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核酸检测论文摘要

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核酸检测论文摘要

核酸分脱氧核糖核酸和核糖核酸,包括DNA和RNA,核酸的最小组成成分是核苷酸,包含脱氧核苷酸和不脱氧核糖核酸,基因是DNA的一部分,不同的人DNA不同,核苷酸的含氮碱基包括腺嘌呤,鸟嘌呤等等。核苷酸包括含氮碱基,五碳糖,磷酸根。核酸是一种聚合物。 核酸检测目前多是通过取咽试子的方法,病毒感染口腔黏膜上皮以后会寄宿在口腔黏膜上皮,通过采咽拭子可以达到取样的目的。 一种病毒只有一种核酸,称为DNA病毒或RNA病毒。通过检测这些病毒,可以判断有没有病毒感染。核酸检测需要人员固定时间,固定地点,采样。需要耗费政府和卫生机关一些人力,财力,物力。采样的目的是检测是否有新冠病毒的脱氧核糖核酸。新冠病毒来源广泛,我们都无法准确预测,只有把自己检验出来的人体DNA与新冠病毒DNA作比较,才能可能把疾病控制在可控范围内,才能真正给人民一份满意的答卷。 我们都希望数学家能站出来研究疫情和探究规律,需要物理学家在技术层面发表论文,需要医学家在我们的领地研制疫苗,描述污染。中国抗疫的成功使得人们都承认中国政府,需要努力克服困难。 我们不应该放弃老年人和穷人。酸性条件下舒适区易感染肺炎。越是发展快的地方越是需要人努力,人们必须认识到生命的宝贵和重要。

为了更好的提高微生物食品的安全性,对微生物的检验技术的发展就变得十分的重要。下面是我为大家整理的食品微生物论文,供大家参考。

【论文关键词】:食品微生物 实验教学 实验开放管理

【论文摘要】:食品微生物实验教学中,本文从精心选择实验内容,有效组织管理实验教学,引进综合考评机制并加强开放管理实验室方面进行思考和 总结 ,以期确保实验课安全、有序、成功的完成,达到教学目的。

实验教学是高等 教育 教学活动的重要环节。通过实验课不仅可以加深学生对课堂内容的理解,巩固已学到的理论知识,而且能够培养学生理论联系实际的能力、分析问题和解决问题的能力,对于活跃思维、提高创新能力起着积极的作用。

食品微生物学是食品专业学生必修的专业课,是普通微生物学的延伸。食品微生物学是一门实践性和应用性较强的学科,它要求学生在系统学习基础理论知识的基础上,掌握食品微生物学检测技术、分离纯化技术、鉴定技术、发酵食品的制备技术、食品加工与保鲜技术以及现代分子微生物学实验 方法 等。通过食品微生物实验教学培养出不仅具有丰富理论知识,而且能掌握现代生物技术并熟练操作的高技能人才。

如何加强食品微生物实践教学的组织指导,如何调动学生的积极性,提高实验教学效果一直是我们关注和探索的问题。下面简单谈一下我们在食品微生物实验教学中遇到的问题,解决的方法和对一些问题的思考。

1 精心选择实验内容,调动学习积极性

随着食品工业和微生物检测技术的迅速发展,食品微生物学及其实验课的内容也不断扩展,而实验课既受理论课内容进度的限制,又受课时及实验室等客观条件的限制。要在有限的课时内,系统、科学地完成食品微生物所有的实验项目是绝对不可能的,这就要求我们实验教师在掌握微生物学教学大纲的前提下,结合现代科技的发展和食品微生物的研究动态,精心设计实验课教学体系,合理选择实验项目。

选择实验内容,我们由浅入深,由感性到理性。首先要求学生对食品中常见细菌、酵母菌、霉菌、乳酸菌进行观察,掌握其性状特征和培养生长条件。学会识别哪些是有益菌,哪些是有害菌,利用有益菌的代谢活动制造更多的发酵产品,提高食品的质量,同时防止有害菌引起食品腐败变质以及食物中毒。其次选择有代表性的发酵食品作为实验内容,使学生了解利用微生物生产发酵食品的整个过程,通过这些实验使同学们对食品发酵有一个总体印象,并能举一反三。最后对不同的食品和发酵食品设计实验,让学生掌握食品微生物学检测技术、分离纯化技术、鉴定技术。并在课堂上结合自己的科研成果和食品研究 热点 介绍食品工业发展的前沿动态。

实验设计过程中,不仅有验证性实验,更多地引进了综合性和设计性实验,学生分成几人一组,让学生从实验设计,自己选择原材料,准备实验材料,试剂的配置,培养基的制备和灭菌等都由学生自己完成,最后写成规范的实验 报告 。学生对此积极性很高,甜酒酿、酸奶、腐乳等都是同学们喜欢并制作的发酵食品。在这个过程中学生将所学内容贯通,并熟悉掌握各个环节的操作步骤,这对学生将来步入社会,在工作岗位上独立开展工作都会有很大的帮助。

2 强化基础技能的训练,有效组织管理实验教学

食品微生物学是在掌握微生物的基本实验技能的基础上开展的,学生无菌操作观念的培养、正确使用、掌握微生物的实验仪器,如光学显微镜、灭菌消毒器械等都非常重要。但基于很多原因,学生的这些基础技能还是很薄弱,所以我们在进行食品微生物的每一个实验的每一个步骤中只要涉及这些基础性的知识,都会给予强调,亲自演示。

学生微生物基础技能培养和形成,不是一两堂课能完成,也不是单单有老师演示后学生就可以掌握,必须让学生每人亲自动手。但在实际教学过程中,由于学生人数的增加,硬件等条件限制,人手一套实验器材不现实,那么在有限人力、有限资源情况下,使每一位同学都能动手操作并熟悉实验过程,有效组织和管理实验教学过程就尤为重要。

(1)首先任课教师和实验技术人员充分做好预实验,对实验的关键步骤和关键操作点都做到心中有数,在授课过程中有重点地强调,并分析某步骤出现问题可能会出现的结果。

(2)每次实验之前任课教师和实验技术人员就实验进行积极的沟通,不仅对实验准备的物品和材料沟通,更要对实验的组织过程协商。

(3)在实验过程中则需要任课教师和实验技术人员相互协作,并充分发挥学生班干部和小组长的作用。课堂理论教学课和实验课最大的区别在于,实验课更注重学生的动手参与,以及实验过程出现问题发现问题的及时解决。 (4)教师要严于律已,教师要严格要求自己,实验过程中耐心指导,热情帮助,回答好学生提出的每个问题,并随时纠正不正确或不规范操作。

3 加强实验课考核,引进综合实验考评

实验课的成绩给定,往往包括实验课出勤率和实验报告成绩两方面综合。所以首先就要求教师认真考勤,只有学生的出勤率有保证才能有效地组织教学活动。其次,要求实验报告书写规范,详细完成实验报告,对实验结果进行讨论,实验失败要分析原因。同时教师也对实验报告认真批改,实验报告是对实验的总结,也是对实验课质量高低的检验。通过对实验报告的批改,可以发现学生的实验操作能力和观察分析问题的能力。

实际教学中,实验报告雷同和抄袭的现象比较多见,为综合考评学生实际动手能力和对实验技能的掌握,建议今后引进期末的综合实验考评:即将各个试验项目设计成不同的实验题目,让每个学生随机抽取并在有限的时间内独立完成操作,视完成的情况给予评分。比如:“食品中常见菌类的平板培养”考察了无菌操作、培养基的制备,对食品中常见菌类平板接菌技术;“食品中常见菌类的形态观察”考察了革兰氏染色,各真菌形态辨别等。在进行具体考核过程中,可把每个考核的内容进行量化定出详细的评分标准,根据学生的每一个操作环节现场打分,并对同学进行现场提问,让学生进行答辩。

4 有计划推进实验室的开放 加强实验室开放管理

微生物实验室的开放是对食品微生物实验课的有益补充,能强化、巩固、提升对食品微生物课程内容的理解,我们鼓励学生设计和开发自己的科研项目,而且学校有很优厚的资金加以支持。但是开放实验室不是无条件的,有时因实验操作不当引起的安全隐患是很严重和难以预料。因此实验室开放时管理须给予加强。

建立科学的管理机制,利用校园网建设实验网站,公布开放实验项目的题目、时间和地点,供学生选择和预约。

专人负责学生的科研队伍,对菌种、标准品、和学生用到的有毒有害物质要有专人负责,注意保管,不随意丢弃,做好无害化处理。对使用仪器学生做好使用登记,实验物品注意清洗、归还、交接。

总之,食品微生物实验课,只有提高对实验教学活动的认识,精心选择实验内容,合理有效组织和管理实验过程,并加强实验课的考核,在此基础上,推进实验室对学生的开放,加强开放实验室的管理,就能确保实验课安全、有序、成功的完成,达到教学目的,也使学生真正有所收获。

参考文献

[1] 赖建平.从培养学生创新能力入手加强化学院食品微生物学实验教学改革[J].广东化工,2007,2:77~79.

[2] 潘蕾.实验室开放管理的研究与实践[J].实验技术与管理,2007,9:131~133.

[3] 陶思源,食品微生物实验课教学改革的初探[J].辽宁行政学院学报,2005,4:211~212.

[论文关键词]:食品微生物 教学改革 多媒体课件

[论文摘要]:针对食品微生物学课程教学, 文章 从教学内容、教学手段、 教学方法 和成绩考核标准等几个方面进行了探讨,为食品微生物教学改革提供了新的思路。

食品微生物学是一门研究与食品有关的微生物的科学,通过对微生物的基本知识、基础理论和基本实验技能的教学,使学生能辨别有益的、腐败的和病原的微生物,从而在食品制造、保藏过程中,充分利用有益微生物,控制有害微生物的活动,以防止食品的变质[1]。该课程内容多,涉及面广,技术性实用性强,是食品专业的专业基础课程。在教学中,除重视基础理论知识、基本操作技能的传授外,也注重了培养学生分析问题、解决问题的能力,做法和体会如下:

一、变学生被动为主动,变换教学立场

教师的备课不是简单的“背课”[2],是在对教学内容熟悉的基础上,优化内容,根据食品微生物学知识体系的要求合理分配教学时间,增加学生在课堂上的参与和主动,启发引导学生完成学习任务,充分发挥教为主导,学为主体的作用。要改以往课堂以教师讲为主,学生被强迫坐于课堂,不能也不敢出声的传统教学模式,做到让学生“动”起来,让学生自身主动地进入到学习状态,增加学习兴趣,提高学习效果。

如“食品微生物学”与“生物化学”等课程相互渗透、相互联系,在授课时间上有前有后,为了避免相近课程某些内容重复,我们进行了授课内容的优化。对于先修课程生物化学,已讲过“物质代谢”内容,则以学生为主角,让学生课下查阅资料丰富相关知识尤其是一些科研论文(这样可以启发学生发现更多问题),然后课堂向教师提问的方式来完成这部分教学内容。教师要根据学生提问的难易做到由浅及深地回答,帮助学生回顾已忘或还未掌握的内容。学生在提问时,允许学生充分发挥想象;老师答疑时要尽可能多联系一些日常生活的实例和本学科当前研究的最新进展,用简练、幽默、易懂的语言回答相关问题,这样既丰富了学生知识,又调动了学生积极性和趣味性,让学生在课堂上能够感觉到自己是课堂主角,要发挥主角作用。

二、善于利用多媒体教学资源

传统的板书加挂图的食品微生物教学模式已远远不能满足当今学生的信息量。计算机辅助教学成为当今教育科学及教学手段的重要组成部分[3]。多媒体技术应用于食品微生物教学中,使教学效果前所未有的提高。首先,多媒体技术使直观教学成为可能。将微观世界在课堂上生动再现,其效果胜过任何语言的描述。其次,多媒体提供的信息量远远大于传统教学模式。课堂上学生可以观看多幅图片,阅读多篇教学材料,这个数量可以是传统教学的几倍。第三,多媒体将多种教学资源进行了整合,提供了多种教学方法,如课件、动画、相关网络声像资料及新闻报道等。

食品微生物学,不仅内容丰富,涉及面广,发展迅速,而且个体微小,学生对它的认识远不如对宏观事物,再加上其营养方式、遗传类型多种多样、代谢机制错综复杂,学生往往感觉其知识繁琐、抽象和难以理解。针对这种情况,将多媒体技术应用到微生物学课程的教学,受到了学生的普遍欢迎。通过flash动画、PPT课件、高清晰显微照片、动态显微录像等CAI教学软件,使微观世界宏观化、教学内容形象化[4]。例如,把细菌、真菌、病毒的显微世界以色彩丰富、直观清晰、生动形象的三维画面或科教电影形式展示给学生,以动画的形式表现出细菌鞭毛的运动、T偶噬菌体的增殖、主动吸收的方式、细胞的分裂过程等内容。不仅激发了学生的学习兴趣,有助于学生的理解与接受,而且可突破教学中的难点,加大教学的信息量,提高讲课的效率。

三、采取形象化教学形式

在实际教学过程中要注重知识的逻辑性和系统性,强化抽象理论与具体实例结合,增加学生对抽象理论的感性认识和接受能力。食品微生物学主要讲解了微生物在食品生产、贮运及销售过程的利害影响,但由于微生物的自身特性,我们很难就只有显微条件下才能观察到的细小生物让其形象化,宏观化。虽然多媒体已经在此方面有了很大改善,但要做到与具体实例联系更加紧密,更加强化学生的感性认识,我们必须借助实际生产、生活中的例子来实现形象化教学。如,上课时我们将一些常见的白酒、红酒、酸乳、面包、酱类等发酵食品带入课堂来讲授微生物在发酵食品中的应用,并且通过与实验紧密结合,开展发酵酸乳来增强学生对微生物利用的认知,让学生自已亲自动手制作酸乳,品评自已的劳动成果,便于理解和掌握教学内容重点。再如讲到微生物对食品的危害时,我们选用了一些发霉的粮食、发霉的马铃薯以及发臭的肉和罐头等进入课堂,这样在理论讲解时有现实的例子,无论从教师的讲授还是学生掌握都因有了宏观感性认识而变得轻松容易。

四、调动学生兴趣,培养创新能力

兴趣是学习的动力,也是创新的动力,创新的过程需要兴趣来维持。教育学家乌申斯基说:“没有丝毫兴趣的强制学习,将会扼杀学生探求真理的欲望。”[5]食品微生物课堂教学中要注重培养学生的学习兴趣,养成学生良好的学习习惯,为学生创造性学习奠定基础。那么如何在微生物教学过程中做到调动学生兴趣,培养创新能力呢?我们主要从三方面来做起。第一,因材施教。学生的个性差异和智力发展情况各不相同,因材施教,对不同层次的学生实施不同程度的思维能力和创造能力,对不同层次的学生要有不同的评价标准和不同的目标要求。第二,以“新”为轴,调动学生学习兴趣。教学中突出“新”的理念(即运用新思想,联系新理论,列举新课题等),在激发学生的学习热情,培养提出问题,解决问题的能力,积极参加各种学术讨论会,大胆提问等方面都无疑会起重要作用,同时还赋予学生宝贵的 创新思维 。第三,多样化传授知识。改传统课堂教学模式,引入食品中微生物变化的课外观察,自行了解微生物的生长变化;鼓励学生课堂提问,学生课外查阅资料课堂以报告会形式进行教学内容讨论;积极开展相关实验,引入校园河水中微生物检测实验,培养学生自行设计安排和完成实验的能力。

五、强化实验教学,重视动手能力

食品微生物学是一门实验性、技能性很强的专业基础课,这一学科的在校大学生踏上工作岗位前,普遍存在动手能力较差、实验技能欠缺的问题。充分利用现有的力所能及的各种条件,加强实验技能培训,是最快捷有效的弥补方法。

(一)课堂实验

食品微生物实验课开始时,讲明实验目的、要求、步骤和注意事项,努力使实验成功的要求变成学生头脑中的指令,使每位同学都全神贯注地投入到实验当中去。从最基本的操作技术做起,抓住实验课上一切可以利用的机会,采取多种形式强化基本技能。具体如下:

最初,教师进行实验目的、要求、步骤和注意事项的详细讲解。

其次,以多媒体的形式将预先录制的实验过程向学生播放。这样既可以回顾理论教学内容加深实验印象,又可使学生初步了解实验过程、实验步骤及实验中的关键操作,帮助掌握实验技能。

再次,教师与学生同时进行实验操作。这样进行实验,学生在观看了录像后对部分仍不明白或是记忆不清楚的地方可以通过教师演示与他们实验的同步,进行实验信息交换,从而让学生能够最短最及时最迅速地掌握正确的实验技能。

最后,进行实验总结,认真完成实验报告的写作和批阅,从中找出问题并进行集中答疑,进一步修正学生实验中的错误。

(二)课外实验

不定期安排学生在课外做些简单实验或集中安排学生课外进行实验技能训练。如在讲微生物腐败变质时安排学生课外取一空矿泉水瓶内装入校园河流中比较清澈的水,然后进行封口存放,直至水质变化产生腥臭。让学生通过这种现象来强化课堂所学内容,起到了良好教学效果。再如集中学生利用课余时间进行校园河水中微生物检测实验,让学生以小组为单位独立完成从实验设计到完成检测报告一系列工作,并且最后进行结果评比。这样不但丰富了学生课余生活,而且还调动了学生的学习积极性,提高了学生的实际动手和综合运用知识的能力。

六、建立适合当代大学生的考核机制[6],正确评定学生成绩

实行理论和实验考试分离,突出实验,综合评定的考试模式。改以往教师授课内容为蓝本,学生考前背,考后忘的非正常态考试模式。将理论考查内容面放宽加大,强调与实际食品生产的联系,将知识点以命题形式溶入现实生活,做到“学以致用”。实验考试采用笔试和操作各占一半的命题形式,做到实验理论和实验操作并行,要求学生在规定时间内完成两部分命题,达到理论、操作都掌握的目的。实验笔试以实验基本原理和关键操作步骤为主要命题范围,实验操作以抽签形式定,内容均为食品微生物必须掌握的实验内容,如显微镜观察、细菌染色、细菌计数等。最后学生成绩由理论和实验两部成绩再结合平时的课堂提问及实验情况进行综合评定,给出学生一个公平公正科学的考核成绩。通过这种模式考试既要求学生掌握了食品微生物的相关理论知识,又培养了学生的实验操作技能,为以后的实际工作打下了坚实基础。

实践证明,我们进行的食品微生物课程教学改革的大胆尝试是成功的。教学内容的丰富更新、教学手段的现代化,考核机制的客观化,不仅提高了教学质量和教学效果,而且激发了学生的学习兴趣,拓宽了学生的知识面,增强了学生的动手能力,适应了现代社会对人才培养的要求。

参考文献

[1]贾英民,食品微生物学[M],北京,中国轻工业出版社,2001,1~243

[2]朱宏飞,微生物教学中激发学生兴趣的几点探索[J],微生物学通报,2007,34(1)173~175

[3]梁峙,微生物教学中的CAI[J],彭城职业大学学报,2001,3(16),76~79

[4]李平、杜先锋、蒋军,运用多媒体课件好食品微生物学的尝试[J],高等农业教育,2002,10,42~44

[5]叶丹玲,如何在微生物教学中培养学生的创新意识[J],宁波工程学院学报

摘要: 随着人类社会的进步,食品安全已经成为世界性的公共卫生问题,不仅影响到人类的健康,而且关系到国家的安全及稳定,大力发展科学技术,研究新检验方法,快速推广普及有效检测技术越显重要。本文介绍了免疫检测技术、分子生物学方法、快速测试片法、电阻电导测定法四方面的检测方法,并评述了他们的特点。随着生物等新技术新方法在食品微生物检验领域应用,文章对近几年食品微生物检测技术和方法进行介绍,这样做有效的提高了检测效率和检验速度。

关键词: 检测方法;微生物

0 引言

随着人们现代科学技术的发展,“细菌门”、“福寿螺”、“毒饺子”等名词的出现,食品安全问题越来越受到人们的重视,根据WHO统计,全球每年有近15亿人感染食源性疾病,其中70%是食品中致病微生物污染引起的。各个环节中都有污染微生物的可能,包括食品生产、加工、储存、运输、销售等,目前,微生物对食品的污染问题成为人们关注领域。

1 食品微生物分类及命名

微生物并不是生物学分类学上的专门名词,而是对所有形体微小,单细胞的或个体结构较为简单的多细胞的、甚至没有细胞结构的低等生物的统称。其群体非常庞杂,种类繁多,包括细胞型和非细胞型两类。凡具有细胞形态的微生物称为细胞型微生物。细胞型微生物按细胞结构又分为原核微生物和真核微生物。

2 食品微生物检测技术及方法

2.1 免疫检测技术———酶联免疫吸附剂测定法 (ELIsA)[1]

免疫学是研究生物体对抗原物质免疫应答性及其方法的生物-医学科学。免疫应答是机体对抗原刺激的反应,也是对抗原物质进行识别和排除的一种生物学过程。现代免疫学将“免疫”定义为:机体对“自己”和“异己”识别、应答过程中所产生的生物学效应的总和,正常情况下是维持内环境稳定的一种生理性功能。

酶联免疫分析法(ELIsA)是食品检验中应用的主要免疫检测技术。它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。具体说就是使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,即与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定比例。加入酶反应底物,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,可根据颜色反应的深浅来进行定性或定量分析。

2.2 分子生物学方法

2.2.1 核酸探针法[2] 核酸探针是将已知核苷酸序列

DNA片段用同位素或其他方法标记,加入已变性的被检DNA中,在一定条件下即可与该样品中有同源序列的DNA区段形成杂交双链,从而达到鉴定样品中DNA的目的,这种能认识到特异性核苷酸序列有标记的单链DNA分子就称为核酸探针或基因探针。与免疫学方法相似,探针也需要附加适当标记。以往研究的探针技术要使用放射性同位素,只在专门的实验室使用,而现在较热门的技术是以核酸杂交为基础的第二代技术一—比色计。该方法依赖核糖体RNA(tRNA)发育中储存的核酸成分进行检测。这种天然富含rRNA标靶序列的使用使得无辐射检测成为可能,同时又保持了与放射性同位素方法相当或者更高的灵敏度。总体说,核酸探针技术是一种较为理想的技术,特点是敏感、特异、简便、快速,缺点是一种菌就需要一种探针,目前尚未建立所有菌种探针,该技术还有待进一步发展,再者就是检验费用比较昂贵。

2.2.2 聚合酶链反应法(PcR方法)[2] 聚合酶链反应 (PCR)PCR是美国科学家Mllllis于1983年发明的体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法。又称为基因体外扩增法,是一种体外选择性扩增DNA或RNA的技术。该方法通过对人工难以培养的微生物相应RNA或DNA片段扩增,检测扩增的产物含量,从而快速对饲料中致病菌的含量进行检测。PCR技术可直接检测样品中痢疾杆菌,大肠杆菌、乳酸杆菌、肉毒梭菌等。

2.2.3 快速测试片法 快速测试片法是利用无毒的纸膜、纸片、胶片为培养基载体,快速、定性和定量检测试纸和胶片的食品微生物检测方法,它是一种集现代化学、高分子科学、微生物学于一体的检测方法。对有些项目的测定,其准确度和精确度高,几乎与标准方法相媲美。其优点:第一,常规法需要时间较长,而且温度要求严格,而测试片操作简单,大大缩短了测试时间,以往许多实验室不能实施,不能达到及时检测的目的。第二,快速测试片可以在取样时同时接种,防止延长接种时间时由于细菌繁殖造成的数量增多,结果更能反映当时样本中真实的细菌数。第三,测定少量样品,不需配试剂,价格低廉,可随时进行,便于运输,携带方便,易于消毒保存,操作简便快速。

2.2.4 电阻电导测定法 电阻电导测定法原理是:在细菌生长繁殖期间,将大分子物质(蛋白质、糖类等)分解成有机酸、氨基酸等带电荷的小分子物质,改变其培养液的导电度。这样,通过电阻和导电度的数值变化,就可推算出样品含菌数。目前已开发出来的电阻电导检测器有:美国Vitek公司生产的Bactometer可适用于检测肉品、乳制品等含菌量;英国推出的Mathus系统,可用来检测牛乳、酿造液、鱼及海产品的含菌量[3]。

3 结束语

随着人们生活质量的不断提高,食品安全问题已逐渐成为世界性公共卫生问题,直接关系到人类的健康。本文中罗列了几个方面的食品中微生物的检测技术,虽然很多技术依然存在一定的问题,有的属于世界前沿,有的还处于发展阶段,但其应用价值日显突出。

参考文献:

[1]王兰兰.临床免疫学和免疫检验[M].北京:人民卫生出版社,2003:91-93.

[2]杨向荣,江志毅等.快速方法在食品微生物检测中的应用[J].学术论坛,2006,5.

[3]周向华,王衍彬,叶兴乾等.电阻抗法在食品微生物快速检测中的应用[J].粮油加工与食品机械,2003(10):73-75.

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工作总结是对这一个阶段中自己工作的一次检查和规划,通过工作总结我们能够更好的去认知了解自己工作,更方便之后将工作做好。以下是我为大家精心整理的“核酸检测工作总结报告范文(精选7篇)”,仅供参考,欢迎大家阅读。

全面做好XX镇关于疫情防控工作部署要求,全力保障人民群众生命安全和身体健康,在镇及分管领导安排部署下,XX村顺利完成全员核酸检测工作,现将有关情况汇报如下:

一、工作开展情况

(1)推行网格管控。在各村民小组中设置网格员,共 XX名。每名网格员负责XX户村民。

(2)全面摸排登记。 X月X日,组织各村民小组组长、网格员对其小组进行全面逐户摸排现居住人员和在外居住人员情况并做详细登记,现居住人员共计 XX 人,在外居住人员共计 XX 人。

(3)强力宣传。 X月 X日至X月X日,通过微信群、广播、入户等形式,进行宣传全员核酸检测事项,提前让村民做好准备,并要求村民在其期间不得离村。

(4)合理布控。一是成立全员核酸检测专项工作组,设置组长、组员和片点负责人。二是在全村范围内划分X个核酸检测点即XX和XX,在各村民小组上设立卡点,共计 卡点。三是按照疫情防控要求合理布置场地以及做好物资后勤保障等,并于X月XX日全部完成。

(5)有序组织检测。组织村民分小组分时段到各核酸检测点进行检测,X月XX日上午X:XX开始检测,XX检测点于下午XX:XX完成全部检测,排查X人,实际检测X人,XX检测点于下午XX:XX完成全部检测,排查 XX 人,实际检测XX人,共计排查 XX人,实际检测XX人。

二、存在的问题

(1)信息采集系统较慢,导致检测进度较为迟缓。

(2)年长者的村民对手机操作不熟悉,在提前出示健康码环节上未能顺畅的衔接。

(3)工作人员在维护秩序的情况下,仍有村民插队、相互拥挤的现象出现。

三、下一步改进措施

(1)工作开展前,测试系统设备情况,做到早发现及时调整。

(2)加强乡风文明建设,做好文明宣传“持久战”。

(3)除了专人维护秩序外,增加物理阻碍,确保秩序“双保险”。

(4)在涉及手机操作时,对年长者村民区别服务。

疫情发生以来,在县的坚强领导下和上级业务部门具体指导下,县卫健委闻令而动,全民动员,精准施策,扎实做好疫情防控各项工作,确保了全县疫情防控形势总体平稳。

(一)以身垂范,机关干部全员参与。委里成立了县卫健委新冠肺炎疫情防控应对领导小组,多次召开了会议研究防控工作,制定下发了各种防控指引和文件。各班子成员不仅担任了县新冠肺炎疫情防控应急指挥部下设工作组的成员,而且身先士卒带队到高速路口、长运车站体温监测点值守,委里一名班子一直在县集中医学观察点坐镇指挥。机关干职工也纷纷投入到疫情防控一线工作,

(二)排查监测,有效阻断疫情输入源头。

(三)不惧危险,千余医护战士逆行“战疫”。疫情期间,我县出现了XX例确诊患者、XX例疑似病例,面对未知的危险,县乡村各级医疗机构的XXXX多名医护人员都牢牢坚守在抗疫的第一线工作,积极参与人员摸排、健康监测、流调消杀,防控指导、舍小家为大家,没有任何怨言。

(四)从无到有,核酸检测工作有序推进。

(五)中药干预,充分发挥中医特色优势。采取中药汤剂、艾熏和热敏灸等中医药手段进行预防,每日向疫情防控一线的医务人员、工作人员、园区返岗人员等人群发放预防用中药汤剂,采取艾熏和热敏灸等中医药手段预防,累计向医院、复工复产企业和集中医学观察点等场所发放艾芯XXXX条;选派县中医院X名中医师加入市中医药专家组,协助配合定点救治医院的中医药治疗。

(六)严防死守,抓实医院感染防控工作。严格落实发热门诊管理要求,加强患者收入院管理,加强陪护、探视的管理,强化新冠病毒核酸检测,严格落实标准预防,开展院内感染风险排查整顿。通过抓实抓细医疗机构院内感染的各项工作措施,切实做到院内闭环管理,确保了医疗机构零感染。

(七)精心安排,全力以赴保障防控物资。一是多渠道争取物资来源,由各部门和社会各界踊跃提供采购信息,县卫健委一名班子专门负责对接落实;二是物资进出管理规范。入库填写入库单,由仓管人、审核人签字,物资出库填写申领单,审核同意后再领取防控物物资,紧缺物资申领报县疫情应急指挥长批准;三是物资分配每日日报,由县指挥部常务副指挥长、副指挥长等领导签字。

(八)储备人员,做好疫情防控准备。一是组建了流行病学调查队伍,共计XX人,均为县疾控中心、县乡医疗机构公卫人员,调查队伍分成了X个梯队;二是组建了核酸采样后备队伍,抽调了XX名乡镇卫生院医护人员人作为核酸采样储备人员,从XX月XX日开始分批次到县XX医院跟班操作学习;三是组建了核酸检测检验后备队伍,乡镇卫生院X名检验专业人员全部作为后备力量,目前正分批次在县XX医院跟班操作学习。

(九)积极备战,开展防控实战应急演练。

20XX年X月XX日至X月XX日X天时间,在辖区内开展了全员核酸检测采样工作。X月XX日下午,社区召开了全员核酸检测工作总结大会。会议由社区书记XX主持。

会上,XX书记就本次核酸检测经验做法、问题不足、意见建议等方面进行了总结。此次全员核酸检测,设立X个点X个台,划分社区和XX大厦两个区域,由X名社区干部专人负责。我们一直秉承先自给自足,再向街道求援的理念,紧紧抓住共建单位资源和群众骨干力量,向市XX、XX销售公司、中小企业大厦等单位征集笔记本电脑,由共建单位负责人推荐熟练电脑操作的年轻职工配合社区干部做好登记及扫码指导工作,从三长和志愿者中选树健康、有热情、有能力的男性同志,按分工做好维持秩序、喇叭宣传及核酸检测早晚的摆台撤台等工作。使X日的检测工作顺利完成。检测工作还存在志愿者参与服务参差不齐、政策解答不及时存在舆情风险等不足。

通过此次大会,总结了检测工作中的经验与不足,为第X轮的检测工作顺利进行奠定基础。

x月x日,xx街道xx社区居民免费核酸检测工作启动。在位于xx路xxx号的核酸检测点,随处可见忙前忙后的志愿者们。他们中,有社区干部的家属,也有家住辖区的大学生……在他们的协助下,经过xx个小时的连续奋战,铁四社区顺利完成了当日的核酸检测工作。

开展核酸检测时间紧、任务重,为保障各项工作有序、高效开展,当天x时,志愿者们便准时到达核酸检测点,接受相关培训。工作开始后,大家根据调度安排,各司其职,分别投入到指导居民填写核酸检测表格、维持现场秩序、打扫场地卫生及进行场地消毒等各项工作中。

很多志愿者由于需要不停地大声说话,嗓子变得沙哑,但他们却顾不上喝一口水,仍争分夺秒地引导居民有序排队,帮助大家顺利完成检测。接受检测的居民说,坚守在寒风中的志愿者用行动守护着大家,带给大家别样的温暖。

为认真贯彻落实疫情防控工作重要指示精神,严防疫情扩散。20xx年1月17日晚上电话通知每一户居民提前做好核酸检测准备和相关注意事项。

1月18日早上7:00全民检测工作全部准备到位,按照应检尽检、愿检尽检、不漏一户、不漏一人,网格长和工作人员以小区楼栋、单元为单位引导居民来到xx市第八中学采集点进行核酸检测工作,确保全民检测工作有序开展,采集地点有明显的入口标识,采集场地内部有明显一米线标识,居民按顺序依次做检测。

为确保安全,街道领导对核酸检测现场再次检查,要求工作人员认真核对好检测人员的身份信息,做到规范、科学、快速有序开展登记和检测工作,做好检测人员的衔接,最大限度提高检测工作效率。目前采集工作仍在有序进行中。

一、新冠肺炎疫情防控阻击战取得阶段性胜利

疫情发生以来,在县委、县政府的坚强领导下和上级业务部门具体指导下,县卫健委闻令而动,全面贯彻落实上级工作部署和要求,全民动员,精准施策,扎实做好疫情防控各项工作,确保了全县疫情防控形势总体平稳。

(一)以身垂范,机关党员干部全员参与。委里成立了县卫健委新冠肺炎疫情防控应对领导小组,多次召开了会议研究防控工作,制定下发了各种防控指引和文件。各班子成员不仅担任了县新冠肺炎疫情防控应急指挥部下设工作组的成员,而且身先士卒带队到高速路口、长运车站体温监测点值守,委里一名班子一直在县集中医学观察点坐镇指挥。机关干职工也纷纷投入到疫情防控一线工作,春节前后的40多天在家的干职工没有一个人临战退缩。

(二)排查监测,有效阻断疫情输入源头。疫情防控前期,委里按照指挥部指令在高速路口、国省道县际交界处均设置了临时检测点,机关工作人员和医疗机构抽调人员24小时值守,做好进出人员排查监测,要求外来人员入境一律居家观察14天,累计检查进出车辆11000余辆次(日最高车流量1230辆、日最低车流量200辆)、人员20000余人次。

(三)不惧危险,千余医护战士逆行“战疫”。疫情期间,我县出现了5例确诊患者、5例疑似病例,面对未知的危险,县乡村各级医疗机构的1000多名医护人员都牢牢坚守在抗疫的第一线工作,积极参与人员摸排、健康监测、流调消杀,防控指导、舍小家为大家,没有任何怨言。与此同时县人民医院王印花和县中医院11名医护人员自愿请缨分别赴武汉、疫情救治前线工作,谱写了一曲曲“战疫”壮歌。企业复工复产之际,抽调12名医务人员驻企全程指导企业疫情防控,为全县园区企业顺利复工复产提供保障。

(四)从无到有,核酸检测工作有序推进。截止10月20日,全县累计核酸检测5110人份,其中560名发热门诊患者、1086名新住院病人、183份冷链场所标本进行了核酸检测。县人民医院PCR实验室9月1日正式投入使用,县疾控中心PCR实验室已经完成主体工程,10月22日通过了评审验收并投入使用。

(五)中药干预,充分发挥中医特色优势。制定了《关于充分发挥中医药在新型冠状病毒感染的肺炎救治作用的意见》《关于新型冠状病毒感染的肺炎中医药防治方案》,采取中药汤剂、艾熏和热敏灸等中医药手段进行预防,每日向疫情防控一线的医务人员、工作人员、园区返岗人员等人群发放预防用中药汤剂,采取艾熏和热敏灸等中医药手段预防,累计向医院、复工复产企业和集中医学观察点等场所发放艾芯6645条;选派县中医院2名中医师加入市中医药专家组,协助配合定点救治医院的中医药治疗。

(六)严防死守,抓实医院感染防控工作。严格落实发热门诊管理要求,加强患者收入院管理,加强陪护、探视的管理,强化新冠病毒核酸检测,严格落实标准预防,开展院内感染风险排查整顿。通过抓实抓细医疗机构院内感染的各项工作措施,切实做到院内闭环管理,确保了医疗机构零感染。

(七)精心安排,全力以赴保障防控物资。一是多渠道争取物资来源,由各部门和社会各界踊跃提供采购信息,县卫健委一名班子专门负责对接落实;二是物资进出管理规范。入库填写入库单,由仓管人、审核人签字,物资出库填写申领单,审核同意后再领取防控物物资,紧缺物资申领报县疫情应急指挥长批准;三是物资分配每日日报,由县指挥部常务副指挥长、副指挥长等领导签字。四是捐赠物款统筹使用。社会各界捐赠的各类防控款物由县红十字会、县慈善总会、县物资保障组负责接收,接收物资统一由县物资保障组储备保管,接收款项纳入县新型冠状病毒感染的肺炎疫情防控应急资金统筹使用。

(八)储备人员,做好秋冬季疫情防控准备。一是组建了流行病学调查队伍,共计14人,均为县疾控中心、县乡医疗机构公卫人员,调查队伍分成了四个梯队,10月11日进行了集中业务培训;二是组建了核酸采样后备队伍,抽调了54名乡镇卫生院医护人员人作为核酸采样储备人员,从10月12日开始分批次到县人民医院跟班操作学习;三是组建了核酸检测检验后备队伍,乡镇卫生院7名检验专业人员全部作为后备力量,目前正分批次在县人民医院PCR实验室跟班操作学习。

(九)积极备战,开展防控实战应急演练。10月13日下午,我县在广场举行了秋冬季新冠肺炎疫情防控应急演练。副县长、指挥部常务副指挥长到场指导。县卫健委、县人民医院、县中医院、县疾控中心、县公安局、镇人民政府等单位60余人参加了演练,演练按照疑似病例发现、采样检测、信息报告、流行病学调查、病例转运、人员管控、环境消杀、集中留观、防控宣传等内容依次展开。

二、其他重点工作齐头并进

(一)党的建设方面。

全面从严治党,党的建设不断加强。卫健委党委始终把党的政治建设摆在首位,不断巩固拓展主题教育成果,扎实落实“不忘初心、牢记使命”的制度,强化政治监督,严明政治纪律和政治规矩,严格执行新形势下党内政治生活若干准则,引导全系统广大党员干部增强“四个意识”、坚定“四个自信”、做到“两个维护”。加强意识形态领域工作,深入推进“两学一做”学习教育常态化制度化。进一步加强机关党组织建设和公立医院党的建设,切实发挥党组织作用,提升各级党组织政治功能和组织力。全面落实公立医院党建重点任务,加强党对公立医院的领导,落实党领导下的院长负责制,健全相互制约又相互协调的权力结构和运行机制,推进权力运行程序化和公开透明。坚定不移正风肃纪反腐。落实党风廉政建设责任制,推行党风廉政建设重点工作项目清单制,持续深入整治“好人主义”突出问题,加大违反中央八项规定及其实施细则精神的查处力度。重点聚焦医疗卫生服务和行业监管中的不正之风,加大监督执纪问责力度,塑造行业风清正气。

(二)卫生县城创建方面。

今年以来,我委按照省、市、县关于开展城乡环境综合整治活动的有关要求,多次召开会议安排部署相关工作,各项工作扎实有效开展,取得了明显实效,推进了环境卫生综合整治行动。针对疫情防控中发现的环境卫生问题,特别是老旧小区、城中村、城乡结合部、农贸市场、小餐饮店、小作坊、流动摊贩等环境卫生管理的薄弱环节和一些长期存在的“老、大、难”问题,结合省级卫生城镇创建工作总体要求,逐项梳理问题清单,及时整改落实,切实为人民群众解决实际问题和困难。

卫健委把创建省级卫生县城作为一项重要的政治任务,统一思想、履职尽职主动作为,坚决打好这场攻坚战、持久战。主要做到了以下三个方面的“提升”:

一是明职责,提升了创卫工作的主动性。

卫健委在创建省级卫生县城工作中顺利完成以下四方面职责:

一、业务指导到位。按照创卫要求,全程对创建省级卫生县城全过程进行业务指导。

二、专线管理到位。认真贯彻落实《传染病防治法》《职业病防治法》《公共场所卫生管理条例》等有关法律法规,加强医疗、学校、社区、企业等重点领域公共卫生服务体系建设。对照《病媒生物预防控制管理规定》积极开展以环境治理为主的病媒生物综合防制工作,定期发布病媒生物密度监测结果和预警预报。规范医疗废弃物和排放的医源性污水处置。

三、医疗卫生机构创建的达标到位。建立完善卫健委机关、全县各级医疗机构环境卫生保洁工作制度,对办公楼、食堂、职工宿舍、厕所、仓库、车库等场所进行全方位大清扫,建立长效管理机制,做到环境整洁、不漏死角。

四、片区联创到位。xx社区13项整治达标全到位,全面完成各项创卫指标。

二是懂业务,提升了创卫工作的指导性。

创卫工作是一项系统工程,技术含量高,省里评价指标有八大类四十小项,三项一票否决,共计1000分,验收评估获得800分以上才能获得省级卫生县城称号,为此,一是我们自身认真学,组织全系统干部认真学习创建省级卫生县城评分工作标准指引,做到人人懂业务。二是发挥行业自身优势,请省级创卫专家来现场培训指导,通过培训使全县创卫工作重点突出,目标明确,任务具体,责任清晰,整治范围全覆盖,不留死角,消除盲区,特别是背街小巷,城中村,城乡结合部,闲置地等薄弱环节创建效果显著,群众满意。

三是善落实,提升了创卫工作的实效性。

创卫工作难点多、堵点多、任务重、压力大、时间紧,我们办好自己的事,解决好思想认识不到位,干事没激情,好人主义思想严重的问题。一是依靠群众。依靠群众是创卫成功的关键,我们加大宣传力度,传播正能量,积极发动群众参与创卫工作。二是组织干部,一分部署,九分落实,干部是创卫的'重要群体。我们结合本系统创卫工作实际,将创卫工作任务清单化、项目化,明确责任人,使人人身上有担子、肩上有压力,干部的积极性得到充分调动,创卫激情得到充分涌动。三是班子带头。安排班子作为联创片区专线管理的责任人,积极负责片区的创卫工作。四是上下联动。委机关与全县各医疗卫生机构建立横向到边、纵向到底的创卫新格局。

(三)健康扶贫方面。

建档立卡贫困人口参加城乡居民基本医保个人缴费部分由财政给予补贴;优化医疗费用决算服务模式,按照《省贫困患者县域内“先诊疗、后付费”服务工作方案》,实行县域内住院“先诊疗、后付费”和一站式结算,贫困人口住院时不需缴纳住院押金,由定点医疗机构与基本医保,大病保险,商业补充保险,医疗救助经办管理机构之间进行决算,减轻贫困患者垫资压力,确保其得到及时、安全、规范、有效的治疗。至10月份底,贫困户门诊住院5996人次,贫困人口个人自付比例控制在10%;完善了定点医疗机构的扶贫病床(病房)设立,县人民医院及县中医院按照总床位数的5%设置扶贫病床,每个乡镇卫生院至少2张扶贫病床,全县共设置58张扶贫病床。

为有效应对可能出现的疫情,对防控区域人员实施“应检尽检”,根据XX市疫情防控指挥办关于做好大规模核酸检测筹备工作的通知要求,我镇于X月XX日晚上XX在XX、XX村委会开展了大规模核酸检测工作。现将有关工作总结如下:

一、高度重视,做好核酸检测准备工作

我镇接到XX市疫情防控指挥办关于做好大规模核酸检测筹备工作的通知要求后,镇高度重视,立即召开班子会议专题研讨,卫健办立即制定我镇区域大规模核酸检测的工作,成立以镇书记为组长的核酸检测指挥中心,同时将工作方案人员职责具体落实到镇村领导职工。同时,卫健办依方案要求购买核酸检测物资清单,保证核酸检测顺利进行。

二、做好区域大规模核酸检测宣传发动工作

X月XX日上午,X镇、XX宣传发动组工作人员通过入户通知的方式全方位开展核酸检测工作的发动工作,务求使更多的居民参与检测。宣传组入户的同时,还带上葵花码,指导村民提前扫码截图。

三、大规模核酸检测工作有序开展

X月XX日晚上XX:XX,全体工作人员行动起来,按岗就位。晚上XX:XX,X镇、XX大规模核酸检测工作有序开展,收到通知的居民群众早早戴好口罩排队参加核酸检测,在工作人员的指引下经过测温,亮码后进入等候区,按指引进行核酸扫码登记。现场群众严格按照一米间隔轮候,有序进入到核酸采样区,配合医护人员进行采样工作。为照顾老人、小孩及行动不便的人员,核酸检测点特设一条快速通道,体现了人性关怀。

本次演练截止时间为晚上XX:XX分,X镇采样点采集样本XXXX份,XX采样点采集样本XX份,全镇总共采样XXX份。我们这次演练取得了不错的成绩,但也存在以下几个问题:一是工作的人员安排不够合理。有一部分干部职工没有利用到位;宣传发动组的人员一部分也是后勤保障组人员,导致布置场地时缺乏人手,速度慢;二是场地的利用有待提高。布置场地时未能充分利用场地,缓冲区的设置与人流量不相匹配,人流量过多时人员密集,达不到一米间隔;三是基础设施薄弱。采集现场无安装加强信号器,采集人员用手机录入信息,无配备平板电脑,录入速度慢。

在今后的工作中,我们要做好方案,调动全体镇村干部积极参与并合理安排,同时做好合理规划、充分利用场地,并提前安装信号加强器,采购平板电脑,为必要时实施全镇全人群筛查做好准备。

写作思路:写下关于疫情的病理变化。

湿毒、风邪是本次COVID19的主要病理因素,其产生和流行也具有显著的自然、体质特征。在多种诱因的共同作用下,湿毒挟风邪致病具有传播迅速、毒性炽烈、病情缠绵、易于传变等特点,并与诱发轻型、普通型患者向重型、危重型转化的炎症风暴的产生密切相关。

基于“天人合一的人”理论,分析了自然和物理COVID19暴发和流行的因素,并讨论了炎性病变的风暴在COVID19疾病病理特性和传输规则的湿、毒和风力。提出了以清热促肺、解毒消秽、健脾除湿、泻风疏络为主的CoVID-19治疗原则。

新冠疫情:

2020年2月28日,世界卫生组织新冠肺炎疫情每日形势报告称,区域和全球风险水平均从此前的“高”区域和全球风险水平提升至“非常高”的最高水平,与中国一致。

当地时间2020年3月11日,世卫组织总干事谭德塞宣布,根据我们的评估,世卫组织认为当前的新冠肺炎疫情是全球大流行。

一、研究背景新冠病毒(COVID-19)从2020年1月以来在全球蔓延,对肾脏移植患者的影响极大。肾脏移植患者不仅存在严重的免疫抑制,而且还需要定期接受免疫抑制剂,这使得他们面临更高的新冠病毒感染风险。因此,有必要研究肾脏移植患者的新冠阳性及其相关危险因素。二、研究目的本研究的目的是探讨肾脏移植患者的新冠病毒阳性率,并分析相关危险因素。三、研究方法本研究为前瞻性、观察性研究,采用回顾性调查方法,以2020年1月至2020年6月河南省某三级医院收治的肾脏移植患者为研究对象,收集患者的临床资料,详细记录其移植术前、术后及接受免疫抑制剂的情况,对患者进行新冠病毒核酸检测并记录检测结果,分析新冠病毒阳性率,同时分析是否存在新冠病毒阳性与患者的移植术前、术后及接受免疫抑制剂的情况之间的相关危险因素。四、结果研究结果显示,肾脏移植患者的新冠病毒阳性率为xx%,而移植术前接受免疫抑制剂的患者新冠病毒阳性率较高,术后接受免疫抑制剂的患者新冠病毒阳性率较低,术后接受免疫抑制剂与新冠病毒阳性呈正相关,而术前接受免疫抑制剂与新

pcr检测核酸论文

【综述】几种用于发现未知病毒核酸序列的技术及其应用翁康生 病毒是引发人类传染性疾病的主要病原体之一, 它们极大地威胁着人类健康。目前还存在人类尚未认知或新出现的病毒, 随时可能严重危害人类健康安全〔1 - 3〕。及早地发现,鉴别未知的或新出现的病毒, 是有效的预防和控制的先决条件之一。因此, 建立、储备、改良、发展、乃至创新应用于发现、鉴别未知或新出现病毒的技术方法是十分必要的。近20 多年来, 常采用传统的微生物学技术方法和现代分子生物学技术方法相结合的途径, 发现和鉴别未知病毒。通过细胞培养的方法分离病毒、电镜观察、用已知病毒的抗血清建立的免疫学方法作排他性检测、用已知病毒核酸序列建立的PCR、杂交等方法, 作特异核酸序列的检测、用分子生物学技术获得未知病毒核酸序列, 查询基因数据库, 检出并确定未知病毒基因组序列, 最终发现鉴别出未知病毒。对于无法用细胞分离培养的未知病毒, 有的采用免疫学与分子生物学技术相结合, 筛选获取病毒特异抗原编码基因的克隆, 进而发现鉴别出该病毒。更多的则是采用相应的分子生物学技术, 从被检样品中发现获取未知病毒的核酸序列,进而发现鉴别未知病毒。无论未知病毒是否可以用细胞培养分离, 最终对其基因组序列的测定分析, 是鉴别和判断的决定性依据之一, 而获取未知病毒的核酸序列是前提条件。从少量样品中, 从高度复杂的宿主细胞核酸物质中, 分离、扩增、获取足够量的无基因序列资料的未知病毒的核酸片段, 供进一步克隆、测序、生物信息学分析, 是用分子生物学技术发现、鉴别未知和新出现病毒的关键之一〔4〕, 也是最终测定分析, 拼接出未知和新出现病毒基因组序列的瓶颈步骤。病毒所携核酸物质有DNA 和RNA 之分, 可采用的技术方法也有所不同, 现将有关技术与其应用作一简介, 以供参考。1 代表性差异分析法代表性差异分析法是为寻找分析两个生物样品复杂的基因组间有何差异而发展建立起来的分子生物学技术方法, 并不断得到演化, 发展和应用。病毒感染宿主细胞后, 与未感染的同类细胞相比, 二者核酸物质间的差异主要在于是否存在病毒核酸。消减去二者核酸间相同序列的背景部分, 扩增、比较、选取余下可能存在差异的部分, 进一步分析以发现未知病毒的核酸序列。病毒的核酸结构各有不同, 可选用相应的代表性差异分析法, 见表1 。111 DNA 代表性差异分析法(DNA Representation differenceanalysis , DNA RDA)此方法是Lisitsyn 等〔5〕利用核酸消减杂交技术〔6〕、PCR 方法和双链DNA 热变性后互补链退火复性的二级动力学原理〔7 - 8〕作者单位:上海市疾病预防控制中心 200336表1 病毒核酸类型与各代表性差异分析法的选用病毒核酸类型DNA RDA c DNA RDA非rRNA 序列6 核苷酸引导c DNA RDAds DNA 线状√ds DNA 环状√ss RNA polyA( + ) √ss RNA polyA( - ) 3 √ds RNA polyA( - ) √ 3 负链ss RNA polyA( - ) 视病毒在宿主细胞的转录机制而定。而建立的。方法中将需分析的样品DNA(Test DNA ,T- DNA) 和对照DNA(Driver DNA ,D - DNA) 设为二组,分别用同一种限制性内切酶酶切处理,并接上5′端去磷酸化的人工接头,补齐接头后,加入与接头序列互补的引物作PCR 扩增。切除扩增产物上的人工接头后,切出的T - DNA 连上第二种人工接头,变性后与过量的变性D - DNA 杂交。通过杂交,消减去T- DNA 中与D - DNA 中同源的核酸序列,而只存在于T - DNA 中的靶序列DNA(Target DNA) 则自我退火复性,其两端连有第二种人工接头。加入与第二种接头互补的引物作PCR ,只有靶序列DNA呈指数扩增,因而得到进一步富集。进过如此重复的几个轮回后,以电泳检测比较T- DNA 和D - DNA ,将T- DNA 中呈现的差异部分作分离,克隆,序列分析。Lisitsyn 等以10μg 人淋巴细胞基因组DNA 作为D - DNA ,在相同的人DNA 中加入相当于单拷贝量的120 pg 腺病毒DNA作T- DNA。以此作为实验模型,用DNA 代表性差异分析法成功的寻找、鉴定出外加入的腺病毒DNA 序列。应用此技术,Chang 等〔9〕在艾滋病相关的卡波西肉瘤(Kaposis Sarcoma) 中发现一段类似人类疱疹病毒的基因, 并由此发现一种新的病毒HPV8。以后人们又以此技术发现鉴定了HPV6、TTV 病毒、黄热病毒样基因组、MDV 等〔10 - 13〕DNA 病毒。112 cDNA 代表性差异分析法(cDNA Representation differenceanalysis , cDNA RDA)Hubank 等〔14〕针对mRNA 所含序列相对简单的特点,提出了cDNA 代表性差异分析法。它的基本原理与DNA RDA 相同,主要不同在于,采用识别4 核苷酸序列的限制性内切酶,它的识别位点在mRNA 反转录成的cDNA 中出现的频率更高,平均酶切片段长度约256 bp ,保证了cDNA 序列群中绝大多数序列,至少被切出一个片段可扩增,供差异分析,分离鉴定。cDNA RDA 技术相对经济,可高效灵敏地用于非常少的起始材料而获得结果〔15〕。具有polyA( + ) - RNA 病毒,其核酸可类似于mRNA 分离纯化,因此可应用此技术。利用cDNA RDA技术,发现鉴定了TiV、MenV ,等〔16 ,17〕RNA 病毒。113 非rRNA 序列6 聚核苷酸引导反转录的cDNA RDA中国预防医学杂志2007 年6 月第8 卷第3 期 Chin Prev Med , June 2007 , Vol18 No13 ·317 ·© 1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.netpolyA( - ) - RNA 病毒,其核酸物质不似于mRNA ,需和宿主细胞总RNA 同时分离,并用随机引物作反转录。因为宿主细胞总RNA 中rRNA 约占80 % ,由于竞争反应、靶序列信号被湮灭等原因,从这样的总RNA 抽提物中,用随机6 聚核苷酸引物引导反转录的cDNA RDA 技术,发现鉴别polyA( - ) - RNA 病毒核酸序列是困难的。Endoh 等〔18〕罗列了6 聚核苷酸所有可能的排列组合,共计4 096 个序列模式,以大鼠18S、518S、28S 等rRNA、微卫星重复序列、SARS - CoV、BI - 3 病毒等的序列数据为模型,筛选出在rRNA 序列中出现频率极低或不出现的6 聚核苷酸序列模式共96 种。将这些序列分别合成并混合后,称之为非rRNA 序列6 聚核苷酸引物。生物信息学分析96 种序列模式在哺乳动物病毒科具代表性的1 791 个病毒基因组序列中出现的频率,数据表明,非rRNA 序列6 核苷酸引物可引导绝大多数病毒的cDNA 合成。分别用非rRNA 序列6 聚核苷酸引物和随机6 核苷酸引物作cDNA 反转录效率、cDNA RDA 试验,结果表明,二类引物对人工合成的RNA (二类引物在其序列中出现的频率相似) 反转录效率几乎相等,而前者对细胞总RNA反转录效率远低于随机引物。用二类引物作cDNA RDA ,检测人工合成的RNA ,前者灵敏度是用随机引物的30 倍。在模拟实验中用非rRNA 序列6 聚核苷酸引物引导反转录,串联cDNARDA 技术,检测鉴别出感染细胞的BI - 3 和SRAS - Cov 核酸序列片段。此方法能从1μg 总RNA 中检测出3 ng 的外来RNA ,其检测灵敏度不及普通的PCR 检测方法,但对于检测鉴别在宿主细胞中复制,但不知其基因序列的poly A( - ) - RNA 病毒而言,也是一个可选择的方法。114 抑制消减杂交cDNA RDA 技术结合消减杂交和PCR 抑制作用〔19〕的技术原理,Diatchenks 等〔20〕等发展出了抑制消减杂交技术( suppressionsubtractive hybridization ,SSH) 。与前两种RDA 技术不同点在于,SSH 技术将内切酶酶切处理的T - cDNA 分为两份,分别接上不同序列的去磷酸化的接头1 和2 ,分别于过量的D - cDNA作第一轮杂交。杂交过程中两组中的单链T - cDNA 浓度趋同,T- cDNA 中的非靶序列单链cDNA 与D - cDNA 中相应序列形成杂交双链而被消减, T - cDNA 中差异表达的单链cDNA被显著富集。合并一轮杂交物,加入过量变性D - cDNA ,作第二轮杂交。合并的二组份一轮杂交物中剩下的趋同化、经消减杂交后的单链T - cDNA 能互补杂交, 可以形成: 原组内T- cDNA 单链间的杂交、T - cDNA 与D - cDNA 单链间的杂交、二组间T- cDNA 单链间的杂交。补齐杂交反应后双链cD2NA 末端,用分别与接头1 和2 的外侧部分序列互补的寡核苷酸为引物,作PCR 扩增。二组份间T- cDNA 互补单链杂交物,因两端分别具有接头1 和2 ,可被指数扩增;T - cDNA 与D -cDNA 杂交物和剩余单链T- cDNA ,因一端具接头序列,被线性扩增;而同组间T- cDNA 杂交物两端具反转重复长序列,因抑制性PCR 效应,在PCR 反应循环中分子内退火形成稳定的“锅柄结构”〔19〕而不被扩增。因此,SSH 技术通过二轮消减杂交和抑制性PCR 特异扩增,使假阳性大大降低,提高了检出低丰度靶mRNA 的灵敏度。Hu 等〔21〕应用SSH 技术,结合反转录酶的模板切换(tem2plate - switching) 功能, 以HCV RNA 阳性血清体外感染的人MOLT- 4 急性淋巴母细胞白血病T 细胞系为模型,通过反转录合成全长cDNA、抑制性消减杂交、消减的cDNA 文库构建、反相斑点杂交筛选,在被筛的96 个克隆里,T- cDNA 探针杂交呈特异阳性的16 克隆中,序列分析后得到4 个插入HCV 序列的克隆。2 非特异多重引导滚环式扩增法乳头瘤病毒、痘病毒等,其基因物质为环状DNA 分子。在事前未知基因序列的情况下,发现和鉴别这类病毒核酸序列还可选择非特异多重引导滚环式扩增法(multiply primed rolling -circle amplification ,RCA) ,扩增、分离、获取其基因片段供进一步分析。自然状况下,环状DNA 经常以滚环方式进行复制。Dean等〔22〕应用随机6 聚核苷酸作引物,加入φ29 DNA 聚合酶,以质粒DNA 和噬菌体DNA 为模型,建立了多重引物引导的滚环式扩增法。φ29 DNA 聚合酶可长距离( > 70 000 nt) 地结合于DNA模板,进行链置换DNA 合成。而随机6 聚核苷酸引物可多位点的与单链环状DNA 互补复性。在φ29 DNA 聚合酶作用下,以随机引物引导,合成与模板互补的DNA 链。当合成链延伸到与模板结合的随机引物5′端时,在φ29 DNA 聚合酶的链置换活性作用下,下游被延伸的随机引物链被“甩”出模板。而上游的延伸链继续在环状模板上复制合成。同时,被从单链环状模板上“甩”出的互补链,又成为新的模板,随机引物与之结合,在φ29 DNA 聚合酶作用下,继续以枝杈的形式进行链延伸和链置换,最后以双链DNA 串联体形式释放。用此法可使1 ng 纯pCU18 环状DNA 模板延展式地扩增至107倍。Rector 等〔23〕以此原理建立了不依赖已知的特定基因序列(非序列依赖性) 的多重引导滚环式扩增环状DNA 病毒基因组方法,并应用其扩增获取了HPV 16 的基因组DNA。在接近实样的试验样品中,由于稀释倍数和环状DNA 分子较大等原因,将HPV 16 基因组DNA 扩增了214 ×104 倍。3 病毒颗粒相关核酸的非序列依赖性PCR 扩增病毒核酸可包裹于病毒外壳内,病毒的蛋白外壳或脂膜对病毒核酸具有保护作用。而病毒颗粒具有不同于细菌或其他真核细胞的理化特性。利用这样的特点Allender 等〔24〕和Stang等〔25〕各自建立了病毒颗粒相关核酸的非序列依赖性PCR 扩增方法(sequence - independent amplification) 。两种方法的共同点在于,依据病毒颗粒小、具一定密度,用0122μm 滤器过滤、或再串上超速密度梯度离心,从样品中分离出病毒颗粒,DNA 酶酶解游离的DNA ,裂解病毒颗粒,抽提获取较纯的病毒颗粒相关核酸。Allender 等〔24〕借鉴RDA 原理,对病毒颗粒相关核酸用限制性内切酶酶切后,作非序列依赖性单引物PCR 扩增( sequence -independent single primer amplification ,SISPA) :将抽提获取的DNA或RNA 分别补齐,合成第二链DNA ,或反转录,合成双链cDNA。限制性内切酶酶切后,酶切片段两端连接一种接头,并以与接头同序列的单一寡核苷酸为引物,作PCR 扩增。扩增产物进一步克隆与序列分析。用此法检验HBV 阳性血清和GBV - B 阳性血清样品,结果在相当于106/ ml 个基因组拷贝浓度的50μl样品中,可重复试验检出相应的病毒基因片段。Stang 等〔25〕则在得到双链DNA 或双链cDNA 后加入k - 随机引物,此种引物5′端含有20 个固定序列的核苷酸,3′端则有·318 · 中国预防医学杂志2007 年6 月第8 卷第3 期 Chin Prev Med , June 2007 , Vol18 No13© 1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. 核苷酸随机简并序列。与变性模板退火时,6 核苷酸随机简并序列随机地与模板相应序列互补退火,在T4 DNA聚合酶作用下作链延伸。然后在延伸产物中加入k - 随机引物中固定序列部分的20 寡核苷酸作引物,进行PCR 扩增。扩增产物电泳分析、克隆、测序。用此方法检验由实时- PCR 定量,包括病毒颗粒相关核酸及游离核酸在内的病毒基因组拷贝数为109/ ml 的Cox - 3 和MAV - 1 培养物。前者的12 克隆中,9 个克隆插入有肠道病毒的四个不同区域的同源基因片段;而6 个MAV - 1 中分离的克隆内,5 个含有99 % 同源MAV - 1 基因片段。基于病毒颗粒分离纯化、DNase 处理、病毒颗粒相关核酸的非序列依赖性PCR 扩增,获取、鉴定未知病毒的基因片段,尽管灵敏度不够高,但其实验时间较短,步骤相对简单,对于病毒拷贝数高,时间紧急的样品鉴别,是较适宜的一套方法。病毒的种类、结构、特性多种多样,感染病毒后需要检验的样品又各不相同,因此用于发现鉴别未知病毒的核酸序列的技术,也不是固定不变和完全通用的。以上的技术方法各有优缺点和适用范围。而针对扩增获取未知病毒基因组序列片断,这一发现鉴定未知病毒的分子生物学技术的要点或瓶颈,必然还会有新的改进、创新技术出现,将会更快、更灵敏、更简便、更准确的发现鉴别未知病毒。参 考 文 献〔1〕 Drosten C , Gunther S , Preiser W, et al1 Identification of novel corona2virus in patients with severe acute respiratory syndrome1 N Engl J Med ,2003 , 348 : 1967 - 19761〔2〕 ven den Hoogen BG, de Jong JC , Groen J , et al , A newly discoveredhuman pneumovirus isolated from young children with respiratory tractdisease1 Nat Med , 2001 , 7 : 719 - 7241〔3〕 Fouchier RA , Hartwig NG, Bestebroer TM, et al1 A previously unde2scribed coronavirus associated with respiratory disease in human1 ProcNatl Acad Sci U S A , 2004 , 101 : 6212 - 62161〔4〕 Muerhoff AS , Leary TP , Desai SM, et al1 Amplification and subtractionmethods and their application to the discovery at novel human viruses1 JMed Virol , 1997 , 53 : 96 - 1031〔5〕 Lisitsyn N , Lisitsyn N , Wigler M1 Cloning the differences between twocomplex genomes1 Science , 1993 , 259 : 946 - 9511〔6〕 Lamar EE , Palmer E1 Y- encoded1 Species - specific DNA in mice :evidence that the Y chromosome exists in two polymorphic forms in in2bred strains1 Cell , 1984 , 37 : 171 - 1771〔7〕 Wieland I , Bolger G, Asouline G, et al1 A method for differencecloning : geng amplification following subtractive hybridization1 Proc NatlAcad Sci USA , 1990 , 87 : 2720 - 27241〔8〕 Milner JJ , Cecchini E , Doming PD1 A kinetic model for subtractive hy2bridizationg1 Nucleic Acids Res , 1995 , 23 : 176 - 1871〔9〕 Chang Y, Cesarman E , Pessin MS , et al1 Identification of herpesvirus- like DNA sequence in AIDS - Associated Kaposi’s Sarcoma1 Scie2nce , 1994 , 266 : 1865 - 18691〔10〕 Challoner PB , Smith KT , Parker JD , et al1 Plaque - associated expres2sion of human herpesvirus 6 in multiple selerosis1 Proc Natl Acad SciUSA , 1995 , 92 : 7440 - 74441〔11〕 Nishizawa T , Okamoto H , Konishi K, et al1 A novel DNA virus (TTV)associated with elevated transaminase levels in pasttransfusion hepatitisof unknown etiology1 Biochem Biophy Res Commun , 1997 , 24 : 92 -971〔12〕 Simons JN , Pilot - Matios TJ , Leary TP , et al1 Identification of two fla2vivirus - like genomes in the GB hepatitis agent1 Proc Natl Acad SciUSA , 1995 , 92 : 3401 - 34051〔13〕 Endoh D , Cho KO , Tsukamoto K, et al1 Application of representationaldifference analysis to genomic fragments of Mark’s disease virus1 J ClinMicrobiol , 2000 , 38 : 4310 - 43141〔14〕 Hubank M, Schatz DG1 Identifying differences in mRNA - expression byrepresentational difference analysis of cDNA1 Nucleic Acids Res ,1994 , 22 : 5640 - 56481〔15〕 Bowler LD1 Representational difference analysis of cDNA1 Methods MolMed , 2004 , 94 : 49 - 661〔16〕 Chua KB , Wang LF , Lam SK, et al1 Tioman virus , a novel paramyxo2virus isolated fromfruit bats in Malaysia1Virology , 2001 , 283 : 215 -2291〔17〕 Bowden TR , Westenberg M, Wang LF , et al1 Molecular characteriza2tion of Menangle virus , a novel paramyxovirus which infects pigs , frutbats , and humans1 Virology , 2001 , 283 : 358 - 373〔18〕 Endoh D , Mizatanil T , Kirisawa R , et al1 Species - independent detec2tion of RNA virus by representational difference analysis using non - ri2bosomal hexanncleotides for reverse transcription1 Nucleic Acids Res ,2005 , 33 : e651〔19〕 Siebert PD , Chenchik A , Kellogg DE , et al1 An improved PCR methodfor walking in uncloned genomic DNA1 Nucleic Acids Res , 1995 , 23 :1087 - 10881〔20〕 Diatchenko L , Lau YF , Campbell AP1 Suppression subtractive hy2bridization : a method for generating differentially regulated or tissue -specific cDNA probes and libraries1 Proc Natl Acad Sci U S A , 1996 ,93 : 6025 - 60301〔21〕 Hu Y, Hirshfield I1 Rapid approach to identify an unrecognized viral a2gent1 J Virol Methods , 2005 , 127 : 80 - 861〔22〕 Dean FB , Nelson JR , Giesler TL , et al1 Rapid amlification of plasmidand phage DNA using phi 29 DNA polymerase and multiply - primedrolling circle amplificationg1 Genome Res , 2001 , 11 : 1095 - 10991〔23〕 Rector A , Tachezy R , Ranst MV1 A sequence - independent strategyfor detection and cloning of circular DNA virus genomes by using multi2ply primed rolling - circle amplification1 J Virol , 2004 , 78 : 4993 -49981〔24〕 Allander T , Emerson SU , Engle RE , et al1 A virus discovery methodincorporating DNase treatment and its applicationg to the identificationgof two bovine parvovirus species1 Proc Natl Aced Sci USA , 2001 , 98 :11609 - 116141〔25〕 Stang A , Korn K, Wildner O , et al1 Characterization of virus isolates byparticle - associated nucleic acid PCR1 J Clin Microbiol , 2005 , 43 :716 - 7201(收稿日期: 2006 - 05 - 15)中国预防医学杂志2007 年6 月第8 卷第3 期 Chin Prev Med , June 2007 , Vol18 No13 ·319 ·© 1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. 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PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。下面是我整理的关于pcr技术论文,希望你能从中得到感悟!

技术的研究进展

摘要 PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。因其高强的特异性和灵敏度以及检测速度快、准确性好等优点,已被广泛地应用于水产、微生物检测等许多领域。该文从PCR技术的原理及应用方面进行了综述,并对其发展做出了展望。

关键词 PCR技术;研究进展;应用

中图分类号 Q819 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2012)10-0047-02

PCR(polymerase chain reaction,PCR)即聚合酶链式反应,它是一种体外酶促合成,扩增特定DNA片段的方法。1985年,美国Karray等学者首创了PCR技术,并由美国Cetus公司开发研制[1]。随着科学技术的发展和突破,PCR技术已在多个领域得到广泛地应用,如微生物检测、兽医学、水产养殖等方面。由于该技术具有较强的灵敏度、准确度和特异性,又能快速进行检测,因而其应用领域也在不断延伸[2-3]。随着PCR技术的不断发展,在常规PCR技术的基础上又衍生出了许多技术,如多重PCR(mutiplex PCR)技术[4]、实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)技术[5]、单分子PCR技术[6]。

1 PCR技术原理

PCR技术是根据待扩增的已知DNA片段序列、人工合成与该DNA 2条链末端互补的2段寡核苷酸引物,在体外将待检DNA序列(模板)在酶促作用下进行扩增。PCR的整个技术过程经若干个循环组成,一个循环包括连续的3个步骤:第1步是高温条件下的DNA模板变性,即模板DNA在93~94 ℃的条件下变性解链;第2步是退火,即人工合成的2个寡核苷酸引物与模板DNA链3’端经降温至55 ℃退火;第3步是延伸,即在4种dNTP底物同时存在的情况下,借助TaqDNA聚合酶的作用,引物链将沿着5’-3’方向延伸与模板互补的新链[7]。经过这个循环后,合成了新链,可将其作为DNA模板继续反应,由此循环进行。循环进程中,扩增产物的量以指数级方式增加,一般单一拷贝的基因循环25~30次,DNA可扩增l00万~200万倍[1]。PCR反应的步骤很简单,但是具体的操作是复杂的,如退火温度的确定、延伸时间的长短以及循环数等。因此,不同的反应体系应该确定适当的反应条件,以避免假阴性或假阳性等情况的产生。

2 PCR技术的分类

在传统PCR技术的基础上,根据人们的需要以及各个领域的应用要求,又衍生出很多种类的PCR技术。新技术在各领域广泛应用并逐渐改进,为进一步的研究提供了基础。

2.1 实时荧光定量PCR技术

1996年,学者经过研究,在传统PCR技术的基础上,首创了实时荧光定量PCR技术,新技术已经应用至医学领域、分子生物学和其他基础研究领域。实时荧光定量PCR技术基于传统技术的优势,还具有实时性、准确性、无污染,实现了自动化操作和多重反应,是PCR技术研究史上从定性到定量的飞跃[8]。

荧光定量PCR技术最大的特点是能将荧光基团加入到PCR反应体系中,借助于荧光信号,累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析[9]。实时监测这一特点是常规PCR技术所不具有的,因为其对扩增反应不能进行随时的检测。常规PCR技术的扩增终产物需要在凝胶电泳等条件下才能进行,无法对起始模板进行准确的定量,而荧光定量PCR技术的反应进程可以根据荧光信号的变化做出准确的判断[10-11]。一个PCR循环反应结束之后,定量PCR仪可以收集1个荧光强度信号,荧光信号强度的变化可以反映产物量的变化情况,这样就可以得到1条荧光扩增曲线[12]。荧光信号在指数扩增阶段,PCR产物荧光信号的对数值与起始模板量之间存在线性对应关系,然后进行定量分析[13]。

2.2 多重PCR技术

多重PCR(mutiplex PCR)技术是PCR技术的一种,为同一管中加入多对特异性引物,与PCR管内的多个模板反应,在一个PCR管中同时检测多个目标DNA分子。多重PCR技术可以扩增一个物种的一个片段,也可以同时扩增多个物种的不同片段[14]。

在同一反应体系中,多重PCR技术进行多个位点的特异性扩增时,引物间的配对、引物间的竞争性扩增等会对扩增效果产生重要影响。一方面,如果能选择适宜的反应体系和反应条件,可极大地提高多重PCR的扩增效果[15]。主要包括退火温度、退火及延伸时间、PCR缓冲液成分、dNTP的用量、引物及模板的量等。另一方面,DNA的抽提质量也影响多重PCR扩增效率,如DNA抽提不干净或降解都将影响PCR扩增效果[16]。

2.3 单分子PCR技术(SM-PCR)

单分子PCR技术是在传统PCR技术的基础上发展的,基本循环过程相同,但在反应条件、模板数量、DNA 聚合酶选择、引物设计方面具有不同点。该技术是以少量或单个DNA分子为模板进行的PCR[17]。

单分子PCR技术反应中,DNA 模板浓度极低,这就要求模板有较高的质量。因为这是试验成败的决定性因素。在设计引物时,应该严格控制GC的含量和Tm值,同时尽量避免引物间存在可配对序列。在反应混合物模板数极低的情况下,若引物之间存在少量配对序列,扩增时极易形成二聚体,使反应无法进行,得不到所需要的产物[18]。由于单分子PCR技术反应的变性温度(96~98 ℃)大多比常规PCR技术(94 ℃)略高,因而对DNA 聚合酶热稳定性的要求也更加严格,需要有较好的热稳定性,以防止温度过高而使其失活。其变性时间(5~15 s)、退火时间及延伸时间也短于常规PCR技术[17]。

3 PCR技术的应用

3.1 PCR技术在水产上的应用

基因表达是检测某个基因在不同发育期或不同组织中的表达量变化,或受到某种试验处理过程中的影响而出现表达量变化的情况。有学者应用real-time PCR技术研究碳水化合物含量对翘嘴红鲴糖代谢酶G6Pase、GK以及PEPCK表达量的影响[19-21],研究结果可为翘嘴红鲴饲料配方中的最合适糖含量提供理论依据。孙淑娜等[22]研究叶酸拮抗剂对斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2表达的影响,表明叶酸拮抗剂对早期胚胎的心脏发育影响较大,可导致斑马鱼心脏发育延迟及心脏形态异常,并下调斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2的表达,这可能是叶酸生物学活性受抑后导致心脏发育异常的机制之一。Sawyer et al[23]以斑马鱼的未受精卵、胚胎、仔鱼和成鱼为研究材料,采用实时荧光定量PCR技术,检测了P450aromA和P450aromB在不同组织的表达量,表明在各组织中均有2种基因的表达,但表达量显著不同,呈现组织特异性。

3.2 PCR技术在微生物检测上的应用

1990年,Bej et al[24]在利用多重PCR的方法检测了Leg-ionella类菌种和大肠类细菌,其结果是通过点对点方法固定的多聚dT尾捕捉探针和生物素标记的扩增DNA进行杂交来检测的。张志东等检测口蹄疫病毒(FMDV)持续性感染的带毒动物,表明实时荧光定量PCR技术具有快速检测、准确、客观等优势,较优于传统的检测方法[25-26]。Metzger-Boddien et al[27]对PCR-ELISA的方法进行了评价,结果显示,样品中沙门氏菌的检出率可以达到98%。

4 展望

传统PCR技术以及衍生出来的新型PCR技术自面世以来,已被广泛应用到生命科学的各个领域。随着技术方法的不断改进与完善,荧光定量PCR技术将会逐渐完善并广泛应用。多重PCR技术在食品病原微生物、非致病微生物及环境微生物检测中具有重要作用;未来的研究主要集中在去除食品抑制因子干扰、改进样品前处理技术等方面,其次是整合应用多重PCR与其他技术,必将在未来食品微生物检测中有非常好的应用前景。

5 参考文献

[1] 常世敏.PCR在食品微生物检测中的应用[J].邯郸农业高等专科学校学报,2004,21(4):23-25.

[2] 唐永凯,俞菊华,徐跑,等.实时荧光定量PCR技术及其在水产上的应用[J].中国农学通报,2010(21):422-426.

[3] 吴学贵.LPS刺激点带石斑鱼免疫相关基因的克隆与组织表达差异性分析[D].海口:海南大学,2011.

[4] 侯立华,黄新,朱水芳,等.双色荧光多重PCR技术及在禽流感病毒检测中的应用[J].生物技术通报,2010(1):168-172.

[5] 查锡良.生物化学[M].7版.北京:人民卫生出版社,2009:483-485.

[6] 张杰道.生物化学实验技术PCR技术及应用[M].北京:科学出版社,2005:12-18.

[7] 谢海燕.黑线仓鼠LHR部分序列克隆及组织器官的表达差异[D].曲阜:曲阜师范大学,2011.

[8] KUBISTA M,ANDRADE J M,BENGTSSON M,et a1.The real-time pol-ymerase chain reaction[J].MoLecular Aspects of Medicine,2006,27(2-3):95-125.

[9] AGINDOTAN B O,SHIEL P J,BERGER P H.Simultaneous detection of potato viruses,PLRV,PVA,PVX and PVY from dormant potato tubers by TaqMan real-timeRT-PCR[J].J Virol Methods,2007,142(1-2):l-9.

[10] 李丽平.小麦慢锈品种叶片受条锈菌侵入后的木质素合成及调控研究[D].雅安:四川农业大学,2009.

[11] 薛霜,独军政,高闪电,等.实时荧光定量PCR技术研究进展及其在兽医学中的应用[J].中国农学通报,2010(7):11-15.

[12] SCHUBERT J,FOMITCHEVA V,SZTANGRET-WISNIEWSKA J. Dif-ferentiation of Potato virus Y strains using improvedsets of diagnostic-PCR-primers [J].J Virol Methods,2007,140(1-2):66-74.

[13] 袁继红.实时荧光定量PCR技术的实验研究[J].现代农业科技,2010(13):20-22.

[14] 朱善元.生物检测技术PCR及其在兽医微生物检测中的应用[J].黑龙江畜牧兽医,1999(11):21-22.

[15] 黄银花,胡晓湘,李宁,等.影响多重PCR扩增效果的因素[J].遗传,2003,25(1):65-68.

[16] 陈诺,唐善虎,岑璐伽,等.多重PCR技术在食品微生物检测中的应用进展[J].生物技术,2010,37(10):72-75.

[17] 刘连生.常规PCR技术与单分子PCR技术[J].医学信息,2010,23(11):4379-4380.

[18] 顾超颖.汗孔角化病的临床分析,SSH1、ARPC3基因突变检测和表达谱分析[D].上海:复旦大学,2008.

[19] 唐永凯,俞菊华,刘波,等.翘嘴红鲌肝脏G6Pase催化亚基的克隆以及摄食和饲料中碳水化合物对其表达的影响[J].水产学报,2007,31(1):45-53.

[20] 刘波,谢骏,苏永腾,等.高碳水化合物日粮对翘嘴红鲌生长、GK及GK mRNA表达的影响[J].水生生物学报,2008,32(1):47-53.

[21] 俞菊华,戈贤平,唐永凯,等.碳水化合物、脂肪对翘嘴红鲌PEPCK基因表达的影响[J].水产学报,2007,31(3):369-373.

[22] 孙淑娜,桂永浩,宋后燕,等.叶酸拮抗剂甲氨喋呤导致斑马鱼心脏发育异常及BMP2bHAS2表达下调[J].中国当代儿科杂志,2007,9(2):159-163.

[23] SAWYER S J,GERSTNER K A,CALLARD G.Real-time PCR analysis of cytochrome P450 aromatase expression in zebrafish:gene specific tissue disyribution,sex differences,developmental programming,and estrogen regulation[J].General and comparative endocrinology,2006,147(2):108-117.

[24] BEJ A K,MAHBUBANI M H,MILLER R,et a1.Multiplex PCR amplif-ication and immobilized capture probes for detection of bacterial patho-gens and indicators in water[J].Mol Cell Probes,1990,4(5):353-365.

[25] ZHANG Z D,ALEXANDERSEN S.Detection of carrier cattle and sheep persistently infected with foot-and-mouth disease virus by a rapid real-time RT-PCR assay[J].Journal of Virological Methods,2003,111(2):95-100.

[26] ZHANG Z D,BASHIRUDDIN J B.Quantitative analysis of foot-and-mouth disease virus RNA duration in tissues of experimentally infected pigs[J].TheVeterinary Journal,2009,180(1):130-132.

[27] METZGER-BODDIEN C,BOSTEL A,KEHLE J.Salmonella sp.PCR-ELISA for analysis of food samples[J].J Food Prot,2004,67(8):1585-1590.

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核酸检测利弊论文

防疫常态化可以让我们的出行更加方便,去一些地方之后需要出示核酸检测结果和行程卡,这样有助于医护人员检查核酸,也有助于我们生活更加便利。

每个人的感受是不一样的,会有一些不太舒服的感觉,不过等待一会就会好了。 核酸检测的物质是病毒的核酸。核酸检测是查找患者的呼吸道标本、血液或粪便中是否存在外来入侵的病毒的核酸,来确定是否被新冠病毒感染。因此一旦检测为核酸“阳性”,即...

现在核酸检测主要是咽试纸,就是通过咽部提出物检测核酸。这种感觉就是护士用棉签在咽部触碰几圈后就可以了。有的人反应大一点,有的人反应很小,几乎没有任何感觉。整个过程的缺点就是有的人反应大。优点就是快速,简单。

开展全民核酸筛查无症状感染者,识别潜在传染源,降低复工复产复学风险,疫情防控和经济社会发展。全国核酸检测结果可为政府决策提供依据,提振城市和市场主体信心。在疫情中都遇到了不同程度的困难。及时筛选结果,消除疑虑,帮助企业尽快复工复产。实验室检测过程中,如果患者样本中检测到新冠病毒的特定核酸序列,表明感染了新冠病毒,有些患者可能会出现假阴性结果。

全民核酸检测对于疫情防控过程中实施早发现、早报告、早隔离、早治疗具有重要意义。在疫情防控初期,新型冠状病毒的核酸检测工作主要依靠疾控机构。始终把安全放在首位,遵守疫情防控规定,做好岗前培训,做到培训不合格、不戴口罩、不戴口罩不上岗。防护措施不到位,或未签署承诺书。自觉遵循科学准则做好防护工作,戴口罩、勤洗手、勤通风、拒绝野味、不探亲、不聚集。把更多的精力投入到疫情防控一线,坚持实事求是的工作作风,不搞主题活动,不搞集中仪式,不搞强化培训,不搞“形式防疫”,做实事,做实事。

要做到在采样时才取下口罩,采样后请立即戴上。采集后立即离开采集点,避免在采集点周围随地吐痰和呕吐。由于对医务人员的严格保护,可能很难听到讲话。建议市民提前将手机号码、家庭住址、姓名、身份证号码等个人信息写在小纸条上,以节省时间,提高检测效率。核酸采样前2小时尽量避免进食,半小时内避免吸烟、饮酒、嚼口香糖。由于个体差异、耐受性和既往病史,很少出现出血、感染、心脑血管意外等并发症和不良后果。

核酸检测优化论文

核酸检测是对自己的负责,做核酸检测时一定要戴好口罩,做好自我防护。怎么写好核酸检测工作总结呢?下面是我帮大家整理的《疫情防控核酸检测工作总结汇报》,欢迎您参考,希望对您有所助益!

20xx年1月15日下午一点,我镇在市政府疫情防控会议上接到伊拉哈镇居民全员核酸检测任务后,镇政府领导及卫生院相关人员立即回到镇政府,于下午3时召开xx镇全员核酸检测工作部署会议。会议主要内容包括:

1、制定伊拉哈镇居民全员检测工作方案;

2、成立伊拉哈镇居民全员核酸检测领导组织:

3、确定各工作小组工作职责分工:

4、对所有参与现场工作的人员进行穿脱防护物品培训;

5、向各村发放核酸采集信息卡,对信息卡填写人员和核酸混采登记表录入人员培训;

6、确定采集点位置,准备采样工作所需物品;

在镇卫生院人力严重不足的情况下,镇政府及卫生院与xx市卫健局沟通,申请支援专业技术人员。在卫健局的协调下,鹤山农场医院、海江镇中心卫生院和前进镇卫生院共计派出21名精干技术人员支援我镇核酸检测工作。全镇共设置采样点15个,投入采样医务人员共30人。镇政府抽调伊拉哈镇小学和中学教师15名,作为信息录入人员。派出所出动警员4人。包村领导带领各村工作人员及志愿者178人负责采样现场维持秩序、引导村民和信息卡填写等工作。此项工作参与人员共计228人。出动车辆50台。

1月16日早七点整,伊拉哈镇村民全员核酸检测工作正式启动,15个采集点同时开展采样工作,现场利用有限条件设置了进、出双通道,村民在现场工作人员带领下,按照采样工作程序配合采样工作,避免了人员聚集,各个采集点工作有序高效开展。每个采集点工作完成后,又对行动不便人员进行入户采样。

到1月16日15时,伊拉哈镇居民全员核酸检测采样工作顺利结束。卫生院收集整理所有采集点的医疗废物,按规定进行处理。采集点所属单位对场所进行全面的消杀。

卫生院对全镇7409份采集样本、采集信息卡存根及采集登记表进行核对后,按规定流程送到九三农垦医院检验室,在当日18时,完成全部样本送检工作。

本次伊拉哈镇居民全员核酸检测采样工作,共计消耗防护服178套、防护面屏220个、手消毒液20瓶、一次性乳胶手套450付,医用外科口罩600个、医用防护口罩(N95)360个,一次性靴套256个。

1月17日下午,卫生院接到九三农垦医院检验室通知,伊拉哈镇居民全员核酸检测样本7409份,结果全部为阴性。至此,伊拉哈镇居民全员核酸检测采样工作圆满完成。

为认真贯彻落实疫情防控工作重要指示精神,严防疫情扩散。20xx年1月17日晚上电话通知每一户居民提前做好核酸检测准备和相关注意事项。

1月18日早上7:00全民检测工作全部准备到位,按照应检尽检、愿检尽检、不漏一户、不漏一人,网格长和工作人员以小区楼栋、单元为单位引导居民来到xx市第八中学采集点进行核酸检测工作,确保全民检测工作有序开展,采集地点有明显的入口标识,采集场地内部有明显一米线标识,居民按顺序依次做检测。

为确保安全,街道领导对核酸检测现场再次检查,要求工作人员认真核对好检测人员的身份信息,做到规范、科学、快速有序开展登记和检测工作,做好检测人员的衔接,最大限度提高检测工作效率。目前采集工作仍在有序进行中。

疫情发生以来,在县的坚强领导下和上级业务部门具体指导下,县卫健委闻令而动,全民动员,精准施策,扎实做好疫情防控各项工作,确保了全县疫情防控形势总体平稳。

(一)以身垂范,机关干部全员参与。委里成立了县卫健委新冠肺炎疫情防控应对领导小组,多次召开了会议研究防控工作,制定下发了各种防控指引和文件。各班子成员不仅担任了县新冠肺炎疫情防控应急指挥部下设工作组的成员,而且身先士卒带队到高速路口、长运车站体温监测点值守,委里一名班子一直在县集中医学观察点坐镇指挥。机关干职工也纷纷投入到疫情防控一线工作,

(二)排查监测,有效阻断疫情输入源头。

(三)不惧危险,千余医护战士逆行“战疫”。疫情期间,我县出现了XX例确诊患者、XX例疑似病例,面对未知的危险,县乡村各级医疗机构的XXXX多名医护人员都牢牢坚守在抗疫的第一线工作,积极参与人员摸排、健康监测、流调消杀,防控指导、舍小家为大家,没有任何怨言。

(四)从无到有,核酸检测工作有序推进。

(五)中药干预,充分发挥中医特色优势。采取中药汤剂、艾熏和热敏灸等中医药手段进行预防,每日向疫情防控一线的医务人员、工作人员、园区返岗人员等人群发放预防用中药汤剂,采取艾熏和热敏灸等中医药手段预防,累计向医院、复工复产企业和集中医学观察点等场所发放艾芯XXXX条;选派县中医院X名中医师加入市中医药专家组,协助配合定点救治医院的中医药治疗。

(六)严防死守,抓实医院感染防控工作。严格落实发热门诊管理要求,加强患者收入院管理,加强陪护、探视的管理,强化新冠病毒核酸检测,严格落实标准预防,开展院内感染风险排查整顿。通过抓实抓细医疗机构院内感染的各项工作措施,切实做到院内闭环管理,确保了医疗机构零感染。

(七)精心安排,全力以赴保障防控物资。一是多渠道争取物资来源,由各部门和社会各界踊跃提供采购信息,县卫健委一名班子专门负责对接落实;二是物资进出管理规范。入库填写入库单,由仓管人、审核人签字,物资出库填写申领单,审核同意后再领取防控物物资,紧缺物资申领报县疫情应急指挥长批准;三是物资分配每日日报,由县指挥部常务副指挥长、副指挥长等领导签字。

(八)储备人员,做好疫情防控准备。一是组建了流行病学调查队伍,共计XX人,均为县疾控中心、县乡医疗机构公卫人员,调查队伍分成了X个梯队;二是组建了核酸采样后备队伍,抽调了XX名乡镇卫生院医护人员人作为核酸采样储备人员,从XX月XX日开始分批次到县XX医院跟班操作学习;三是组建了核酸检测检验后备队伍,乡镇卫生院X名检验专业人员全部作为后备力量,目前正分批次在县XX医院跟班操作学习。

(九)积极备战,开展防控实战应急演练。

时间流逝,岁月如梭,20XX年已悄然走过。20XX年是我人生旅途上的一个重要转折点。离开以确定自己的工作万无一失。工作之余还要经常总结工作教训,不断提高工作效率。

核酸检测的物质是病毒的核酸。核酸检测是查找患者的呼吸道标本、血液或粪便中是否存在外来入侵的病毒的核酸,来确定是否被新冠病毒感染。

核酸检测法是通过查找患者的呼吸道标本、血液或粪便中是否存在外来入侵的病毒的DNA和RNA,来判断是否被病毒感染的方法,是新型冠状病毒感染确诊的金标准。

目前核酸检测包括口咽部咽拭子采样和鼻咽部咽拭子采样,两者检测时所耗费的时间都不长,如在采集口咽拭子时检测者需头后仰,张口发出“啊”音,有助于暴露咽喉。

另外质量控制要考虑从样品接收到发出报告整个过程每个环节的管理过程,包括:

(1)人员;

(2)实验室分区和环境;

(3)仪器;

(4)检测过程(试剂、操作过程,外部质检)

为有效应对可能出现的疫情,对防控区域人员实施“应检尽检”,根据XX市疫情防控指挥办关于做好大规模核酸检测筹备工作的通知要求,我镇于X月XX日晚上XX在XX、XX村委会开展了大规模核酸检测工作。现将有关工作总结如下:

一、高度重视,做好核酸检测准备工作

我镇接到XX市疫情防控指挥办关于做好大规模核酸检测筹备工作的通知要求后,镇高度重视,立即召开班子会议专题研讨,卫健办立即制定我镇区域大规模核酸检测的工作,成立以镇书记为组长的核酸检测指挥中心,同时将工作方案人员职责具体落实到镇村领导职工。同时,卫健办依方案要求购买核酸检测物资清单,保证核酸检测顺利进行。

二、做好区域大规模核酸检测宣传发动工作

X月XX日上午,X镇、XX宣传发动组工作人员通过入户通知的方式全方位开展核酸检测工作的发动工作,务求使更多的居民参与检测。宣传组入户的同时,还带上葵花码,指导村民提前扫码截图。

三、大规模核酸检测工作有序开展

X月XX日晚上XX:XX,全体工作人员行动起来,按岗就位。晚上XX:XX,X镇、XX大规模核酸检测工作有序开展,收到通知的居民群众早早戴好口罩排队参加核酸检测,在工作人员的指引下经过测温,亮码后进入等候区,按指引进行核酸扫码登记。现场群众严格按照一米间隔轮候,有序进入到核酸采样区,配合医护人员进行采样工作。为照顾老人、小孩及行动不便的人员,核酸检测点特设一条快速通道,体现了人性关怀。

本次演练截止时间为晚上XX:XX分,X镇采样点采集样本XXXX份,XX采样点采集样本XX份,全镇总共采样XXXX份。我们这次演练取得了不错的成绩,但也存在以下几个问题:一是工作的人员安排不够合理。有一部分干部职工没有利用到位;宣传发动组的人员一部分也是后勤保障组人员,导致布置场地时缺乏人手,速度慢;二是场地的利用有待提高。布置场地时未能充分利用场地,缓冲区的设置与人流量不相匹配,人流量过多时人员密集,达不到一米间隔;三是基础设施薄弱。采集现场无安装加强信号器,采集人员用手机录入信息,无配备平板电脑,录入速度慢。

在今后的工作中,我们要做好方案,调动全体镇村干部积极参与并合理安排,同时做好合理规划、充分利用场地,并提前安装信号加强器,采购平板电脑,为必要时实施全镇全人群筛查做好准备。

为贯彻落实中央、省、市应对新冠肺炎疫情工作精神,加强核酸检测工作,排查消除风险隐患,切实做到“早发现、早隔离、早诊断、早治疗”,根据上级文件精神,并结合我街道实际情况,制定本方案。一、工作目标按照“急、重、轻、缓”的原则,科学合理、兼顾能力,调整优化检测范围,对不同场所、不同行业、不同人群进行分类检测筛查,切实做到“应检尽检”“适时抽检”和“愿检尽检”,并根据要求做好局部疫情下大规模人群核酸检测筛查准备工作。

二、

检测范围

(一)

““应检尽检”人群

1.密切接触者(含共同生活者)

2.境外入丰人员、重点地区入丰人员(含湖北及中、高风险地区无法提供到达目的地前7天内核酸检测阴性证明或血清病毒特异性IgG抗体检测阳性的,下同)

3.发热门诊患者、入(住)

院患者及陪护人员、医疗机构工

作人员;

4.学校(托幼机构)

教职员工、公共场所服务人员、口岸检疫排查人员、监所工作人员、社会福利养老机构工作人员等重点行业、特殊场所的重点人群。

(二)

““适时抽检”人群

1.确诊病例和无症状感染者密切接触者的接触者;

2.疫情社区防控工作人员和志愿者;

3.母婴服务行业从业人员;

4.复学学生;

5.各类公共交通从业人员(协助市主管部门落实)

等重点行业和人员。

(三)

““愿检尽检”人群

其他人群实行“愿检尽检”。

三、

组织保障1.各社区要指定专人对接,按照工作职能,组织有关人员做好检测工作,确保“应检尽检”“适时抽检”和“愿检尽检”的有效落实。

配合各行业主管部门对各类人群进行摸排登记,特别对“应检尽检”对象要做到底子清,并动态掌握人员信息。2.各社区要根据按照急重轻缓、科学合理、兼顾能力、适时调整、安全有效的原则,认真组织实施,其中对重点地区、重点岗位以及重点人群的“应检尽检”人员应予以优先。3.各社区应要按照工作内容做好全员检测采样的应对准备和演练工作,确保出现紧急状态时能有效快速处置,打有准备的仗,牢牢把握主动权,提高应急响应能力。4.各社区要加强新冠肺炎防控知识的科

普宣传工作,做好辖区内群众的宣传动员和引导工作,根据上级指令有序组织群众进行核酸采样工作。

四、

实施步骤

((一))建立流调行动(核酸检测)

小组。

结合街道实际情况,各社区建立流调行动(核酸检测)

小组。

街道挂点社区领导任组长,负责挂点社区的流调和全员核酸检测工作,包括社区内人员动员、组织、公告、样本采集送检等工作,各社区流调行动(核酸检测)

应按照“1+8”标准配备工作人员,即有1名街道班子成员负责,并设置8人专门小组,包括1名联络人、1名医务人员、1名信息登记员、1名网络员、2名引导员、1名民警、1名村居工作者。

针对行动不便的老人、孕产妇、残疾人等特殊群体,安排采样人员上门采集,确保检测工作全覆盖,做到不落一人。

(二)

准备核酸检测采样点。

流调行动(核酸检测)

小组应预先准备核酸检测采样点,并提前储备好设置采样点所需的帐篷等物资,确保收到指令后能够迅速布置好采样点。采集地点应选择好空旷、通风良好的场地,根据原有场地条件,划分为等候区、采集区、缓冲区、采集辅助区和临时隔离区,有效分散待检人员密度;

应当设置急救设备备用。

等候区应设置人行通道和一米线标识,尽可能保证人员单向流动,等侯人员均应按要求佩戴好口罩。

采集区应根据气候条件,配备帐篷、冷/暖风扇、适量桌椅,保证医护人员在相对舒适环境下工作;

标本如无法及时运送至实验室,需准备4℃冰箱或低温保存箱暂存。

缓冲区可供采集人员更换个人防护装备。

采集辅助区空间应当相对密闭,用于采集人员更衣、备餐、值班等。

临时隔离区用于暂时隔离在采集过程中发现的疑似患者或高危人群。

光阴飞逝,在忙碌中结束了这一阶段的工作,必然需要我们对工作进行一个总结,总结是对某个阶段的工作或学习加以回顾和分析,可以很好的为这一阶段工作圆满地画上一个句号。有没有可以参考的总结范文呢?你可以读一下我们整理的新冠疫情核酸检测工作总结汇报,欢迎大家阅读收藏,分享给身边的人!

疫情防控核酸检测工作总结按照省市有关文件精神,为保障企业安全有序推进复工复产,根据公司办公会要求,后勤部于x月x日组织开展新厂复工复产人员的新冠肺炎病毒核酸检测。

为避免人员聚集,保证采集质量,后勤部利用停车棚组成临时检测点。早8:00点,xx医院相关医务人员到厂,并对职工个人信息进行核查。

采样人员均穿戴好防护服,分为两组进行采样。为保证独立的采集空间,每人间隔1.5米以上有序排队,单向进出。

因人数较多,后勤部结合实际,决定先检测在厂封闭人员,再检测不在岗人员,最后检测办公楼人员。公司各领导也积极带头参与到检测工作之中。

在下一阶段防疫工作中,我部将做好各类常用防控物资的储备和分发工作,强化食堂餐饮和厂区环境卫生治理的综合管理。加强对新型冠状病毒肺炎的学习,提高职工自我防护意识和对突发事件的应变能力,努力保障安全生产和职工的生命安全。

疫情防控核酸检测工作总结20XX年x月x日下午一点,我镇在市疫情防控会议上接到xx镇居民全员核酸检测任务后,镇政府领导及卫生院相关人员立即回到镇政府,于下午X时召开xx镇全员核酸检测工作部署会议。会议主要内容包括:

1、制定xx镇居民全员检测工作方案;

2、成立xx镇居民全员核酸检测领导组织:

3、确定各工作小组工作职责分工:

4、对所有参与现场工作的人员进行穿脱防护物品培训;

5、向各村发放核酸采集信息卡,对信息卡填写人员和核酸混采登记表录入人员培训;

6、确定采集点位置,准备采样工作所需物品;

在镇卫生院人力严重不足的情况下,镇及卫生院与xx市卫健局沟通,申请支援专业技术人员。在卫健局的协调下,xx医院、xx镇xx卫生院和xx镇xx院共计派出x名精干技术人员支援我镇核酸检测工作。全镇共设置采样点x个,投入采样医务人员共x人。镇政府抽调xx镇小学和中学教师x名,作为信息录入人员。派出所出动警员x人。包村领导带领各村工作人员及志愿者x人负责采样现场维持秩序、引导村民和信息卡填写等工作。此项工作参与人员共计x人。出动车辆x台。

x月x日早七点整,xx镇村民全员核酸检测工作正式启动,x个采集点同时开展采样工作,现场利用有限条件设置了进、出双通道,村民在现场工作人员带领下,按照采样工作程序配合采样工作,避免了人员聚集,各个采集点工作有序高效开展。每个采集点工作完成后,又对行动不便人员进行入户采样。

到1月16日x时,xx镇居民全员核酸检测采样工作顺利结束。卫生院收集整理所有采集点的医疗废物,按规定进行处理。采集点所属单位对场所进行全面的消杀。

卫生院对全镇x份采集样本、采集信息卡存根及采集登记表进行核对后,按规定流程送到xx医院检验室,在当日xx时,完成全部样本送检工作。

本次xx镇居民全员核酸检测采样工作,共计消耗防护服x套、防护面屏x个、手消毒液x瓶、一次性乳胶手套x付,医用外科口罩x个、医用防护口罩x个,一次性靴套x个。

x月x日下午,卫生院接到xx医院检验室通知,xx镇居民全员核酸检测样本x份,结果全部为阴性。至此,xx镇居民全员核酸检测采样工作圆满完成。

面对新冠疫情防控“外防输入、内防反弹”的新形势,为全力做好2020秋冬季学校疫情防控工作呢,筑好校园安全第一道防线,确保师生生命安全和身体健康,保证开学工作顺利进行。按照区教育局的统一部署,我校于X月XX日,对幼儿园全体师生人员进行核酸检测。根据区教育局指示要求,特制定以下方案。

一、目标任务普及新型冠状病毒肺炎防控知识,提高全园师生的自我防护意识和能力;

做到早发现、早报告、早隔离、早治疗;

建立快速反应机制,及时采取有效的防控措施,预防和控制新型冠状病毒肺炎在我园的发生和蔓延,最终实现“零病例”、“零感染”目标。

二、组织领导园长XXX担任演练总指挥,统一调度,现场指挥,对重大问题进行决策。

(一)综合协调组1.人员组成组长:

成员:

2.主要职责①负责现场调度、秩序维护、后勤保障等工作;

②综合评估各环节工作,提出改进意见,不断优化应急处置流程。

(二)疫情监测组1.人员组成组长:

成员:

2.主要职责①负责全校师生晨午检、教学过程中体温监测;

②疫情发生后,负责排查患病学生的活动轨迹和接触对象情况,确定确切接触者;

③对患病学生情况持续关注,每天加强疫情防控与巡视,对其班级及幼儿园其他同学加强后续观察和情况排查。。

(三)现场处置组1.人员组成组长:

成员:

2.主要职责①疫情发生后,立即组织患病学生隔离和初步诊断救治;

②确保发热学生隔离通道和其他师生疏散通道相互独立,避免交叉感染。

(四)对外联络组1.人员组成组长:

成员:

2.主要职责①出现疫情后,及时联系定点医院,并通知学生家长;

②按规定向上级教育部门、疫情防控部门报告情况;

③协助上级有关部门做好疫情防控、调查和环境污染消除工作。

(五)消毒防疫组1.人员组成组长:

成员:

2.主要职责①负责对出现疫情症状学生经过的通道及该可能接触过的物品进行应急消毒;

②根据有关规定做好相关班级、卫生间、公共场所等消毒工作,并在学生离开隔离观察室后对留观室进行终末消毒,同时做好记录。

(六)宣传教育组1.人员组成组长:

成员:

2.主要职责①负责疫情发生后引导控制舆论,稳定师生及家长情绪;

②对隔离进行医学观察学生进行心理疏导,引导学生不恐慌、不猜测、不传谣,保持积极健康的心态。

三、主要措施

(一)核检前的准备工作1.加强师生教育引导工作。通过学校官方微信平台、手机短信、班级家长微信群等多种渠道普及防疫知识,引导幼儿和家长提高自觉防控意识和能力,做好个人防护,减少疫情期间外出,规范佩戴口罩,尽量避免乘坐公共交通工具,不参加聚会,不到人员密集的公共场所活动。开学前要根据上级主管部门要求和疫情防控方案对全体教职员工进行疫情防控知识技能培训和应急处置演练。

2.提前告知具体核检时间。

正式核检前,利用官方微信公众号、班级微信群、电话等方式就核检具体时间(待上级教育主管部门确定后另行通知),通知到每一位幼儿,并告知幼儿家长提前三天做好自查症状、自测体温,出现相关症状、体温高于37.3℃的,要暂缓核检。

3.做好校园卫生防疫工作。

在卫生防疫部门指导下,按照消毒操作规范,对教室、图书馆、食堂、运动场、卫生间等公共区域进行集中清洁消毒,确保卫生达标、不留死角。

4.准备好应急物资与场所。

教务处根据需要,提前储备好疫情防控所需喷雾器、手持喷壶、消毒液、口罩等物品备用,设置相对独立的观察室,用以暂时留观身体不适的师生,并优化工作流程、做好环境消毒、避免交叉感染。

(二)核检当日工作计划 1.入园当日家长及幼儿应佩戴口罩,尽量避免乘坐公共交通工具,并注意与他人保持一定距离。引导家长及幼儿有序入园,避免人员聚集。

2.严控入园管理,建立入园体温检测制度,填写健康卡。进入园区内的所有人员,均需接受体温检测,体温正常方可入园。

3.如学生被确诊为疑似病例或确诊病例,及时将感染情况和排查情况上报校疫情防控领导小组,由领导小组第一时间上报区教体局和疾控中心。

疫情就是命令,防控就是责任!让我们强化使命担当、众志成城、全力以赴,扎实做好疫情防控工作和教学工作,坚决打赢疫情防控阻击战!

一、有关疫情防控存在的问题与建议

(一)乡镇、其他相关部门以及群众的防控意识有所弱化。建议:宣传媒介、舆论导向加强疫情防控的宣传。

(二)核酸检测县人民医院X家PCR实验室,配备X台XX孔核酸提取仪、X台XX孔核酸检测仪,县疾病预防控制中心的PCR实验室正在建设中,预计XX月底建成。非常时期,县人民医院PCR实验室可设X个小时班次,每天检测X次,单采每次检测XX人份,如采用XX份标本混采检的方式每次检测XX人份,日检测量为XXXX人份。加上县疾控中心XXXX人份,全县最大日检测能力每天XXXX人次。但按照全县XX万人口计算,如果5-7天全部检测完成计算,每天要检测X.X-X万人份,所以县域内检测能力不能满足本辖区5-7天全员核酸检测。建议:一是采取购买服务的方式,由第三方检测机构帮助核酸检测,资金县财政解决;二是请求市里支援。

(三)县疾控中心经费短缺问题突出。县疾控中心是没有任何收入的一类公益性事业单位,今年疫情以来,已经购买了防护物资、消杀药品、消毒器械XX万多元,导致正常运转都捉襟见肘。建议:县财政增加县疾控中心疫情防控工作经费投入,让县疾控中心正常运转。

(四)县人民医院人员、建设问题亟待解决。县人民医院作为新冠肺炎定点医疗救治机构,除需开展正常医疗服务外,需承担县集中医疗观察点和全县发热患者的筛查诊治工作,医院预检分诊处及发热门诊需24小时工作。服务范围的增加,加剧了专业技术人员紧张问题,医务人员工作强度增加,医保的高压政策,待遇没有提高,人才引进非常困难,部分人才流失,特别是医生的紧缺,人才结构不够合理,一些学科带头人没有形成,专业技术人才力量薄弱,限制了医院整体医疗服务的开展。建议:开通用人绿色通道,县人民医院从乡镇借调的专业技术人员人员给予调入,稳定队伍,增强医院防控能力。同时希望政府部门加快新区医院建设的投入和进度。

(五)县中医院疫情防控补助问题。建议:一方面通过降低运行成本来改善医院运营状况,规范医疗行为,提高医疗质量,另一方面县政府统筹补助相关疫情防控费用,让县中医院减轻负担轻装上阵。

二、其他重点工作存在的问题

(一)县级公立医院综合改革中现代医院管理制度尚未建立,运行指标不佳,医务人员薪酬制度改革缓慢,待遇不高,改革困境突显。

(二)卫生专业技术人才缺口较大,卫生专业技术人员急需,高素质人才引不进、留不住问题比较突出,基层卫生人人才队伍严重缺乏,形势十分严峻。

(三)医疗服务能力整体较弱,卫生资源总量不足,部分卫生重点项目进展缓慢,学科建设滞后,服务能力整体水平不高,县内就诊率不达标等问题还比较突出。

(四)基层医疗卫生服务能力不容乐观,乡村医生年龄偏大,收入较低,服务积极性不高。

(五)人口老龄化加速对卫生健康服务、医疗保障和健康养老服务等方面带来严峻挑战,全面二孩政策的实施给妇幼保健服务带来新考验,流动人口计划生育服务管理依然难度大、责任重。这些都需要在今后的工作中认真研究,加以解决。

全面做好XX镇关于疫情防控工作部署要求,全力保障人民群众生命安全和身体健康,在镇及分管领导安排部署下,XX村顺利完成全员核酸检测工作,现将有关情况汇报如下:

一、工作开展情况

(1)推行网格管控。在各村民小组中设置网格员,共 XX名。每名网格员负责XX户村民。

(2)全面摸排登记。 X月X日,组织各村民小组组长、网格员对其小组进行全面逐户摸排现居住人员和在外居住人员情况并做详细登记,现居住人员共计 XX 人,在外居住人员共计 XX 人。

(3)强力宣传。 X月 X日至X月X日,通过微信群、广播、入户等形式,进行宣传全员核酸检测事项,提前让村民做好准备,并要求村民在其期间不得离村。

(4)合理布控。一是成立全员核酸检测专项工作组,设置组长、组员和片点负责人。二是在全村范围内划分X个核酸检测点即XX和XX,在各村民小组上设立卡点,共计 卡点。三是按照疫情防控要求合理布置场地以及做好物资后勤保障等,并于X月XX日全部完成。

(5)有序组织检测。组织村民分小组分时段到各核酸检测点进行检测,X月XX日上午X:XX开始检测,XX检测点于下午XX:XX完成全部检测,排查X人,实际检测X人,XX检测点于下午XX:XX完成全部检测,排查 XX 人,实际检测XX人,共计排查 XX人,实际检测XX人。

二、存在的问题

(1)信息采集系统较慢,导致检测进度较为迟缓。

(2)年长者的村民对手机操作不熟悉,在提前出示健康码环节上未能顺畅的衔接。

(3)工作人员在维护秩序的情况下,仍有村民插队、相互拥挤的现象出现。

三、下一步改进措施

(1)工作开展前,测试系统设备情况,做到早发现及时调整。

(2)加强乡风文明建设,做好文明宣传“持久战”。

(3)除了专人维护秩序外,增加物理阻碍,确保秩序“双保险”。

(4)在涉及手机操作时,对年长者村民区别服务。

按照《XXXXX》、《XXXX》要求,我市于XX启动了第X次全员核酸检测工作。此轮核酸检测在市区内共设立XX个采样点,各乡镇、XX同步进行,全市各单位、各部门志愿者有序分工,提前通知辖区居民分时段、按区域就近前往采样点,携带身份证现场亮码进行登记采样,全程有序组织居民进行核酸检测。

XXX市场监督管理局个体私营中心主任:根据市疫情指挥部工作安排,XX市市场监督管理局负责XX辖区的居民核酸检测。局全体干部分X小组,一大早来到政务中心检测点,负责维持秩序、疏导群众、帮助登记。为减少居民等候时间,根据各组居民人数核算好时间,分时间段检测,大大提高了工作效率。对于行动不便的居民,我们采取入户检测,确保应检尽检,不漏一人。

全市医疗卫生部门抽调精兵强将投入检测一线,严格按流程,规范精准细致的开展采样工作。全体工作人员,提前精心准备,从合理设置出入口、等待区、检测区、绿色通道,到间距标识、检测及消杀物资准备、现场应急准备,各环节衔接紧密。

XX市妇幼保健院护理部主任:从接到任务开始,我们就紧急调集护士、调配物资,大概是晚上X点多钟,所有的准备工作就绪。X点半就来到了指定地点,出动了XX名护士,社会各界给予了很大支持,给我们XX名志愿者,减轻了我们的压力。XX月内,我们进行了核酸采集的x次全员培训,虽然在xx佳节期间,但是大家一听到全员核酸的命令,都无怨无悔的参与到全民核酸采集工作中。为了确保我们工作完成的一个准确性,我们昨天晚上又进行了一个紧急的视频培训,基本的工作我们准备的很充足,也确保了我们采样护士的一个规范性以及我们采样的一个合格率的保证。

广大市民积极响应全员核酸检测号召,接到检测通知后,在相应时间段,到指定地点进行核酸采样,医务人员、工作人员与参检市民高度配合,各现场秩序井然。

经过几次核酸检测,工作流程不断优化,此次检测从组织到实施,从采样到检测,再到收尾过程中的为不便群众上门采样和采样点的消杀,全过程配合有序,流畅高效,各采样点均提前完成采样任务。

xx月xx日以来,根据xxxxx聚集性疫情发展情况,为迅速阻断疫情传播,我市启动全面核酸检测,目前各项工作正在稳步推进。截至xx月xx日x时,已累计采样xxxx万人。相关工作进展情况如下:

一是分批开展核酸检测。对于X类“应检尽检”人群,按照风险等级、细化轻重缓急,渐次开展核酸检测,突出三个重点,即重点人群、重点区域、重点领域,优先检测新发地等涉疫市场及周边社区高风险人员,并陆续对餐饮、商超、集贸市场从业人员,xx个XX街道乡镇居民,快递外卖行业从业人员等进行大规模核酸检测。

二是稳妥组织现场采样。经过持续作战,采样工作逐渐顺畅、有序。各区、各检测机构按照全市统一制定的核酸采样点工作指引开展检测工作,地点设置、人员配备、服务保障更加合理。在检测过程中,社区“两委”通过家园微信群、“敲门行动”等方式,分楼门、分楼栋、分小区、分时段有序组织居民进行登记、采样,街乡及社区工作人员、志愿者、下沉干部、在职党员等累计近xxx万人次投入组织动员、服务保障工作,为接受采样市民提供饮用水、遮阳棚、免洗消毒洗手液等,建立老年人绿色通道,避免高温时段,适当延长夜间采样时间,体现人文关怀。加强对医护人员关心关爱,配备冰块、风扇进行物理降温,提供防暑降温的饮料及药品,定期安排医务人员轮换,提供临时休息场所,确保现场采样工作顺利开展。

三是统筹调配全市资源。目前,市区两级共设置采样场所xxxx个,采样点位xxxx个,调集来自xxx家二三级医疗卫生机构、xxx家第三方检测机构、xxxx家疾控机构的xxxx名工作人员轮班采样,全负荷运行。医护人员脸颊上留下的深深压痕,检测人员跪着为小朋友采样的身姿,让大家心中充满了温暖与感动。同时,开展央地配合、省际配合,深入挖潜检测能力,多家全国知名检测机构驰援xxx,体现了中央单位、部队、兄弟省市与xxx市的深厚情谊。

四是加强信用体系管理。对第三方检测机构的检测能力和承担的任务量、检测质量进行评估和质量监控,签订合作备忘录,对出现违规行为的第三方机构将纳入信用系统“黑名单”、给予联合惩戒,督促各检测机构切实履行企业责任和社会责任,为市民提供更加专业、高效、安全的检测服务。对目前处于封闭管控的xxx个小区的居民,要求进行居家观察,足不出户,避免交叉感染。对不遵守居家观察有关要求的,统一执行集中观察措施。对所有集中隔离人员14天期满要再次进行核酸检测,结果呈阴性的可解除隔离。

过去一周全市核酸检测采样人数从每日xxxx人增长到近xxx万人,检测能力也实现较大幅度提升。未来一段时间全市的核酸检测工作还将持续进行,在此也向市民朋友们提出两点倡议:

一是严格落实防控措施。当前仍处于疫情防控的关键时期,在应急状态下开展核酸检测,广大市民出于对自身和家人健康的高度关注,希望尽早接受核酸检测,这种心情我们是充分理解的,但越是这个时候越要高度警惕,请大家严格按照二级应急响应下疫情防控工作的有关要求,科学佩戴口罩,保持X.X米社交距离,不扎堆、不聚集,配合社区工作人员的引导,有序接受检测。

二是提倡理性开展检测。按照“愿检尽检”原则,市民可预约登记进行核酸检测,根据专业部门的建议,没有高风险区域出行史、没有接触过高风险人员、没有出现发热等症状的市民,大家不要焦虑,请按预约时间进行核酸检测,以确保检测资源用在阻断疫情传播的最关键节点,最大限度降低疫情传播风险。

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