明美人蕉在6-BA/NAA 小于2/ 时生根率可达50%以上(表2)。8、9、10 号培养基,探讨美人蕉脱分化,诱导愈伤组织,但结果均不理想。因此,建立高效的美表1 不同消毒剂及处理时间对外植体无菌化的影响处 理 接种数污染数污染率(%) 药害情况升汞10min 30 5 基本无药害2%次氯酸钠10min 30 12 无药害2%次氯酸钠20min 30 4 20%有轻微药害2%次氯酸钠+升汞5min 30 10 3%有轻微药害2%次氯酸钠+升汞10min 30 5 7%有药害第1 期 王丹,等:大花美人蕉茎尖组织培养技术研究 ·35·人蕉遗传转化再生体系还需进一步探索愈伤组织诱导途径。 芽继代增殖为了探讨优化的芽继代增殖培养基配方,按表3 设计6-BA、NAA、TDZ 的正交实验,以15 号培养基上分化出的丛生芽为接种材料,进行继代增殖培养(图版-b)。由表3 可见,除17、18 号培养基外,低浓度TDZ()的分化促进作用较高浓度()的效果好,说明高活性的TDZ 浓度过高反而抑制分化。当 时, NAA 促分化作用显著优于。在TDZ、NAA 浓度相同的情况下,随着6-BA 浓度的升高,分化率提高。但随着继代次数的增多,含高浓度6-BA的27 号培养基分化率略有下降,甚至有个别畸形芽产生,说明高浓度细胞分裂素对短期的分化有促进作用[9],但继代数次后,芽已经萌动,自身具有分化能力,需适当降低6-BA 浓度进行壮苗,以避免畸形芽产生。因此,在增殖过程中交替使用分化增殖系数较高的19 号培养基和27 号培养基,既可保证较高的芽分化率,又可使继代苗生长健壮,减少畸形芽。 生根诱导增殖芽3~5cm 长时,转接到生根培养基上培养约10d 后,可见到根生成(图版-c)。接种20d 后统计生根结果(表4)。从表4可见,所用培养基上都有根生成,说明美人蕉生根较容易;结合生根率和生长势,我们认为MS + 6-BA + NAA 培养基较适宜美人蕉生根。表2 不同植物生长调节剂组合的比较植物生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA 2,4-D KT TDZ分化率(%) 生根率(%) 备注1 0 0 0 0 02 9 0 0 0 0 参考[2]3 5 0 0 0 0 参考[3]4 3 0 0 0 0 2 1 0 0 0 2 0 0 0 2 0 0 0 08 0 0 4 0 09 0 0 2 1 0 参考[6]10 0 0 2 0 参考[7]11 0 0 0 0 012 0 0 0 参考[8]13 0 0 0 0 0 1 0 8 0 0 0 5 0 0 表3 不同生长调节剂配比对芽继代繁殖的影响生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA TDZ接种数分化率(%)增值系数 生长势17 30 ++18 30 ++19 30 ++20 30 ++21 30 ++22 30 ++23 30 ++24 30 +25 30 ++26 30 +27 30 ++28 30 +注:++ 表示生长势强;+表示生长势弱。同列中不同字母表示差异显著(P<=,表4 同。表4 不同的生长调节剂配比对组培苗生根的影响生长调节剂(mg/L) 编号6-BA NAA接种数生根苗数生根率(%)植株生长势29 0 30 19 +30 0 30 21 ++31 30 20 +++32 30 16 ++注:+++ 表示生长势强;++表示生长势中等;+表示生长势弱。第·36· 37 卷3 结 论美人蕉根茎生长在土壤中,无菌化操作较困难。灭菌试验表明,升汞震荡灭菌10min 效果较好,采回的外植体应尽快处理接种,放置时间过长伤口处易染菌,导致接种后褐化较严重。MS + 6-BA + ZDT + NAA 培养基能较好地诱导分化丛生芽,MS + 6-BA + TDZ NAA 为较好的增殖培养基,在增殖培养过程中这两种配方交替使用效果更好;短时间使用高浓度生长调节剂对增殖有促进作用,但长时间使用高浓度生长调节剂会使组培苗质量下降。在试验中还发现,转接次数多的茎尖较转接次数少的分化率大,建议在接种后的10~20d 内及时转接。选用MS + 6-BA + NAA 为生根培养基,生根率较高,根系粗壮、根毛密集,植株生长健壮(图版-d),且移栽成活率较高。参考文献:[1] Segeren W, et al. The genus Canna in Northern South America[J]. Acta Bot Neerl., 1971,20(6): 663-680.[2] 刘文萍,等. 美人蕉茎尖组织培养及快繁技术[J]. 北方园艺, 2001(6): 32.[3] 丁爱萍,等. 美人蕉组织培养及快速繁殖技术[J]. 园林科技, 2006(1): 11-12.[4] Singh N D, et al. The effect of TDZ on organogenesis and somatic embryogenesis in pigeonpea (Cajanus cajan L. Millsp)[J].Plant Science, 2003,164(3): 341-347.[5] 王关林,等. 高活性细胞激动素TDZ 在植物组织培养中的应用[J]. 植物学通报, 1997,14(3): 47-53.[6] 宣朴,等. 生姜茎尖组培快繁技术研究[J]. 西南农业学报, 2004,17(4): 484-486.[7] Kromer K, et al. In vitro cultures of meristem tips of Canna indica L.[J]. Acta Horticulturace, 1985,167: 279-286.[8] Vendrame W A, et al. In vitro propagation and plantlet regeneration from Doritaenopsis Purple Gem 'Ching Hua' flowerexplants[J]. HortScience, 2007,42(5): 1 256-1 258.[9] 刘敏. 花卉组织培养与工厂化生产[M]. 北京: 地质出版社, 2002: 101-102.
植物组织培养及其应用研究概况在世界各国科学家的不断努力下,近几十年来,植物组织培养技术迅速发展。利用组织培养,不仅可以大量生产优良无性系,获得人类需要的多种代谢物质,还可获得单倍体、三倍体、多倍体及非整倍体。通过细胞融合可以打破种属间的界限,克服远缘杂交不亲合性,在植物新品种的培育和种性的改良中发挥了巨大作用。组织培养的植物细胞是在细胞水平上分析研究的理想材料,从植物快繁、花药培养发展到细胞器培养、原生质融合以及DNA重组技术等,植物组织培养技术广泛应用于植物科学的各个领域及农业、林业、工业、医药等多种行业,已经成为当代生物科学中最有生命力的一门学科。1 植物组织培养的基本概念、原理和试验步骤1.1概念植物组织培养是在无菌条件下,将离体的植物器官(根尖、茎尖等)、组织(形成层、花药组织等)、细胞(体细胞、生殖细胞等)、胚胎(成熟或未成熟的胚)、原生质体等在人工配制的培养基上培养,给予适宜的培养条件,诱发其产生愈伤组织或潜伏芽或长成完整的植株的技术。1.2原理 植物组织培养的依据是植物细胞的“全能性”及植物的“再生作用”。1902年,德国著名植物学家 G.Haberlandt根据细胞学理论提出了一个观点,“高等植物的器官和组织可以不断分割,直至单个细胞,即植物体细胞,体细胞在适当的条件下具有不断分裂、繁殖并发育成完整植株的潜力”。1943年,美国人White在烟草愈伤组织中偶然发现形成一个芽,证实了G.Haberlandt的论点。 不同植物所需要的生长条件不同,所用的培养基也有所不同。较常用的基础培养基有MT、MS、 SH、N6、White等。在组织培养中,愈伤组织和胚状体能否形成是培育出新植株的关键。通过在基础培养基里添加一定浓度的外源激素,可以诱导出愈伤组织、胚状体、不定芽、根等器官,最终获得再生植株或次生物质。 用于植物组织培养的材料称为外植体,其主要形式有器官、胚胎、单细胞、原生质体等。根据外植体的不同,所需要的培养基种类、培养条件、外源激素的种类及比例等均不同。植物组织培养中,影响培养力的因素是多方面的,诱导愈伤组织成败的关键在于培养条件,植物激素是诱导愈伤组织和绿苗分化的关键因素。最常用的诱导愈伤组织的生长素是IAA、NAA和2,4一D,所需浓度为O.01~10 mg/L。最常用的细胞分裂素是KT和ABA,使用浓度为O.1~10 mg/L。KT的主要作用是促进细胞分裂和愈伤组织分化。ABA对植物体细胞胚的发生与发育具有重要作用。各类植物激素的生理作用虽有相对专一性,但是植物的各种生理效应是不同种类激素之间相互作用的综合表现。1.3试验步骤1.3.1选择和配制培养基 培养基是植物组织培养中的“血液”,血液的成分及其供应状况直接关系到培养物的生长与分化,因此了解培养基的成分、特点及其配制至关重要。1.3.2灭茵灭菌是组织培养中的重要工作之一,通常采用物理的或化学的灭菌方法。培养基用常压或高压蒸煮等湿热灭菌、器械采用灼烧灭菌、玻璃器皿及耐热用具采用干热灭菌、不耐热的物质采用过滤灭菌、植物材料表面用消毒剂灭菌、物体表面用药剂喷雾灭菌、接种室等空间采用紫外线或熏蒸灭菌。1.3.3接种将已消毒好的根、茎、叶等离体器官,经切割或剪裁成小段或小块放入培养基,整个接种过程要在无菌条件下进行。 .4培养把培养材料放在有一定光照和温度等条件的培养室里,使之生长、分裂和分化,形成愈伤组织或进一步分化成再生植株。1.3.5试管苗驯化移栽 试管苗是在特殊环境条件下生长的幼苗,与自然生长的幼苗有很大差异,只有通过驯化,使之适应自然环境后才能移栽。2 植物组织培养的应用2.1植物快速繁殖和无病毒种苗生产植物快速繁殖技术始于20世纪60年代,法国的Morel用茎尖培养的方法大量繁殖兰花获得成功,从此揭开了植物快速繁殖技术研究和应用的序幕。目前,通过离体培养获得小植株并且具有快速繁殖潜力的植物已有100多科1 000种以上,有的已经发展成为工业化生产的商品。世界上80%~85%的兰花是通过组织培养进行脱毒和快速繁殖的。培养的植物种类也由观赏植物逐渐发展到园艺植物、大田作物、经济植物和药用植物等。在我国,同类的研究始于20世纪70年代。马铃薯无毒种薯和甘蔗种苗已在生产上大面积种植,30余种植物已进行规模化生产或中间试验。利用组织培养进行植物快速繁殖及无病毒种苗生产,不仅能够挽救珍惜濒危物种,而且能够解决植物野生资源缺乏的问题。2.2植物花药培养和单倍体育种 将植物花药培养成单倍体植株,再经过染色体加倍,能很快得到纯合的二倍体,这样将大大缩短育种年限。到目前为止,世界上通过花粉和花药培养已获得了几百种植物的单倍体植株。印度科学家应用这种方法培育的水稻品系,比对照产量提高15%~49%。韩国先后育成了5个优质、抗病、抗倒伏的水稻品种。我国自20世纪70年代开始该领域的研究,已经培育了40余种由花粉或花药发育成的单倍体植株,其中有10余种为我国首创。玉米获得了100多个纯合的自交系;橡胶获得了二倍体和三倍体植株。仅“九五”期间就育成高产、优质、抗逆、抗病的农作物新品种44个,种植面积超过660万 hm2。2.3植物胚胎培养杂交育种中,杂种胚常常败育,因此将早期生长的胚取出,应用组织培养方法,就有可能培育出杂交植物。已经有100篇以上幼胚培养成为植株的报道。国内外科学家应用植物胚胎培养技术获得了多种远缘杂交的重组体、栽培种和杂交品种。2.4植物愈伤组织或细胞悬浮培养利用植物愈伤组织或细胞悬浮培养可以生产用于预防和治疗疾病的植物次生代谢产物。近年来,这一领域的发展极为迅速,已经研究了400多种植物,从培养细胞中分离到600多种次级代谢产物,其中60多种在含量上超过或等于原植物,20种以上干重超过原植物的1 9,6。例如,从薯芋愈伤组织和悬浮细胞生产的diosgenin用于合成甾体药物。最近抗癌药物紫杉醇一红豆杉细胞培养物,可用75t发酵罐培养,已达到商业化生产水平。另外,达到商品化水平的还有紫草、人参、黄连、老鹳草等;长春花、毛地黄、烟草等已实现工业化生产;牙签草、红花等20多种植物正在向商品化过渡。2.5细胞融合与原生质体培养自1960年英国学者Cocking首次利用纤维素酶从番茄幼苗的根分离原生质体获得成功以来,到1990年已有100种以上植物的原生质体能再生植株。我国获得了30余个品种的原生质体再生植株,其中包括难度较大的重要粮食作物和经济作物,如大豆、水稻、玉米、小麦、谷子、高梁、棉花等。在木本植物、药用植物、蔬菜和真菌原生质体培养方面的进展也十分迅速。国外已先后获得了种内及种间的体细胞杂种植株。植物原生质体培养还可应用于外源基因转移、无性系变异及突变体筛选等研究,因而越来越受到人们的重视。2.6植物细胞突变体筛选植物细胞突变体的筛选最早始于1959年,G. Melchers在金鱼草悬浮细胞培养中获得了温度突变体。1970年,P.S.Carlson,H.Binding和Y.M. Heimer等分别分离出烟草营养缺陷型细胞、矮牵牛抗链霉素细胞系及烟草抗苏氨酸细胞系。迄今为止,已经在不少于15个科45个种的植物细胞培养中筛选出100个以上的植物细胞突变体或变异体。其中包括抗病细胞突变体,如玉米抗小斑病突变体和小麦抗赤霉病、根腐病突变体;抗氨基酸及其类似物细胞突变体,如甘蓝型油菜抗HYP突变体[263;抗逆境胁迫细胞突变体,如水稻耐盐突变体和小麦抗盐突变体;抗除草剂细胞突变体及营养缺陷型细胞突变体,如玉米抗除草剂变异体;株高突变体的筛选,如水稻矮秆变异体。2.7植物体细胞胚胎和人工种子1958年,Reinert在胡萝卜的组织培养中最先发现了体细胞胚胎(胚状体)。据不完全统计,能大量产生胚状体的植物有43科92属100多种。一些重要作物如水稻、小麦、玉米、珍珠谷等,也能通过离体培养产生胚状体。这些胚状体用褐藻酸钠等包埋,再加上人工种皮,就形成了人工种子。人工种子的优点是:繁殖快速,成苗率极高;不受气候影响,四季皆可工厂化生产。上世纪80年代初,美、日、法等国家相继开展了人工种子的研究,我国也于“七五”期间开展了此项研究,并于1987年列入了国家“863”高技术研究发展计划。2.8 植物组织细胞培养物的超低温保存与种质库建立植物细胞全能性的发现和证实,为植物种质资源的长期保存开辟了一条新途径。采用液氮超低温保存技术,能保持很高的存活率,并且能再生出新植株和保持原来的遗传特性。如建立茎尖分生组织培养物的超低温保存种质库,不仅可以防止种质的遗传变异和退化,而且可以长期保存无病毒的原种。2.9 植物组织培养与转基因技术的应用 我国第一个T—DNA插入突变体库的构建和研究为我国水稻功能基因组学研究奠定了良好的技术和材料基础,为确保我国拥有一批有自主知识产权的基因资源做出了积极贡献。由中国水稻研究所农业部水稻生物学重点开放实验室和中科院上海植物生理研究所合作,通过建立大规模、高效的农杆菌介导的转基因技术体系,将玉米转座子Ac—Ds等外源基因导入水稻未成熟胚和种子诱导的愈伤组织,获得了1.2万个独立的T—DNA插入株系,并构建了水稻突变体的数据库。 3 展望植物组织培养研究与应用是20世纪科技进步的重大成果之一,为研究植物生长发育、抗性生理、激素及器官发生与胚胎发生等提供了许多良好的实验材料和有效途径。植物组织培养方法不断提高的同时,也相应拓宽了其应用范围。由于组织培养在人工控制的条件下进行,容易掌握花芽分化和开花成因;通过胚胎培养,能够得到杂种或自交种;通过分离单倍体细胞,能培育纯合的二倍体优良品系;提高育种多样性的同时缩短了育种时间;通过突变体筛选,提高植物的品质,增强抗逆境胁迫能力,扩大植物的生长范围;将体细胞冷藏在低温下,建立基因库,达到保存物种的目的;获得药用价值高和工业生产所需要的次生产物,加快药物生产的时间并且减少了单纯依靠天然植物的被动性。植物组织培养技术已经渗透到科研、生产和生活各个领域,必将日臻完善。黑龙江农业科学2006,(3)
药学毕业论文比较好写的题材:
1、薜荔果总黄酮提取工艺及抗氧化性研究
2、超声波辅助酶法提取百香果果皮中果胶的工艺研究
3、甘草及其提取物的药理作用、提取工艺及在家禽养殖中的应用
4、花椒叶挥发油的提取工艺优化及抗氧化活性
5、生姜中活性物质糖蛋白的提取工艺及抗菌活性
6、海西黑枸杞多糖酶法提取工艺研究及其体外抗氧化性分析
7、超声波辅助法提取核桃青皮总黄酮工艺及抗氧化活性研究
药学学子的课程主要以研究药剂学、药理学、药物化学、药物合成等方面的知识和技能为主。药学毕业论文分类:
一、药学专业毕业论文分综述类、调研类和实验类。
二、药学专科毕业论文可以写综述类或者实习报告。
三、药学本科毕业论文要求有数据分析,只能写调研类和实验类,且大部分学校会要求写实验类。调研类毕业论文,可通过调查问卷收集数据进行分析,也可对已有的数据进行回顾性分析(例如医院某一段时间处方用药的分析)。
四、实验类毕业论文,分药剂、药分、药化、药理等实验,选题也各不相同。一般制备工艺和质量研究类较容易。
审计论文提纲
导语:近年来我国商业银行蓬勃发展,取得了显著的成绩,但是我国的审计仍然存在许多的问题。下面是我分享的审计的论文提纲,欢迎阅读!
题目:商业银行内部审计问题及措施
摘要:近年来我国商业银行蓬勃发展,取得了显著的成绩,但是商业银行在内部审计过程中依然存在着诸多问题,例如相对独立性难以保证、审计人员专业水平有待提高、审计质量参差不齐等现象,本文通过对当今内部审计现状的描述,对商业银行中出现的突出问题以及产生问题的原因分析,进一步提出改善措施,本文对于改善内部审计问题具有一定的借鉴意义。
关键词:商业银行;内部审计;问题;措施
1.概述
2.商业银行内部审计现状
银行内部审计管理与机构配置
银行内部审计内容多样化
银行内部操作系统智能化
3.商业银行内部审计存在的问题及原因
内部审计权限独立性不足
审计人才短缺
审计质量难以保证
4.商业银行内部审计改进措施探究
完善监督机制
加强审计人员培训和整体素质建设
更新审计技术及方法
5.结语
参考文献:
[1]邱兆祥,邱俊杰.商业银行内部审计转型升级:现实意义与实践路径[J].西南金融,2013,06:12-15.
[2]李亚鹏,廉鹏飞.商业银行内部审计未来发展的趋势[J].时代金融,2013,24:21-22.
[3]丁俊博,李烨,徐润,等.江苏省商业银行转型背景下内部审计独特性的探讨[J].现代商业,2013,33:204-207.
[4]朱泉.浅谈风险导向内部审计在商业银行风险管理中的运用[J].金融纵横,2012,04:51-55.
[5]黄种.中国商业银行内部审计独立性研究[J].管理观察,2015,03:9-11.
题目:国企境外投资税收风险管理审计探析
摘要:随着我国“一带一路”战略的实施和境外投资日益增多,国家审计的视野应拓展到境外国有企业和国有资产,现代国家审计目标具有综合性的要求,因此现代国家审计应该关注境外投资的.税收风险管理审计。本文首先探讨国企境外投资税收风险管理审计之地位,再研究税收风险管理审计包含的双重税收风险管理审计、境外企业组织结构风险管理审计、转移定价风险管理审计、资本结构风险管理审计以及税收协定风险管理审计这五个维度的审计内容,最后分析如何加强发展跨国审计合作,以应对境外投资审计的需求。
关键词:国有企业;税收风险;境外审计;跨国合作
0引言
1文献综述
境外投资税收风险
税收风险审计
2国企境外投资税收风险管理审计的内容
双重税收风险管理
境外企业组织结构风险管理
转移定价风险管理
资本结构风险管理
税收协定风险管理
3大力推进国企境外投资税收风险管理
参考文献
[1]韩师光.中国企业境外直接投资风险问题研究[D].吉林大学,2014.
[2]郝玉贵,赵晨,郝铮.国家审计服务“一带一路”战略的理论分析与实现路径[J].审计与经济研究,2016(02):23-32.
[3]华维真.试述企业境外投资税收风险控制[J].涉外税务,2010(03):31-33.
[4]王克玉.境外国有企业法律风险管理审计探讨[J].审计研究,2015(05):14-19.
题目:内部审计在现代财务管理的运用
摘要:目前,社会经济发展迅猛,而对于内部审计来说,和财务管理之间关系,变得更加密切。现如今,现代财务管理阶段,对于内部审计而言,成为不可或缺关键。而随着财务管理方面要求持续变高,无论内部审计工作,还是财务管理工作,在目标方面逐渐一致,从而促进财务管理顺利实施。通过科学有效内部审计,利于单位达成目标,实现价值。本文针对财务管理工作环节,如何实现内部审计应用展开一定探讨。
关键词:内部审计;现代财务;管理;应用;效用;分析
一、财务管理阶段普遍面临实际问题
(一)财务管理缺乏重视
(二)整个财务管理体系,难以充分满足现代管理需求
(三)关于财务管理,执行力方面不高
(四)关于财务管理人员,综合素质需要加强
二、内部审计之于现代财务管理方面实际作用
(一)借助于内部审计,能够帮助管理人员加强财务管理
(二)借助于内部审计,实现财务管理体系更加完善
(三)借助于内部审计,可以增强财务管理执行作用
(四)借助于内部审计,增强财务管理人员能力水平
三、结语
参考文献:
[1]马卫红.浅谈内部审计在现代财务管理中的作用[J].中小企业管理与科技,2014.
[2]姜雷.内部审计在现代财务管理中的作用[J].中外企业家,2015.
[3]梁丹.浅议农村信用社财务管理及内部审计[J].财经界(学术),2010.
[4]何立志.内部审计在国有企业财务管理中的作用探究[J].现代经济信息,2012.
[5]郝栋梁.新时期医院财务管理的内涵现状与对策对促进内部审计的意义探讨[J].大家健康(下旬版),2013.
最开始是郭德纲在相声里面讽刺姜昆的女儿姜珊被导演潜规则,后来愈传愈烈。郭德纲曾经说过的一个段子是“北京某知名相声艺术家的女儿为了出名走捷径,陪睡外国导演,醒来后发现人家是导卡通片的”,暗示姜昆的女儿姜珊去讨好导演,被导演潜规则。这段流出后,网友们纷纷去扒姜珊。姜珊是著名笑星姜昆与李静民的独生女儿,出生于1979年4月。1992年,在中央电视台举行的元旦晚会上,姜珊与歌手章鹏演唱的主题歌曲《祝福明天》,给亿万观众留下了难忘的印象,成为保留节目。随后,许多音乐人和制作公司看中了这位“童星”身上的潜力,纷纷找上门来与她合作。于是,1993年,14岁的姜珊一口气推出了《梦中的秋千》、《歌坛童星——姜珊》、《姜珊93新专辑》等多张专辑,发行量达数十万张。但姜昆并不希望姜珊因此荒废学业。1997年高中毕业时,姜珊选择了美国洛杉矶一所名校,攻读电影制作专业。2001年夏,姜珊大学毕业了,在洛杉矶一家文化公司从事影视创意和策划。3年后,姜珊辞去美国的工作,回到了北京,与丈夫成立了一家影视制作公司。
2001年夏天,姜珊大学毕业了,很快在洛杉矶一家文化公司找到了工作,从事影视创意和策划。2004年5月,姜珊辞去美国的工作,回到了北京。后来姜珊结婚了,丈夫是她初中同学。2006年,在姜昆的支持下,姜珊与丈夫成立了一家影视制作公司,经营影视剧的制作和推广业务。
姜珊,女, 1984年出生,山东省泰安市人,中国女子体操队员。姜珊在202年进入国家队, 206年在多哈亚运会上,姜珊与队友合作,为中国女队获得团体金牌立下了汗马功劳。 206年世界杯斯图加特站,姜珊与队友合作,获得团体金牌。 207年世锦赛,姜珊获得团体第五。 207年体操世界杯科特布斯站,姜珊获得高低杠、自由操两枚金牌。 208年北京奥运会,姜珊与队友合作获得团体金牌。 209年体操世界杯科特布斯站,姜珊获得高低杠、平衡木、自由操三枚金牌。 2010年世锦赛,姜珊获得团体第三名。 201年世锦赛,姜珊获得团体银牌。 201年体操世界杯斯图加特站,姜珊获得高低杠冠军。
2007“中国演艺名人公众形象满意度调查”报告本月初出炉,在500名演艺名人公众形象排行中,姜昆以分的成绩名列榜首。姜昆在外的公众形象令人“满意”,那么在家里,他是一个令人“满意”的父亲吗?他的女儿曾经是一个很有名的“童星”,可姜昆并没有让女儿往演艺上发展,而是让她专心读书。这对父女经历了怎样的心路历程?他们的情况如何?记者对笑星姜昆进行了独家专访 。 姜珊是著名笑星姜昆与李静民的独生女儿,出生于1979年4月。父母的遗传基因和家庭的熏陶,让姜珊很小就表现出过人的艺术才华,她4岁就能流畅地用钢琴弹奏歌曲,能有模有样地把几十首流行歌曲唱下来。1992年,在中央电视台举行的元旦晚会上,姜珊与歌手章鹏演唱的主题歌曲《祝福明天》,给亿万观众留下了难忘的印象。随后,许多音乐人和制作公司看中了这位“童星”身上的潜力,纷纷找上门来与她合作。于是,1993年,14岁的姜珊一口气推出了《梦中的秋千》、《歌坛童星——姜珊》、《姜珊93新专辑》等多张专辑,发行量达数十万张。那时,随着女儿一天比一天辉煌,要忙于演出和接受采访的她,用在学习上的时间越来越少。女儿还是个孩子,主要任务是学习,如果耽误了学业,以后该怎么办呢?姜昆越想越后怕,他甚至懊悔当初把女儿带进演艺圈。1994年4月的一天,姜珊又从外地演出回来,姜昆把女儿叫到书房,郑重地对她说:“南南(姜珊的小名),爸爸觉得,从现在起,你必须退出演艺圈,回到学校安安心心读书。”姜珊睁着一双迷茫的大眼睛问:“为什么?您知道现在有多少人羡慕我吗?别的父母有这样的女儿,恨不得孩子名气更大,您怎么却要我退出?我喜欢现在这样的生活。”但一向以慈父形象出现在姜珊面前的姜昆,在对待女儿的这件事上,立场非常坚定。女儿已经接下的演出活动,他通过关系推掉了;有音乐制作公司找上门来,要为姜珊录制专辑,也被姜昆客气地打发走了。5月的一天,固执的姜珊背起包要去石家庄演出,姜昆一气之下,把女儿锁进了房间里……想来想去,姜昆觉得最好的办法就是给女儿换个环境,让她去一个全新、陌生的环境里生活、学习,那样,谁都不认识她,她浮躁的心就会渐渐平静下来。这年9月,姜昆就强行把女儿送上了飞往澳大利亚留学的航班。 自己的明星梦就这样被父亲狠心地扼杀了,姜珊怎么也难以释怀,内心深处,她对父亲充满了怨恨。在陌生的澳大利亚读中学,语言的障碍和生活的不习惯,让姜珊精神上承受着巨大的痛苦。回想在国内众星捧月的明星生活,再看看自己像只受伤的孤雁一样蜷缩在异域他乡,她黯然落泪,决心要找回从前的生活!两个月后,姜珊没有告诉任何人,悄悄从澳大利亚返回了北京。望着突然从天而降的女儿,姜昆和李静民都惊呆了。当得知女儿回国的真实原因后,姜昆气得脸色煞白,当天晚上,就为女儿订了返回澳大利亚的机票。经历了这一次,姜珊对父亲的怨恨又多了几分。1995年春节,姜珊赌气没有回到北京。3月,姜昆和李静民前往澳大利亚看望女儿。令姜昆尴尬和寒心的是,女儿不正眼看他,只与母亲打招呼、说话,仿佛他这个父亲不存在似的。这一次,姜昆紧紧拉着女儿的手,把自己的心里话全部告诉了她:“孩子,这几年你把文化基础打牢,等你到了20岁,你再重返演艺圈。到那时,爸爸一定支持你!”姜珊擦干眼泪,和父亲约定,在她20岁那年再进演艺圈。1997年高中毕业时,姜珊选择了美国洛杉矶一所名校,攻读电影制作专业。在国内养尊处优的“童星”姜珊,和众多普通留学生一样,一边学习,一边打工,端盘子、洗碗、切菜……几年留学生活的磨砺,让姜珊昔日心头“童星”的优越感荡然无存。当姜珊20岁时,姜昆觉得自己该兑现当初和女儿的约定,他告诉女儿:“爸爸说话算数,已经为你在洛杉矶联系了一家音乐学院,你去学习声乐吧,准备重返演艺圈。”出乎姜昆意料的是,姜珊直言不讳地告诉他:“爸爸,我现在对当歌星已经没有什么兴趣了……” 面对父亲惊诧的目光,姜珊认真地对姜昆说:“爸爸,我喜欢现在的电影制作专业,想努力把这门专业学好,歌星梦早已在我心里淡去了。”她明确地告诉父亲,她不想把唱歌作为自己一辈子的事业。2001年夏,姜珊大学毕业了,在洛杉矶一家文化公司从事影视创意和策划。3年后,姜珊辞去美国的工作,回到了北京。姜珊是哭着被父亲强行送出北京的;10年后再回到曾经熟悉的京城,岁月已经将一切改变。再看北京,姜珊觉得一切都是那么陌生,一切都要从零开始。她去外企当过白领丽人,在文化公司从事过创意总监,也许是离开得太久的缘故,她始终无法融入周围的环境,找不到工作的乐趣。女儿的郁闷与困惑,每一个细微之处姜昆都看在眼里,他与姜珊进行了一番长谈:“孩子,爸爸觉得你还是应该走唱歌这条路。虽然你已经离开歌坛这么多年,但没有关系。凭你的实力和功底,加上爸爸的帮助,相信你很快就会红起来。”李静民也劝女儿:“孩子,如果你不答应,你爸爸会很内疚的。”重返演艺圈,一切都是那么陌生。2005年3月,当北京一家演出单位邀请姜昆演出时,他向对方推荐了自己的女儿,演出方想起了姜珊这位昔日的“童星”,爽快地答应了。姜珊重新拿起话筒,站在舞台中央放声歌唱,但她早已没有了骨子里的那种兴奋,鲜花和掌声不再令她热血沸腾。2005年8月,姜珊在天津的一次演出结束后,许多记者围着她采访,提的问题令她难以招架:“如果你父亲不是姜昆,你在离开歌坛这么多年后,还有机会重新登台演出吗?”“你父亲是不是想把你提携到像他在相声界那样的地位和高度?”一个个刁钻的问题,像炮弹一样砸向姜珊,她眼里蓄满了泪水……回到家,姜珊认真地告诉父亲:“爸,我再也不想唱歌了,实在找不到快乐。现在这样的生活不是我想要的。”姜昆发现女儿的话发自肺腑,何必勉强女儿做她不喜欢的事呢?他告诉姜珊:“既然你不想唱歌了,就放弃吧,你想做什么,就自己选择吧。”思来想去,姜珊觉得还是应该从事自己的专业,便与丈夫成立了一家影视制作公司。如今,忙忙碌碌的平常人生活,让姜珊很充实,很知足。她不羡慕父亲那样的名人生活,她告诉父亲:“名人有名人的烦恼,普通人有普通人的精彩!”2011年姜昆的女儿姜珊“触电”,在一部喜剧片中出演重要角色,出身演艺世家的她表示,自己一直对表演深感兴趣,但姜珊回国几年一直从事幕后工作,姜昆早就断了她的“歌星梦”。陪父亲姜昆出席活动姜昆携女儿姜珊一同出席某时尚晚宴活动。或是因为有女儿在身旁陪伴,姜昆当晚显得十分开心频频举杯。