1 材料与方法 实验材料雄性4～5周龄ICR小鼠80只，购自长春高新医学动物实验研究中心，合格证号：SCXK�（吉）2003�0004，平均体重 g，饲养1周后用于实验。环磷酰胺(山西普德制药有限公司，批号：H14023686， g/支)，白消安(Busulfan，B2635，10 g，Sigma，美国)，二甲基亚砜(DMSO，天津基准化学试剂有限公司，500 ml)，多聚赖氨酸(poly�L�lysine，福州迈新公司，编号：GLU�0040，8 ml，10×)。 实验动物分组及给药方法实验动物按注射药物及给药方式不同分为4组，分别为：环磷酰胺组22只腹腔内单次注射环磷酰胺(200 mg/kg)、白消安组24只同法给白消安(40 mg/kg)、复合组20只同法给环磷酰胺(120 mg/kg)和白消安(20 mg/kg)、空白组14只给生理盐水。每只小鼠统一腹腔内单次给药 ml。先将环磷酰胺和白消安配成母液：环磷酰胺 g/支，每支加生理盐水5 ml完全溶解成浓度为40 mg/ml；白消安准确称取100 mg，充分溶解于DMSO 10 ml中成浓度为10 mg/ml，给药时根据体重计算每只小鼠给药量，并将母液稀释成相应浓度工作液，注射后常规饲养，并每天做好观察记录。 精子涂片的制作及分析给药后第35天、45天和60天各组分别取5只小鼠20%乌拉坦7 ml/kg麻醉，取双侧附睾头置于培养皿中(培养皿中放预温37℃ 生理盐水1 ml)，用手术刀片统一将附睾头纵向切3～5刀，静置5 min，使精子充分游出。取10 μl悬液滴于洁净载玻片上，推片，自然风干，然后置固定液中固定5 min（固定液预先配好，无水乙醇与冰醋酸体积比2∶1），苏木精液中染色5 min〔2〕，1%弱氨水返蓝，伊红染色片刻。脱水透明后中性树胶封片。各组涂片在40×10 HP下随机取15个视野，计数各组所取视野内完整精子数目以作进一步统计分析。 睾丸组织切片的制作注射后第35天、45天和60天各组分别处理部分小鼠，制作睾丸组织切片。小鼠20%乌拉坦7 ml/kg麻醉，4℃ 4%多聚甲醛心脏灌流预固定，然后取双侧睾丸，4%多聚甲醛4℃固定12～18 h后，梯度酒精脱水，常规石蜡包埋，制成4 μm厚的石蜡切片进行HE染色。中性树胶封片后光学显微镜下观察各组组织切片中生精小管形态结构改变、内源性生精状况改变以及间质细胞等的改变。 数据处理用Spss 软件包进行数据分析。2 结 果 各化疗药物处理组小鼠一般状态环磷酰胺组、白消安组及复合组小鼠给药后活动状况、饮食饮水及毛发整洁度、光泽度均不同程度较空白组差，其中白消安组、复合组除上述状况外，体重也较空白组显著减轻。 各组注射后精子涂片分析各组精子涂片计数分析见表1。白消安组、复合组在给药后第35天和45天涂片仅见稀薄的黏液(轻微的淡粉色)和细胞碎片，在60天时可见完整精子。环磷酰胺组、空白组涂片中完整精子较多，偶可见完整细胞。 各组注射后HE染色分析各组注射后HE染色结果见图1～6。对照组睾丸组织正常，生精小管完整，呈饱满椭圆形。小管内细胞层数多，各级生精细胞排列紧密有序，基底层可清晰分辨深染的精母细胞，腔内含大量的精子及精子细胞，各给药组均可见生精小管萎缩，间质细胞成分减少，相邻生精小管间隙增大，小管内细胞层数减少甚至缺失，其中环磷酰胺组始终变化不大，白消安组、复合组在第35天和45天睾丸生精小管内精子、精子细胞及精母细胞消失，仅可见少量的初级精母细胞和精原细胞，小管基底层有断裂现象，在第60天管腔内可见少量精子，细胞层数略增加，但仍基本保持无生精状态，没有明显恢复。表1 各组精子涂片计数分析
2013 年《Science》杂志评选的当年十大科学突破中，癌症免疫治疗研究成果位列其首！2018 年的诺贝尔生理医学奖授予了开启肿瘤免疫治疗新航向的美国免疫学家詹姆斯 · 艾利森（James P. Allision）和日本教授本庶佑（Tasuku Honjo）！自此，人类与癌症的斗争进入肿瘤 – 免疫（immuno-oncology，IO）时代！
以免疫检查点（immune checkpoint）抑制剂和 CAR-T 细胞治疗为代表的新的免疫疗法在临床实践中创造的许多奇迹！这些研究让人们相信癌症不再是不治之症！
虽然癌症的免疫治疗研究方兴未艾，但其实人们很早就认识到免疫与肿瘤的密切关系：
1. 某些肿瘤的发生由慢性炎症而起； 2. 肿瘤的发展、转移需要逃脱免疫系统的严密监视； 3. 免疫细胞是构成肿瘤生长微环境的重要组分，某些免疫反应会被肿瘤细胞利用而成为促进肿瘤生长、扩散的因素，有可能在肿瘤治疗，尤其是免疫治疗当中发挥负面影响。
因此免疫与肿瘤的关系研究，特别是肿瘤微环境中的免疫调节机制的研究也成为当今 IO 时代的重要内涵。不管是癌症免疫治疗还是肿瘤发生发展、肿瘤微环境的机理研究，这些复杂的、系统性的研究当然都离不开动物模型的应用。在此就一一细数 IO 研究中用到的小鼠模型。
1. 自发、诱导的小鼠肿瘤及其移植瘤模型
正常的小鼠在大约一年半的生命周期里也有可能罹患癌症，不同品系的小鼠自发肿瘤的机率和类型不同，体现出遗传因素与癌症易感性的关联。为了更有效地获得小鼠肿瘤模型，也可以采用人为的物理（如紫外线、放射线照射）、化学（天然致癌物质和致癌化合物）和生物（病毒等）的方法诱导小鼠产生肿瘤。可以诱导小鼠肿瘤的致癌物有多环芳烃类、亚硝胺类、偶氮染料类、黄曲霉毒素等。实验室常用的诱导化合物包括MNU（N – 甲基- 亚硝基脲）、DEN（二乙基亚硝胺）、4NQO（4 – 硝基喹啉- 1 – 氧化物）等，可诱导小鼠发生肝癌、食管癌、肺癌、膀胱癌等多种肿瘤，为癌症发生的机理研究提供了有用模型。
研究者也从小鼠的肿瘤建立起很多可在体外培养传代的肿瘤细胞系，如结肠癌细胞CT26-WT、黑色素瘤细胞B16，肝细胞癌细胞H22，淋巴瘤细胞A20 等，这些肿瘤细胞系不仅为癌细胞的体外生物学研究提供了工具，而且可以移植到遗传背景相同、不会发生免疫排斥的其它小鼠体内，建立移植瘤小鼠模型。小鼠自发或诱发的肿瘤也可以剖取下来，分割为小组织块，移植到其它小鼠体内，制作成异体移植瘤模型（allograft）。对于近交系小鼠品系建立的异体肿瘤移植模型，由于小鼠之间的遗传背景相同，其实相当于自体移植（autograft），又可称为同基因型（syngeneic）肿瘤移植模型。移植瘤模型由于可以大量制备，荷瘤鼠之间均一性好，因而非常适合抗肿瘤药物筛选和评价的体内实验。因为荷瘤鼠体内有着正常的免疫系统，这种模型可以用来研究肿瘤和免疫系统的相互作用，也可以进行一些肿瘤免疫治疗的概念性（proof of concept）、机理性（mechani *** ）研究。
2. 基因工程小鼠肿瘤模型
自发或诱导肿瘤模型都带有相当的随机性、不确定性，产生的肿瘤类型、特征也经常不能满足研究的需要。随着基因工程技术的发展成熟，对小鼠进行遗传修饰—包括转入新基因、删除基因、基因替换等成为可能。
研究发现，在小鼠上过表达某些致癌基因或者敲除某些抑癌基因可以导致小鼠易发肿瘤。于是利用基因工程手段来研发各类小鼠肿瘤模型的工作越来越多。比如 p53 基因敲除的小鼠，纯合体一般在 3、4 个月内发生各类肿瘤，杂合体在 6 个月之后也多发肿瘤。组织特异性地敲除 Pten 基因，则导致这种特定的组织中高发肿瘤。过表达 Ras、Myc 等这些癌基因的转基因鼠也易发各种肿瘤。人们可以把在临床研究中发现的与肿瘤相关的基因突变通过基因工程手段，如转基因、基因编辑等方法复现在小鼠基因组上，验证这种突变的致癌作用，以及探寻该种基因突变驱动的肿瘤的生物标志物（Biomarker）、诊断和治疗方法等。
基因修饰小鼠模型（geically engineered mouse model, GEMM）产生的肿瘤也可以移植到相同遗传背景的其它小鼠体内，建立异体移植瘤模型，这被称为 GDA（ GEM-derived allograft）模型。
这里有个非常好的例子：
GEM 肿瘤模型的例子即 KPC（LSL-KrasG12D/+; LSL-Trp53R172H/+; Pdx-1-Cre）小鼠。 KrasG12D 是人类肿瘤中常见的 Kras 基因的活化突变体，Trp53R172H 则是 p53 基因的突变体。在这两个基因编码区和启动子之间插入 loxp-Stop-loxp 序列，然后将这两个基因构件转入小鼠基因组，制作出双转基因小鼠。由于「Stop」序列的存在，这两个基因并不会被转录。当双转基因小鼠再与Pdx-Cre 小鼠配在一起，Pdx 驱动表达元件使Cre 重组酶得以在胰腺组织特异表达，切除一对loxp 之间的「Stop」序列，KrasG12D 和Trp53G12D 基因开始表达，其结果是小鼠在2、3 个月内几乎都有胰腺肿瘤发生，并有肿瘤转移现象。 KPC 小鼠为胰腺癌这一癌症之王的研究提供了绝好的研究工具。
3. 分子嵌合小鼠肿瘤模型
小鼠模型虽然可以为人类肿瘤的研究提供有用工具，但有时并不理想，因为毕竟人和小鼠在遗传、生理 / 病理方面存在着巨大差异。对于 IO 研究，肿瘤和免疫系统都可能存在种属差异，生物标志物、抗肿瘤药物靶点、药物反应性、治疗有效性都有不同之处。
通过基因工程的方法，包括经典的转基因技术、基于胚胎干细胞基因打靶的基因敲出/ 敲入技术以及新兴的基因编辑技术将人源基因导入小鼠基因组，可以建立基因「人源化」小鼠。这种小鼠体内表达某种研究者感兴趣的人特有的蛋白，成为在分子水平上的人鼠嵌合体。这种人源化可以遗传给后代，使其成为有特殊用途的新品系小鼠。基因人源化小鼠在许多领域得到应用，包括肿瘤免疫治疗研究。
免疫检查点（immune checkpoint）是近年来发现的利用自身免疫功能抗肿瘤的重要药物靶点。针对 PD1/PDL1 这一对 「免疫刹车」信号分子的单抗药物已被证明具有强大的抗肿瘤效用。由于这些抗体药物都是针对人的靶点设计和筛选的，它可能只识别、结合人的 PD1、PDL1，就无法用动物做临床前体内评估实验。
为了解决这个问题，可以通过基因编辑技术将小鼠的PD1、PDL1 基因替换为人的基因，这样小鼠的细胞上就表达人的PD1、PDL1，可以用来试验抗人PD1、PDL1 抗体药的作用。在做基因编辑的设计时，为了保证这些信号分子与小鼠细胞内信号转导分子之间的相互作用正常进行，一般只替换蛋白分子的胞外区基因片段，使其表达人的抗原靶位，而保持小鼠源的胞内区。
以人源化PD1 小鼠的应用为例，评价抗PD1 抗体药的抗肿瘤效果时，先在这种小鼠上接种一个表达PDL-1(这个分子在人鼠之间同源性较高)的同背景肿瘤细胞（如小鼠结肠癌细胞系MC38），然后就可以用荷瘤模型给药来评估有无抑制肿瘤的效果。如果药物可以阻断 PD1/PDL1 之间的结合，解除免疫抑制，免疫系统活化，重新开始攻击肿瘤，就可以观察到小鼠肿瘤的生长抑制或消退。
基因人源化小鼠应用于肿瘤免疫治疗研究的另一个例子是在双特异性抗体（bispecific antibodies）的体内筛选、评估试验中。有一大类抗肿瘤双特异性抗体药的设计原理是它既可以结合一种人的肿瘤抗原，又可以结合人的T 淋巴细胞上的CD3 分子，这样双特异性抗体可以把T 细胞连接到肿瘤细胞上，同时激活T 细胞，从而来攻击杀伤肿瘤。由于肿瘤抗原、CD3 分子这两个靶点都是人的，在普通小鼠模型上无法评价这类双特异性抗体。一般CD3 上的靶点在其ε亚基上，因此可以将CD3E 基因人源化，然后在其T 细胞上表达人CD3E 的小鼠上接种表达有人的特定肿瘤抗原的小鼠肿瘤细胞，这个体系就可以用来测试评估双特异性抗体的抗肿瘤效果。
4. 人源肿瘤小鼠移植模型
将人的肿瘤移植给小鼠，可以建立人源化肿瘤小鼠模型，前提是小鼠受体必须是免疫缺陷的，否则将被免疫排斥。最早的人源肿瘤模型在裸鼠上建立成功。裸鼠为先天性无胸腺的小鼠品系，体内缺乏 T 淋巴细胞。这说明 T 细胞在异种排斥中起著至关重要的作用。后来发现在免疫缺陷程度更高的小鼠上人源肿瘤更易生长，如 T、B 淋巴细胞联合缺失的 scid 小鼠、Rag1/Rag2 敲除小鼠等。
目前，最为广泛使用的作为人源化受体的高度免疫缺陷小鼠品系是NOD prkdcscidIl2rgnull 小鼠，即非肥胖型糖尿病小鼠NOD 遗传背景，SCID 基因突变，Il2 受体的gamma 链亚基敲除的小鼠，由日本的CIEA 研发的被称为NOG，由美国Jackson Laboratory 研发的被称为NSG，由北京维通达公司生物技术公司研发的被称为NPG。此类小鼠之所以被选择，是因为：
（1）NOD 背景的小鼠存在许多先天性免疫功能的缺陷，如巨噬细胞对人源细胞吞噬能力弱（由于其不同于其它品系小鼠和更接近人的Sirpα分子的结构）；补体系统缺失；树突状细胞功能弱等。
（2）prkdc 基因在B 细胞抗体基因重排及T 细胞受体基因重排过程中均发挥不可替代作用，这个基因突变导致T 细胞、B 细胞发育阻滞，使机体细胞免疫、体液免疫功能联合缺失。
（3）Il2rg 基因是多种白介素受体的共同亚基，它缺失后多种免疫功能受损，尤其是 NK 细胞活性完全丧失。这些特点结合在一起，使 NPG 类小鼠成为迄今为止免疫功能缺失最严重，最适合接受人源细胞移植的小鼠品系。
人源肿瘤移植模型可以分为CDX（cell line derived xenograft）模型和PDX（patient derived xenograft）模型，前者是由已经建立的各种肿瘤细胞系接种小鼠，后者是由临床获得的病人的肿瘤组织直接移植给小鼠建立肿瘤模型。 PDX 模型因为更多的保留着病人肿瘤的「原生态」，包括肿瘤细胞的异质性、肿瘤的微环境，因而更具有临床相关性。 CDX 模型的特点则是容易获得，永久传代，每个细胞系都有较多数据积累，一致性较高，便于多地点比较研究……。
肿瘤模型一般为皮下接种，因皮下瘤便于观察和测量。也可作腹腔内、肾包膜下以及「原位」接种，如肝癌组织细胞接种于肝，血液瘤注射入血液，乳腺癌接种于乳腺管等。原位接种使肿瘤微环境更接近真实，更易发生转移现象。 PDX、CDX 肿瘤模型都广泛应用于肿瘤学研究和抗癌药物的体内筛选、评估实验。然而，由于使用免疫缺陷动物建立肿瘤模型，体内没有正常免疫系统，使得这种模型「先天不足」。免疫细胞是肿瘤微环境中的重要成分，对肿瘤的发生、发展、治疗效果都扮演着至关重要的作用。建立既具有人的免疫系统又有人的肿瘤的动物模型是研究者长久以来的一个追求。
5. 人源免疫系统 – 肿瘤小鼠模型
人源化动物模型（humanized animal model）指携带有人的功能性基因的动物或移植了人的细胞、组织、器官的动物，后者也称嵌合体动物。即人源化包括基因水平的人源化以及组织细胞水平的人源化。导入人源成分之后，就使某些原来只能在人体上进行的体内实验可以在动物上进行，解决了人体实验的伦理诘难。
在IO 研究当中，如前面讲到，个别或少数基因的人源化小鼠可以在某些方面获得应用，但总体而言实验仍然建立在小鼠的肿瘤和小鼠的免疫系统之上，依然无法反映人体系统的情况和反应。
NPG 这类高度免疫缺陷小鼠的出现，使向小鼠移植人的造血 / 免疫系统成为可能。目前，人源化造血/ 免疫系统小鼠可以归为三大类：移植成体外周血单个核细胞（PBMC）或分离的免疫细胞的模型；移植来自人的脐带血、胎肝的造血干细胞（ HSC）的模型；联合移植来自同一供体的胸腺、胎肝、骨髓造血干细胞（Bone、Liver、Thymus-BLT）模型。这些模型各有自身的特点，也各自存在一些不尽人意的缺点（见下表）。
PBMC 移植 NPG 类小鼠建立的模型，因为含有成熟的免疫细胞，因而可以进行某些要求人的免疫功能的体内实验。移植之后这些成熟的免疫细胞中的 T 淋巴细胞会受到小鼠异种抗原 *** 而增殖，其它种类细胞则维持较低含量，有的细胞寿命有限而从体内消失。所以 PBMC 移植模型的人源细胞以 T 细胞为主。移植的人源免疫细胞，主要是T 细胞，还会对受体小鼠产生免疫攻击，发生发生移植物抗宿主反应（GvHD），并在大约数周之后引起小鼠死亡，所以PBMC 模型可供实验的窗口期较短，只适合于短期性研究。
造血干细胞是所有造血和免疫细胞的共同祖细胞。 HSC 移植 NPG 类小鼠之后可以定植于小鼠骨髓，并不断产生各类造血、免疫细胞，如 T 细胞、B 细胞、NK 细胞、髓系细胞等。由于其免疫细胞是在小鼠体内「从头」发育出的，对小鼠宿主产生耐受，所以不出现 GvHD 现象，模型存活一年还可以在血中检测到人源细胞稳定存在。这种模型的缺点是发育出的 T 细胞功能较弱。这是因为 T 细胞需要在胸腺中完成「education」过程，T 细胞受体形成 MHC 限制性。人源T 细胞的前体在小鼠胸腺内完成发育，可能既表现小鼠MHC 限制性，也表现HLA 限制性，造成与人源细胞相互作用类似于异体（allo-）或异种（xeno-）排斥反应。
为了解决T 细胞在人源化小鼠体内不能正常发育的问题，又发明了BLT 模型，就是将胎胸腺和胎肝小组织块合并移植到小鼠肾包膜下，再移植分离自同一个体的胎肝或骨髓的造血干细胞。这样人源前体细胞可以迁移到肾包膜下生长的胸腺类器官中发育出自身 MHC 限制性的功能性 T 细胞。 BLT 模型被认为是人的免疫功能最完善的人源化小鼠模型。但是，由于 BLT 模型的人源组织材料取自流产胎儿，来源非常有限，且面临很大的伦理争议，因而应用受到限制。
将 PDX/CDX 肿瘤移植模型跟人源化免疫系统模型结合起来可以用于人类肿瘤免疫方面的研究，如 PBMC 模型加肿瘤模型、HSC 模型加肿瘤模型。这些模型已经在肿瘤与免疫系统的相互作用研究以及肿瘤免疫治疗研究当中获得应用，但是也有一些问题未能解决。
PBMC 移植再加肿瘤的模型，因为模型的稳定期短，肿瘤接种时机需要精确把握。更关键的，因为很难获得相同 HLA 配型的 PBMC 和肿瘤，所以 PBMC 对肿瘤存在异体排斥。排斥作用太强则肿瘤不能在模型上生长。所以需要筛选、匹配合适的 PBMC 和肿瘤供体来建立共移植模型。
HSC 移植加肿瘤的模型出现肿瘤被排斥的情况较少，但也需要对 HSC 供者跟肿瘤做一定筛选匹配。 HSC 移植加肿瘤的模型作为肿瘤免疫模型有几点必须考虑：
（1）人 T 细胞在小鼠胸腺完成发育，大部分表现小鼠 MHC 限制性，视人 MHC 为异己；
（2）APC 细胞对 T 细胞的「Prime」作用存疑；
（3）T 细胞对人肿瘤的反应类似一种异体 / 异种排斥反应，反应有可能强有可能弱，不能以 HLA 配型与否预测；
（4）T 细胞对肿瘤的反应可能以 CD8 + 细胞毒反应为主。
虽然因为MHC 匹配问题，HSC 移植模型发育出的T 细胞功能不太正常，但因为其免疫调控机制很多还是存在的，可以被激活和发挥功能，所以这类模型有可能应用于肿瘤免疫微环境研究、immune checkpoint inhibitor 抗癌药物评价、双特异性抗体抗癌药物评价（不依赖MHC 识别）、CAR-T 治疗肿瘤的研究（也不依赖MHC 识别）以及作为因子释放综合征（cytokine release syndrome）模型，等等。
不可否认的是现有人源化免疫系统小鼠模型仍然存在诸多缺陷，不能满足肿瘤免疫研究中的需要。为此正在研发下一代的人源化小鼠，包括MHC 基因人源化小鼠（表达HLA 的小鼠），转入人源细胞因子如IL-2、IL-3、GM-CSF、SCF 等以能更好支持功能性免疫细胞发育的小鼠。使用自身 MHC 分子敲除的 NPG 类小鼠制作 PBMC 人源化小鼠则可以延缓 GvHD 的发生，拓展了此类模型应用的窗口期。
文章来源：维通达
题图来源：站酷海洛
医学类毕业论文格式要求
论文一般由题名、作者、目录、摘要、关键词、正文、参考文献和附录等部分组成，其中部分组成(例如附录)可有可无。论文各组成的排序为：题名、作者、摘要、关键词、英文题名、英文摘要、英文关键词、正文、参考文献、附录和致谢。以下是我为您整理的医学类毕业论文格式要求，欢迎参考阅读。
篇一：医学类毕业论文格式要求
1.题目：
题目应简洁、明确、有概括性，，字数不宜超过20个字(不同院校可能要求不同)。本专科毕业论文一般无需单独的题目页，硕博士毕业论文一般需要单独的题目页，展示院校、领导教师、答辩光阴等信息。英文部分一般需要应用TimesNewRoman字体。
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写出目录，标明页码。正文各一级二级标题(根据实际情况，也可以标注更低级标题)、参考文献、附录、致谢等。
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毕业论文正文：包括前言、本论、结论三个部分医学教导网编辑整|理。
前言(引言)是论文的开头部分，主要说明论文写作的目的、现实意义、对所钻研问题的认识，并提出论文的中心论点等。前言要写得简明扼要，篇幅不要太长。
本论是毕业论文的主体，包括钻研内容与法子、实验材料、实验结果与分析(讨论)等。在本部分要运用各方面的钻研法子和实验结果，分析问题，论证观点，尽量反映出自己的科研能力和学术水平。
结论是毕业论文的收尾部分，是环抱本论所作的收场语。其基本的要点就是总结全文，加深题意。
7.致谢：
简述自己通过做毕业论文的体会，并应对领导教师和协助完成论文的有关人员表示谢意。
8.参考文献：
在毕业论文末尾要列出在论文中参考过的所有专著、论文及其他资料，所列参考文献可以按文中参考或引证的先后顺序排列，也可以遵照音序排列(正文中则采纳相应的哈佛式参考文献标注而不出现序号)。
9.注释：
在论文写作历程中，有些问题需要在正文之外加以阐述和说明医学教导网编辑整|理。
10.附录：
对于一些不宜放在正文中，但有参考价值的内容，可编入附录中。有时也常将个人简介附于文后。
篇二：医学类毕业论文格式要求
一. 题目
题目是文章最首要和最先看到的部分，应能吸引读者，并给人以最简明的提示。
1.应尽量做到简洁明了并紧扣文章的主题，要突出论文中特别有独创性、有特色的内容，使之起到画龙点睛' 启发读者兴趣的作用。
2.字数不应太多，一般不宜超过20个字。
3.应尽量避免应用化学结构式、数学公式或不太为同行所熟识的符号、简称、缩写以及商品名称等。题目中尽量不要用标点符号。
4.必要时可用副标题来做补充说明，副标题应在正题下加括号或破折号另行书写。
5.若文章属于“资助课题”项目' 可在题目的右上角加注释角号(如 ※、#等)' 并在脚注处(该文左下角以横线分隔开)书写此角号及其加注内容。
6.为了便于对外交流' 应附有英文题名' 所有字母均用大写，放在中文摘要与关键词的下面。
二. 作者
署名是论文的必要组成部分' 要能反映实际情况。
1.作者应是论文的撰写者' 是指直接参与了整个或部分主要工作' 对该项钻研作出实质性贡献' 并能对论文的内容和学术问题负责者。
2.钻研工作主要由个别人设计完成的' 署以个别人的`姓名; 合写论文的署名应按论文工作贡献的多少顺序排列; 学生的毕业论文应注明领导老师的姓名和职称。作者的姓名应给出全名。
3.作者的下一行要写明所在的工作单位(应写全称)，并注上邮政编码。
4.为了便于领会与交流' 论文的最后应附有通迅作者的详细通讯地址、电话、传真以及电子信箱地址。
三. 摘要
摘要是科研论文主要内容的简短、扼要而连贯的重述，必须将论文本身新的、最具特色的内容表达出来(重点是结果和结论)。
1.具体写法有“结构式摘要” 和“非结构式摘要”两种，前者一般分成目的、法子、结果和结论四个栏目，规定250字左右;后者不分栏目' 规定不超过150个字，目前国内大多数的医学、药学期刊都采纳“结构式摘要”。
2.摘要具有独立性和完整性，结果要求列出主要数据及统计学显著性。
3.一般以第三人称的语气写，避免用“本文”、“我们”、“本钻研”等作为文摘的开头。
四.关键词
关键词也叫索引词' 主要为了图书情报工作者编写索引' 也为了读者通过关键词查阅需要的论文。
1.关键词是从论文中选出来用以表示全文主题内容的单词或术语，要求尽量应用《医学主题词表》(MeSH) 中所列的规范性词(称叙词或主题词)。
2.关键词一般选取3～8个词' 并标注与中文一一相对应的英文关键词。每个词之间应留有空格以差别之。
3.关键词通常位于摘要之后，引言之前。
五.引言
(导言、序言)作为论文的起头' 起纲领的作用，主要回答“为什么钻研”这个课题。
1.引言的内容主要介绍论文的钻研背景、目的、范围' 简要说明钻研课题的意义以及前人的主张和学术观点' 已经取得的后果以及作者的意图与分析依据'包括论文拟解决的问题、钻研范围和技巧方案等。
2.引言应言简意赅' 不要等同于文摘或成为文摘的注释。如果在正文中采纳对比专业化的术语或缩写词时' 最好先在引言中定义说明。
3.字数一般在300字以内。
六. 正文
正文是科研论文的主体' 包括材料、法子、结果、讨论四部分内容' 其中某些部分(特别是法子和结果)还需列出小标题' 以使层次更加清晰。
1.材料 材料是科学钻研的物质根基' 需要详细说明钻研的对象、药品试剂、仪器设备等。
(1)如属动物实验钻研' 材料中需说明实验动物的名称、种类、品系、分级、数量、性别、年(月)龄、体重、健康状态、分组法子、每组的例数等;如属用药的临床观察' 应说明观察对象的例数、性别、年纪、职业、病例种类、症状体征、诊断标准、分组法子、治疗措施、临床观察指标及疗效判定标准(如痊愈、显效、好转、无效的标准)等。
(2)说明受试药的来源、批号、配制法子等，中药应注明学名、来源，粗提物应标明有效部位或成分的含量和初步的质量标准，若是作者本实验室自行提取的应简述提取历程。
(3)标明主要仪器设备的生产单位、名称、型号、主要参数与精密度等。
(4)标明主要药品、试剂的名称(尽量用国际通用的化学名' 不用商品名)、成分、批号、纯度、用量、生产单位、出厂日期及配制法子等。
2.方法
(1)采纳已有报道的法子只要注明文献的出处即可，不必详述其历程;若为有创意的法子' 要详细介绍创新之处，便于读者依此重复验证;若是对惯例方法作出改进的' 应具体描述改进部分及改进的理由' 同时也要注明原法的文献出处。
(2)对于实验条件可变因素的把持方法(如放射免疫法的质量把持)要加以详细说明' 以显示本文结果的可靠性和准确性。
(3)实验钻研论文要设立阴性对照组和阳性药物对照组，前者一般采纳溶剂作为对照，后者选用被公认的、确有疗效的药物，以验证实验法子的可靠性。
(4)在进行药效学和毒理学钻研时，通常要设高、中、低三个剂量组，以体现出药物的量-效关系。
(5)实验设计时应考虑到每组有足够的样本数以满足统计学处理的需要，，一般地说，小动物(如大、小鼠)每组至少8～10只，大动物(如狗)每组至少4～6只。同时应说明数据处理的统计学法子，统计学处理结果一般用P>、P<、P<三档表示。
3.结果 试验结果是论文的核心部分' 这一部分要求将钻研中所得到的各种数据进行分析、归纳' 并将经统计学处理后的结果用文字或图表的形式予以表达。
(1)表格
①表格设计要清晰、简练、规范。每个表格除有栏头、表身外，还要有表序(如表1、表2、表3……)和表题' 表题与表序居中写' 中间空一格将两者分开。在正文中要明确提及见表×。②表随文放' 一般应列在“见表×”文字的自然段落的下面。
③表格一般采纳三线表。
④表题应有自明性。若表中数据均用“均数±标准差”表示，则在表题的后面注上( ±S);若表中各组的例数相等，则在表题后面统一注上(n=X)，若例数不等应另加一列，分辨注上各组的例数;表中计量单位若一致' 可写在表题的后面'若不一致应分辨写在每个栏头之下' 不加括号。
⑤表内阿拉伯数字高低各行的个位数对齐' 未发现的数据用“-”表示' 未测或无此项用空白表示' 实测结果为零用“0”表示。
(2)插图
①图包括示意图、曲线图、照片图等。
②图要求大小比例适中' 粗细均匀' 数字清晰' 照片黑白比较分明。与表一样图也要随文字放' 先见文字' 后见图。
③每幅图都要有图序和图题' 通常写在图的下方。图题要有自明性。
(3)结果处理时要尊重事实' 要求结果中的数据精确完整、可靠无误，同时要注意不应忽视偶然发生的现象和数据。
(4)药物的临床疗效钻研结果，要注意交待与药物有关的整个信息' 如疗效、毒副作用及注意事项等。
小鼠模型可通过TALEN、ZFN、ES同源重组、CRISPR/Cas9等基因编辑技术构建。集萃药康基因编辑平台熟练掌握各类基因编辑手段，可定制不同策略的小鼠模型，大大满足用户实验需求。
老鼠的基因和人类有98％是相同的！小白鼠因为其颜色的原因，在试验中很容易发现异常,其白色的体毛让科学家可轻易地作记号和观察它们的作息等,小白鼠是特殊培育的品种，繁殖快、易饲养、来源易得(一年可以有好几代，可以很快看到遗传结果)。 现代医学研究的小白鼠都是近亲繁殖的小白鼠(使其DNA比较单一稳定)，几乎完全没有个体差异,容易作比较，可以排除不同种系的干扰因素。小白鼠因其与人的生理机能相似(免疫力低，如果它对药物没有不良反应，对人体的不良反应也就会低一些)，也被广泛使用。总之小白鼠的优点大概有这么几条： 哺乳动物，基因和人类接近 价格便宜，容易饲养，生活条件不高。 种系纯，容易作比较，可以排除不同种系的干扰因素 性格温顺，抓持方便，操作简单 药物试剂等，腹腔注射，吸收效果良好，不用行血管注射（兔子和狗都要静脉或动脉注射） 体积小，便于运输和实验，可以在室内大量饲养（一般随便弄上几百个没有问题，换乘其他动物，占地太大了。）
易智编译给大家推荐四款生物医学作图工具，有了这些工具后，像信号通路图、各种模型图、流程图等就可以快速搞定。 一、Scienceslide 首先第一个就是Scienceslide，这是一款专门做医学图片的ppt插件。安装后，会在PPT界面出现一个工作条，包括了常用元件、信号通路、方法学、生物化学、分子生物学等几千种素材。 想要什么图，只需要选择相应的模板，就可以在此基础上进行文字及分子形状的修改，而后可以做成精致无比、赏心悦目的示意图。有了这个PPT插件，足以满足你任何信号通路图的要求。 二、pathwaytool 另一个软件pathwaytool，也是一款作图神器哦。它几乎自带了分子生物学会用到的所有元素，如不同的细胞、细胞器、分子、老鼠模型、器官模型以及经典的信号通路图。 在选择一个理想的模型后，可直接进行修饰和改动，非常的简单方便，3分钟内既能上手！ 三、GraphPad Prism graphpad prism是一款非常棒的医学绘图软件，它基于生物统计，曲线拟合和科学绘图于一体，可以制作出非常专业的医学表，如果你是医学相关专业的人士，一定不要错过！ 四、SmartDraw 2013 SmartDraw 2013是一款非常专业的绘图软件，可以用来快速建立流程图、组织图、柱形统计图和馅饼图、表格和其他更多图表。在绘图、图表制作领域，SmartDraw绝对是行业的佼佼者，它的出现让图表制作变得如此简单。 SmartDraw 2013最大的特点就是支持多种图形，采用模板的方式在线扩充，它可以预测你的需求，从而给你预先制定的模板，自动设计，并且可以很容易的快速把你的信息变成鲜明的插图。 易智编译是一家专门为非英语国家科研工作者提供最优质SCI论文服务的专业公司，致力于为广大科研工作者解决SCI论文写作晦涩难懂、基金标书难中、文书编辑艰难耗时等各类问题，提供SCI论文润色、论文翻译、同行评估、评审及期刊推荐，基金标书撰写、评估及审核，文件编辑等优质服务。
主要要注意两个方面一个是完整一个是科学性。完整性是指SCI论文实验过程记录要全面，不要有遗漏的地方，要把每一个环节都要照顾到，避免丢失重要信息。Methods部分行文组织按照实验对象，实验材料，实验设备以及实验方法等。要想在实验过程描述上做到完整以及科学，需要注意一下几个方面第一，实验对象，实验对象一般都是人，动物以及一些组织。描述时候要完整清晰。但是这里要注意的是，有一些影响因子较高的期刊所在国家，会对实验对象有一些立法要求，比如在该国家在找个领域里不让用人体作为实验对象。如果偏偏你的实验对象又选择的是人体的话，那SCI论文被采纳的可能性就不高。所以事先都要先看看该期刊的一些实验要求和标准。第二，实验设备，实验设备这方面描述时，要对生产厂家，仪器名称型号，以及在实验过程中的用途都要进行详细描述，设备在实验过程中一些重要的用途步骤要记录详细，因为这些有可能导致结果不同。另外更重要的是实验设备的使用，连接，方法要科学规范，否则会认为操作不正规导致结果不可信。第四，实验流程，这部分就是要对整个实验操作流程进行详细描述。一般来说sci医学论文都要求有实验流程图，流程图一般有文字，图表，大多数论文都会采用文字和示意图并举的方式，如果你的流程图画的很好的话，给审稿编辑的印象就会很好，不要小视它。流程图描绘的时候，要有鲜明的层次感，流程之间的关系要表达清楚。
有自己的论文吗？有的话直接就能发，没有的话先拟题。确定题目写好了再发。
在平时的生活中，我们都知道老鼠是一种非常脏的动物，而且老鼠身上是很有可能携带病菌的。很多人家里都养了一些仓鼠，那么仓鼠身上有没有病毒的呢？如果长期养仓鼠对人体会不会造成一些危害呢？相信这也是很多人心里都会有的一些疑虑。仓鼠有没有病毒 养仓鼠对人有哪些危害仓鼠有没有病毒1、仓鼠是宠物鼠的一种，无毒，可以放心饲养。是仓鼠亚科动物的总称。仓鼠共七属十八种，主要分布于亚洲，少数分布于欧洲，其中中国有三十八种。2、仓鼠体长5-12厘米，除分布在中亚的小仓鼠外，其他种类的仓鼠两颊皆有颊囊，从臼齿侧延伸到肩部，因此得名为仓鼠。这种动物非常迷你和可爱，是一种很强势的独居动物。仓鼠有没有病毒 养仓鼠对人有哪些危害3、小型累仓鼠痘，由鼠痘病毒引起，多呈爆发性流行，致死率较高，常造成小鼠全群淘汰，危害极大。临床表现以四肢、尾和头部肿胀、溃烂、坏死甚至脚趾脱落为特征，故又称脱脚病病毒。 本病毒的自然宿主为小鼠，不同品系小鼠的易感性差异很大。A、DBA、C3H等品系易感，C57BL对MPV的抵抗力强，呈隐性感染，因而成为主要的潜在疫源。本病常感染野生小鼠，使野生小鼠成为另一种危险的传染源。仓鼠有没有病毒 养仓鼠对人有哪些危害养仓鼠对人有哪些危害1、饲养仓鼠容易被咬伤。饲养仓鼠如果不注意卫生，容易产生一些疾病。仓鼠原来在宠物店是合养的，虽然幼鼠领地意识还不强，但也会常与其它同笼的仓鼠打架，因此脾气会比较暴躁，对其它生物怀有警惕性与敌意。 建议按照时间表与仓鼠相处，消除它的敌意。2、因为和仓鼠还不熟，却经常摆弄它，用手抓它，让它没有安全感。仍旧建议按照时间一步一步来消除仓鼠的敌意。很多网友都被仓鼠咬过，大家都会问用不用打狂犬疫苗。被仓鼠咬感染狂犬病的几率约，所以不用过于担心，被咬后立即用肥皂水冲洗，或用酒精消毒即可。3、皮肤的伤口处理：应立即或尽快用肥皂水/洗涤液和大量清水冲洗所有咬伤和抓伤处（如条件许可约15分钟），如条件具备，应使用含碘制剂或类似的局部用杀病毒制剂涂抹伤口。 伤口较深、污染严重者酌情进行抗破伤风处理和使用抗生素等，以控制狂犬病病毒以外的其他感染。仓鼠有没有病毒 养仓鼠对人有哪些危害养仓鼠的注意事项1、温度，仓鼠最适宜的生活温度为20-28℃，并且保证温度变化不是很大，如果一天的气温差有10度的话，对仓鼠来说是极不利的，因为仓鼠对温度非常的敏感。避免阳光直射，仓鼠和许多动物不一样，它不能直接被阳光照射，如果长时间被阳光直射，就很容易出现异常。2、避免被风直接吹，有的人觉得动物就应该放到直接被风吹的地方，仓鼠却不可以，但是也要注意通风性，保证空气的正常对流。远离电视、电脑等，仓鼠对辐射和嘈杂的环境也非常的敏感，它能听到人类听不到的音波，所以要远离电视、电脑等辐射电器。仓鼠有没有病毒 养仓鼠对人有哪些危害仓鼠的繁殖1、一般来说，仓鼠40天就会有繁殖能力，但是比较好的繁殖是在3-4个月大左右。一旦仓鼠怀孕，就要把它隔离到一个安静独居的笼子。因为仓鼠在生小仓鼠的时候，如果被鼠打扰的话，就有可能会难产或神经过敏，而把小仓鼠咬死。2、另外，仓鼠的笼内一定要有个房子来让它分娩。在它怀孕期16天内，是不能拿它出来玩的，也不用洗澡，要等生产后一星期才行;乳期间需固定喂食饲料与补充干净的水、可以加强饲料营养仓鼠有没有病毒 养仓鼠对人有哪些危害在上文中，我们也清楚的了解到，仓鼠和老鼠是两种完全不同的物种。如果是家里饲养了一些仓鼠，其实也是非常干净的，身上携带的病菌也是非常的少，所以主人也要经常给仓鼠进行清理
在平时的生活中，我们都知道老鼠是一种非常脏的动物，而且老鼠身上是很有可能携带病菌的。很多人家里都养了一些仓鼠，那么仓鼠身上有没有病毒的呢？如果长期养仓鼠对人体会不会造成一些危害呢？相信这也是很多人心里都会有的一些疑虑。仓鼠有没有病毒 养仓鼠对人有哪些危害仓鼠有没有病毒1、仓鼠是宠物鼠的一种，无毒，可以放心饲养。是仓鼠亚科动物的总称。仓鼠共七属十八种，主要分布于亚洲，少数分布于欧洲，其中中国有三十八种。2、仓鼠体长5-12厘米，除分布在中亚的小仓鼠外，其他种类的仓鼠两颊皆有颊囊，从臼齿侧延伸到肩部，因此得名为仓鼠。这种动物非常迷你和可爱，是一种很强势的独居动物。仓鼠有没有病毒 养仓鼠对人有哪些危害3、小型累仓鼠痘，由鼠痘病毒引起，多呈爆发性流行，致死率较高，常造成小鼠全群淘汰，危害极大。临床表现以四肢、尾和头部肿胀、溃烂、坏死甚至脚趾脱落为特征，故又称脱脚病病毒。 本病毒的自然宿主为小鼠，不同品系小鼠的易感性差异很大。A、DBA、C3H等品系易感，C57BL对MPV的抵抗力强，呈隐性感染，因而成为主要的潜在疫源。本病常感染野生小鼠，使野生小鼠成为另一种危险的传染源。仓鼠有没有病毒 养仓鼠对人有哪些危害养仓鼠对人有哪些危害1、饲养仓鼠容易被咬伤。饲养仓鼠如果不注意卫生，容易产生一些疾病。仓鼠原来在宠物店是合养的，虽然幼鼠领地意识还不强，但也会常与其它同笼的仓鼠打架，因此脾气会比较暴躁，对其它生物怀有警惕性与敌意。 建议按照时间表与仓鼠相处，消除它的敌意。2、因为和仓鼠还不熟，却经常摆弄它，用手抓它，让它没有安全感。仍旧建议按照时间一步一步来消除仓鼠的敌意。很多网友都被仓鼠咬过，大家都会问用不用打狂犬疫苗。被仓鼠咬感染狂犬病的几率约，所以不用过于担心，被咬后立即用肥皂水冲洗，或用酒精消毒即可。3、皮肤的伤口处理：应立即或尽快用肥皂水/洗涤液和大量清水冲洗所有咬伤和抓伤处（如条件许可约15分钟），如条件具备，应使用含碘制剂或类似的局部用杀病毒制剂涂抹伤口。 伤口较深、污染严重者酌情进行抗破伤风处理和使用抗生素等，以控制狂犬病病毒以外的其他感染。
1、仓鼠身上肯定是存在细菌的，可任何生物身上都会有细菌，人类也有。2、相版比猫狗之类的宠权物来说，细菌已经很少了，而且对人类的身体健康也不会构成威胁。如果实在比较担心，饲主们可以准备一下浴沙，可以减少细菌的存在，同时防止皮肤病。饲养仓鼠的准备工作：1、对于食物而言：不可以吃含盐分过高的食物。2、生活环境：仓鼠很怕热的，散热片或大理石是可以为它们解暑降温的好东西。3、喝的水要注意：不能喂它们喝生水，而是要给它们喂煮沸过后的冷开水。4、住所：千万别用报纸垫窝，油墨太重。5、准备娱乐设施：一定要为它们准备滚轮等必要物品。提示：虽然仓鼠于鼠类，但是不会与老鼠同流合污。仓鼠就是市面上最常见的鼠类宠物，价格也很容易被人接受，特别是小朋友比较喜爱。我想要说一下老鼠 和仓鼠 是不一样的 本质上就不是同种仓鼠被人类驯养有历史了 最早的版要说是金丝熊仓鼠不权会得鼠疫等烈性疾病 因为它自己身体本身就承受不住 如果很不凑巧得了什么病 还没等传染人就一命呜呼了 感冒对仓鼠来讲都是会咳血的 长个疖子粉瘤对仓鼠讲都会跟癌症一样~·所以 如果 你养了一只仓鼠5天以上它没事活蹦乱跳的 就说明他健康 起码 现在健康~··不用担心 就算咬一口 也没事~·要不我都死了无数次了~··我老要说 白鼠跟老鼠是一科 仓鼠不是~··真滴真滴~··至于味道那是必然 因为仓鼠有体味才会吸引异性交配 勤洗澡 勤换木削 你要是还觉得有味 那就通通风 注意 不能吹到仓鼠 你要开窗子 就把仓鼠移走再开哦 要不会感冒的~··别的就没什么了 别担心 仓鼠是安全的~~·^_^
鼠痘，由鼠痘病毒(poxvirus of mice，mpv)引起，多呈爆发性流行，致死率较高，常造成小鼠全群淘汰，危害极大。临床表现以四肢、尾和头部肿胀、溃烂、坏死甚至脚趾脱落为特征，故又称脱脚病病毒(ectromelia virus)。 本病毒的自然宿主为小鼠，不同品系小鼠的易感性差异很大。a、dba、c3h等品系易感，c57bl对mpv的抵抗力强，呈隐性感染，因而成为主要的潜在疫源。本病常感染野生小鼠，使野生小鼠成为另一种危险的传染源。 mpv病毒经皮肤伤口、消化道、呼吸道感染。妊娠母鼠可将病毒垂直感染给胎儿。 2.淋巴细胞性脉络丛脑膜炎，是由淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus， lcmv)引起的人和多种动物的人畜共患病。小鼠感染后呈三种病型，即内脏型、大脑型和迟发型;人类感染后主要表现为流感样症状和脑膜炎。 lcm为人畜共患病，小鼠、豚鼠、仓鼠、犬、猴、鸡、兔和棉鼠均易感，有实验证明金黄地鼠对lcmv易感，而大鼠则不易感。 只有持续感染的小鼠和急性感染的仓鼠能传播病毒。病鼠通过唾液、尿和鼻分泌物排出病毒。健康鼠可通过呼吸道感染，乳鼠通过乳或子宫垂直感染，许多鼠成为不发病的隐性带毒者。 lcmv感染后的临床症状可表现为3种类型: 内脏型、大脑型和迟发型。内脏型lcm小鼠表现被毛粗乱、结膜炎，有时出现腹水。 大脑型lcm由脑内及神经途径感染而产生，病鼠表现为脑内接种后5~6天，有的小鼠突然死亡，其它小鼠表现被毛粗乱、懒动、嗜睡、消瘦，常见结膜炎和面部水肿。倒提时小鼠头部震颤，肢体痉挛，后肢强直性伸展。小鼠于出现上述症状后l~3天死亡。 迟发型lcm常发生于子宫内感染和出生后1~2天感染的小鼠，病毒在体内增殖，但无症状，直到9个月后，可见病鼠体重减轻、被毛粗乱、蛋白尿、腹水、弓背等症状。 3.肝炎 小鼠病毒 (mouse hepatitis virus，mhv)可引起小鼠发生肝炎、脑炎和肠炎，一般呈亚临床感染或慢性感染，而机体抵抗力低时可引起急性发病死亡，导致实验失败。 mhv可改变各种免疫应答参数，影响酶的活性，从而对实验产生严重的干扰。 在我国普通鼠群的感染率超过l/5。 mhv经空气和直接接触传播，自然状态下只感染小鼠。 健康鼠通过接触病鼠排泄物和其污染的物品而感染。 mhv也可垂直传播。小鼠感染mhv后，急性发病时，病鼠被毛粗乱、消瘦、精神萎靡，有时有腹水，幼鼠可见后肢麻痹。 乳鼠可发生腹泻，生长迟缓，进而死亡。 小鼠感染低毒力的mhv时常常呈隐性感染，成为鼠群中的严重传染源。老鼠并不是天生带细菌的。
巩义市涉村镇有个祖传中医专治这个老鼠疮，家人亲身经历治愈。
老鼠虽然作为四大公害之一，但是在医学上的用途还是非常广泛的。很多的实验当中，基本上都是以老鼠作为实验对象，因为老鼠的繁殖能力比较强，而且也很好控制，所以先在老鼠身上进行试验，如果试验成功，才会将研制好的注射剂或者药品投入使用。
都是哺乳类动物，小白鼠的基因其实和人类的基因有着很大的相似度。人类与老鼠共享着80％的遗传物质和99％的基因，因此了解老鼠非常有助于了解人类自身。新的基因组草图显示，老鼠的20对染色体上共有约25亿个碱基对，与人类23对染色体上的29亿个碱基对相当接近。DNA链上基因与基因之间的“空白”片断也非常相似。两个物种的基因数目大约都是3万个。其中绝大部分相同，只有几百个基因是某一物种独有的。00老鼠和人类基因组相似度很高，对之进行比较研究可得知很多关于人类疾病和生理机能的信息。在研究老鼠基因组的过程中，新发现了约1200个人类基因，其中许多基因与癌症等常见疾病有关。
可以试验新研发的药物，可以帮助科研人员研发新药品，老鼠体型小，用药量也少，可以很快的看到药物反应。