动物检验检测系统论文

环境雌激素对水生动物的影响研究进展摘要：水环境是环境雌激素的最大储存库。环境雌激素通过食物的传递进入动物体内，类似于雌激素的功能。环境雌激素可导致水生动物性别特征丧失和后代不能繁殖；可引起水蚤性别比例失调，蜕皮率下降，导致软体动物性畸形和超雌性化现象；导致鲤鱼等生殖器畸形，引起鱼类种群生存力和资源量下降。壬酚（NP）、双酚A（BPA）和E2在河水、水生附着生物和底栖生物之间的生物积累与放大倍数在18~1200倍之间，环境激素通过食物链的生物放大作用比通过水体的传递对鱼类等水生生物的危害更大，并且在河流等的枯水期对水生动物的影响更大。文章讨论了环境雌激素的降解与研究前景。关键词：环境雌激素；水生动物；影响；进展早在20世纪30－40年代，西方国家最早用雌激素防止流产和促进胚胎发育，若干年后才发现服药妇女易患乳腺癌，她们所生子女易患生殖系统癌症，20世纪70年代发现了DES综合症，美国毒理学会（NTP）已列出78种可能属于内分泌干扰剂化合物的实验室试验法[1~3]；环境雌激素（environmental estrogens）通常包括类似于雌激素的外源化学物质(壬基酚、双酚A、已烯雌酚、17α-乙炔基雌二醇，等)和环境中的内源性雌激素（17α-雌二醇、17β-雌二醇、雌三醇、雌酮），环境激素已成为继臭氧层、地球气候变暖之后的第三大环境问题，被喻为威胁人类存亡的定时炸弹[4~6]。环境激素的研究已成为国际上环境科学的前沿和热点课题之一，其主要研究范围是环境激素的筛选与调查、作用机制、对人和动物的危害等。1 环境雌激素的作用机制环境激素对动物内分泌系统的影响包括对受体介导的激素作用，激素合成或清除程度的影响，导致内分泌紊乱，其分子结构与人体内雌激素或某些配体的分子结构非常相似，在极低浓度（有时甚至低于现有的分析技术检测的浓度）对易受感染的动物也可引发巨大的生物效应，特别是多种环境雌激素的联合作用强度可以达到各种激素单独作用之和的1600倍[7，8]。当环境激素进入生物体后，主要通过雌激素受体(ER)介导、拮抗雄激素受体(AR)或其它受体介导的通路发挥作用，以及影响与受体无关的细胞信号传递途径，干扰胚胎发育过程中多种基因的表达及诱变效应，影响细胞的分裂增殖，表现出各种生物效应，诱使机体渐渐改变某些生化反应，在体内发出错误信息，从而破坏生物体的正常代谢、内分泌和生殖机能；另外环境激素直接进入细胞内，则有可能作用于细胞核的酶系统或核酸，从而引起遗传变异，研究表明这种作用方式发生的机率较小，但环境雌激素对生物体影响的机理目前还不十分清楚[4，9~12]。2 环境雌激素对水生无脊椎动物的影响有关环境雌激素在河流、湖泊、污水处理排放口以及生物体内的监测报道较多，并广泛存在于水环境中[13~19]，环境雌激素对甲壳类动物性腺发育和生殖影响的研究较多，由于桡足类等性别分化受食物丰盛度的影响较大，0.1~100 µg/L的E2、雌酮、E3对桡足类的性比没有明显的影响[19，21]。以藻类为食的水蚤（Daphnia，枝角目）是水生生态系统中重要的无脊椎动物，是鱼类、其它大型无脊椎动物的主要食物之一，在水生生态系统的食物链中占有重要的地位， Dodson和Hanazato认为北美Mendot湖水蚤性别比例多年呈下降趋势可能是由环境雌激素类物质引起的，水蚤在胚胎期暴露于0.5~10 µg/L的除草剂阿特拉津、或DDT、甲氧氯和壬基酚等而导致性别向雄性化分化；暴露于0.5 mg/L已烯雌酚可导致第一代水蚤的蜕皮率下降，但对第二代的水蚤和成年个体均不受影响，具有雌激素活性的外源物质硫丹、酞酸二乙酯和PCB29会显著延长水蚤完成4次蜕皮时间。外源雌激素与蜕皮激素受体的结合抑制了壳二糖酶的活性，扰乱了蜕皮激素的生物合成，导致水蚤蜕皮时间的延长。10~20 µg/L的辛基酚对Corophium volumtation 的性别分化没有明显的影响，但10~100 µg/L能延长第二对触角，10~50 µg/L辛基酚长期暴露下，可使Corophium volumtation性别比例失调，从而导致种群下降[19，21]。钛酸四丁酯能引起多种海产腹足动物的“性畸变”（雌性动物体内附加了雄性动物的性器官），从而严重影响这种动物的繁殖，甚至可导致物种的绝灭[4，19]。日本沿海的荔枝螺的生殖系统出现异常，在它们体内发现了有机锡；TBT可导致螺（Nassarius reticulates）和鲍(Haliotis madaka)等性畸形和后代性别比例失调[4]。双酚A和辛基酚可导致淡水螺（Marisa cornurietis）出现超雌性化现象，雌性个体的雌性性器官增加，输卵管畸形，性腺增生，卵母细胞增多，这种现象同时也出现于海水螺（Nucella lapillus）中[19，22]。3 环境雌激素对水生脊椎动物的影响环境雌激素导致鱼类性畸形的报道也不少，1985年，在英国城市污水处理厂下游河流中捕获具有雌雄两性特征的斜齿鳊鱼（Rutilus rutilus）之后，Larsson等对瑞士城市污水处理厂排水的调查也得到了相似的结论，Purdom等认为广泛使用避孕药剂和随之而来的乙炔基雌二醇的释放是产生雌雄同体鱼的真正原因[23~26]；并在其它河流中发现了雌激素活性的物质，包括雄鱼血液中存在高浓度的属于雌性成熟特征的卵黄蛋白原和在假性雄鱼的睾丸中出现卵母细胞，睾丸发育延迟，而环境雌激素壬基酚可能是其主要影响因素，通过对成年雄鳟（Oncorhynchus mykiss）的实验也证明壬基酚可诱导卵黄蛋白原的形成和抑制睾丸的发育[26~30]。类似报道的很多，日本从东京附近多摩川中捕捉到的13条鲤鱼中，发现有12条生殖器畸形[23，28]。英国的另一项调查报告说，生活在工厂排污河流的石斑鱼发生了严重的雌化现象，在诺福克郡的艾尔河观测点，接受调查的雄性石斑鱼60％出现了雌性化的特征，不少石斑鱼的生殖器开始具有排卵功能，生长在受污染水域中的大部分雄性鱼，会变成两性鱼或雌性鱼[24，25]。低于1 ng/L的EE2能导致魟鳟产生卵黄蛋白原，而4 ng/L的EE2可导致幼鱼的性畸形，其第二性征发生改变[23，28，31]。环境雌激素可导致鱼类种群生存力和渔业资源下降[26，32]。20世纪90年代在美国的五大湖，发现爬行类和鱼类动物的雌性化、生殖器怪异等繁殖异常的现象，后来美国佛罗里达州又发现短吻鳄（Alligator spp.）的孵化率从90％降到18％，幸存的雄性鳄鱼阴茎长度只有正常个体的75%，并且体内的睾丸酮含量显著下降，而雌性的子宫及卵泡异常，排入水中的天然或人工合成的环境雌激素是导致这些现象的主要原因，同时野生青蛙畸形率增加的问题一直未能得到合理解释[7，20]。4 环境雌激素在生物体内的富积与降解环境雌激素一方面通过水体的传递并积累于生物体内，另一方面通过食物链的传递而发生作用，在生态系统中，环境激素通过生物浓缩、生物积累和生物放大等途径增大浓度，实现对生物和人类的更大危害，其中NP在淡水团集刚毛藻（Cladophora glomerata）、贻贝（Mytilus edulis）、大西洋鲑鱼（Salmo salar）、九刺鱼（Gasterosteus aculeatus）和虾（Crangon crangon）体内的生物浓缩因子BCF值分别为10000、3400、280、1300和100；壬酚（NP）、双酚A（BPA）和E2在河水、水生附着生物和底栖生物之间的生物积累与放大倍数在18~1200倍之间，而底栖生物相对的最大积累率可达106倍，环境激素通过食物链的生物放大作用比通过水体的传递对鱼类等水生生物的危害更大[18，19]。大西洋鲑鱼（Oncrohynchus keta）可以通过洄游将环境雌激素转移到阿拉斯加淡水湖泊，从而使环境雌激素浓度高出其他湖泊2倍[7，20]。环境激素是人们在生产、生活中产生的，防治环境激素的根本对策是不向环境中释放，杜绝环境激素产生的源头，如不焚烧垃圾，严格控制农药的使用，谨用避孕药等激素类药物，不使用泡沫塑料容器泡方便面，方便面容器90％是泡沫苯乙烯产品，它是一种致癌的环境激素；禁止将聚氯乙烯包装食品放在微波炉中加热，在高温条件下，环境激素双酚A会从中渗出；食用糙米、荞麦、菠菜、萝卜等，容易使环境激素二恶英等从体内排出，多饮用茶水也有助于内脏中的环境激素排出体外[2，7，33]。人工合成的雌激素药物，如乙炔基雌二醇在体内的稳定性高于雌二醇等天然雌激素，但低于杀虫剂等人工合成的雌激素类化合物[35]；有关环境激素的生物降解方面的研究很少[36，37]，并处于起步阶段，烷基酚类(APEs)经过下水道及污染水处理厂后，其降解率约为60%，但又生成了难以降解的中间代谢产物，其最终生物降解过程非常缓慢[37]；已有E1、E2、E3、EE2和MeEE2在污水处理厂和河流中降解行为及浓度变化的报道，当河流中E2浓度为100~500 µg/L时，可在4~5 h内生物降解降到100 µg/L~100 ng/L，而E1的半衰期约为4~5 h，大部分进入河流中，特别是在河流的枯水期对水生动物的影响更大[1，13]。硝化细菌对EE2的降解不需要预处理过程，但其降解率较低，并不能彻底降解[38]。单一的纯菌不能降解邻苯二甲酸二甲酯，而二种或三种组合菌可在7天内将500 mg/L的底物彻底降解[39]。据来自日本农艺化学年会的消息，日本大阪市立工业研究所的酒井清文等人从海水中分离到一种能在20~30天内完全分解双酚的细菌；日本神奈川工科大学教授齐藤贵发现水鳖科植物、金鱼藻科植物和睡莲科植物对双酚A和酞酸酯具有较强的吸收作用，双酚A和酞酸酯是我们日常用品如塑料餐具等的主要化工原料[40，41]。5 我国环境雌激素研究前景国外已经在环境雌激素的污染途径、主要污染源，对生态系统的危害及分子作用机理，以及污染控制、防治对策等方面作了逐步深入的研究，我国目前对环境激素的研究尚属起步阶段，至今没有形成有组织的系统研究，特别是缺少对环境激素问题的全面调查评价，环境雌激素污染现状及其变化的趋势还不清楚[10，20，33，40，41]，未见对环境雌激素对水生生态系统影响的定量性风险分析与评价的报道,同时也缺乏环境激素的检验和保护系统，更谈不上如何有效地控制。目前我国就在环境雌激素研究有较大发展前景的方向主要在以下几个方面:（1）对我国工业发达地区代表性水体中环境雌激素种类及在水生动物体内富集与释放代谢动力学的研究，获得其分配、归趋、迁移、转化的行为规律，结合天然水体中环境雌激素对水生动物的综合影响，如对野生水生动物及后代性别比例、性腺发育、血中卵黄蛋白原、产卵与孵化、变态、第二性征和特定年龄阶段等方面的影响。（2）通过长期暴露实验获得我国天然水体中主要存在的环境雌激素对水蚤、贝类、甲壳类、鱼类、两栖类性别比例、性腺发育、血液中卵黄蛋白原、繁殖能力、变态、特定年龄阶段等影响，为野外调查结果提供更为科学的依据，寻找对环境雌激素敏感的指示生物和生物标记物,优化环境激素的检测与监测手段，获得快速、可靠和低费用的新检测方法。（3）进行环境雌激素对水生动物低浓度下的联合作用试验，以及低浓度水平下的环境雌激素及其混合物对水产品的产量和质量的影响。通过对野外和实验数据的对比研究，广泛的浓度试验和在不同水平下的浓度-效应关系，以及环境雌激素的激素活性水平与其定量构效关系，从已观测到的暴露-效应关系中建立相应的预测模型，并对模型进行实验评价与检验。（4）建立环境雌激素对渔业资源量、种群、群落及生态系统影响的定量生态风险分析与评价方法，获得环境雌激素通过食物链的传递规律,进行低浓度环境雌激素混合物对水生动物和人类影响的评估，降低对水生动物和人类健康的危害，提出环境雌激素污染下对野生水生动物保护的综合建议。（5）调查环境雌激素的行为机制，模拟环境雌激素的生物积累过程，结合国外已有的模型，建立新的动物模型，模拟环境雌激素对水生野生动物和人类健康的定量风险评价，结合健康风险管理方法，为决策者和渔业管理机构提供科学的参考与依据。（6）筛选具有超强降解能力的细菌和水生植物，降低并去除水环境的中痕量环境雌激素，提出切实可行的关于污水处理厂、养殖废水、生活污水以及饮用水中环境雌激素进行生物降解与生物修复等高效处理方法,大幅度降低环境雌激素对人类和野生水生动物的危害。参考文献：[1] 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Environmental estrogens can cause the aquatic animals to have confused characteristics, affect the development, differentiation and reproduction of aquatic animals, change the sex ratio, cause sex abnormality, and so on. The trend of the future research in this field was also briefly discussed.Key words: environmental estrogens; aquatic animals; effect

生物医学动物实验研究论文

1实验设计

在开展生物医学研究时，研究者通过正确地运用统计学知识，可直接影响研究的质量。统计学设计的任务在于对研究的部署、实施，直到研究结果的解释进行系统的安排，力争做到以最少的人力、物力获得可靠的结论和信息。其目的在于确定某种处理是否会表现出某种特定的效应。在实验设计时应遵循惟一差异原则，即在进行两组比较时，两者之间仅有因处理因素不同而引起的差异，而其他实验条件相关的非处理因素都应保持等同。然而，处理组与对照组在反应上表现出的差别并不一定意味着是处理的结果。另有两种引起差别的可能性，即偏倚和偶然性。偏倚是指系统性差别，它不是因组间在处理上的不同所引起。生物医学实验中统计学设计和分析的目标就是消除潜在的偏倚，减少偶然性[2]。

1.1实验的偏倚和控制

偏倚是在研究中从设计到实验实施和结果分析的各环节存在一些人为的、有系统倾向的非随机误差，它不是由于抽样造成的，而是某种偏性使得实验结果偏离它的真值。从所选择的生物医学问题到研究方案的制订与实施、实验的完成过程、实验的分析与解释，乃至实验结果的发表，均可能存在各式各样的偏倚[2]。这种偏倚常常表现为系统误差。偏倚的大小取决于研究的方法和具体的实验条件。常见的偏倚主要有选择性偏倚、观察性偏倚和混杂性偏倚。必须认识实验过程的偏倚，从实验设计起直到整个研究过程结束均要加以控制。正确的实验设计可控制选择性的偏倚，事前人为控制和采取相应的措施可避免和减少观察性的偏倚。对于混杂性偏倚，可将重要的混杂因素在设计阶段进行分层随机设计，使混杂因素在组间分布均衡；在统计分析阶段将混杂因素作为分层因素或采用有协变量分析方法，以消除混杂因素的影响。只有有效地控制或消除偏倚，方可减少结果的假阳性或假阴性。

1.2减少偶然性的潜在影响

偶然性因素的作用可以减少，但不能完全排除。因为即使是在精心实施的研究中，接受同样处理的动物，其反应也不可能完全一样。适当的统计分析可使实验人员评估出现假阳性的概率，即根本不存在处理效应的情况下观察到差异的概率。这种概率越小，实验者发现真实效应的可能性就越大。为了更有把握地检测出真实效应，有必要减少偶然性的作用，并通过实验设计确保能在“噪声”之上识别真正的“信号”。

1.3实验设计的要素

要消除生物医学实验中潜在的偏倚，减少偶然性，就应对实验对象、处理因素和实验效应这三个实验设计要素，按照对照、重复、随机化和均衡四项原则进行周到的设计与控制[3]。1.3.1实验对象实验中处理因素所作用的对象称为实验对象。不同性质的实验研究需要选取不同种类的实验对象，一个完整的实验设计中所需实验对象的总数称为样本含量。生物医学试验中考虑动物实验对象时应关注以下几个方面：①动物种属的选择：选择实验动物的种属与品系时，尤其需要注意其背景反应的水平。为了将反应“信号”水平最大化，常常意味着应避免选择那些背景反应水平极低的动物种属或品系，但如果采用过度反应的动物种属或品系也同样会出现问题。动物物种选择中的其他问题，无论是实际问题（寿命、体型、易得性、对动物学特征的了解情况）或是理论问题（生化、生理或解剖结构与人的相似性），都需要从专业的角度认真加以考虑和权衡。②动物的数量：虽然从统计设计角度考虑可得出某项实验所需的动物数（样本含量），但所得出的数值往往很大。因此，虽然样本含量估计是保证结论可靠性（精度和检验效能）的前提，但基于实验的可操作性及经济原则方面的考虑，应结合统计学的计算结果与以往的生物医学研究经验予以确定。③动物的体重与年龄：为确保实验对象的同质性，实验中所使用的动物体重与年龄应尽可能相近；动物体重的标准差不应超出平均值的10%；啮齿类等小动物年龄相差不应超出1周，大动物年龄相差不应超出1个月。④动物的分层：为了准确检测一种处理因素引起的差别，各处理组在可能影响实验结果的其他非处理因素方面应尽可能具有同质性。当存在动物亚系间的差别时，有两种方法可得到更为准确的结论。一是在结果分析阶段将亚系作为一个“分层变量”处理，包括对两个亚系的结果进行单独分析，然后将结果综合，得出处理效应的总结论；二是将亚系作为实验设计的“区组因素”，这种情况下可使对照组与处理组中每个亚系动物数量相等。除以上所讨论的“亚系”之外，其他的非处理因素，如性别、窝别、体重段等也可作为分层变量进行局部控制，并据此进行分层随机化分组。1.3.2处理因素设计实验研究时，要明确研究中的处理因素和影响实验效应的非处理因素。研究者希望通过对研究设计进行有计划的安排，从而能科学地考察其效应大小的因素称为处理因素或实验因素；研究者往往忽略对评价实验因素作用大小有一定干扰的重要的非处理因素或非实验因素（如动物的窝别、体重等）；其他未加控制的许多因素的综合作用统称为实验误差。实验结果是处理因素和非处理因素共同作用而产生的实验效应，因此如何控制和排除非处理因素的干扰，正确显示处理的效应，是实验设计的基本任务。1.3.3实验效应实验效应是处理因素作用于受试对象的反应和结果，是反映实验因素作用强弱的标志，它通过观察指标（统计学常将指标称为变量）来体现。如果指标选择不当，未能准确反映处理因素的作用，获得的研究结果就缺乏科学性，因此选择好观察指标是关系整个研究成败的重要环节。指标的观察应避免带有偏性或偏倚，要结合专业知识，尽可能多地选用客观性强的指标，在仪器和试剂允许的条件下，应尽可能多选用特异性强、灵敏度高、准确可靠的客观指标。对一些半客观（如尿液pH试纸读数值）或主观指标（行为测量、病理观察），一定要事先规定读取数值的严格标准，只有这样才能准确地分析实验结果，从而提高实验结果的可信度。

1.4实验设计的原则

为了防止结果的偏倚，保证实验结果的准确性和最大化的表达，在进行生物医学实验设计时必须遵循统计学设计的对照、重复、随机化和均衡四个基本原则。生物医学实验中对照组的设置必须具备三个条件：①对等原则，即惟一差别原则，除处理因素外，对照组具备与实验组对等的非处理因素。在相互比较的各组间，除了给予的处理因素不同外，其他方面应与实验组具有一致性，如相同的实验单位来源（动物种属、体重等）和相同的实验条件、操作方式和喂养环境等。②同步原则，对照组与实验组设立之后，在整个研究进程中始终处于同一空间和同一时间。③专设原则，任何一个对照组都是为相应的实验组专门设立的。不得借用文献上的记载或以往结果或其他研究资料作为本研究之对照。

1.5生物医学中常用的实验设计类型

如果需要在同一实验中同时评价几种不同的效应，实验者应该安排能区别各自效应差别的实验设计方法。生物医学中常用的实验设计有以下几项。1.5.1完全随机设计完全随机设计是生物医学动物实验中最为常用的一种实验设计方法，它是一种单因素有k个水平（k≥2）组的实验设计。即实验设计可设置一个对照或多个剂量组的实验方案。本设计保证每个实验动物都有相同机会接受任何一种处理，而不受实验人员主观倾向的影响。本设计应用了重复和随机化两个原则，因此能使实验结果受非处理因素的影响基本一致，真实反映出实验的处理效应。1.5.2随机区组设计随机化完全区组设计，简称随机区组设计，又称配伍组设计，是配对设计的扩展，它将几个条件相同的受试者划分在同一个区组或配伍组，然后再按随机的原则，将同一配伍组的受试者随机分配到各实验组。该设计方法的优点是每个区组内的k个实验单位有较好的同质性，比完全随机设计更容易察觉处理间的差别。这种方法须特别注意的是要求区组内实验单位数与处理数相同，实验结果中若有缺失值，统计分析将损失部分信息。1.5.3拉丁方设计拉丁方设计从横行和直列两个方向进行双重局部控制，使得横行和直列两向皆成区组，是比随机区组设计多一个区组因素的设计。在拉丁方设计中，每一行或每一列都成为一个完全区组，而每一处理在每一行或每一列都只出现一次，也就是说，在拉丁方设计中，实验处理数=横行区组数=直列区组数=实验处理的重复数。1.5.4析因设计析因实验设计又称全因子实验设计，属于多因素、多水平单效应的设计。它不仅可以检验每一因素各水平之间的效应差异，而且可以检验各因素之间的交互作用。交互作用是指一个因素不同水平间的效应差受另一因素的影响，包括协同交互作用和拮抗交互作用。析因实验主要用于分析交互作用，当因素及水平数过多时，所需的实验对象数、处理组数和实验次数大幅度增加，故一般采用较简单的析因实验。含有较多因素和水平的实验一般采用正交实验设计[5]。

2生物医学动物实验的描述统计学

2.1生物医学实验资料的类型

生物医学实验对实验对象（动物）进行干预后测定的观测指标通常有以下类型：①连续性数据：测定结果表现为有数字大小和单位的数据，统计上称定量资料，如生理、生化指标，体重值，器官重量等。②分类数据：测定结果表现为按某属性划分的定性类别，统计上称为定性资料，具体又可以分为二值资料、多值名义资料和多值有序资料。如某反应为出现或不出现，死亡或未死亡，有畸形或无畸形；病理损害的严重程度（无、轻度、中度、重度）等。

2.2统计描述指标

描述性统计学（或归纳统计学）是对样本观察/测量数据频率分布的定量研究，描述性统计的目的在于：①对测量值或观察值进行归纳浓缩，用统计量、统计图或统计表的形式表现；②估计总体分布的参数。2.2.1资料的整理与探索对于某一测量指标，一般应从文献资料中了解其分布类型。如果没有判断概率分布的理论基础，应重复以大样本测定，绘制样本的频数分布图（理论上样本量要大于100），并经统计学检验拟合其分布。2.2.2数据的描述统计量①连续性数据的频数分布：通过对样本资料编制频数分布表或做茎叶图，以确定资料分布的类型、频数分布的集中趋势和离散趋势、估计总体参数，也便于发现离群值。②中心位置的描述统计量：描述数据分布的集中趋势，常用指标为算术均数、中位数、众数、几何均数等。③离散程度的描述统计量：描述数据分布的离散趋势，常用指标为标准差和方差、极差和四分位数间距、变异系数和离散系数等。④统计学图表：统计图包括连续性数据分布的直方图、茎叶图，表示数据中心位置和离散程度的点杆图（做图时表示均数和标准差）和盒须图（做图时表示中位数、极差、四分位数间距），描述构成比数据资料的百分条图、饼图，描述经时变化趋势的线图，以及预测和检验分布类型的概率-概率图（P-P图）等[6]。统计表具有简单、明了、易于理解、便于比较的优点。编制统计表时原则上应当重点突出、层次分明、避免层次过多或结构混乱。一般的统计表应为三线表，表中只有横线，无竖线和斜线。统计表的标目应层次清楚，不宜过于复杂。

3生物医学动物实验的假设检验

生物医学动物实验中最常见的情况是给予不同受试物后进行组间比较，通过统计学中的假设检验，说明受试物的作用。假设检验时应注意以下问题。

3.1检验方法的选用依据

3.1.1资料的类型和变量的数目不同类型的资料（定量、定性）的组间比较应采用不同的统计检验方法。单变量、多变量的`统计检验方法也各不相同。3.1.2实验设计类型应该根据实验设计的具体类型选择对应的统计检验方法，以便得到处理组效应的真实结论。3.1.3检验方法的前提条件选用假设检验方法前，应了解所分析的数据资料是否满足相应检验方法的前提条件，如t检验和方差分析等参数检验方法要求数据满足正态性和方差齐性，2检验要求样本含量大于40且理论频数大于5。

3.2正态性检验及拟合优度检验

统计学假设检验须判定样本的频数分布是否符合某一理论分布，如符合要求就可按此理论分布来进行统计学处理。对正态分布可采用正态性检验，其他分布可用拟合优度检验。通常可通过查阅文献，了解实验参数符合何种理论分布。

3.3方差齐性检验

连续性数据未达到参数法统计分析前提的第二种原因即为方差不齐。一般而言，数值愈大，其固有的变异性也愈大。例如，若某组动物的平均反应值为100，其数值范围可能为80~120；而另一组动物的平均反应值为300，其数值范围可能会扩大至240~360。解决方差不齐的措施是进行数据转换。若数据的标准差与平均值成正比，在统计分析前宜将数据转换为对数值之后再进行分析，据此，不仅数据的变异度与平均值大小无关，同时还可确保其更符合正态分布。若数据变异度增加幅度与平均值的关系不太明显，采用平方根转换则更易使数据的变异度与平均值大小无关。某些数据经对数或平方根转换后可能仍存在方差不齐，此时宜采用非参数检验。

3.4单侧检验与双侧检验

检验假设选择单侧检验或双侧检验，应事先根据专业知识做出选择。一般而言，若研究目的仅须了解是否存在组间差异、实验者无法预测组间变化的方向以及实验者希望获得正负两方面的结果时，应采用双侧检验。若事先可预测组间差异的变化方向，实验者仅对某一方面的重要性感兴趣，实验者仅希望了解与对照组差异或正或负一个方向，则应采用单侧检验。此外，剂量设计预试验中应采用双侧检验，正式试验在了解相关信息后可采用单侧检验。

3.5多重比较及多重性问题

生物医学实验经常在处理组和对照组之间做多个变量的比较。即使不存在真正的实验效应，也有可能纯粹由于偶然性而有一个或多个变量在5%检验水平出现显著性差别。除了上述均数多重比较导致Ⅰ类错误概率增加的多重性问题之外，其他的多重性问题还包括多次的中期分析、关注多个结局、亚组间的多重比较。处理多重性问题的原则包括：①预先计划进行多重比较；②限制比较的次数；③多重比较时采用更严格的界值标准；④多重比较具有生物学方面的依据。

3.6观察值或实验对象的独立性

许多统计检验方法要求比较的观察值或实验对象相互独立，如二项分布的率检验、t检验和方差分析等。但是，有的生物医学实验中观察单位并不独立。例如，生殖和发育研究中就存在窝效应：由于遗传因素、宫内的发育环境和药物的代谢环境相似，与异窝胎仔相比，同窝胎仔之间对毒性效应的反应概率趋于系统，即同窝内数据为聚集性数据，这就是一种常见的非独立数据。在统计学分析时，忽略数据的窝内相关性具有潜在的风险；因同窝母鼠所产k个胎仔的观察值存在共性，其所提供的信息不及k个独立的来自不同母鼠所产胎仔所提供的信息；窝内相关性愈大，其信息量愈少。聚集性数据的均数标准误小于独立的数据，因此，若基于观察值独立的统计分析方法，就会增加犯Ⅰ类错误的概率，即假阳性的风险增加，降低实验的有效性。

3.7历史对照数据的应用

某些情况下，尤其是在发生率较低的情况下，单项研究可能提示处理可影响肿瘤发生率，但无法得出明确的结论。可能想到的分析办法之一是将处理组的数据与来自其他研究的对照组动物相比较。虽然历史对照数据具有重要意义，但值得强调的是，众多原因可导致不同研究之间的变异度大于研究之内的变异度。动物来源、饲料及饲养条件，研究期限，研究中的动物死亡率、读片的病理学家等均可能影响最终的肿瘤发生率。故此，忽视这些差异，将处理组的肿瘤发生率与合并的对照组发生率相比较，可能得出严重错误的结果，并进而明显夸大统计显著性水平。Tarone[4]曾对历史对照组的比率数据分析进行过综述。

3.8假设检验的局限性

首先，假设检验中的P值并未提供有关处理诱发效应大小的直接信息。某一受试物可诱发一定量的、反应的增加，但增加的幅度是否具有统计显著性则取决于研究的规模和数据的变异性。在规模较小的研究中，有可能错失较大、重要的效应，尤其是在检测终点测量精度不高的情况下。相反，在规模较大的研究中，较小、非重要的效应则具有统计显著性。例如，D药与C药相比，降血压效应相差近30mmHg，但因为例数仅10例，假设检验未发现显著性差异（P=0.31）；相反，B药与A药相比，降血压效应仅相差0.2mmHg，但因为例数达500例，假设检验却发现存在显著性差异（P<0.001）。由此可见，统计学显著性与效应大小无直接相关性。因此，愈来愈多的统计学家主张以处理组与对照组差异值的95%置信区间表述处理的效应。据此，若处理反应的增加值为10个单位（95%置信区间3~17单位），则该区间包含真实差异的几率为95%。若置信区间的下限大于零，则双侧检验的P值小于0.05。其次，假设检验无法消除实验设计或实施不当所带来的影响。虽然前述的分层分析等有助于发现真实的差异，但若实验设计存在偏倚，或实验实施过程中存在偏差或失误，假设检验方法一般也于事无补。因此，在生物医学实验过程中应注重对实验设计或实施过程进行严格的质量控制和质量保证措施，强化GLP规范意识。其三，对统计学分析本身的质量控制和质量保证也是确保研究质量的重要环节。所用统计分析软件包应经过充分的认证，以确保分析结果的准确、可靠性。数据的录入、核对和分析结果的报告与归档，均应制订并严格执行相关的标准操作规程。综上所述，在动物实验研究的多个环节，统计学中的相关理论和方法都能够发挥重要作用。统计学不仅可以保证结果的科学性和可靠性，在很多情况下也可以极大地提高研究效率，节约研究成本。在这里还必须强调，除了实验后期的数据分析以外，在实验方案的制定阶段也需要统计学人员的早期介入，这样有助于避免实验设计出现大的偏差和漏洞，有利于研究目标的顺利实现。

物联网技术在环境监测中的合理应用论文

物联网技术的引进又是一次环保信息技术的改革，经过很多年努力，我国对物联网的研究和分析逐渐成熟，物联网的引进是对环境污染经习惯防御和保护有着重要的作用，在这同时市场规模也在逐步扩大，物联网也是现在刚新兴的一个名词，和互联网有点相似性，物联网和互联网都是建立在网络的基础上，也就是互联网技术的延伸发展，利用互联网为基础，把各种事物联系在一起，形成一种新的网络组织，让我们获取各种事物的信息能力，物联网也有着检测作用，是一种新型的检测手段，物联网对环境的信息和在采集过程中的环境质量方面有着重要作用，环保是现在比较重视的一个问题，物联网的引进可能会很好的解决环保等一系列的问题。

一、物联网在监测中的应用

物联网监测主要就是就传感器而言，是保护物联网监测的应用范围，也是最广、最监测的手段，为人们的环境监测带来了很大的便利，以下主要介绍物联网监测都有哪几点。

(一)水污染的监测

物联网对水污染进行监测，在河流水质的检测中污水处理质量监测中已经井下了物联网技术的应用，在水质的评价工作给水资源保护提供了很多真实有效的数据，水质的监测是特别广泛的，范围也是比较大的，比如说有被工业污染的天然水等等，在进行水质的`检测中不但要看水质的污染情况，最重要的还要看水中存不存在有毒物质，在这一监测过程中要做足够的了解。目前我国对水质的监督主要是检测引用水和水污染等两个方面，对饮用水进行检测的时候过程较复杂，得取回水，然后每天进行水的质量监测，不能及时得到水质情况，而在自动检测这方面就方便很多，计算机课可自动进行判断和分析水质的安全情况，检测后的数据会自动出现数据并自动储存，如果发现水质问题会自动报警，不但方便还可及时避免发生水污染即污染物的排放。

(二)大气污染的检测

物联网对大气污染进行检测，随着经济的不断提高，人们生活水平也有着明显提高，经济的迅速发展是人们的需求也越来越高，中大型城市的经济水平高，人口也不断增加，人口的迅速上升再加上一些重工业的发展对城市造成了很大的污染，而互联网技术能够有效的检测大气污染，在环境检测的区域下还具有检测环境中的有毒物质进行检测和安装处理，不但能测量空气污染还能检测人口密度，在检测的范围内，如果测量出发现空气有改变，就会按照传感器上的传感点进行更深的了解，还可以检测出空气中可吸入颗粒法含量，和空气中的有毒物质，还能监测出空气中的有氧含量和二氧化碳含量，并且通过实时能够传输到监测器上把相关的信息传输到气象控制中心，以新闻方式传播给民众，我国在物联网应用上已有了完整的体系。

(三)生态环境污染的检测

对于物联网技术生态环境检测系统是一个较为广泛的系统概念，也已经逐渐被应用，一般来说这样的系统不仅仅包括现已应用的环境检测系统中，还要包括视频监控系统，生态环境的污染主要是监测动物及生物的生产情况，在监测的过程中也将最终汇集到中央控制中心，对于生态环境污染主要监测一些自然保护区和生态恶化，动物和沙漠进行绿色种植研究，在这几种环境下监测汇报。

二、物联网技术的应用对环境监测水平的提高

(一)物联网的环保应用

目前，物联网已经是网络发展中的重要体现，在现在的作用也更加重要，传统的环保不能全面及时监测到环境污染的，而物联网主要是把传统监测的环保环境和互联网信息技术很好的结合在了一起，是环保管理工作更有效的监测到环境污染并及时处理，在环保领域中物联网技术已经逐渐成发展到新兴环保行业进行发展的重要手段，提成了环保工作，对未来环境的保护和环境的发展也有重要的意义。

(二)物联网在监测中的重要意义

环境监测技术不断发展，在物联网的监测技术中仅仅会只留在环境保护的表面，很多与环境监测的信息中并没有检测到环境记录中，应用物联网监测技术，可以让我们对生态环境在监测上更加准确，可以及时获得监测信息，把反应上的相关资料及时整理出来，这样可以有助于环保部门进行更加有效合理的管理，及时发现污染所造成的原因，并及时有效的做好防御工作。

结语

根据以上内容我们了解到了物联网的先进技术对于我们现在环境保护有着重要影响，也起着重要作用，通过电子商务网站的建设能够更好的得出结论，网站技术给我们的生活带来了很大的方便，使用科学网站及时安全得到更优秀的保障和改善，并为其提供了全面可靠的技术支持，当然现在的社会发展越来越好，人们在生活水平要求高的同时，忽略了对环境的保护意识，我们不但要求相关环保部门对环境方面的绿化，更好以自身做起，保护生态环境，保护绿色家园。

动物检疫的问题和建议论文【1】

[摘 要] 动物检疫工作是保证肉类食品是否合格的第一道关口。

唯有做好动物检疫工作，才能保证肉类食品的质量卫生，保障食用者的健康安全;亦可防止诸如禽流感、猪流感等动物疫情的传播和爆发，防患于未然，减少农户损失。

《动物防疫法》虽已颁布实施，现阶段的动物检疫却仍存在诸多问题，制约着实际操作。

本文通过对于动物检疫问题的探讨，提出一系列解决策略。

目的是为了提高动物检疫的效率。

[关键词] 动物检疫 问题 建议

一、动物检疫存在的主要问题

1.养殖户及消费者的检疫意识

大部分养殖户的文化水平有限，对动物检疫方面知识知之甚少，在进行屠宰售卖之前不作报检，有关部门出于人手原因也无法一一查实。

且部分地区难以施行集中屠宰，多数为自行屠宰或个体屠宰。

而动物检疫部门监督人员有限，只能去往指定屠宰点进行监督检查，个体农户或自行屠宰贩卖养殖户难以进行检疫，此类肉品的安全卫生也就无法保证。

不法商贩收购病禽死禽，多数农民贪图眼前利益，法律意识淡薄，对此类现象并不制止，因为一点利益助长不法分子的气焰，造成不安全肉类的流通。

对于一些偏远山区农村的个体农户，这些地方往往交通不便，设施落后，检疫工作更是难以开展，不法商贩亦是横行。

而多数消费者的防疫意识往往不足，贪图便宜或是根本对动物检疫一无所知，购买价格低廉的未经检验的不安全肉类，让违法者有利可图，为违法活动创造了可能。

2.检疫人员的素质

动物检疫工作对在职人员的素质要求相对来说较高，需要一定相关知识水准。

而当前我国针对动物检疫的相关法律仍不够完善，对动物检疫人员的规定尚不明确，对相关人员工作也没有很好的约束和要求。

这就导致了从事该工作的人员鱼龙混杂，文化素质水平参差不齐。

间接地致使动物检疫工作无法正常有序的执行，而疫情也就不能及时发现，无法做好防治工作，人民群众的生命财产安全也就会受到威胁。

如此一来，动物检疫部门岂不是形同虚设?政策好并不代表一定能执行好，好的政策还需由优秀的人才来执行。

3.检疫设施和条件

落后偏远地区自不必说，基本的检疫设备都难以保证，更不用说专业的检疫队伍和检疫环境。

而拥有相关设备和人员的地区就能做好检疫工作?这也未必见得。

仅仅依靠简单的设备，某些疾病已经无法检测出来。

这些疾病需在特殊的环境中，使用更为专业的设施进行检测。

纵观我国，极少有地区具备如此检测环境、检测设施和检测人员。

诸多落后，造成了动物检疫的太多不便，其检测结果的权威性和可信度也同样面临着严峻的考验。

4.相关法律法规

相关法律法规不尽完善，前面已经涉及，相关法律对检疫人员的要求和规定尚不明确，导致检疫人员素质偏低。

《动物检疫法》对于不检疫、逃避检疫者的处罚也是过轻，违法者根本无所畏惧;对于私自屠宰、私自贩卖未经检疫的禽畜机及其肉类的行为，甚至没有处罚说明。

关于产地检疫到场到户的法规，鉴于有关部门条件的不允许，对个体农户和交通不便地区的养殖地来说，施行起来难上加难。

相关法律的形同虚设，致使检疫工作无法有序的开展。

二、动物检疫的建议与对策

1.检疫部门需要做好宣传工作

检疫部门必须做好宣传工作，提高民众对于动物检疫的认识，对于养殖户和个体农户来说，更需加大宣传力度，必要时集中学习动物防疫知识，使之意识到动物检疫的重要性，主动提出检疫。

需善用报刊、杂志、电视、网络等大众传媒手段，普及动物检疫相关知识法律，营造良好的社会氛围，擦亮养殖者和消费者的眼睛，使不法商贩无处藏身。

2.检验人员选拔制度需要完善

检疫人员的精心选拔和严格管理也尤为重要。

只有优秀的高素质检疫人员队伍，才能做出优秀的成绩，保障检疫结果的准确度。

故而在检疫人员的选拔上切不可马虎，必须选用文化素质高、专业技术水平过硬、法律意识强、坚持正义、责任意识强和秉公执法的人才。

严格的选拔必不可少，检疫人员的在职培训和考察亦不可忽视。

执行公务的同时，政府应调拨款项对检疫人员进行定期的培训和不定期的考核，不断提高在职人员的文化素质和专业技术水平，不断促使检疫人员学习新的检疫知识。

对于不能通过考核的'人员，坚决不予上岗，需进行再学习并通过考察后方可复职;违反相关法律的，直接开除公职。

另外检疫部门可通过与各大高校合作，直接在学校中培养所需人才，保证对人才需求的满足。

3.重视硬件设施建设

除人才的培养外，硬件设施的需求亦不能忽视。

先进的检疫设备和检测手段才能保证检测结果的准确度，因此相关部门必须大力引入先进设备，改善动物检疫部门的设施，提高检疫人员队伍的设备水准和检疫结果的权威性，为动物检疫营造良好的检疫环境。

对于落后偏远地区，必须加强基础设施和人才队伍的建设，保证检疫能够完成。

4.完善动物检疫方面的法律

一要加大对违法者的处罚力度，达到使之不敢违法的目的;二要明确对检疫人员的规定和要求，保证检疫人员的质量水准;三要修改相关法律法规，使之切实可行;四要破除在行法律对检疫监督人员的诸多限制，使其能从容行使职能，而不有所顾忌。

对与未作规定的相关违法行为，修订者必须尽早完善，使之有法可依，不至不法分子钻法律的漏洞。

三、小结

上述论证可知，要切实做好动物检疫工作，不仅是单一方面的责任。

上至国家政府部门，下至一线检疫人员和养殖农户，必须加强联系，互相理解支持，才能让动物检疫工作落到实处，保障养殖农户的财产安全。

我国的肉类食品安全才能得到保证，人民群众方能吃上放心肉。

参考文献

[1]沈向华. 动物检疫制度比较研究[D].内蒙古农业大学，2008. [2]马祥林. 动物检疫常见问题及改进对策分析[J]. 农民致富之友，2013，16：185+229.

动物检疫工作的问题及建议【2】

摘要：动物检疫工作极其重要，关系到人民群众的生命安全和身体健康。

本文笔者就从动物活检和肉检两个方面入手，对动物检疫工作提出一点建议。

关键词：动物检疫 活检 肉检 建议

前言

动物检疫工作是确保农产品尤其是动物产品质量安全的主要手段。

多年来,我们认真贯彻落实《动物防疫法》,制定措施,壮大队伍,开展监督稽查等工作,对动物检疫工作的开展起到了很大推动作用,但仍然存在许多问题,制约着动物检疫工作的开展。

检疫手段落后、检疫设备差、检疫行为不规范等现状没有从根本上解决,检疫率、疫病检出率低等问题依然存在,动物疫病没有得到有效净化,动物疫病发生隐患及动物食品安全隐患没有得到有效治理。

一、动物检疫工作存在的主要问题

首先，农民饲养的畜禽在出售前不作活检,具原因是《动物防疫法》的宣传不到位,农民对动物检疫申报制度认识不够,加之农民认为法不制众,没有全面推行。

其次，大多数地区定点屠宰工作很难推行,个体屠宰户仍然是屠宰主流,其中的80%以上为收购、屠宰、销售一体化经营,他们夜间到饲养户收购、屠宰,白天到市场零售肉品均采取逃检的办法逃避费用。

加上动物防疫监督人员有限,收购环节防不胜防,屠宰环节中只能到定点屠宰场进行同步检疫,却无法到户进行检疫,只能在零售环节对肉品实施补检,忽略了对动物经营环节的重点检疫。

最后，对于山区农村散养的畜禽,由于交通不便、收费少、收费难,而且按要求产地检疫必须到场、到户,工作很难开展。

对于平川乡村,交通四通八达,违法贩运户昼伏夜出,绕道前行,千方百计的逃检、逃费。

绝大部分群众防疫意识淡薄,对动物疫病的认识不到位,以至于对病死畜禽收购、加工视而不见,有的为图便宜,购买未经检疫的肉品,从而给违法活动创造了很大的经营空间。

二、执法体系逐步完善，但以监促检相对滞后

1995年以来，我国相继颁布实施了《中华人民共和国食品卫生法》、《中华人民共和国进出境动植物检疫法》、《中华人民共和国动物防疫法》和《生猪屠宰管理条例》，并于2008年对《中华人民共和国动物防疫法》的相关条例进行了修改和补充，2009年又对《生猪屠宰管理条例》进行了新修订，进一步健全了执法体系，为保证肉食品的安全提供了有力的法律保障。

在加强法制建设的基础上，同时加强执法人员培训和考核，提高执法人员素质，把“内强素质、外树形象”作为动物检疫执法体系建设的重点，建立了一支思想品德好、政策水平高、业务素质强的执法队伍。

随着动物检疫执法体系的不断完善，逃避检疫、贩卖病死动物等违法行为的不断被发现，作为打击和遏制违法行为的主要方式，监督环节越来越得到重视，以监促检的工作也日益凸显其滞后性。

首先，检疫后的监督工作缺位。

检疫后的畜禽长距离调运导致畜禽感染疫病情况严重。

畜禽在运输途中病死后，被随意丢弃或进入黑市交易，导致疫情传播。

由于餐馆、食堂、冻库及卤制品、腊制品店是相关部门监督管理中的一个相对较弱的一个环节，这些场地便成为病害动物产品的集中消化地。

其次，违法案件办理难。

在实际办案中，由于违法者交易的隐蔽性、染疫动物对人危害的潜在性和病害动物及其产品价格的不确定性，往往导致违法者得不到应有的法律制裁。

三、动物检疫的对策

(一)搞好兽医卫生管理，有效减少疾病的暴发

1.要搞好圈舍卫生，改善畜禽的生存环境。

要及时清除和处理粪便，更换垫草，清洁圈舍，定期消毒，保持畜体卫生。

2.做好消毒措施。

要有适宜的消毒设施，消毒剂的选择应根据消毒目的而定。

通常应选高效、低毒、价廉、无残留、使用方便、对人和家禽安全，并且在畜禽体内不产生有害物质的消毒剂。

3.要及时淘汰患病畜禽。

一旦畜禽发病，要及早淘汰病畜禽。

必要时可添加作用强、代谢快、毒副作用小、残留低的非人用药品和添加剂，或以生物学制剂作为治病的药品，控制畜禽疾病的发生发展。

发生传染病时要根据实际情况及时采取隔离、扑杀等措施，以防疫情扩散。

4.要做好疾病防治工作。

对畜禽疫病要坚持预防为主的原则，使用科学的免疫程序、用药程序、消毒程序、病畜禽处理程序，搞好消毒、驱虫等工作。

要做到有计划、有目的适时使用疫(菌)苗进行预防，及时搞好疫(菌)苗的免疫注射，搞好疫情监测。

防止畜禽发生疫病，避免动物发病用药，确保畜禽及产品健康安全。

(二)搞好产地检疫、运输检疫和屠宰检疫

产地检疫是整个检疫环节中的关键一环，是检疫工作的第一步。

一是动物产地检疫是一切检疫的基础和源头，开展面和到位率要达到100%;二是检疫人员必须到场、到户、到点检疫，不允许隔山开证;三是必须要分析防疫措施的落实情况，为检疫结果负责;四是猪、牛、羊必须有免疫耳标才能出证，否则要注射疫苗并补耳标后实施产地检疫。

《动物防疫法》第42条规定：经铁路、公路、水路、航空运输动物、动物产品的，托运人必须凭检疫证明方可托运，承运人必须凭检疫证明方可承运。

通过运输检疫，补检未经产地检疫的动物及动物产品，重检动物及动物产品再次验证产地检疫的正确与否，及时发现传染病类及未经检疫的畜禽及畜禽产品，禁止危险性传染病和寄生虫病传出，严防外地区的危险性传染病及寄生虫病传入。

屠宰检疫是检疫过程中最重要的一个环节，意义重大，它关系到每个消费者的健康，关系到“放心肉”工程，是一道不容忽视的必不可少的检疫手续。

一是要在屠宰现场检疫，不允许和市场的行政监督、补检、重检混为一谈;二是要按照“有宰必检”的要求进行，屠宰检疫到位;三是必须和屠宰过程同步检疫，严格对照编号;四是屠宰检疫权作为国家的一项重要执法权利，不委托，更不允许自宰自检，要严格执法。

结语

民以食为天，动物检疫工作是防止患病动物进入流通的关键，是促进动物疫病预防工作的有效手段，是保证动物产品质量、维护公共卫生安全的前提保障。

必须把动物检疫工作真正重视起来，保证人民群众的生命安全和身体健康。

参考文献:

[1]陈东来,柳枫.动物诊疗与动物检疫的关系[J].今日畜牧兽医.2006(06)

[2]张选民.动物检疫工作存在的问题及建议[J].畜牧兽医杂志.2011(03)

[3]刘红.辽宁省基层动物检疫工作的现状及思考[J].畜牧兽医科技信息.2010(04)

[4]陈立平,唐耀平.关于新宁县动物检疫工作的思考[J].中国畜禽种业.2008(16)

[5]曹莉琼.动物检疫中存在的困难及解决办法[J].中国畜禽种业.2010(05)

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