猪肉中瘦肉精的检测论文

瘦肉精”又称盐酸克仑特罗，是一种白色或类白色的结晶粉末，猪食用后在代谢过程中能够促进蛋白质合成，加速脂肪的转化和分解，提高猪肉的瘦肉率。 含有“瘦肉精”的猪肉如果被人食用后，临床表现会有如下症状：急性中毒会造成心悸，面颈、四肢肌肉颤动，手抖甚至不能站立，头晕、乏力；原有心律失常的患者更容易发生反应，如心动过速，室性早博，心电图示S-T段压低与T波倒置；原由交感神经功能亢进的患者，如有高血压、冠心病、甲状腺功能亢进者，上述症状更易发生；与糖皮质激素合用，可引起低血钾，从而导致心律失常。 如发生中毒情况需实施急救治疗：洗胃、输液，促使毒物排出；在心电图监测及电解质测定下，使用保护心脏药物如6-二磷酸果糖（FDP）及β1-受体阻滞剂倍他乐克 市民在购买猪肉过程中，如果发现猪肉肉色较深、肉质鲜艳，后臀肌肉饱满突出，脂肪非常薄，这种猪肉则可能使用过“瘦肉精”，尽量不要买.瘦肉精的四种检测方法 1. 1金标快速检测卡本试剂运用抗原抗体的特异反应以及侧向层析和胶体金技术进行尿液中克伦特罗分子的快速定性检测。样本中的瘦肉精在流动的过程中与胶体金标记的特异性的单克隆抗体结合,抑制了抗体和NC膜检测线上瘦肉精—BSA偶联物的结合。将尿样收集在干净容器中,尿样可直接测定,肉样粉碎后用HCL溶液定容,超声提取过滤加NaOH再加磷酸二氢钠过滤后C1小柱卒取而得试样,取出试剂将试剂板置于平坦的台面上,用塑料管吸取尿样或试样,然后垂直滴加2~3滴尿样或试样于试剂板的加样孔内,测试结果在3~5min读取,当试剂板的测试区出现一条紫红色带则为阳性,出现两条紫红色则可判断为阴性。 1. 2酶联免疫法(ELISA) 本方法的检测依据是抗原抗体反应,将克伦特罗特异性抗体吸附在固相载体表面,加入酶标克伦特罗结合物、标准溶液或者样液,游离的克伦特罗,酶标结合物与结合在固体表面的克伦特罗特异性抗体竞争,未结合的酶标克伦特罗结合物洗涤除去。加入酶底物,在结合酶的催化作用下,无色底物降解产生蓝色物质,加入终止剂后颜色转变为黄色。通过酶标检测仪,在450nm波长处测得吸收值。尿样可直接测定,肉样粉碎后用HCL溶液定容,超声提取过滤加NaOH再加磷酸二氢钠过滤后C18小柱卒取而得试样。用标准溶液或试样加入酶标板上相应微孔中,反应1h后洗涤4次,加入显色溶液15min后再加入终止液,然后在酶标仪上测定计算,总用时约3h。 1. 3高效液相色谱法(HPLC) 组织如肉样剪碎后,用高氯酸溶液匀浆,进行超声加热提取后,用异丙醇加乙酸乙酯萃取,有机相浓缩,经弱阳离子交换柱进行分离,用乙醇+氨(98+2)溶液洗脱,洗脱液经浓缩,经流动相磷酸二氢钠+甲醇(65+35)定容后在高效液相色谱仪上进行测定,外标法定量计算出结果。总用时约4h。 1. 4气相色谱-质谱法(GC-M S) 组织如肉样剪碎后,用高氯酸溶液匀浆,进行超声加热提取后,用异丙醇加乙酸乙酯萃取,有机相浓缩,经弱阳离子交换柱进行分离,用乙醇+氨(98+2)溶液洗脱,洗脱液经浓缩,经N,O-双三甲基硅烷三氟乙酰胺(BSTFA)衍生后于气质联用仪上进行测定,以美托络尔为内标定量计算出结果。样品处理过程与1. 3基本一样,总用时约4h。

另外三方圆公司有一种快速检测卡，配合分析仪在几分钟就能得出结果，可以去网站看看主要特点本法是采用竞争性酶联免疫反应来测定尿液、血清、肝脏、水、饲料和肌肉中莱克多巴胺（瘦肉精）含量的检测。 其主要原理是：吸附在孔内的莱克多巴胺药物抗体与标准品或样品中药物竞争性与药物抗体相结合，未与药物抗体相结合的标准品或样品被洗涤去除后，只剩下与微孔内药物相结合的抗体，其再与加入的酶标记的结合物相结合，酶底物在酶作用下产生蓝色产物，该产物在450nm波长下产生较强吸光性。450nm吸光度与样品中药物含量成反比。。

瘦肉精是一类动物用药，有数种药物被称为瘦肉精，例如莱克多巴胺（Ractopamine）及克伦特罗（Clenbuterol）等。将瘦肉精添加于饲料中，可以增加动物的瘦肉量、减少饲料使用、使肉品提早上市、降低成本。但因为考虑对人体会产生副作用，各国开放使用的标准不一。瘦肉精是一类药物，而不是某一种特定的药物，任何能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。在中国，通常所说的瘦肉精是指克伦特罗(Clenbuterol)，而普通消费者则把此类药物统称为瘦肉精。当它们以超过治疗剂量5-10倍的用量用于家畜饲养时，即有显著的营养“再分配效应”——促进动物体蛋白质沉积、促进脂肪分解抑制脂肪沉积，能显著提高胴体的瘦肉率、增重和提高饲料转化率，因此曾被用作牛、羊、禽、猪等畜禽的促生长剂、饲料添加剂。 此类药物主要是肾上腺类，β激动剂，因为能够促进瘦肉生长、抑制动物脂肪生长，所以统称“瘦肉精”。瘦肉精让猪的瘦肉率提供，带来更多经济价值，但它有很危险的副作用。中国最高报道的瘦肉精中毒事件是1998年供港活猪引起的，此后这类事件经常发生，如：2001年广东曾经出现过批量中毒事件。 目前，能够实现这种功能的物质是一类叫做β-兴奋剂（β-agonist)的药物，约16种，比如在中国造成中毒的克伦特罗(clenbuterol)和美国允许使用的莱克多巴胺/又译雷托巴胺(Ractopamine)。2001年12月27日、2002年2月9日、4月9日，农业部分别下发文件禁止食品动物禁止使用β激动剂类药物作为饲料添加剂（农业部176号、193号公告、1519号条例）。 瘦肉精在上海曾经引发了几百人的中毒事件。而在台湾，由于从美国进口的猪肉里含有 健康的肉瘦肉精，几乎挑起一场政治争端。由于西方国家一般不消费动物内脏（内脏特别是肝脏则会残留瘦肉精），因而，在美国、加拿大、新西兰等国，瘦肉精这类物质的使用是合法的。 在中国，通常所说的“瘦肉精”则是指克伦特罗。它曾经作为药物用于治疗支气管哮喘，后由于其副作用太大而遭禁用。 其它这样类似药物还有沙丁胺醇(Salbutamol)和特布他林(Terbutaline)等，同样能起到“瘦肉”作用、却对人体健康危害过大，因而造成安全隐患。它们也因而在全球遭到禁用。 国务院食品安全委员会办公室《“瘦肉精”专项整治方案》（食安办〔2011〕14号）规定的“瘦肉精”品种目录： 盐酸克伦特罗(Clenbuterol Hydrochloride) 莱克多巴胺(Ractopamine) 沙丁胺醇(Salbutamol) 硫酸沙丁胺醇(Salbutamol Sulfate) 盐酸多巴胺(Dopamine Hydrochloride) 西马特罗(Cimaterol) 硫酸特布他林(Terbutaline Sulfate) 苯乙醇胺A(Phenylethanolamine A) 班布特罗(Bambuterol) 盐酸齐帕特罗(Zilpaterol Hydrochloride) 盐酸氯丙那林(Clorprenaline Hydrochloride) 马布特罗(Mabuterol) 西布特罗(Cimbuterol) 溴布特罗(Brombuterol) 酒石酸阿福特罗(Arformoterol Tartrate) 富马酸福莫特罗(Formoterol Fumatrate) 编辑本段基本信息中文名：瘦肉精；克伦特罗；学名盐酸克伦特罗；是一种平喘药。该药物既不是兽药，也不是饲料添加剂，而是肾上腺类神经兴奋剂。盐酸双氯醇胺；克喘素；氨哮素；氨必妥；氨双氯喘通；氨双氯醇胺；7-[2-甲基丙烷2-亚氨基甲基]4-氨基3,5-二氯苯甲醇盐酸盐 英文名：Clenbuterol; Spiropent; Planipart; NAB365；4-Amino-3,5-dichloro-alpha-(((1,1-dimethylethyl)amino)methyl)benzenemethanol CAS号：37148-27-9 盐酸克伦特罗结构简式分子式：C12-H18-Cl2-N2-O理化特性白色或类白色的结晶粉末，无臭、味苦，熔点161℃，溶于水、乙醇，微溶于丙酮，不溶于乙醚。 编辑本段检测方法GB/T 动物性食品中克伦特罗残留量的 瘦肉精测定 气相色谱-质谱法(GC-MS)GC-MS法优点是把色谱高效快速的分离效果和质谱高灵敏度的定性分析有机合起来，能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析，而且具更高的检测极限。Fente C. A等用GC-MS法检测牛毛中CLB的残留，最低检测限为5ng/g[6]；Pteer Batioens应用气相色谱－串联质谱法(GC-MS-MS)对牛、羊、猪组织中的CLB含量进行检测，最低检测限为2ng/g[7]；刘琪等用GC-MS法(EI离子源）检测猪尿中的CLB,检测限为；VanRhijin等用三甲基硅基或2-二甲基硅基吗啉衍生物检测尿提取物中的CLB,衍生物用电脉冲方式或化学离子化方式扫描，会产生更高的灵敏度。另外,GC-MS法与HPLC法相比，检测灵敏度更高，假阳性率更低。因此，中国将GC-MS法定为检测CLB的确证性方法(NY/T468~2001)。 高效液相色谱法(HPLC)HPLC适合测定热不稳定和强极性的β-激动剂及其代谢产物，而且,HPLC可以与柱前提取、纯化及柱后荧光衍生化反应和质谱(MS)等系统联用，容易实现分析过程的自动化。黄士新等(1995)应用紫外检测器，在λ=243nm,色谱柱：shimpackCLC-ODS150×,流速：1mL/min,柱温：室温30℃的条件下检测猪肝脏和猪肉中的CLB残留，最低检测限可达2ng/g[4]。国外有人应用HPLC (二极管阵列检测器）测定动物性食品中CLB残留，测得最低检测限为,回收率达[5]。目前，中国已将HPLC法作为检测CLB残留的半确证性方法，最低检测限范围为1～15ng/g,其优点是专属性好、选择性强、检测精确度较高，而且假阳性率低；缺点是样品处理时间长，检测过程烦琐、难于操作，需贵重仪器，在实际应用中受到一定的限制。 酶联免疫吸附法(ELISA ）利用免疫学抗原抗体特异性结合和酶的高效催化作用，通过化学方法将植物辣根过氧化物酶(HRP)与克伦特罗(CL)结合，形成酶偶联克伦特罗。将固相载体上已包被的抗体（羊抗兔IgG抗体）与特异性的抗克伦特罗抗体结合，然后加入待测克伦特罗和酶偶联克伦特罗，它们竞争性与克伦特罗抗体结合，洗涤后加底物，根据有色物的变化计量待测克伦特罗量。若待测克伦特罗多，则被结合的酶偶联克伦特罗少，有色物量就少。用目测法或比色法测定样品中的克伦特罗含量，比色的最佳波长为450 nm,参比波长应大于600 nm。 液相色谱—质谱/质谱法(HPLC-MS/MS)参见SN/T 1924—2007 进出口动物源食品中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林残留量的检测方法。 本标准适用于动物源性食品肌肉和内脏中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林残留量的检测。 试样中的药物残留采用的乙酸铵缓冲液提取，同时加入β-盐酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酯酶进行酶解后，提取液经C18和SCX双SPE柱净化，液相色谱—质谱进行测定，内标法定量。 近年来，中央各有关部门及各级政府高度重视农产品质量安全检测体系建设，投资建设了2000多个农业质检机构，从事农产品质量安全检测工作的人员达2万多人，年检测样品近百万个[1]。 编辑本段研究历史克伦特罗是一种β-兴奋剂，添加于饲料中能提高几种家畜包括猪的 瘦肉精瘦肉率。 克伦特罗在家畜和人体内吸收好，而且与其它β-兴奋剂相比，它的生物利用度高，以至食用了含有克伦特罗的猪肉出现中毒。Zimmer(1976)证实人内服20 μg的14C-盐酸克伦特罗，峰浓度时，血浆中克伦特罗原形药占总的14C-盐酸克伦特罗的75%。克伦特罗内服生物利用度高的事实对估计消费者食用了含有克伦特罗的组织，从中获得的克伦特罗的量很重要。引起人中毒的动物组织含有克伦特罗原形药的量差异很大。Martinez-Navarro(1990)报道犊牛肝中克伦特罗原形药的残留量为161~291 ppb,Pulce等(1991)报道犊牛肝中克伦特罗的残留量为375~500 ppb,Salleras等(1995)报道犊牛肝中克伦特罗的残留量为19~5395 ppb。此外,Maistro等(1995)报道犊牛肌肉中克伦特罗的残留量为500 ppb。 1ppm的克伦特罗添加于猪饲料中用于促生长，人食用猪肝或猪肺足够引起中毒。世界没有任何正规机构批准克伦特罗作为饲料添加剂用于动物促生长。 游学归来的浙大教授许梓荣在明知瘦肉精有副作用的情况下，隐瞒事实引进国内，名利双收，获奖无数。他09年向媒体解释：那时国家正力倡培育瘦肉型猪，他和学生的研究吻合政策方向，“我们也不宜和政府唱反调。如果在论文中介绍了副作用，我们（的论文）也发不了。” 编辑本段具体用途盐酸克伦特罗是一种β-兴奋剂,20世纪80年代初，美国一家公司开始将其添加到饲料中，增加瘦肉率，但如果作为饲料添加剂，使用剂量是人用药剂量的10倍以上，才能达到提高瘦肉率的效果。它用量大、使用的时间长、代谢慢，所以在屠宰前到上市，在猪体内的残留量都很大。这个残留量通过食物进入人体，就使人体渐渐地中毒，积蓄中毒。如果一次摄入量过大，就会产生异常生理反应的中毒现象，因此而被禁用。国内养猪户不顾农业部的规定，为了使猪肉不长肥膘，在饲料中掺入瘦肉精。猪食用后在代谢过程中促进蛋白质合成，加速脂肪的转化和分解，提高了猪肉的瘦肉率，因此称为瘦肉精。 “瘦肉精”能使猪提高生长速度，增加瘦肉率，猪毛色红润光亮 瘦肉精，收腹，卖相好；屠宰后，肉色鲜红，脂肪层极薄，往往是皮贴着瘦肉，瘦肉丰满。肥猪饲喂瘦肉精后，逐渐发生四肢震颤无力，心肌肥大心力衰竭等毒副作用。