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酪蛋白的等电点为4.7左右(不同结构的酪蛋白等电点有所不同),本实验中将牛乳的pH调值4.7时,酪蛋白就沉淀出来。市售牛奶通常会添加耐酸碱稳定剂来增加粘稠度,以致即使pH调至等电点酪蛋白也沉淀的很少,故实验时可将pH稍微调过多一点再调回等电点。
2、掌握等电点沉淀法提取蛋白质的方法。二、实验原理牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白,含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物,等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理,将牛乳的pH调至4.7时,酪蛋白就沉淀出来。
为了避免蛋白质提取过程中的降解,可加入蛋白水解酶抑制剂(如二异丙基氟磷酸,碘乙酸等)。下面着重讨论提取液的pH值和盐浓度的选择:a.pH值蛋白质,酶是具有等电点的两性电解质,提取液的pH值应选择在偏离等电点两侧的pH范围内。
3、盐析沉淀法和等电点沉淀优缺点之比较(1)等电点法沉淀适用于疏水性较大的蛋白质(如酪氨酸)。亲水性很强的蛋白质(如明胶)在水溶液中溶解度较大,在等电点的PH值下不容易产生沉淀。因此,等电点沉淀法没有盐析沉淀法使用的广泛。
蛋白质在其等电点pH溶液中溶解度降底。根据这个原理,将牛乳的PH调整至4.8,即酪蛋白的等电点时,酪蛋白即沉淀出来。用乙醇除去酪蛋白沉淀中不溶于水的脂肪,得到纯的酪蛋白。所得酪蛋…
作者:X-MOL2018-10-08酪氨酸酶是一种重要的酚羟基氧化酶,广泛存在于植物、动物和微生物体中,是黑色素代谢过程中的关键酶之一。据报道,酪氨酸酶在黑色素瘤细胞中过量表达,所以在临床研究中可以作为一种黑色素瘤的生物标记。
请教各位高手:看文献上有用半胱氨酸与纳米金结合的。不是利用巯基而是氨基与纳米金结合。在其实验条件下,纳米金是带负电荷,半胱氨酸也是带负电荷。那么氨基如何与之结合?是氢键?还是其他?没看明白,请高手指点。谢谢!
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以前做过,现在忘了。请教专家,氨基酸酪氨酸的等电点是多少?谢谢!
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