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步骤 (1)发现与鉴定病毒 (2)诊断病毒性疾病(3免疫机体抗体效价的测定 测定(鸡新城疫(ND)的HA和HI)一般以鸡新城疫Ⅱ系或LaUra系冻干苗作为已知抗原,进行试验。
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1、将样本做去皮和去脂处理,并用均质器均质样本,然后称取适量的均质物至离心管内。2、依次加入蒸馏水、试剂A、衍生化试剂,振荡混匀后孵育半小时。3、依次加入试剂B、试剂C、提取剂,并振荡混匀。4、离心5分钟,取上层有机相至离心管内,再用氮气吹干。5、用净化剂溶解干燥物,加入试剂D,离心2分钟后待检。
一、鸡新城疫抗体检测步骤
1、将鱼虾蟹、畜禽肉、内脏等样本做去皮、去脂肪等处理,再用均质器均质样本,然后称取3±克均质物至15毫升的离心管内。
2、依次加入4毫升蒸馏水、毫升试剂A以及毫升衍生化试剂,并振荡混匀,于65℃水浴中孵育半小时。
3、依次加入1毫升试剂B、毫升试剂C、1瓶4毫升的提取剂,然后振荡混匀。
4、在室温下(20-25℃)以4000r/分钟的速度离心5分钟,取2毫升上层有机相至5毫升的离心管内,在50-60℃水浴中用氮气(或空气吹干仪)吹干。
5、取1毫升净化剂溶解干燥物,再加入毫升试剂D振荡混匀,在室温下(20-25℃)以4000r/分钟的速度离心2分钟,最后待检。
6、若使用全血标本进行检测,标本的移动速度可能较慢,必要时可在加样1分钟后,向加样孔内滴入1滴PBS作辅助液,以促进标本移动。
二、鸡新城疫的症状表现
1、急性型
(1)病鸡呼吸困难,会发出“咕噜”的特殊怪声。
(2)病鸡的嘴、鼻中有大量黏液,产蛋量下降。
(3)病鸡出现下痢,其粪便的颜色为黄白色或绿色,有麻痹和神经症状。
2、最急性型
此类症状大多出现在3-4周龄的小鸡身上,发病时通常不会表现出任何症状,但病发后小鸡会快速死亡。
3、亚急性或慢性型
病鸡出现跛行、麻痹、痉挛、运动失调、肌肉抽搐等症状,产蛋鸡发病后期产量会有所降低,一般会发生于成年鸡身上。
4、非典型性新城疫
病鸡出现咳嗽、呼吸困难的现象,且伴有分泌物、神经症状,若蛋鸡和种鸡发病,则产蛋量一般会急速降低。
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1、将样本做去皮和去脂处理,并用均质器均质样本,然后称取适量的均质物至离心管内。2、依次加入蒸馏水、试剂A、衍生化试剂,振荡混匀后孵育半小时。3、依次加入试剂B
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