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cell发表关于干细胞的论文

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cell发表关于干细胞的论文

北科生物有着非常强的研发团队,北科生物还曾与近百家科研及医疗机构开展了细胞治疗技术临床研究合作

作者 刘如楠

如果我们能“定制”细胞,会发生什么?

当人体需要某类细胞时,比如心脏出现问题,就取些成纤维细胞,“定制”打造成心肌细胞来帮助心脏恢复;当人体不需要某类细胞时,比如发生癌变,就引导癌变细胞快速凋亡。

几位华人博士为这一设想的实现提供了新的工具。他们开发了一个细胞命运预测模型,能够预测细胞发育所要经历的过程和最终命运。还能给出相应的发育方程,定量描述细胞命运的转变路径。

也就是说,如果想定制某一类细胞,需要哪些细胞作为原材料、需要什么条件、如何选择分化路径,这个模型都能告诉你。

北京时间2月1日,美国麻省理工学院教授Jonathan Weissman组博士后邱肖杰、匹兹堡大学博士生张衍为共同一作的研究在Cell(《细胞》)在线发表。

寻找生物学中的“万有引力”定律

作为17世纪自然科学最伟大的成果之一,万有引力定律揭示了天体运动的规律。在天文观测中,只要有一定的观测资料,根据万有引力定律,就能计算出天体运动的轨道。这为航天 探索 提供了坚实的理论基础。

而在微观层面,当动物体内的胚胎干细胞分化成心肌细胞、造血细胞、骨髓细胞、脂肪细胞等时,或许也遵循着某个定律。如果能找到这个定律,就像计算天体运动轨道一样,也能计算出单个细胞的分化路径。

2011年,在导师的“放养”式管理下,邱肖杰拥有大把的时间去广泛阅读文献,这个过程中他萌生了上述想法。那时的他很兴奋,立即选取了两个基因的相互作用进行数学建模,对体系分化进行了初步的函数表征。

“虽然当时的研究很不成熟,也没有发表在特别好的期刊上,但这颗种子已经深深扎进我心里了。”邱肖杰说。

后来,随着单细胞测序技术的出现和发展,他意识到,这给细胞分化命运的研究带来了契机。

决定每个细胞独特功能的是细胞内活跃的一大批特定基因,它们相互作用构成了决定细胞分化命运的大型调控网络。当有了所有细胞的基因组数据、有了大数据技术,全面分析基因调控网络也就成为了可能。

2018年,单细胞数据分析领域有一个重要突破,有研究者提出利用RNA速率从固定细胞数据中预测细胞基因表达状态变化方向的方法。

这也给了邱肖杰很大的启发:我们能否再进一步,不仅实现细胞命运的预测,也给出相应的“方程式”和生物学解释呢?

用物理学方法解决生物学问题

一次偶然的面试时,邱肖杰遇到了邢建华,即本篇研究的通讯作者之一、匹兹堡大学教授。

“肖杰很热情地向我解释他的想法,事实证明,他找对人了。”邢建华告诉《中国科学报》,“我们课题组一直致力于用数学和物理的思维及手段解决生物学问题,尤其是认识并调控细胞形态分化或重组。用数学方程描述基因网络是系统生物学的基本工具,其中一个挑战是缺乏大规模的定量数据,而这正是肖杰擅长的。我们一拍即合。”

落实到具体的研究中,想要把细胞、基因、相互作用等生物学中的概念,抽象成数学表达,再放到动力学系统理论的框架下,找到能够拟合的函数,最终得出“细胞命运”方程,并不容易。

后来,邱肖杰、张衍采用机器学习的方法,对十几个数据集进行了分析,每个数据集中包含数千至数万个细胞不等,经过优化迭代,最终开发出了名为dynamo(发动机)的算法模型。

“优化迭代中的每一步都不好走,由于没有成型的工具包,我们需要不断调试参数、代码,保证拟合效果。同时,为了使这个工具好用,我们还要尽可能地减小内存、加快运行速度。”张衍说。

对于大多数的机器学习方法来说,其中的过程都是“黑箱”,即使能给出准确的预测结果,但结果是怎么得来的,很难明确解释。

而在本项研究中,他们结合重构的向量场与系统生物学/动力学系统理论中的一些概念,使“黑箱”变成了“白箱”。也就是说,dynamo不仅能预测细胞分化的最终命运,还能给出相应的生物学解释,即由于在哪些关键基因的在哪些分化阶段的相互作用才导致了细胞的最终分化。

随后的2000多个人造血干细胞分化的验证实验表明,将单细胞测序数据作为dynamo输入量,即可预测出其分化成神经细胞、红细胞、血液细胞等的动态图谱及分化时间。这与以往研究者利用动物实验进行细胞分化的结果完全吻合。

学科交叉产生的奇妙反应

谈及研究成功的“秘笈”,几位合作者不约而同地提到了学科交叉。

这种学科交叉不仅体现在合作者有着不同的学术背景,还可以追溯到他们多年前的“不务正业”。

“研究生阶段,我花了很多时间阅读文献,从中发现了自己真正感兴趣的方向,和我当时的方向并不一致,顶住了重重压力才得以继续研究。”邱肖杰告诉《中国科学报》。

而对于药学专业背景的张衍来说,把时间花在数学、计算机的专业学习上,才是他最喜欢的事情。

邢建华更是如此。“作为物理化学背景出身的人,我希望为生物学研究注入新的视角。我想,本项研究的最大贡献是能启发大家利用单细胞数据和物理思维,结合数据和理论去寻找细胞动力学方程。”

视角不同,当然会有争执,有很多次,这几位研究者争论得面红耳赤,谁也不服谁。

可这恰恰也是碰撞的乐趣,化学反应中,不同的物质相遇,升温、变色甚至爆炸都是常事,可只要弄清楚性质、掌握好剂量,不同物质间产生的相互作用远比一种物质更加奇妙。

论文信息:

dynamo:

全国最为健全的临床应用研究技术支持服务网络:70多家临床应用研究技术支持服务网络,提供干细胞临床应用研究技术支持。亚洲最大的干细胞储存服务网络:可为客户提供就近、便捷、可靠的储存服务江苏、深圳、安徽和印度干细胞库已经运行河南、辽宁、贵州干细胞库启动建设覆盖全国的客服网络:快捷、温馨、精确、放心 7*24小时不间断的五星级服务具有全程配合孕妇生产过程的服务团队,提供一对一的专人服务 北科专利:申请了15项发明专利(2项国际专利),6项实用新型专利,列表如下:承担各级政府项目27项承担各级政府项目27项,其中3项国家级项目。承担863项目:干细胞医疗技术临床转化与应用开发-临床级干细胞库和干细胞储运技术;参与863项目“间充质干细胞治疗心肌梗塞的多中心临床试验”发表干细胞相关论文近100篇:在Nature Review、Stem cell 、Arthritis & Rheumatism等杂志发表干细胞相关研究论文近100篇科研合作联盟:与美国斯坦福大学、清华大学、香港中文大学、中山大学、南京大学、中科院、军科院等合作研究的课题达30多个。同时,江苏北科是江苏省干细胞产业技术创新战略联盟成员单位和理事长单位。

关于细胞学说的发表论文

施莱登在1838年发表的《植物发生论》中指出,植物是由细胞构成的,细胞核在细胞生长、发育过程中起着重要作用,即提出了植物的细胞学说。施旺在施莱登的启发下,进一步研究,于1839年发表了《关于动植物的结构和生长一致性的显微研究》的论文,提出了他的细胞理论。这篇论文共有三部分内容:第一部分,描述蛙的幼体蝌蚪内有脊索和各种不同来源的软骨的结构和生长;第二部分,提出证据,论证了一切动物组织,无论特化到什么程度,其结构的基础还是细胞;第三部分,详细阐明了细胞学说。

1665年英国物理学家R.胡克发现的细胞. 在18世纪的德国 ,自然哲学非常盛行。这个体系的内容之一是描述他们认为是组成有机世界多样性的典型单位。歌德认为叶子是各种不同植物的典型单位结构,而奥肯则主张脊椎节是一般动物原型结构的基本单位。奥肯还进一步认为有机体由粘液囊泡或活的单位所组成,并在它们暂时所属的有机体死亡后继续生存着,形成另一个生物的一部分。在19世纪早期,这样一种观点相当流行,并且同对动植物结构的显微镜观察结合在一起,导致了细胞学说的发展。 在17世纪初胡克、马尔比基和列文霍克,都曾用显微镜看到了植物细胞,但是并没有被认为是植物世界的独立的、活的结构单位。 在19世纪初期,植物解剖的研究复活了,德国植物学家特雷维拉努斯和冯·莫尔认识到细胞是植物的结构单位。19世纪20年代, 意大利 的亚米齐和其他人制成了改进的消色差显微镜,使人们得以观察到有机细胞的详细情况。一个 伦敦 医生罗伯特·布朗于 1831年 观察到植物细胞一般具有一个核,不过他对自己的发现并不怎样重视。 捷克 人普金叶在 1835年 用显微镜观察了一个母 鸡 卵中的胚核,并指出动物的组织,在胚胎中是由紧密裹在一起的细胞质块所组成,这些细胞质块与植物的组织很类似。 这些观察导致耶拿大学的植物学教授马提阿斯·施莱登于1838年宣布,细胞是一切植物结构的基本的活的单位和一切植物借以发展的根本实体的学说。卢万大学的解剖学教授泰奥多尔·施旺于1839年把细胞说扩大到动物界。 19世纪40年代许多研究者纠正了他们其中的一些错误观点,特别是植物学家冯·莫尔,耐格里和霍夫迈斯特以及动物学家克里克尔、莱迪希和雷马克,他们证明新细胞是靠分裂形成的, 细胞核 先在母细胞内分裂为二,然后是母细胞分裂为两个子细胞。 意义 细胞学说论证了整个生物界在结构上的统一性,以及在进化上的共同起源。这一学说的建立地推动了生物学的发展,并为辩证唯物论提供了重要的自然科学依据。恩格斯曾把细胞学说誉为19世纪最重大的发现之一。 从1665年英国物理学家R.胡克发现细胞起,到1839年细胞学说建立,经过了近二百年。其间,科学家们虽然观察了若干不同类型的细胞,然而并没有认识到所有动植物体都是由细胞组成。 1838年,德国生物学家M.J.施莱登概括出细胞学说的主要论点,提出植物是由细胞组成的,并且指出植物胚胎来自单个细胞。次年,T.施旺进一步加以充实,提出动物和植物的细胞从整体而言,结构上是相似的,细胞是生物体的功能单位。这两位德国学者对细胞及其功能较为明确的定义,宣告了细胞学说基本原则的创立,有力地推动了生物学的发展,并为辩证唯物论提供了重要的自然科学依据。恩格斯誉之为19世纪自然科学三大发现之一。 施莱登和施旺的细胞学说为19世纪细胞的研究指出了方向。然而,他们虽然正确地指出新的细胞可以由老的细胞产生,却提出了一个错误的概念即新细胞在老细胞的核中产生,由非细胞物质产生新细胞,并通过老细胞崩解而完成。由于这两位科学家的权威,使得这种错误观点统治了许多年。 许多研究者的观察表明,细胞的产生只能通过由原先存在的细胞经过分裂的方式来完成,1858年德国病理学魏尔肖概括为“一切细胞来自细胞”的著名论断,这不仅在更深的层次上揭示细胞作为生命活动的基本单位的本质,而且通常被认为是对细胞学说的重要补充,甚至有人认为直至于此细胞学说才全部完成。 尽管细胞学说的某些部分已成为历史的陈迹,然而其中心思想仍广泛而深刻地影响了后来生物学的发展,任何生物学的重要问题都必须从细胞中寻求最后的解答。

18世纪末、19世纪初,德国诗人、自然科学家 J.W.von歌德认为有机界的多样性是从物质的神圣统一性与第一原理衍生出来的,即由共同的原型所组成。德国自然哲学家、生物学家L.奥肯根据自然哲学思想与不确切的观察,提出由球状小泡发展成的纤毛虫是构成生命的共同单位。学者们寻找动植物原型的思想对细胞学说的提出有一定影响。19世纪20、30年代,有些学者提出“小球”可能是植物或动植物的基本结构。其中法国生理学家H.J.迪特罗谢曾明确指出所有动植物的组织和器官都由小球构成。但是他所指的小球比较含糊,有时是细胞,有时是细胞核,也有时甚至是早期显微镜缺陷所造成的衍射圈。与此同时,有些学者开始采用消色差显微镜。1831年,英国植物学家R.布朗在兰科植物叶片表皮细胞中发现了细胞核。1835~1837年,捷克生物学家J.E.浦肯野及其学生G.G.瓦伦廷对构成动物某些组织的“小球”进行描述,并提到与植物细胞有相似性。1838年德国植物学家M.J.施莱登发表《植物发生论》,提出只有最低等的植物,如某些藻类和真菌是由一个单细胞组成的。高等植物则是各具特色的、独立的单体即细胞的集合体;因而认为细胞是组成植物的基本生命单位。他还认为细胞的生命现象有两重性:一方面细胞是独立的,只与自身生长有关;另一方面又是附属的,是构成植物整体的一个组成部分。他研究植物的个体发育、发展了R.布朗关于细胞核的看法,认为核与细胞的产生有密切关系,并把它称为细胞形成核(cytoblast)。他描述了先由粘液颗粒长成细胞形成核,再在其表面出现小囊,逐步形成细胞的过程。他认为所有显花植物都具有共同的细胞形成规律。德国动物学家 T.A.H.施万于 1837年10月,获悉M.J.施莱登的研究成果而受到启发,认识到从细胞核入手对论证植物细胞与动物细胞的一致性有重要意义。他于1839年出版《动植物的结构和生长一致性的显微研究》,提出了细胞学说。他通过对蝌蚪脊索细胞和不同动物软骨细胞的研究,阐述了动物细胞与植物细胞的相似性。他把动物的永久性组织分为5类,分别研究了血细胞,指甲、腱、骨、齿、肌肉、神经等,证明它们都是有核的细胞或是细胞分化的产物。他接受M.J.施莱登的观点,并发展为细胞可由细胞内或细胞间的一种无结构物质即细胞形成质(cytoblastema)产生。他根据研究结果提出一切动物和植物都是由细胞组成的,有机体的各种基本组成都有一个共同的发育原则,即细胞形成的原则,并认为细胞是生命的基本单位。一切有机体都从单个细胞开始生命活动,并随着其他细胞的形成,不断发育成长。他还明确指出细胞有两类现象,一类是塑造现象,与细胞由分子组成有关;另一类是代谢现象,与细胞本身组成成分或周围的细胞形成质中发生的化学变化有关。细胞学说建立后的主要进展是原生质理论的建立和动植物细胞有丝分裂、减数分裂一致性的证实。继1835年法国原生动物学家F.迪雅尔丹将根足虫的内含物称为肉浆,1839年浦肯野把动物胚胎细胞内的物质,称为原生质。1844年 C.W.von内格利发现植物细胞壁内有一颗粒状的无色粘液层,同年H.von莫尔称它为原囊,1846年又称它为原生质。1850年F.J.科恩证明肉浆和植物原生质为同一物质。以后M.舒尔策于1861年证实植物和动物的原生质和最低等生物的肉浆是同一物质。1844~1846年 C.W.von内格利和 H.von莫尔提出植物细胞通过分裂形成,但并不排除细胞游离形成。1852年,德国动物学家R.雷马克与德国病理学家R.C.菲尔肖分别明确指出动物细胞分裂的普遍性,并由R.C.菲尔肖于1855年总结提出“一切细胞来自细胞”的名言。但他们并未正确认识细胞分裂过程,而且也未完全排除细胞游离形成。直到19世纪70年代和80年代中期,通过德国植物细胞学家E.A.施特拉斯布格、德国细胞学家W.弗勒明等许多学者的努力,才正确阐明了动、植物细胞有丝分裂的过程,并证明它遵循着共同的规律。比利时胚胎学家E.van贝内登于 1883年发现马蛔虫性细胞染色体数目的减少是对于细胞减数分裂的认识的开始。后来德国动物学家H.亨金于1891年指出减数过程是染色体配对及染色体对之间的分离,并指出了脊椎动物、植物和昆虫细胞减数分裂的一致性。但是H.亨金的研究成果在当时并未得到承认。1905年英国植物学家J.B.法默和生物学家J.E.S.穆尔在总结前人工作的基础上,进一步证实了动、植物细胞减数分裂的统一性,以及两者之间的某些差异。 本文主要论点是1&2.

许莱登(Schleiden,德)和许旺(Schwann,德)先后发表两篇论文 《论植物发生》(1838) 《动植物结构和生长相似性的显微研究》(1839) 明确提出细胞是植物体和动物体结构的基本单位。此后,经过多位研究者的丰富和发展,细胞学说渐趋成熟.

干细胞论文发表

开源类的期刊不知道你有了解过没,也还可以的,世界肿瘤研究,你去看看

我觉得人类离这一步还有十分遥远的距离,因为人类根本不可能采用真正的人体做实验,而人与鼠之间毕竟还有其他差异,想真正让人做到这一步很难。我个人无法接受这一点,这明显是有悖于伦理道德的事情。我不希望看到这样的技术出现,也不希望这种事真的发生在生活里。

最近英国原则上批准了一类人兽混合胚胎实验。其实类似的研究在中国早已进行,并发表了论文。但由著名科学家盛慧珍领导的这一工作目前已基本中断,整座大楼显得空空荡荡9月5日,英国“人工受精与胚胎学管理局”(HFEA)原则上批准了一类人兽混合胚胎的实验,这事实上是对英国纽卡斯尔大学和国王学院等研究机构在一两年前提出的研究申请的回应。该管理局将根据科学家的研究申请,逐个进行审查。这意味着英国科学家终于可以正式进行这类人兽混合胚胎研究。说是一类研究,是因为异种混合胚胎的实验实际上有三个等级:第一种是将某种动物的精子与另一种动物的卵子结合为受精卵,这类研究在伦理上是最不允许的,而且存在多种技术障碍。第二种叫“嵌合体”,就是将一种动物的胚胎干细胞注入另一种正在发育的动物胚胎中,令其发育为两种动物细胞混杂的胚胎,其最终目的是为人体器官修复提供备件,英国方面还没有给这类实验“开绿灯”。第三种也就是这次批准的实验类型,具体来说,是运用体细胞核转移技术,将一种动物的细胞核注入去核的牛或兔、羊的卵母细胞,以培养早期胚胎(囊胚),并从中提取胚胎干细胞。首个发表论文的机构“异种混合胚胎的实验,我们一直在搞,而且是国际上首个正式发表论文的研究机构。”陈学进不无自豪地说。陈是上海交通大学医学院附属新华医院发育生物学研究中心的主任,他所说的“我们”,是指盛慧珍在这个研究所时带领的研究团队,当时,陈是她的副手。这个研究所在新华医院旁一个不起眼的小巷子里,占用了一栋白色的5层楼。“英国人事实上是要重复我们的工作。”陈学进说。1999年,盛慧珍离开工作了十多年的美国国立卫生院(NIH)的实验室,回到国内,担任当时的上海第二医科大学发育生物学研究中心的主任,并在以后承担了973“干细胞的基础研究与临床应用项目”。2002年,《自然》杂志曾以《干细胞研究在东方冉冉升起》为题介绍盛慧珍和其他一些中国科学家的工作。现在这篇文章还贴在发育生物学研究中心的一楼,但是,盛慧珍已经离开了这个研究团队,去美国继续研究工作。2003年,盛慧珍成了国内外媒体和科学界瞩目的科学家。那年8月,她领导的研究小组运用克隆技术,从外科废弃的皮肤组织中提取细胞,并将这些细胞融合到新西兰兔的去核卵母细胞中,成功获得数百个融合胚胎,其中有一百多例发育至囊胚阶段,并提取得到了胚胎干细胞。这篇论文当时发表在国内的《细胞研究》(CellResearch)上,这也是国内影响力最大的国际性学术刊物。《自然》、《华尔街日报》、《华盛顿邮报》均在文章发表的同一天和第二天做出了评论,因为这是国际上第一例人兽胚胎融合成功的报道。陈学进说:“去年英国为了人兽胚胎研究的工作而召开听证会,邀请了国际上三个专家,盛老师就是其中之一,这也说明她在这一领域的学术地位。”不得已的手段将人兽细胞融合,其实是科学家不得已的手段。人类的体细胞,比如皮肤细胞,是一种专门化的细胞,早就丧失了发育成胚胎的能力。但是,干细胞研究却发现,如果将卵母细胞的细胞核去掉,代之以这种体细胞的细胞核,就有可能让体细胞返老还童。卵母细胞如同神奇的魔法师,它含有的胞质物质,唤醒体细胞细胞核中潜藏的能力,并能让它发育到囊胚阶段,这样,科学家可以从中提取出胚胎干细胞——这类干细胞具有发育成所有种类细胞的可能性,将它们植入一些病人受损的脊髓、角膜、脑区,可能起到修补工的作用,帮助治疗一些曾认为回天无术的疾病,这就是所谓的“治疗性克隆”技术。而且,如果使用病人自己的体细胞,还可以消除免疫排斥的问题。可惜,这个技术并不成熟,成功率非常低,这就需要大量的卵母细胞。但是,从女性身上直接采取卵母细胞是非法的,陈学进介绍说,“只能与开展试管婴儿项目的机构协作,经同意,拿到一些多余的废弃卵子”。在没办法的情况下,科学家只好退而求其次,向动物要卵母细胞。好在动物的卵母细胞同样能“激发”人类的体细胞。但是,这项技术用到人身上,就得经过伦理方面的检查。虽然DNA主要在细胞核中,但细胞质中也有少量的遗传物质,即线粒体。它负责编码13个基因,主要功能是为生命活动提供能量。虽然比起细胞核中的几万个人类基因,这13个线粒体基因只是少量的“杂质”,然而人们担心,如果有人将这些混合胚胎发育成个体,这些家伙将给伦理学带来重大难题。但是,在科学家看来,这种担忧只是杞人忧天。研究发现,大部分的情况下细胞中的动物线粒体会随着胚胎发育逐渐丢失。再则,线粒体只是供能单位,并不编码与“人”特征有关的任何蛋白。但最关键的一点是,胚胎干细胞研究有条伦理底线,那就是人兽胚胎绝不允许被植入子宫内,而且在胚胎发育到14天以前就得把它毁掉。“这些胚胎最多到14天就终止了,而且不允许重新植入人或动物的子宫,不可能繁殖后代。明确了这些界限,也许会消除一大半的忧虑。”国家人类基因组南方研究中心伦理学部主任沈铭贤说,因此“国内对这方面的基础研究不限制”,正是沈铭贤所在的部门在当年为盛慧珍的论文作了伦理审定,他们的结论是“应予支持,但不能应用于临床” 。为什么不能应用于临床,沈铭贤解释说,因为还是有风险的,动物的线粒体“会不会与人的线粒体或别的成分发生相互作用,科学家并不知道”。更大的风险还是病毒,“有的病毒对人有害对动物却无害”。因此,这方面的研究必须“慎之又慎,科学上严格准入,伦理上严格把关”。“我们的积累断了”但是,973项目结题后,盛慧珍不再被交大医学院续聘,她离开了这个团队,主要在美国从事研究工作。关于盛的离开,“原因很复杂。”陈学进说。“技术上依然存在问题。”陈学进承认。2003年的那篇文章,差点可以发在《美国国家科学院院刊》,甚至已经被制成小样准备印刷,但是美国有专家不同意,因为对“囊胚中可以分离出胚胎干细胞”这一项的实验论证有争议,只好发表在国内的《细胞研究》上。而后来,“又陆陆续续做了一些这方面的工作,侧重研究机理,但是实验的重复性不好,成功率也不高。”陈学进说。人兽胚胎的研究难度很大,除了盛的工作,在国际上还没有正式发表的论文,陈学进认为,这个研究团队的工作还是不错的,在干细胞领域发表了不少文章,在国内国际处于领先地位,但是“国家和上海市不准备再支持了”。沈铭贤则认为,因为伦理上的一些争议,人兽胚胎的研究不容易得到正式发表,“国际上有支持也有反对的”,这是导致盛慧珍离开的“一部分原因”。但是肯定还有别的因素,“原因很多”,作为当年为盛慧珍工作做伦理审定的专家,沈铭贤跟盛慧珍比较熟,但是“作为局外人,很多问题我不方便说”。“盛老师比较失望。”李峰觉得。李峰是盛慧珍亲自招入的博士后,盛走了以后,他一直在这个研究所继续工作。李峰认为“盛老师对周围环境不满意,她如果选择留下来,肯定是有能力拿到项目资助的”。但是盛慧珍还是选择了离开。因为盛的离开,这个研究所现在得到的资助很少,“与中科院合作的部分停止了,仪器被收回去了一部分,其他的我们借到年底,现在主要靠我申请到的项目资助。”陈学进说,“但是很难。”这个5层楼的楼房原先有四五十个学生,但是现在只剩下十多个,楼里显得空荡荡的。陈解释说,“因为实验大多在晚上做。我们现在主要做克隆猪的实验,要从屠宰场取新鲜的卵母细胞,而屠宰场杀猪是在晚上。”克隆猪是他现在的研究课题,这是陈学进与农委合作的一个项目。而李峰还在做盛慧珍留下的延续课题,是与中科院动物所的陈大元研究组合作,做“人牛胚胎”的遗传分析,动物所那边将人的体细胞与牛的卵母细胞融合,发育成胚胎,“已经拿到囊胚了,我们来做分析。”李峰说,“这也是盛老师的意思,她想在多个物种上证明她的结果,因为不同动物的卵母细胞的重编程能力不一样。有可能牛的就更容易成功。”但是现在他们只能做到囊胚,“不能继续从囊胚中分离胚胎干细胞”,因为“结题了,没有资金支持了”。陈学进说:“很多学生毕业就出国了,国内很难留住优秀的学生,李峰做完这期博士后以后也要出国。但是科研需要积累,不能断,很多工作我们不做就失去了机会。”“盛老师走了以后,我们这里的积累就断了。”陈学进有点痛心。研究应该有延续性除了盛慧珍正式发表论文外,国际上做人兽克隆实验的尝试并不少。1998年,美国一家私营的“先进细胞公司”曾将人的面颊细胞核注入去核的牛卵母细胞,克隆出胚胎干细胞。陈学进说,“现在各国都在搞”,因为这方面的“前景很好”,如果治疗性克隆技术能得以突破的话,帕金森病、早老性痴呆等重大疾病的治疗都有可能得到突破。对人兽“嵌合体”的研究也很多。今年3月,美国内华达大学的伊斯梅尔·赞加尼教授培育出拥有15%人类细胞的绵羊,这项工作是将人的胚胎干细胞注入胎羊体内,这样,羊的胚胎在发育过程中将与人的胚胎干细胞混合生长,最终长成的成体羊混杂有人类细胞。这则“人-绵羊嵌合体”的报道曾在国内外激起很大反响。其实,在中国也有类似的研究,上海交大医学院的黄淑帧、曾凡一等人培育出了世界上第一头“人-山羊嵌合体”,相关论文发表在去年5月的《美国科学院院报》上,证明人类干细胞可存活于山羊体内。这类研究的意义在于,人类将可能从动物身上获得具有部分人类细胞的肝脏、肾脏、心脏等脏器,可用于人类器官移植手术。今年6月6日,来自美国和日本的三个科研小组分别对正常小鼠细胞进行基因重组改造,成功制造出“胚胎干细胞”,相关研究结果刊登在《细胞·干细胞》杂志和《自然》杂志网站上。这项研究将体细胞直接转变为胚胎干细胞,如果能在人类身上实验成功,就将回避长期以来围绕人类胚胎使用问题的伦理争论,被认为是干细胞研究领域的一项重大突破。陈学进说,“如果这项工作能成功,治疗性克隆就不用搞了,”但是他认为,“研究都是有延续性的,只有不断地尝试,才有可能有重大突破。”

同性生殖?主要是指两个雄性或者是两个雌性基因结合产生后代的生殖方式,在自然界中这种方式是受到限制的。没有一个生物能够进行这种奇葩的繁殖方式。

但在人类科学技术的推动下,两个同性小鼠就诞生了自己的后代。这项研究是中科院进行的,研究论文发表在了《细胞干细胞》(Cell stem cell)上。

地球上的生物没有一个能够真正做到永生的,那为了生命世世代代的繁荣,自然界就允许生物进行繁殖,以传递自己的基因。

在自然界中生物进化出来的繁殖方式有两种:有性生殖和无性生殖。

有性生殖的方式大家都非常熟悉,因为我们的繁殖方式就是属于这一种,通过雌性和雄性生殖细胞的融合,所产生的后代具有两个亲本各自一半的基因。

这种生殖方式必须有雌雄的共同参与,缺一不可。

无性生殖的方式,很明显就不需要雌雄生殖细胞的结合过程,这种繁殖方式更多的发生在植物的身上和微生物的身上,例如孢子生殖、分裂生殖。

在动物身上我们也看到这种现象,普遍存在无脊椎动物、爬行动物、两栖动物身上,部分脊柱动物身上,这些动物雌性的卵细胞在特定的环境下不用授精,就能发育成一个完整且健康的个体。

因此在动物身上的这种无性生殖往往也被称为孤雌生殖。例如:母鸡没有受精的卵有时也能孵化出小鸡,这是我们生活中最近的例子。

听了孤雌生殖当然你也会想到孤雄生殖,也就是雄性的繁殖细胞发育成了一个完整的个体,虽然这听起来不可思议,在自然界极其罕见,但也有这种现象,目前我们只在斑马鱼这种生物的雄性身上发现了此现象。

你有没有发现,能够进行无性生殖的生物都是一些低等生物,而像哺乳动物这样的高等生物只有通过有性生殖才能繁殖。

是的!哺乳动物包括我们人类在内想要生宝宝就必须两性繁殖细胞结合,因为这种生殖方式具有无性生殖所不具备的强大优势,这也解释了为什么高等生物都必须进行有性生殖。

你看,在有性生殖的时候,来自两个亲本的基因会被打乱,然后随机重组,每一次重组出来的基因结构都不一样,这就是为什么“龙生九子,各不相同”。

这样的生殖方式不仅增加了基因突变的几率,加快了物种的进化,而多样性的基因组合也让后代有了更多的适应环境的能力和机会,换句话说,多生几个总有一个能出人头地。

而无性生殖就不具备以上所有的优势,只采用无性生殖的生物,已经被认为走向了进化的尽头,因为无性生殖出来的后代跟单个亲本具有完全一样的基因,像是复制出来的一样。

由于缺乏基因的多样性,这样的生物就没有抵抗灾难和疾病的能力。但无性生殖也有自己的优势,在没有雄性的情况下进行生殖更加省事、节省能量,繁殖速度也快,就是简单的复制自己。

因此这种生殖方式依旧被一些低等生物采用,它们在环境适宜的情况下,在找不到雄性的情况下,就可以通过无性生殖繁殖后代,在环境恶劣的情况下,它们又会进行有性生殖。

这就是所谓的顺风浪、逆风猥琐发育。

为什么哺乳动物就不能进行无性生殖呢?为什么自己的生殖细胞就不能独自发育成一个完整的个体呢?

这其实跟我们染色体中的特定DNA片段上的“基因印记”有关,你看,我们身体上包含的所有信息、以及制造各种蛋白质的能力都来自父母双方。

但是单个亲本给我们的基因在表达某些蛋白质的时候就受到了“基因印记”的限制,也就是说不能制造某些发育必须的蛋白质;

上图:取甲基化可以消除基因印记。

这些不能制造的蛋白质就需要另外一个亲本的基因来制造,它们两个互补就诞生出了我们身体内所需的完整蛋白质信息。

所以哺乳动物并不能进行孤雌生殖,也不能依靠两组雌性或者两组雄性的基因产生出一个新的个体。必须是雌雄结合互补才行。

因此科学家一直在试图打破这种限制,让哺乳动物也可以进行无性繁殖,如孤雌生殖或者是孤雄生殖,克隆技术就是突破这一限制的成功技术,多利羊就是一个典型的代表。

所采用的方式就是在生物体上获取体细胞(表皮或者血液细胞),然后将这些体细胞经过基因编辑转化为诱导多功能干细胞,这种干细胞就可以发育成一个生物体身上的任何细胞,甚至是生殖细胞。

然后将这种干细胞的细胞核移植到一个卵母细胞中,经过体外培养可以让它发育成胚胎,最后再将胚胎移植到另外一个雌性个体的子宫,让其开始发育成为完整的个体。

所克隆出来的个体,跟提供干细胞的个体拥有一样的基因,就像是复制体一样,这就是无性生殖的一种方式。

目前我们还可以利用这种方式在其他的动物身上克隆人体所需要的器官,方法是将可以发育成人体各种细胞的诱导多功能干细胞移植到经过基因编辑的动物胚胎内,让这些干细胞发育成我们所需要的器官,这项技术目前还在研究中。

但是中国科学家所作的实验虽然跟上文中一直提到的无性生殖(孤雌、孤雄生殖)很相似,但有本质的区别,他们研究的是同性生殖,简单说就是将两个雄性或者是两个雄性的基因融合在一起,让它们产生后代。

这样的后代是两套基因的杂合体,具有有性生殖的优势,后代有两个父亲或者是两个母亲,比克隆更加复杂。

具体的方法是从限制哺乳动物无性繁殖的“基因印记”上着手,通过获取雌性小鼠的体细胞,将它们通过基因编辑手段转化为诱导多功能干细胞,并将其在体外培养成单倍体胚胎干细胞。

通过去甲基化删除单倍体胚胎干细胞基因中的三个印记区段,并将其注入到卵母细胞中,最终就诞生出了一个健康、功能完整的、有两个母亲没有父亲的小鼠。

并且这个小鼠长到成年,还跟其他小鼠进行了有性繁殖。一切正常。

通过以上的方法,也首次实现了哺乳动物的孤雄性生殖,当然孤雄生殖所用的就不是卵细胞了,而是由多功能干细胞培养出来的精子。

然后通过去甲基化科学家将其中的7个印记区段进行了删除,形成了无印记雄性生殖细胞,并将其与另外一个雄性生殖细胞一起注射进去核卵母细胞中。

同样获得了一个有两个父亲的小鼠,但是这个小鼠有很多的健康问题,不到48小时就夭折。

这说明孤雄生殖要比孤雌生殖难得多,也许是因为删除的“基因印记”不够多,也许是还有一些我们未知的原因。未来还有待研究。

那么这项技术在小鼠的身上获得了初步成功,那人类呢?以后我们不再仅仅依靠克隆技术来克隆自己,克隆出来的个体跟自己有一样的基因,不利于进化。

而同性生殖跟异性生殖一样,后代来自两个成熟的个体,是两个个体的基因组合,也就是男性和男性可以生宝宝,女性和女性也可以生宝宝。

我认为这项技术未来一定可以成熟到能诞生出首个同性后代,这就要看我们敢不敢这么做,就像克隆技术一样,我们并不敢把它用在人类身上。

发表的关于细胞治疗的论文

细胞工程论文

细胞工程是生物工程的一个重要方面。总的来说,它是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法,按照人们的设计蓝图,进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。下面是我为大家整理的细胞工程论文,欢迎阅读。

【摘要】 目的制作去细胞肌肉组织工程支架,并检测其与人羊膜上皮细胞的生物相容性。方法 采用TNT和十二烷基磺酸钠结合的化学萃取方法制作去细胞肌肉组织工程支架,冰冻切片观察其结构。将人羊膜上皮细胞种入支架培养7 d后,用免疫组化检测羊膜上皮细胞的增殖活性、NT3及BDNF的表达,扫描电子显微镜观察其超微结构。结果 支架中细胞去除完全,其主要结构为平行排列的管状结构。细胞外基质的主要成分弹性纤维和胶原纤维保持完好。羊膜上皮细胞在支架里有增殖活性,并呈现NT3、BDNF免疫反应阳性。扫描电镜显示,羊膜上皮细胞在支架中分布均匀,生长良好。结论 成功的制作了去细胞肌肉组织工程支架,其与人羊膜上皮细胞有良好的相容性。

【关键词】 去细胞肌肉;人羊膜上皮细胞;生物相容性

近年来组织工程研究的重要进展之一就是采用自体或异体移植物制作天然生物降解材料的组织工程支架。其中去细胞移植物与机体有良好的生物相容性。去细胞肌肉支架可作为生物工程支架支持神经细胞轴突再生。Mligiliche等〔1〕把去细胞肌肉移植入大鼠坐骨神经缺损处,4 w后发现有大量神经轴突长入去细胞肌肉支架中。由于单独应用去细胞肌肉支架治疗神经系统疾病的效果有限,去细胞肌肉支架要发挥更大的作用往往需要向支架中植入种子细胞〔2,3〕。研究表明羊膜上皮细胞可分泌多种神经因子〔4,5〕,促进神经元轴突的生长,是一种良好的治疗神经系统疾病的种子细胞。本研究利用化学去细胞的方法制成去细胞肌肉支架,并把羊膜上皮细胞种入去细胞肌肉支架内,探究两者的相容性,为开展组织工程治疗神经系统方面的疾病提供新的途径。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 Wistar 大鼠由吉林大学白求恩医学院实验动物中心提供。

1.1.2 试剂 IMDM培养基及小牛血清由Hyclone 公司提供。5′溴尿嘧啶核苷(BrdU) 及BrdU 单克隆抗体购自Neomarker公司;神经营养素(NT)3,脑源性神经营养因子(BDNF)兔抗人多克隆抗体购自武汉博士德公司,SABC免疫组化试剂盒购自福州迈新生物公司。人羊膜上皮细胞株为本实验室保存。

1.2 方法

1.2.1 去细胞肌肉支架的制备 参考 Brown等〔6〕去细胞膀胱的制作方法制备去细胞肌肉支架,简述如下:取Wistar大鼠腹锯肌,放入蒸馏水中,在摇床中以37℃、50 r/min摇48 h后,转入3%的TritonX100溶液,摇床中37℃、50 r/min摇48 h。然后放入蒸馏水中,摇床37℃、50 r/min摇48 h。换成1% SDS溶液,摇床37℃,50 r/min摇48 h。PBS洗24 h。PBS中4℃保存备用。

1.2.2 支架形态结构的观察及成分鉴定 肉眼观察去细胞肌肉的形态。去细胞肌肉用4%多聚甲醛PBS固定1 h,5%蔗糖90 min,15%蔗糖90 min,30%蔗糖过夜以梯度脱水,OCT包埋,冷丙酮速冻,之后放入-70℃冰箱保存。恒冷箱切片机切片,HE 染色,观察其内部结构。此外对切片进行Van Gienson(VG)染色和 Weigert染色(VG+ET染色)检测支架的细胞外基质成分。

1.2.3 人羊膜上皮细胞的培养 人羊膜上皮细胞在DMEM培养液中(含10%胎牛血清,100 U/ml青霉素,100 mg/ml链霉素,200 μg/ml的谷氨酰胺),37℃、5 % CO2及饱和湿度条件下的细胞培养箱中培养,隔天换液,待单层培养细胞生长至80%汇合后,传代培养。

1.2.4 人羊膜上皮细胞与去细胞肌肉支架相容性的鉴定

1.2.4.1 取生长良好的人羊膜上皮细胞,80%细胞接近融合,弃去培养液,0.25%胰蛋白酶消化,当胞体回缩,细胞间隙变宽时,用血清终止消化,反复轻吹瓶壁细胞,制成单细胞悬液于离心管中,1 000 r/min,离心3 min。用DMEM重悬细胞。用1 ml注射器吸入细胞悬液,以2×106/ml 密度注入去细胞肌肉支架中分装至24孔板中,在37℃、5 % CO2及饱和湿度条件下的细胞培养箱中培养,隔天换液,培养1 w。掺入Brdu(终浓度为10 mg/L),继续培养1 d后,恒冷箱切片机切片(方法同前)。切片经PBS 洗后,3% H2O2灭活内源性过氧化物酶10 min,血清封闭20 min;一抗用BrdU(1∶1 000稀释)单克隆抗体,BDNF和NT3多克隆抗体(1∶100稀释)4℃孵育过夜,PBS 洗后,二抗37℃孵育30 min,PBS 洗后,SABC37℃孵育30 min,DAB显色。光镜下观察。

1.2.4.2 扫描电子显微镜鉴定羊膜上皮细胞在去细胞肌肉支架上的生长情况 取生长良好的人羊膜上皮细胞,80%细胞接近融合时,用上述方法消化下来后,把羊膜上皮细胞种植到去细胞肌肉支架中,放在24孔板中,在37℃、5 % CO2及饱和湿度条件下的细胞培养箱中培养7 d后,用2%戊二醛固定后,梯度乙醇脱水,CO2临界点干燥,镀膜,采用扫描电子显微镜观察并拍照。

2 结 果

2.1 支架的组织结构与成分 去细胞肌肉外观呈乳白色,半透明,质地柔软。从大体上看,肌肉去细胞前后整体大小与形状无显著变化。支架纵切面的HE染色观察可见骨骼肌细胞成分消失,而纤维网架结构保持完整,支架内主要为平行管道。VG+ET染色证明支架成分主要为胶原纤维和弹力纤维等细胞外基质成分,胶原纤维为红色波浪状结构,弹性纤维为蓝色丝状结构,见图1。

2.2 羊膜上皮细胞与去细胞肌肉支架的兼容性 见图2,HE染色显示人羊膜上皮细胞在支架中生长良好,分布均匀(图

图1 去细胞肌肉支架大体与组织切片染色

图2 去细胞肌肉支架的病理图片2A)。免疫组化染色显示,BrdU阳性细胞数目多,提示支架中的人羊膜上皮细胞有增殖能力(图2B)。抗NT3和BDNF染色显示,支架中的人羊膜上皮细胞含有NT3、BDNF阳性颗粒,呈棕褐色分布在细胞质中(图2C,2D)。JSM5600LV扫描电子显微镜显示,在支架内部分布有大量细胞,细胞在支架中分布比较均匀,生长状态良好(图2E)。

3 讨 论

理想的支架材料应与细胞外基质类似,与活体细胞有良好的生物相容性〔7,8〕。去细胞肌肉作为治疗神经损伤的生物工程支架材料有如下优势:(1)去细胞肌肉的细胞外基质成分对组织细胞的'迁移、黏附、生长代谢都有重要作用,研究表明再生的轴突可以很好的黏附在去细胞肌肉支架上〔9〕。(2)去细胞肌肉的排列结构与神经膜管类似,仅在直径上略大于神经膜管〔10〕,它们提供了轴突可生长穿过的足够空间〔9〕,该结构对于诱导神经轴突再生是十分重要的。 Fansa等比较了接种施万细胞的不同去细胞生物材料(肌肉,静脉,神经外膜)桥接缺损的外周神经的结果,发现缺乏神经膜管样结构的去细胞肌肉支架(静脉和神经外膜支架)中的再生轴突是无序和排列混乱的,而有神经膜管样结构的去细胞肌肉支架中的再生轴突是有序排列的〔11〕。这种轴突再生的有序性对神经损伤的轴突再生同样也是十分重要的。(3)去细胞肌肉引起的免疫排斥反应较小〔9,12〕。这些优势都说明去细胞肌肉可作为治疗神经损伤的理想的材料。本研究采用的制作去细胞肌肉的方法主要用来减少异种移植材料的免疫排斥反应。该方法能有效的去除脂膜和膜相关抗原以及可溶性蛋白,并能有效的保留细胞外基质成分的原始空间结构。肌细胞正常呈平行分布,其细胞外基质成分也是平行分布的,从支架纵切面的结果看支架的纤维成分也是平行排布的,VG+ET染色结果显示细胞外基质的主要成分胶原纤维和弹性纤维保持完好。这些结果进一步证实此方法可成功制备去细胞肌肉支架。

由于单独应用去细胞肌肉支架治疗神经系统疾病的效果有限〔13〕,去细胞肌肉的生物相容性也有待验证。本研究用人羊膜上皮细胞作为种子细胞种入去细胞肌肉支架以探讨其相容性。研究表明,羊膜上皮细胞中含有多种生物活性因子,包括黏蛋白、转移生长因子、前列腺素E、表皮生长因子样物质,IL1,IL8 等因子,另外,还可分泌BDNF和NT3等重要的神经营养因子〔4〕。其中层黏蛋白、BDNF和NT3等生物活性因子对神经损伤的治疗具有十分重要的作用。羊膜上皮细胞可作为一种较理想的种子细胞,与去细胞肌肉支架结合可能成为治疗神经系统疾病的一个理想的组织工程材料。本实验观察到人羊膜上皮细胞在去细胞肌肉支架中分布均匀,抗BrdU、BDNF及NT3免疫组化显示去细胞肌肉支架中羊膜上皮细胞有良好的增殖能力,并能表达BDNF和NT3,说明羊膜上皮细胞在去细胞肌肉支架中保持了良好的生物学活性。以上结果一方面证明了本研究制作的去细胞肌肉支架有良好的生物相容性,另一方面为应用羊膜上皮细胞和去细胞肌肉支架结合治疗神经系统疾病提供了理论和实验基础。

总之 ,本研究成功制备了去细胞肌肉支架,并证实人羊膜上皮细胞在去细胞肌肉支架中能分泌重要的神经营养因子,人羊膜上皮细胞与去细胞肌肉支架桥接体为神经缺损再生提供了基底膜、神经营养因子等种种有利因素,构成了良好的神经再生微环境,有利于使神经缺损得到较好地修复,为进一步研究羊膜上皮细胞与去细胞肌肉支架桥接体治疗神经损伤奠定了一定的实验基础。

【参考文献】

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2 Fansa H,Keilhoff G,Forster G,et al.Acellular muscle with Schwanncell implantation:an alternative biologic nerve conduit〔J〕.J Reconstr Microsurg,1999;15(7):5317.

3 Gulati AK,Rai DR,Ali AM.The influence of cultured Schwann cells on regeneration through acellular basal lamina grafts〔J〕.Brain Res,1995;705(12):11824.

4 朱 梅,陈 东,盂晓婷,等.羊膜上皮细胞移植治疗帕金森病大鼠的实验研究〔J〕.中国老年学杂志,2006;26(2):2279.

5 Meng XT,Chen D,Dong ZY,et al.Enhanced neural differentiation of neural stem cells and neurite growth by amniotic epithelial cells coculture〔J〕.Cell Biol Intern,2007;31:6918.

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10 李培建,胥少汀.去细胞肌肉支架移植及神经生长因子对脊髓横断性损伤的修复作用〔J〕.中国脊柱脊髓杂志,2000;10(4):2203.

11 Fansa H,Keilhoff G.Comparison of different biogenic matrices seeded with cultured Schwann cells for bridging peripheral nerve defects〔J〕. Neurol Res,2004;26(2):16773.

12 Brown AL,Farhat W,Merguerian PA,et al.22 week assessment of bladder acellular matrix as a bladder augmentation material in a porcine model〔J〕.Biomaterials,2002;23:217990.

13 李培建,李兵仓,胥少汀.肌基膜管移植修复脊髓缺损的实验研究〔J〕.中华创伤杂志,2001;17(9):5258.

张海龙博士近年发表的主要论文:1.张海龙,侯铁胜 细胞治疗椎间盘退变的研究进展。中国脊柱脊髓杂志, 2007, 17:226-228.2.张海龙,傅强,赵鑫,陈元贵,吴大江,侯铁胜 兔骨髓间充质干细胞在壳聚糖支架上的诱导培养,中国脊柱脊髓杂志,2008,18:385-388.3.张海龙,傅强,葛星野,赵鑫,陈元贵,尚保华,侯铁胜 双钢板在颈前路手术中的应用,中国矫形外科杂志,2008,16:325-327.4.张海龙,贺石生,侯铁胜,张立国 颈椎髓外硬膜内外周性原始神经外胚层瘤诊治,中国神经免疫学和神经病学,2011,1:60-62..5.Hai-Long Zhang, Multiple brown tumors — A diagnostic dilemma, The Endocrinologist,2010,20:152-154.6. 张海龙,贺石生, 侯铁胜,蔡郑东,张立国. 颈椎髓外硬膜内外周性原始神经外胚层瘤的诊治.中国神经免疫学和神经病学杂志 2011年18卷01期7. Ning Yan, Hailong Zhang (coauthor), GU Guang-feiL,IU Bi-feng,LIU Yan-bin,ZHANG Li-guo,GU Xin, DING Yue, GUO Cheng-bin ,HE Shi-sheng. Magnetic Resonance Imaging Analysis of Surgical Trans-sacral Axial L5/S1 Interbody Fusion. Chinese Medical Journal. 2011年 18 期8. 张海龙,顾昕,贺石生, 顾广飞 ,张立国 ,丁悦 ,贾建波 ,周旭 ,袁超群 ,李佳怡, 袁嘉敏. 微创经椎间孔椎体间融合术与开放手术治疗腰椎滑脱症的疗效比较. 中华骨科杂志 2011年10期9. 张海龙,贺石生,丁 悦,顾广飞,李忠海,侯铁胜.颈前路椎体次全切除融合术后邻近节段病的手术治疗[J].中国脊柱脊髓杂志,2012,(1):92-94.10. 赵鑫, 张海龙,黄师, 严宁, 侯铁胜. 骨髓间充质干细胞复合藻酸盐凝胶支架修复兔退变椎间盘的效果,上海医学,2008,31:562-56511. 赵鑫,黄师, 张海龙,白玉树,石健,赵新刚,严宁,侯铁胜,人骨形成蛋白7基因转染骨髓间充质干细胞对兔退变椎间盘蛋白多糖的影响 . 中国临床解剖学杂志,2008,4:413-41512. 赵鑫, 赵新刚,张海龙,黄师,刘超乾,侯铁胜 .纤维环穿刺法与髓核抽吸法建立兔椎间盘退变模型的比较 . 解剖学杂志,2008, 31: 394-39613. 李忠海,赵杰,张海龙,侯铁胜, 陈志明,马辉,王聪.二期前后路手术治疗颈椎后纵韧带骨化症的疗效分析.中国骨与关节损伤杂志,2009,24:964-96714. Jingfeng Li, MD, Hongxing Shen, MD, Tiesheng Hou, MD, Ming Li, MD, Shisheng He, MD, and Hailong Zhang, MD.Acquired Hemophilia A in a Patient With Lumbar Disc Herniation. SPINE, 2009, 34:305-308

你看看这是不是你需要的类型论文,不过我还是建议只是参考,自己写最好了。 干细胞作为一种既有自我更新能力、又有多分化潜能的细胞,具有非常重要的理论研究意义和临床应用价值。近几年来,干细胞的研究取得了重大突破, 1999和2000年,世界最权威的美国《Science》杂志连续2年将干细胞和人类基因组计划列为当年的10大科学突破之首。美国《时代》周刊认为干细胞和人类基因组计划将同时成为新世纪最具有发展和应用前景的领域。为抢占这一科技制高点,世界各国纷纷投入大量的人力、物力和财力加紧研究开发,并已取得应用性成果:2005年10月,美国食品和药物管理局(FDA)也已批准将神经干细胞移植入人体大脑;2005年11月,美国心脏协会报道了干细胞治疗心肌梗塞的204例临床病例的研究报告,其结论是干细胞对心脏功能的改善效果,是没有任何现有临床药物能达到的;日本在2000年启动的“千年世纪工程”中,将干细胞工程作为四大重点之一,于第一年度就投入了108亿日元的巨额资金;瑞典、巴西也于2005年通过立法继续支持干细胞研究,并于2005年进行一项多中心1200病例的用干细胞治疗心脏病的临床应用研究。干细胞技术作为生物技术领域最具有发展前景和后劲的前沿技术,将可能导致一场医学和生物学革命,给无数疑难病症治疗带来了新的希望。 按照科学家描绘的美妙蓝图,通过干细胞技术的有效应用,今后更换人体器官就像给汽车换零件一样简单,血细胞、脑细胞、骨骼和内脏都将可以更换,即使患上绝症也能绝处逢生。其实,干细胞技术不仅在疾病治疗方面有着极其诱人的前景,而且其对动物克隆、植物转基因生产、发育生物学、新药物的开发与药效、毒性评估等领域也将产生极其重要的影响。干细胞技术是世纪之交最为引人注目的科技成果,被认为是人类生命科学研究的重要里程碑,预示着生命科学研究将进入快速发展时期。 参考资料:

干细胞期刊投稿

开源类的期刊不知道你有了解过没,也还可以的,世界肿瘤研究,你去看看

这个期刊偏重干细胞方面的研究,主要接受一些有关干细胞的综述,也有实验类的文章,3个审稿人。我综述的一审回来后,1个专家基本没有什么意见,另外一个只是指出了一些语法和逻辑问题,只有一个审稿人的意见比较大,编辑态度很好,建议修改,修改过程中编辑来信催了2次,修改完投出后2周就直接接收了。接受以后很快就给了proof,校样以后2天就可以在期刊的网站上看到论文摘要了,大概1周后就可以在Pubmed中检索到了。另外,这个期刊如果不需要其他的服务,可以不用交钱。

第三军医大学综合:中国现代医学杂志。第四军医大学学报(改名为:医疗争)4 5中国现代医学南方医科大学,第二军医大学7解放军医学8。北京大学医学科学..... 肿瘤:肿瘤放射肿瘤学杂志。中国临床肿瘤学杂志。肿瘤的5名中国癌症癌症研究中国肺癌杂志中国癌症预防医学中国期刊杂志......很多。 需要为=发=表= 5 =来=发现= I。

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