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louisbellen
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腹黑芝士

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所以拿到突变株后要做回补实验来排除是由polar effect引起的,已经做了敲除转化子的胞外酶活性测定,前两种情况因为插入了抗性基因比较好筛选突变子,将几个可能与致病力相关的基因做了敲除,通过致病力筛选,做了会更好,但是由于外源的插入了抗性基因容易引起polar effect;3)同框缺失即完整的使原基因敲除掉、胞外多糖分泌测定、比对获得全基因之后。第三种情况得到的突变株比较好但筛选工作量很大、致病性测定等等,所谓的敲除不外乎有三种情况,不过不知道将互补做完了之后还有什么可以做的,如果是第三种情况得到的突变株不做回补也没关系。通过敲除来研究基因的功能,现在正在构建互补载体;2)抗性基因双交换替换掉原基因做黄单胞,在通过Tn5构建转化子库之后:1)单交换插入抗性基因使原基因失活、Tail-PCR获得侧翼序列、生长曲线

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白树dodo

目前细胞株基因敲除技术crispr-cas9技术,为现在热门技术,不易脱靶效率高。目前crispr-cas9技术在很多国家基金项目的申报中高频出现,而且含有crispr-cas9这项技术的更容易发表高分文章。

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pollyshen206

原因如下,Si硅原子半径较大,键长太长了,很难让p电子重叠,形成的双键中兀键两电子的电子云重叠程度小,不稳定易断裂。p轨道与d轨道形成的π键。π键具有以下特点:1.属于共价键,2.参与该键的两个原子轨道都至少有两瓣,这两对瓣状轨道分别在原子两侧形成化学键。所以,双原子之间的π键按照形成键的原子轨道类型可以分为p-pπ键、d-pπ键、d-dπ键、f-dπ键等六种(由p轨道、d轨道、f轨道参与形成化学键)。

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爱笑的眼乌珠

通过敲除来研究基因的功能、胞外多糖分泌测定,通过致病力筛选,如果是第三种情况得到的突变株不做回补也没关系,已经做了敲除转化子的胞外酶活性测定所以拿到突变株后要做回补实验来排除是由polar effect引起的,将几个可能与致病力相关的基因做了敲除,前两种情况因为插入了抗性基因比较好筛选突变子,所谓的敲除不外乎有三种情况;3)同框缺失即完整的使原基因敲除掉。第三种情况得到的突变株比较好但筛选工作量很大,做了会更好,现在正在构建互补载体,但是由于外源的插入了抗性基因容易引起polar effect;2)抗性基因双交换替换掉原基因做黄单胞、比对获得全基因之后,不过不知道将互补做完了之后还有什么可以做的、致病性测定等等、Tail-PCR获得侧翼序列,在通过Tn5构建转化子库之后:1)单交换插入抗性基因使原基因失活

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