论文格式 1、毕业论文格式的写作顺序是：标题、作者班级、作者姓名、指导教师姓名、中文摘要及关键词、英文摘要及英文关键词、正文、参考文献。
2、毕业论文中附表的表头应写在表的上面，居中；论文附图的图题应写在图的下面，居中。按表、图、公式在论文中出现的先后顺序分别编号。
3、毕业论文中参考文献的书写格式严格按以下顺序：序号、作者姓名、书名（或文章名）、出版社（或期刊名）、出版或发表时间。 4、论文格式的字体：各类标题（包括“参考文献”标题）用粗宋体；作者姓名、指导教师姓名、摘要、关键词、图表名、参考文献内容用楷体；正文、图表、页眉、页脚中的文字用宋体；英文用Times New Roman字体。
5、论文格式的字号：论文题目用三号字体，居中；一级标题用四号字体；二级标题、三级标题用小四号字体；页眉、页脚用小五号字体；其它用五号字体；图、表名居中。 6、格式正文打印页码，下面居中。
7、论文打印纸张规格：A4 210*297毫米。 8、在文件选项下的页面设置选项中，“字符数/行数”选使用默认字符数；页边距设为 上：3厘米；下：2.5厘米；左：2.8厘米；右：2.8厘米；装订线：0.8厘米；装订线位置：左侧；页眉：1.8厘米；页脚1.8厘米。
9、在格式选项下的段落设置选项中，“缩进”选0厘米，“间距”选0磅，“行距”选1.5倍，“特殊格式”选（无），“调整右缩进”选项为空，“根据页面设置确定行高格线”选项为空。 10、页眉用小五号字体打印“湖北工业大学管理学院2002级XX专业学年论文”字样，并左对齐。
11、使用软件：Microsoft Word 2000以上版本。 论文格式-论文网 一、学年论文基本要求 1、每位学生论文选题应有所区别，不得几位学生选同一题目； 2、论文写作应注意主题明确、结构合理、语音流畅； 3、论文内容较为新颖，不得抄袭他人已发表的学术论文，需要引用时，应注明引文出处； 4、论文排版整齐，插图清晰准确，全文篇幅恰当，字数在5 000~8 000之间。
5、学年论文定稿及交稿时间为7月6日。 二、打印格式 1. 毕业论文的写作顺序是：标题、作者班级、作者姓名、指导教师姓名、中文摘要及关键词、英文摘要及英文关键词、正文、参考文献。
2. 附表的表头应写在表的上面，居中；附图的图题应写在图的下面，居中。按表、图、公式在论文中出现的先后顺序分别编号。
3. 参考文献的书写格式严格按以下顺序：序号、作者姓名、书名（或文章名）、出版社（或期刊名）、出版或发表时间。 4. 字体：各类标题（包括“参考文献”标题）用粗宋体；作者姓名、指导教师姓名、摘要、关键词、图表名、参考文献内容用楷体；正文、图表、页眉、页脚中的文字用宋体；英文用Times New Roman字体。
5. 字号：论文题目用三号字体，居中；一级标题用四号字体；二级标题、三级标题用小四号字体；页眉、页脚用小五号字体；其它用五号字体；图、表名居中。 6. 论文正文打印页码，下面居中。
7. 打印纸张规格：A4 210*297毫米。 8. 在文件选项下的页面设置选项中，“字符数/行数”选使用默认字符数； 页边距设为 上：3厘米；下：2.5厘米；左：2.8厘米；右：2.8厘米； 装订线：0.8厘米；装订线位置：左侧；页眉：1.8厘米；页脚1.8厘米。
9. 在格式选项下的段落设置选项中，“缩进”选0厘米，“间距”选0磅，“行距”选1.5倍，“特殊格式”选（无），“调整右缩进”选项为空，“根据页面设置确定行高格线”选项为空。 10. 页眉用小五号字体打印“湖北工业大学管理学院2002级XX专业学年论文”字样，并左对齐。
11. 使用软件：Microsoft Word 2000以上版本。（请参见附件样张） 三、学年论文装订顺序 1、学年论文封面（标准格式见管理学院网站） 2、指导教师评语（标准格式见管理学院网站） 3、目录 4、正文 5、参考文献 学 年 论 文 题 目 姓 名 所在学院 专业班级 学 号 指导教师 日 期 年 月 日 学年论文指导教师评阅意见 学 生姓 名 专 业班 级 学号 （论文）题目 指导教师 教师职称 学年论文评语 评定成绩： 指导教师签名： 年 月 日 国有企业“错位”与非国有化问题 94市场营销 卢家茂 指导教师 蒋良揆 摘要：本文通过对国有企业职能的重新定位，阐述了当今国企改革的最佳途径，…………。
关键词：国有企业 非国有企业。 Abstract: This paper relocates enterprise of country's function…… Keywords: 1 一级标题 1.1 二级标题 1.1.1 三级标题 国有企业作为生产关系的一种组织形式，…………。
表1 95年 — 98年统计表 95年 96年 97年 98年 项 目 图1 增长趋势图 国有经济的产业分布既受产业性质所约束，又受国有企业的目标及制度优势所指导，……。
我们这个班，是一个团结友爱，互帮互助的班级。
在这个集体里，同学们都是大家庭中的一员，善良，是我们的口号；团结，是我们的力量；坚强，是我们的动力；快乐，友谊，健康，是我们的个性。那么，他见想知道在这个家庭里发生的事情吗？现在就跟我一起去看看吧！烈日当空，太阳 *** 辣的照射着大地，新建的塑胶操场被晒得滚烫滚烫的，树上的知了都不满的叫了起来，可以想象，这是多么热的上午。
可是，全校的学生一起站在这里，就是为了听校长宣布艺术节的开幕。天哪，太阳啊，你快点回家吧，不要再玩了，我们就快要被晒昏了。
这不，刚一乞求就发生了“昏倒事件”，我们班上的一位女同学是在经受不住太阳的照射，在众多同学前，优雅的倒下。同学们一看，可着急了，连忙把那个同学扶进教室，还从教室里拿来拖把，走到目的地，开始了清洁大扫除。
他们先用扫帚把残渣扫去，再用拖把使劲拖地。“嘿哟，嘿哟”三下两下就把地拖的干干净净。
还反反复复拖了好几次。没有帮忙做清洁的同学，都走到那位晕了的同学旁边，不停的安慰她。
事后，那位同学感激的不得了，连声说谢谢。还有一次，我们学校开展“体育节”，同学们听到这个消息，都高兴的不得了，都想一展身手。
到了比赛场上，那些要比赛的同学都在做热身运动，伸伸胳膊踢踢腿。这下进行的是200米比赛，我们班的同学都热血沸腾，不停的给比赛的同学加油。
比赛接近尾声，加油声一阵高过一阵，冲啊，那位比赛的同学一鼓作气，像长了翅膀似的冲向终点。耶，赢了，第一名！同学们相互击掌，满脸的笑容。
可是，不能忘了我们的功臣啊，同学们一个个的向他祝贺。此时，喜悦充满了整个班级。
看吧，这就是我们的班级，一个乐观向上的班级体，一个坚强的班级体，一个活泼开朗的班级体。在这班级里，有许许多多感人的事，也有许许多多悲伤的事，可是，快乐是我们的招牌，友谊在我们这个班级里变得重要万分。
说起我们班啊，那是一个字——棒。
你想不想知道我们班是怎么个棒法？如果想知道的话，你可要聚精会神，听我细细道来。 我们班之所以这么好，多亏了老班长纪雪梦以身作则带领我们好学向上。
她从三年级当班长到现在一直没有下岗，真是稳稳当当。她办起事来一本正经，铁面无私。
谁没有交作业要照实登记，连好朋友也不留情面。你要她办事呀，大可放心。
她总是全心全意帮你把事办好。你说，班里少了她那还能行吗？ 我们班还出了许多“虎将”呢！比如说我们班的“漫画专家”张鑫，别看他一副虎头虎脑的样子，想象力还真丰富，小小年纪居然写起了改编的小说《铁达尼号》，够厉害了吧。
“数学天才”王帆原本成绩平平，可经过努力，成绩扶摇直上。如今书上的题，一点儿难不住他，连老师都直夸他呢！ “记忆大师”纪丽丽可是我们班赫赫有名的大人物。
她的记忆力惊人，二十分钟可以背诵一篇课文。而古诗呢？只要读上三四遍就可以背过。
怎么样，说她是“记忆大师”一点儿也不为过吧。 “晚风轻拂澎湖湾，白浪逐沙滩……”噢，原来是“小歌手”王晓芝正在为同学们演唱歌曲呢！她放开喉咙，那甜润的嗓音时而激昂，时而婉转，时而……我们陶醉了，仿佛融入一个美妙的世界…… 咦，“劳动积极家”纪君鹏哪去了？噢，他在率领同学们大扫除呢！提起他，同学们无不夸赞。
他可是班上的“老黄牛”、“好公仆”呢。他总是带头参加劳动，脏活累活抢着干。
每天，教室里、清洁区、垃圾桶边都有他忙碌的身影。同学们都对这位“劳动积极家”充满了敬意。
“来，传给我！给我！”“进，好，又进一球！”操场上正紧张的进行一场篮球赛，“篮球家”周琅可真大显身手啦！这不，见他一个雀跃，接住来球，来到篮下，轻轻一投，进了！篮球赛真精彩！ “哈哈哈……”当听到同学们的傻笑声，就知道一定是“搞笑大王”纪起起了。他讲的的笑话可真是一流，只要听了他讲的的笑话，就不可能停止我们的傻笑。
有一次，他的邻座和后面的同学闹翻了，唇枪舌战一番后，还落了“金豆豆”呢。纪起起见了，计从心来，往前一凑笑嘻嘻地说：“娇小姐吵架落泪也挺好看的嘛！”同学们一听，哄堂大笑，一场干戈便化为玉帛啦！ 下面该介绍一下我的后位王川了。
你别小瞧了她，她可是我们班数一数二的“小画家”。她画的画栩栩如生，特别是素描，那真绝啦！她的每一幅作品出手，都让同学们和老师惊叹。
你猜，最后一位“虎将”是谁？告诉你，是我。我嘛，是一个“大师”——“写作大师”。
因为我上交作业上的作文曾被老师夸奖过，所以才有了“写作大师”这个称号。我一定好好写作文，不负众望！ 我们班的“虎将”说也说不完，我真为我有这样一个班级而感到骄傲！！这就是我的与众不同的班级。
。
My classroom is a huge room with many tables and chairs. My seat is in the middle of the classroom, not too far from the blackboard and not too close either. Daming is my deskmate and he sits on my right. The both of us sit in beeen Wendy and Betty.
我的教室是一个有很多桌子和椅子的大房间。我坐在教室的中间，离黑板不太远，也不太近。大明是我的同桌，他坐在我的右边。我们都坐在温迪和贝蒂之间。
木瓜 《诗经·大雅·抑》有“投我以桃，报之以李”之句，后世“投桃报李”便成了成语，比喻相互赠答，礼尚往来。比较起来，《卫风·木瓜》这一篇虽然也有从“投之以木瓜(桃、李)，报之以琼琚(瑶、玖)”生发出的成语“投木报琼”(如托名宋尤袤《全唐诗话》就有“投木报琼，义将安在”的记载)，但“投木报琼”的使用频率却根本没法与“投桃报李”相提并论。可是倘若据此便认为《抑》的传诵程度也比《木瓜》要高，那就大错而特错了，稍微作一下调查，便会知道这首《木瓜》是现今传诵最广的《诗经》名篇之一。 对于这么一首知名度很高而语句并不复杂的先秦古诗，古往今来解析其主旨的说法居然也有七种之多(据张树波《国风集说》统计)，实在是一件很有意思的事。按，成于汉代的《毛诗序》云：“《木瓜》，美齐桓公也。卫国有狄人之败，出处于漕，齐桓公救而封之，遗之车马器物焉。卫人思之，欲厚报之，而作是诗也。”这一说法在宋代有严粲(《诗缉》)等人支持，在清代有魏源(《诗古微》)等人支持。与毛说大致同时的三家诗，据陈乔枞《鲁诗遗说考》考证，鲁诗“以此篇为臣下思报礼而作”，王先谦《诗三家义集疏》意见与之相同。从宋代朱熹起，“男女相互赠答说”开始流行，《诗集传》云：“言人有赠我以微物，我当报之以重宝，而犹未足以为报也，但欲其长以为好而不忘耳。疑亦男女相赠答之词，如《静女》之类。”这体现了宋代《诗》学废序派的革新疑古精神。但这一说法受到清代《诗》学独立思考派的重要代表之一姚际恒的批驳，《诗经通论》云：“以(之)为朋友相赠答亦奚不可，何必定是男女耶！”现代学者一般从朱熹之说，而且更明确指出此诗是爱情诗。平心而论，由于诗的文本语义很简单，就使得对其主题的探寻反而可以有较大的自由度，正如一个概念的内涵越小它的外延越大，因此，轻易肯定否定某一家之说是不甚可取的。有鉴于此，笔者倾向于在较宽泛的意义上理解本诗，将其视为一首通过赠答表达深厚情意的诗作。 《木瓜》一诗，从章句结构上看，很有特色。首先，其中没有《诗经》中最典型的句式——四字句。这不是没法用四字句(如用四字句，变成“投我木瓜(桃，李)，报以琼琚(瑶、玖)；匪以为报，永以为好”，一样可以)，而是作者有意无意地用这种句式造成一种跌宕有致的韵味，在歌唱时易于取得声情并茂的效果。其次，语句具有极高的重叠复沓程度。不要说每章的后两句一模一样，就是前两句也仅一字之差，并且“琼琚”、“琼瑶”、“琼玖”语虽略异义实全同，而“木瓜”、“木桃”、“木李”据李时珍《本草纲目》考证也是同一属的植物．其间的差异大致也就像橘、柑、橙之间的差异那样并不大。这样，我们不妨说三章基本重复，而如此高的重复程度在整部《诗经》中也并不很多，格式看起来就像唐代据王维诗谱写的《阳关三叠》乐歌似的，——自然这是《诗经》的音乐与文学双重性决定的。 你赠给我果子，我回赠你美玉，与“投桃报李”不同，回报的东西价值要比受赠的东西大得多，这体现了一种人类的高尚情感(包括爱情，也包括友情)。这种情感重的是心心相印，是精神上的契合，因而回赠的东西及其价值的高低在此实际上也只具有象征性的意义，表现的是对他人对自己的情意的珍视，所以说“匪报也”。“投我以木瓜(桃、李)，报之以琼琚(瑶、玖)”，其深层语义当是：虽汝投我之物为木瓜(桃、李)，而汝之情实贵逾琼琚(瑶、玖)；我以琼琚(瑶、玖)相报，亦难尽我心中对汝之感激。清牛运震《诗志》评此数语云：“惠有大于木瓜者，却以木瓜为言，是降一格衬托法；琼瑶足以报矣，却说匪报，是进一层翻剥法。”他的话并非没有道理，但显然将木瓜、琼瑶之类已基本抽象化的物品看得太实，其他解此诗者似也有此病。实际上，作者胸襟之高朗开阔，已无衡量厚薄轻重之心横亘其间，他想要表达的就是：珍重、理解他人的情意便是最高尚的情意。 子衿 这首诗写一个女子在城楼上等候她的恋人。全诗三章，采用倒叙手法。前两章以“我”的口气自述怀人。“青青子衿”，“青青子佩”，是以恋人的衣饰借代恋人。对方的衣饰给她留下这么深刻的印象，使她念念不忘，可想见其相思萦怀之情。如今因受阻不能前去赴约，只好等恋人过来相会，可望穿秋水，不见影儿，浓浓的爱意不由转化为惆怅与幽怨：纵然我没有去找你，你为何就不能捎个音信？纵然我没有去找你，你为何就不能主动前来？第三章点明地点，写她在城楼上因久候恋人不至而心烦意乱，来来回回地走个不停，觉得虽然只有一天不见面，却好像分别了三个月那么漫长。 近人吴闿生云：“旧评：前二章回环入妙，缠绵婉曲。末章变调。”(《诗义会通》)虽道出此诗章法之妙，却还未得个中三昧。全诗五十字不到，但女主人公等待恋人时的焦灼万分的情状宛然如在目前。这种艺术效果的获得，在于诗人在创作中运用了大量的心理描写。诗中表现这个女子的动作行为仅用“挑”、“达”二字，主要笔墨都用在刻划她的心理活动上，如前两章对恋人既全无音问、又不见影儿的埋怨，末章“一日不见，如三月兮”的独白。两段埋怨之辞，以“纵我”与“子宁”对举，急盼之情中不无矜持之态，令人生出无限想像，可谓字少而意多。末尾的内心独自，则通过夸张修辞技巧，造成主观时间与客观时间的反差，从而将其强烈的情绪心理形象地表现了出来，可谓因夸以成状，沿饰而得奇。心理描写手法，在后世文坛已发展得淋漓尽致，而上溯其源，本诗已开其先。所以钱钟书指出：“《子衿》云：‘纵我不往，子宁不嗣音？’‘子宁不来？’薄责己而厚望于人也。已开后世小说言情心理描绘矣。” 以上资料来自网络
亲你好，海洋学领域国际知名期刊Frontiers in Marine Science在线发表了由上海交通大学海洋学院张召儒副教授、周朦教授与合作者的研究论文“ Spatial Variations of Phytoplankton Biomass Controlled by River Plume Dynamics Over the Lower Changjiang Estuary and Adjacent Shelf Based on High-Resolution Observations ”。文章提出包含冲淡水锋面动力过程在内的一系列中小尺度过程是调控长江口及邻近陆架海域浮游植物量变化和藻华爆发的关键机制，为我们重新审视河口近海生态系统动力学提供了新的视角与启示。文章在线发表后浏览量已达595次。文章发表于 Frontiers in Marine Science ，该期刊2019年影响因子为3.661。动力过程是调控河口和近海区域浮游植物量时空变化的重要因素。以往研究多是基于大面站调查结果，强调浊度和光限制的变化、地形诱导的上升流和黑潮次表层水入侵等中-大尺度过程对长江口附近海域浮游植物量和藻华发生的主导作用。本研究于2017年7月首次在长江口海域利用集成多传感器的拖曳式走航观测系统Acrobat（图1），获取了从河口到陆架海域的物理及生态要素的高时空分辨率观测断面（图2），在此基础上揭示了中-小尺度上的冲淡水锋面过程对长江口海域藻华爆发的控制作用，其中的关键因素包括锋面对物质的辐聚效应、真光层深度的变化及冲淡水扩散状态变化对浮游植物停留时间的延长等。该航次由张召儒副教授担任首席科学家，周朦教授参与航次并担任技术指导，航次参与人员还包括上海交通大学钟贻森老师、高咏卉副教授及周朦教授团队成员，华东师范大学吴莹教授及其团队成员，同济大学许惠平教授团队。图1. 项目团队于2017年7月在长江口邻近海域开展的海上调查航次，该航次综合利用了近海拖曳式走航观测系统Acrobat、表层水走航系统、漂流浮标、站位采样等多种观测方式。图2. 长江口南槽至陆架海域断面水文、层结频率、有色溶解有机物、浊度、光合有效辐射、叶绿素浓度、营养盐和表层溶解氧等参数的高时空分辨率分布特征。文章指出，长江口邻近海域的浮游植物量空间变化受多重尺度动力过程的影响，其中冲淡水锋面过程对藻华的爆发起到决定性作用。初级生产力的出现起源于长江冲淡水主锋面所致的垂向层结及其对泥沙悬浮的抑制和对光照条件的改善，营养盐最大水平梯度发生在该区域，但其浓度的迅速下降主要由淡水和海水的混合所致。长江口藻华发生于冲淡水主锋面的露头位置（称之为表锋面），漂流浮标结果（图3）显示该位置存在显著的物质辐聚效应，是导致浮游植物汇聚和藻华发生的重要因素；同时，辐聚导致下降流的产生，进一步增加了真光层的深度；此外，锋面外海一侧存在波动信号，伴随了冲淡水运动由超临界状态向亚临界状态的转变，增加了冲淡水及其携带的浮游植物在表锋面附近的停留时间，为藻华的发生进一步提供了有利的条件（图4）。图3. 航次中在长江口北港外侧释放的5个表层漂流浮标在124°E以西的漂流轨迹与速度。图（A）和（C）揭示了冲淡水表锋面附近流动状态的改变及其物质辐聚效应。图4. 多重尺度物理过程对长江口邻近海域浮游植物量及相关生物地球化学过程的调控作用与机理。本文第一作者为上海交通大学海洋学院长聘教轨副教授张召儒，通讯作者为上海交通大学周朦教授和张召儒副教授，合作者还包括上海交通大学钟贻森老师、高咏卉副教授、张瑞峰副研究员、Walker Smith教授，以及华东师范大学的张国森和江山博士。该研究由国家自然科学基金重点项目“长江口冲淡水的对流、扩散和物质转换综合过程”（41530960）资助，上海交通大学海洋学院周朦教授为该项目负责人，参加单位包括上海交通大学、华东师范大学和同济大学。张召儒，上海交通大学海洋学院长聘教授副教授，博士生导师。2007年本科毕业于中国海洋大学，2013年博士毕业于美国德克萨斯农工大学，2014年至今任职于上海交通大学海洋学院。研究领域包括近海动力学、极地海洋-海冰动力学和海洋物理-生态耦合过程，目前已经在Progress in Oceanography, JGR-Oceans, Climate Dynamics,Ocean Modelling和Frontiers in Marine Science等期刊发表SCI论文18篇。担任海洋学领域知名国际期刊Journal of Marine Systems责任编委，美国地球物理学会期刊AGU Advances总编遴选委员会委员和Ocean Sciences Meeting主席遴选委员会委员。
1、 文稿要求内容精练、论点明确、数据可靠、行文流畅，“研究报告”、“综述”一般在3500字（2版）最多不超过3版（包括图、表）。英文摘要和英文题目必须是中文的译文（中文150～300字，外文不超过250个实词）、关键词（3～5个）、中图分类号（查阅“中国图书馆分类法”）、作者单位及汉语拼音的作者姓名；“实验与技术”、“研究简报”要附英文题目及汉语拼音的作者姓名、单位名称；“论文摘要”等文章一般在1000字以内。2、 来稿请提供激光打印稿一式两份（A4纸小4号通栏打印，作者自留副本），并附作者工作单位证明介绍信。稿件须注明联系人详细通讯地址（邮政编码、电话、传真、电子信箱等）、第一作者个人信息（性别、职称、所获学位、现研究方向等），以便处理稿件时能及时与作者联系。3、 文中所用计量单位及符号均按近期公布的“中华人民共和国法定计量单位”书写，非许用单位，务请换算成许用单位。来稿务必做到清稿定稿。稿件中的外文字母、符号必须分清大、小写，正、斜体，上下角的字母、数码、符号，位置高低应区别明显。容易混淆的字母、符号等在首次出现时，请用铅笔注明。4、 文中插图随文排（先见文，后见图）。曲线图一律要求电脑绘制；照片必须黑白分明，影像清楚，如是显微镜或电镜照片应注明倍数。文中画一方框，表明其插图位置，并将图题、图注写在方框下，图及照片大小一般不超过45mm×65mm；同一稿件图及照片尺寸尽可能相同，不用圆形照片；图片实际宽度（指印出后的横向长度，包括坐标轴的刻度值名称等在内）一般不超过70mm；特殊情况不超过125mm。图中文字、数字和符号应与正文一致，图题、表题（包括图表内项目）要注明英文。5、 论文第1页注脚处，请注明科研项目来源，并附课题号及受资助情况（各种科技发展基金、科技发展计划、重点实验室资助等，务必注明项目编号）及第一作者姓名、性别、职称、学位、研究方向等情况。本刊对国家自然科学基金资助项目及具有前沿课题取得突破性进展的优秀论文将优先发表，并开展优秀论文评选活动。本刊发表的论文，凡涉及获省（部）级以上成果奖者，请及时与本刊联系，提供获奖复印件或单位证明。6、 参考文献仅限于公开发表的且是主要和最新的（最好近3年的），其排列顺序不分文种按论文中引用文献次序列出。研究报告限10篇以内，进展与综述限15篇以内。文献必须注明文献类型：专著[M]，论文集[C]，报纸文章[N]，期刊文章[J]，学位论文[D]，报告[R]，标准[S]，专利[P]。著录如下：专著（书）：著者（前3名，3名以上加“等”，下同）.书名（版本）.出版地：出版单位，出版年，起讫页.期刊：著者.题（篇）名.刊名，出版年，卷（期）：起讫页.会议录 论文集 论文汇编：著者.题（篇）名.出版地：出版单位，出版年，起讫页.科学技术报告：著者.题（篇）名.出版地：出版单位，出版年，起讫页.7、 为传播作者的学术思想和成果，本刊发表的文章均被认为已获得作者无稿酬提供情报检索期刊摘录转载的许可。8、 来稿需附单位介绍信、通讯地址、联系电话、邮政编码及电子信箱。文责自负，本刊有权删改，一年刊登期内切勿一稿两投，稿件不退，请自留底稿。凡被本刊录用的稿件，将同地被《中国学术期刊（光盘版）》、《中国期刊网》、《万方数据库》、《中文科技期刊数据库》等录用。9、 来稿或订阅请邮局汇款寄辽宁省朝阳市双塔区龙山街四段820号《微生物学杂志》编辑部；亦可银行汇款至工行朝阳市燕都支行，务必注明联系人姓名。
1.作业介绍：完成一篇字数500-600个单词的短文，这篇短文要以两本关于奴隶问题的书为基础，其结构是以高中最常用的五段落格式来表达。这两本关于奴隶问题的书分别是：（1）To Be a slave，by Julius Lester.（2）The Narrative of the life of Frederick Douglass，by Frederick Douglass你可以从下列四个主题中选择其一作为你的主题（l）奴隶制度无论是在体力上还是精神上都是残酷的;（2）奴隶制度是非人性的;（3）奴隶主受到奴隶制度的消极影响;（4）奴隶是比奴隶主更好的人。2.作业要求引言段：（1）引言段要吸引读者的注意力并且贯彻主题（3分）;（2）引言段要用正确的陈述语句（3分）。短文主体：（3）每个段落用正确的相关主题句开头（9分）;（4）第一段需要三个论据来支持你的主题句，这三个论据必须合乎逻辑，完整并直接与主题句相关（6分）;（5）第二段需要三个论据来支持你的主题句，这三个论据必须合乎逻辑，完整并直接与主题句相关（6分）;（6）第三段需要三个论据来支持你的主题句，这三个论据必须合乎逻辑，完整并直接与主题句相关（6分）。结束段：（7）最后一段以另外一种方式重述你的主题并结束全文（3分）。3.质量及语法要求：（8）没有任何错别词（3分）;（9）正确地引用支持你论点的信息（2分）;（10）所有句子都是有意义的，也就是说，每一个句子都不需要重新改写（5分）;（11）把引用文献放在正确的页码上（2分）;（12）正确利用两本小说，每本小说至少引用三次（2分）。总分：50分。《普通高中历史课程标准（实验）》中对历史习作是这样阐述的：“撰写历史习作是体现探究性学习成果的内容之一，也是历史学习评价的方式。通过撰写历史习作，重点考查学生的历史思维能力、语言文字表达能力、收集和处理信息能力等。”[1]历史作业是历史教学中非常重要的组成部分，具有检测、反馈、提升、发展的作用。历史习作作为一种历史作业类型，伴随着高考历史小论文热，教育者的研究也见多起来。郑连生老师指出历史小论文的写作要注意选题切入口要小、阅读广博、取材精实、批改时宜面对面。[2]（P68）上海特级教师曹家骜指出撰写历史小论文题目要注意审题，确立标题，推敲论点，组织材料。[3]（P65-66）张树生老师根据自己的教学实践提出，开展历史小论文教学有利于学生学习方式的变革;有利于学生掌握基本知识，提高思想认识和培养综合能力;有助于培养学生严谨求实的学风;有助于提高学生的综合素质。[4]（P42-43）历史小论文的教学需要老师设计情境、提供材料并且给予一定的指导，给学生写作空间，并恰当评价给予适时反馈。现有的研究成果一部分主要集中对历史小论文题型的撰写及教学指导进行探索，另一部分则主要是对历史高考小论文题目的命制特点及解题技巧进行探究，对历史论文作业的设计与评价的论述不多。杨文政老师认为有效的历史作业应分为“发布、完成、提交、反馈、质疑、探讨、拓展、生成”八个环节完成。[5]笔者将以上述题目为例，结合新课程和新理念的要求，谈谈对高中历史小论文作业设计与评价的几点进行反思和建议，以求教方家。一、设计原则：趣味性、开放性、探究性兴趣能使学生主动去学习思考，学生在学习中体验快乐、体验自己智慧的增长，激发探索真理的欲望。历史小论文选择的论题应该有趣味性，吸引学生主动探究，在好奇心的带动下主动积极完成作业。论题的选择要注意开放性。学生的学习不应该禁锢在同意标准之下，要给他们创造自由开放的学习环境。论文题目的选择如果局限于重难点，仅仅是将论述题换了一种形式，这样的作业不能给学生思维的空间、创造的空间，不能发展学生思维能力、问题意识，这样的小论文作业也就失去了意义。除了趣味性、开放性，论题还应该有探究价值。历史问题有很多，老师应该根据学生的能力，选择与所学内容相关，具有探究价值的问题来设计作业。论题要为教学服务，为学生历史认识的发展服务，为学生能力发展服务。 美国历史作业选题是奴隶问题，学生会去思考奴隶生活是什么样的？与奴隶主于什么不同？和我们现在生活有什么不同？为什么会存在奴隶制度，后来又为什么被废除了？等等。引发学生思考的兴趣，同时提供学生很大的思考空间，问题有思考价值和深度。二、设计要求：指导性、目的性、具体性选择好的论题之后，老师还要提出一些写作要求。学生对历史小论文这一题型不熟悉，老师的指导师必不可少的。首先是阅读指导，考虑到学生知识的有限，阅读的缺少，老师有必要提供与论题相关的材料，比如书籍、影像素材、历史文献材料、也可以选择后人对历史事件、过程的认识和评论。另外，可以适当提供一些教材中未体现的观点来开阔学生的眼界。其次是观点指导，由于这一阶段学生的世界观人生观价值观还处在形成阶段，老师对学生思考问题的方向也应该有一个大方向的指引，为学生提供可参考的观点，既可以帮助学生树立正确的价值观，也可以为归纳观点困难的学生提供参考。三是探究指导，教会学生如何查阅资料，如何从资料中提取有效的信息。最后是写作指导，教会学生如何做到论点明确、论据充分、论证严密。让学生能够写出规范的论文。要求还应该具体，笼统的、放之四海皆可的作业要求，是不能有效指导学生的。作业要求应该反映题目设计的目的。老师设计作业不是随意的，要体现教学教学目标，即知识与能力、过程与方法、情感态度价值观。历史小论文是综合性作业，对学生的能力要求是较高的，学生需要调动所学知识，运用历史学习方法，根据一定的写作规范来完成作业。作业要求很有目的性地指出老师希望学生思考的知识点以及运用的探究方法，对学生的历史习得是很有帮助的。历史习作除了让学生思考某个知识点或问题，更重要的是帮助学生学会思考，拓展思维能力，掌握正确科学的学习探究方法，不能仅限于一次作业，要为以后的学习服务。美国历史作业的要求非常具体，指导性很强。特别是写作要求，包括字数要求，引言段写作方法，文章主体写作方法，体现了严密的逻辑性和论从史出的严谨的科学探究观念，甚至对每本书引用次数做了规定。这样的要求对学生的历史小论文写作的指导才是有效的、有意义的。三、评价原则：多元化、有效性、肯定性历史小论文的写作不同于历史专业论文写作，重点并不在要求学生得出成熟的结论，而是试图引导学生去探求知识的奥秘，在学习的过程中学会思考。怎样评价学生的小论文，同样重要。评价注意多元化。评价主体是多元的，小论文的评价不仅是老师的工作，也需要学生的参与。老师的评价不能仅仅给个优、良、中、差就完事，而应花费较多的时间和精力，尽量做到面对面的批改。对于学生习作中的明显错误进行指正，对优点进行肯定，不仅看到结果，也关注探究过程中的得失。学生也可以进行自评和互评。不仅在学习过程中关注学生主体地位，在评价环节也要发挥学生的作用，推动学生的自我发展。评价方法是多元的。老师可以利用SOLO分层评价法、PTA量表评价法等，对学生的小论文进行评价。评价要及时，有效。作业的反馈环节要及时有效，历史小论文是学生研究性学习的成果，教师要认真负责地批阅每一篇文章，发现问题要及时记录，归类、总结;对作业结果要作出合理恰当的评判，并及时反馈给学生。可以画出其中表达准确而生动的语句，在旁边批语表扬;也可以在最后写上总批语，表扬肯定其突出之处，婉言指出其不足之处。建议最好是开一堂总结课，采取分析加总结的方式来提高学生的认知水平，也可以让学生继续讨论这些问题;对于观点出现对立的情况，教师还可以组织学生分组进行辩论，以使他们的思维更加活跃和开放。
药学毕业论文开题报告篇3 题 目 名 称： 番泻叶对小鼠尿量的影响 研究现状： 一、普鲁兰酶 普鲁兰酶(Pullulanase，EC.3. 2. 1. 41)是一种能够专一性切开支链淀粉分支点中的α-1.6糖苷键，从而剪下整个侧枝，形成直链淀粉的脱支酶。普鲁兰酶还可以分解普鲁兰多糖，普鲁兰酶来源于微生物，R-酶则来源于植物。普鲁兰酶最初是由Bender和Wallenfels于1961年通过产气气杆菌Aerobacter. aerogenes}(典型菌为肺炎克雷伯氏杆Klebsiella.pneumoniae)发酵获得，他们报道了该酶良好的酶学性能。之后，各国的科研人员经过广泛深入研究，从不同的地区、微生物中获得该酶，掀起了开发普鲁兰酶的高潮。 在淀粉加工工业中，α淀粉酶最为常用，它的功能是水解淀粉的α-1,4糖苷键，单独用它时，产物中含有大量分支结构的糊精，其中就含有大量的α-1,6糖苷键。假如不把淀粉的α-1,6糖苷键彻底分解的话，势必会造成很大的浪费。自然界中，存在有能分解淀粉的α-1,6糖苷键的酶，通称为解支酶。如寡α-1,6葡萄糖苷酶( E.C3.2.1.68, Oligo-l,6-glucosidase )，普鲁兰酶(E.C3.2.1.41Pullulanase )，异淀粉酶( E.C3.2.1.68, Isoamylose )，支链淀粉一6-葡聚糖酶( E.C3.2.1.69,Amylopectin-6-gluanohydrase )，其中普鲁兰酶要求的底物分子结构最小，故而可以将最小单位的支链分解，导致可以最大限度的利用淀粉，所以在淀粉加工工业中有着重要的用途和良好的市场前景。故而许多国家都争相开发，但是到现在为止，只有丹麦的NOVO公司具有普鲁兰酶的生产能力。我国只有向其进口，但是其价格昂贵，限制了普鲁兰酶在我国的应用。其实，我国早在七十年代就开发普鲁兰酶的产生菌，但是该菌的酶学性质不适合生产，至今我国在普鲁兰酶的国产化方面还没有报道。 在淀粉的加工行业上，对普鲁兰酶的酶学性质的要求是耐酸耐热，其原因是因为通常使用外加酶化法，由于所用酶类的限制，普鲁兰酶的添加可以在两步反应的任何一步，但必须满足上述的反应的条件。因此所开发的普鲁兰酶的酶学性质必须满足现有的酶法水解制糖的条件，也就是耐酸耐热。 二、普鲁兰酶的研究现状 1.产普鲁兰酶的微生物 普鲁兰酶最初是由Bender和Wallenfels于1961年通过产气杆菌(Aerobacter aerogenes)发酵获得。他们报道了该酶的良好性能之后，各国的科研人员经过广泛深入的研究，从不同的地区的微生物中获得该酶，掀起了开发普鲁兰酶的高潮。但是迄今为止，尽管发现许多微生物能够产普鲁兰酶，但是由于当今工业生产条件(酸性，温度)，大多数微生物所产的普鲁兰酶并无商业价值。以下便介绍一下普鲁兰酶的生产菌种。 1.1蜡状芽抱杆菌覃状变种(Bacillus cereus Var.mycodes) 由日本的ToshiyukiTakasaki于1975年发现。该菌同时产生两种淀粉酶:β-淀粉酶和普鲁兰酶。最佳作用条件为pH6～6.5，温度50℃，最大转化率(淀粉水解产生麦芽糖)大约为95%.酶学研究中发现，此酶在pH5，温度60℃依然保持大部分活性，该菌的营养细胞呈棒杆状，聚集成长短不等紊乱链状，无运动性，格兰氏阳性，产芽抱时细胞无明显膨胀。该菌最适生长温度30℃～37℃ ,最高生长温度在41℃～45℃，可以利用葡萄糖，甘露糖，麦芽糖，海藻糖，淀粉和糖原。 1.2嗜酸性分解普鲁兰多糖芽抱杆菌(BaciIluS.Acidopullulyticus) 上世纪八十年代初，丹麦Novo公司获得此菌，此菌所生产的普鲁兰酶耐热 (60℃)，耐酸(pH4.5)。该公司经过投入巨资开发研究，1983年Nov。公司在日本和欧洲市场同时商业化销售，商品名Prornozyme。如今，它是应用最广，产量最大的普鲁兰酶。Bacillus.Acidopullrrlyticus呈棒状，深层发酵几小时后，可观察到类原生质体的膨胀细胞，较稳定，饱子呈圆柱体或椭圆体。格兰氏反应阳性，37℃生长良好，45℃以上和pI-1高于6.5以上不长，在以普鲁兰糖为碳源的培养基((pH4.8 ～5.2)上生长良好。 1.3枯草芽饱杆菌(Bacillus subtilis) 1986年，日本的Yushiyuki Takasaki报道了一株能产生耐热耐酸普鲁兰酶的菌种，被命名为Bacillus subtilis TU。此菌种所产生的酶为普鲁兰酶和淀粉酶的混合物，可水解淀粉为麦芽三糖和麦芽搪.水解普鲁兰糖为麦芽三糖，其中普鲁兰酶最佳作用pH为7.0～7.5，但在pH5.0时亦有约50%的酶活，此普鲁兰酶最佳作用温度60℃。 1.4耐热产硫梭菌(Clostridum Themosulfurogenes) 1987年.德国的E.madi等报道了一株能同时产a淀粉酶、普鲁兰酶和葡萄糖淀粉酶的菌种:耐热产硫梭菌。该菌种所产普鲁兰酶有较广的温度适应范围(40℃～85℃)，在pH4.5～6.0有较高的活性，在如此广的范围内都有较强活力无疑将扩大该普鲁兰酶的应用领域. 1.5 Bacillusnaganoensis,Bacillus deramificans,Bacillus.Acidopullulyticus 上世纪九十年代，Deweer发现了普鲁兰酶产生菌Bacillus naganoensis;Tomimura筛选出Bacillus deramifrcans。这两株菌所产的普鲁兰酶的酶学性质与Bacillus. Acidopullulyticus的酶学性质相似。这两株菌都是中度嗜酸菌，在pH6.5以上就不生长，温度超过45℃以上同样也不生长。这两株普鲁兰酶产生菌的发现，进一步拓宽了普鲁兰酶的应用。 1.6产普鲁兰酶的高温菌菌种 自上世纪八十年代以来，人们逐渐意识到在通常的自然条件下，很难筛选得到极端耐热的普鲁兰酶生产菌种，于是各国的科学家便把目光转移到温泉嗜高温细菌的筛选，而且现在已经取得较多的成果。Bacillus如vorcaldarius所产普鲁兰酶的最适温度和pH分别是75～85℃, pH6.3, Thermotoga maritime的最适温度和pH分别是90℃, pH6.0, Thermurs caldopHilus的最适温度和pH分别是75℃,pH5.5, Fenidobacterion pernnavoran最适温度和pH分别是80～85℃, pH6.0o 2.普鲁兰酶的分子结构 至今为止，许多普鲁兰酶的基因己经被克隆，但是还没有见到任何有关普鲁兰酶结构的报道，但是在根据序列相似性对糖普键水解酶的分类，普鲁兰酶属于第13家族，α淀粉酶家族，这个家族中包含了30多种酶，可以分为水解酶，转移酶。异构酶三大类。这些酶能够水解和合成α～1.4,α～1.6,α～1.2,α～1.3,α～1.5,α～1.1糖苷键。其中很多酶的结构已经被报道，它们都采取了(β/α)8的结构，通过生物信息学的研究，这个家族的蛋白都有一个共同的结构，酶的活性中心都是(β/α)8折叠筒的结构，命名为结构域A。第13家族的大多数酶还具有结构域B，它是位于(β/α)8折叠筒中，第三个β片层与第三个α螺旋之间的一段序列，其特点是结构和长度差异较大，推测其功能是与底物的结合有关。在紧接着(β/α)8折叠筒后，还有C结构域，紧接C结构域，部分家族成员还有结构域D。 3.普鲁兰酶的应用 普鲁兰酶，在食品工业中是一种用途广泛的酶制剂和加工助剂。它能专一性分解淀粉中的支链淀粉和糖原分子及其衍生的低聚糖分支中的α～l, 6糖苷键，使分支结构断裂，形成长短不一的直链淀粉。因此，将该酶与 其它 淀粉酶配合使用时，可使淀粉糖化完全。近年来，普鲁兰酶己作为淀粉酶类中的一个新酶种，应用于淀粉为原料的食品等工业部门，在食品工业中有如下几方面的作用: 3.1单独使用普鲁兰酶，使支链淀粉变为直链淀粉 直链淀粉具有凝结成块，易形成结构稳定的凝胶的特性，因此，可作为强韧的食品包装薄膜。这种薄膜对氧和油脂有良好的隔绝性，又因涂布开展性好，故适合于作为食品的保护层。它还适合于淀粉软糖制造，也可用作果酱增稠剂，用于装油脂含量高的食品，以防止油的渗出以及肉食品加工。近年来在食品工业中提倡使用可被生物降解的薄膜，直链淀粉在这些方面具有较大的发展前途。豆类直链淀粉含量较高，因此绿豆淀粉制成的粉丝韧性比其它淀粉好，如果用普鲁兰酶处理谷物淀粉，再制成直链淀粉后，可以制成高质量的粉丝。一般谷物淀粉中，直链淀粉含量仅占20%，支链淀粉含量约为80%。工业上每生产1吨直链淀粉就有4吨副产品的支链淀粉。美国虽然通过遗传育种的方法.得到含直链淀粉60%玉米新品种，但不大适于大量生产。国外已采用普鲁兰酶改变淀粉结构，可使支链淀粉变为直链淀粉。据报道，采用此法收率可达100%.制造直链淀粉的方法为，先采用普鲁兰酶分解经液化的分支部分，使其转变为直链淀粉，并以丁醇或缓慢冷却法沉淀淀粉。再回收含少量水分的晶型沉淀物，最后通过低温喷雾干燥法制成粉状的直链淀粉。 3.2普鲁兰酶与β～淀粉酶配合使用生产麦芽搪 饴糖是我国传统的淀粉糖产品，其中所含部分麦芽糖，广泛用于糖果、糕点等食品工业。目前生产方法是以α～淀粉酶进行液化，再用β～淀粉酶水解支链淀粉，这样只能水解侧链部分。接近交叉地位的α～1.6糖苷键时，水解反应停止。但如果使用普鲁兰酶共同水解，便能使分支断裂，提高淀粉酶水解程度，降低了β极限糊精的含量，大大提高了麦芽糖的产率，有利于生产麦芽搪浆。目前对加普鲁兰酶进行糖化己作了较大规模的试验。 试验条件为。每批投料量约为900公斤碎米，粉浆浓度为15～16Be°数皮用量1.5%(对碎米计)，β～淀粉酶活性2,000单位/克以上，pH5.8;普鲁兰酶活性45,000～55,0 00单位/克，系由产气气杆菌生产，每批用量为1公斤。试验结果表明，加入普鲁兰酶糖化的试验糖与对照糖品相比，还原糖平均增加14.8，麦芽糖含量平均增加了45.6，糊精含量平均减少了26.7高浓度麦芽糖浆较之高浓度葡萄搪浆，具有不易结晶，吸湿性小的特点，所以高浓度麦芽糖浆在食品工业中有着广泛的用途。采用普鲁兰酶与p一淀粉酶配合使用，成本低廉，麦芽糖收率达到70%左右，其至更高。 3.3用于啤酒外加酶法糖化 啤酒生产中麦芽，既是酿造啤酒的主要原料，也为酿造过程提供了丰富的酶源。在啤酒酿造的糖化过程中，麦芽中分解淀粉的主要酶是α～淀粉酶、β～淀粉酶和分解淀粉α～1. 6糖瞥键的R一酶(植物普鲁兰酶或植物茁霉多糖酶)。β～淀粉酶与另两种淀粉酶协同作用，可使淀粉分解成麦芽糖(也包括少量的麦芽三糖和极少量的葡萄糖)和低分子糊精。使麦芽汁有比较理想的糖类组成。在工业生产中为了节约麦芽用量，采用所谓外加酶法糖化，即在减少麦芽用量的前提下，增加淀粉质辅助原料的比率，并加入适当种类的酶制剂进行搪化。要使大麦及其它辅助原料糖化完全，需要外加a一淀粉酶和分解α～1.6糖苷键的普鲁兰酶制剂等。单独使用a一淀粉酶时产生麦芽糖和麦芽三搪是很不完全的。假如分解淀粉α～1.6糖苷键的酶活性不足，淀粉分解就不完全，其结果是可发酵性糖含量低，制成的啤酒发酵度达不到要求。若采用能分解α～1.4和α～1.6糖苷键的糖化型淀粉酶，则其反应产物为葡萄糖，容易使酒味淡薄。采用普鲁兰酶与α～淀粉酶协同，效果良好，其分解产物主要是麦芽糖和少量的麦芽多糖。采用外加酶法糖化时，加入酶制剂的用量为:淀粉酶6～7单位/克大麦及大米:蛋白酶，60-80单位/克，并配合以菠萝蛋白酶10ppm，普鲁兰酶50单位/克大麦。以上三种酶制剂均添加于糖化或酒化开始。 总之，普鲁兰酶无论作为酶制剂和食品工业的加工助剂均有广阔的发展前途。 研究目的和意义： 酶制剂工业是上世纪七十年代就己经形成的一个重要的产业，目前世界酶制剂总产值达100亿美元，我国的产值约为100亿人民币，并且随着其应用领域的不断扩大以及新酶种的开发，这一市场正在迅猛发展。但是全球酶制剂产业几乎被几家外国公司所垄断，其中丹麦的NOVO公司几乎占全球总销售额的一半。本研究对普鲁兰酶的开发，对酶制剂产业的发展有重要的意义。 其次我国自从七十年代开始便对普鲁兰酶进行研究开发，但是所开发得到的普鲁兰酶，既不耐热也不耐酸，这就使其在工业化应用中受到了局限。为了改变我国对进口产品的依赖，填补我国这一领域的空白，寻找一条国产化的道路，本研究的目的是利用自然微生物资源，普鲁兰酶，提高我国淀粉原料的利用率，从而提高整个淀粉加工行业的生产率，这对我国淀粉加工产业的意义是不言而喻的。 研究内容(内容、结构框架以及重点、难点)： 一.普鲁兰酶产生菌的筛选 (1)样品的采集; (2)菌种初筛; (3)菌种复筛; (4)菌种保藏方法; (5)酶活力测定方法的建立。 二.产普鲁兰酶菌株的产酶条件的研究 (1)碳源，氮源对发酵产酶的影响; (2)初始PH对发酵产酶的影响; (3)接种量对发酵产酶的影响; (4)发酵温度对产酶的影响; (5)金属离子对产酶的影响。 重点或关键技术： (1)纯菌株的分离; (2)菌株的鉴定方法的选择。 研究方法、手段： 一.普鲁兰酶产生菌的筛选 (1)样品的采集：选择适合产生的地点(面粉厂.菜地.果园等)采集土样 (2)菌种初筛：在采集的土样用无菌水稀释后，在含有淀粉类的培养基中做平板涂步， 37℃培养48h后，用碘液进行显色反应，将有淀粉酶产生的菌落接于斜面中保存。 (3)菌种复筛：将前期分离的能产生淀粉酶的菌株涂步于普鲁兰糖平板上，37℃培养48h后用95%乙醇进行透明圈实验。有透明圈产生说明菌株产生普鲁兰酶，将产生透明圈的菌落挑于斜面培养基培养。 (4)菌种保藏方法： 采用4℃低温保藏。 (5)酶活力测定方法的建立：采用发酵培养液经过离心后利用DNS显色法 520nm测定吸光值，测定标准葡萄糖标准曲线，利用标准曲线计算普鲁兰酶酶活大小。 二.产普鲁兰酶菌株的产酶条件的研究 (1)碳源，氮源对发酵产酶的影响：采用不同碳源，氮源培养基培养一段时间，测定酶活力。(其他条件相同：接种量，装瓶量，初始PH值，转速，培养时间。) (2)初始PH对发酵产酶的影响：采用相同发酵培养基，在不同初始PH下接种等量种子液。在相同条件下培养，测定发酵液的酶活。(其他条件相同：接种量，装瓶量，转速，最佳培养温度，最佳培养时间。) (3)接种量对发酵产酶的影响：在发酵培养基中分别接入2%，4%，6%，8%， 10%，14%，18%的种子培养液于最佳碳源，氮源，最佳初始PH的培养基中，在相同条件下培养，分别检测酶活。(采用以上确定的最佳碳源，氮源，最佳初始PH。) (4)发酵温度对产酶的影响：采用相同培养基，在不同温度下(25℃，30℃，35℃，40℃，45℃)培养一定时间，测定酶活力。 (5)金属离子对产酶的影响：在基础培养基中加入少量不同金属离子，发酵后测酶活。(金属离子有： 锰离子，钙离子，锌离子，镁离子，铁离子，铜离子。) 研究进度 ：完成项目总体进度30%，样品土样的采集及前期的准备工作,菌株的初筛，包括(样品土样原液的涂步培养及摇床培养，产支链淀粉酶菌株的挑选及斜面培养)。 ：完成项目总体进度50%,菌株的复筛，包括(产普鲁兰酶菌株的筛选及斜面培养),葡萄糖标准曲线的测定,酶活测定方法的建立,并以酶活大小对菌株进行再次筛选。 ：完成项目总体进度80%,产酶条件的研究。包括：碳源，氮源，初始PH值，接种量，发酵温度，金属离子。并通过各中单因素试验确定发酵培养基的最佳碳源，氮源，初始PH值，接种量，发酵温度，金属离子。 2009、4—2009、5 ：完成项目总体进度100%,课题总结，撰写论文。 文献综述(包括：国内外研究理论、研究方法、进展情况、存在问题、参考依据等) 自从1961年Bender H.等人在研究一株产气气杆菌Aerobacter aerogenes(典型菌为肺炎克雷伯氏杆菌Klebsiella.pneumoniae)时首次发现普鲁兰酶后，国际上对产生这种酶的微生物进行了广泛研究，发现许多微生物可以产生此酶，并筛选出一些适用于工业化生产的优良菌株。随着该酶的应用发展，对耐热性普鲁兰酶的研究也逐渐增多，已成功克隆并表达了该酶的基因。国内1976年开始对一株产气气杆菌(Aerobacteraerogenes 10016)的普鲁兰酶进行研究，对该菌株的产酶条件、酶的分离提取及酶学性质作了报道，并研究了该酶的食品级提取技术。此外，陈朝银、刘涛等人从云南温泉水样中筛选到一株产普鲁兰酶高温栖热菌菌株，通过诱导等实验将该酶的酶活从0.069u/mL提高到170u/mL，酶产量提高了近2500倍左右，酶的最适作用温度及pH分别是75℃和4.5，具有一定的耐热和耐酸特性。 陈金全等从温泉水样中筛选到一株产耐热耐酸普鲁兰酶的野生菌株，并根据形态、生理生化特征、细胞化学组分分析及16SrDNA序列比对、基因组DNA的G+C摩尔百分含量、同源性比对等实验，鉴定其为脂环酸芽抱杆菌属(Alicyclobacillus)的一个新种，所产酶最适作用温度为60℃，最适pH值4.0，具有较好的耐热耐酸特性。杨云娟等利用毕赤酵母成功构建了普鲁兰酶表达量较高的基因工程菌，摇瓶发酵酶活可达350.8U/mL，最佳发酵条件下产量可达504.5-510.1U/mL .酶的最适作用温度为600C，最适pH值4.5，具有较好的耐热耐酸性。目前我国仍没有具备独立生产普鲁兰酶能力的厂商，要实现低成本、国产化的生产，还有很长的路要走。 技术应用于耐热脱支酶的研究，使耐热异淀粉酶的研究有了很大发展。Coleman等人将嗜热厌氧菌T. brockii普鲁兰酶基因克隆到B.subtilis中得到的克隆子分泌的普鲁兰酶数量高于出发菌株，Okada等人将Bacillus Steanther, onhiu:中编码热稳定异淀粉酶的基因克隆到B.subtilu:中，得到的转化菌株其异淀粉酶能在60 ℃稳定15分钟。Burchadf将。ostridium thermosulf urogenes DSM38%的嗜热异淀粉酶基因克隆并在E.coli中表达，所得酶的最适pH和最适温度与出发菌相同，而且在高温下仍能保持活性.Antranikiam等人将Pyrococcus舟riousous的异淀粉酶基因克隆到E.coli中并分离得到了酶蛋白。尽管如此，目前尚未有已将转基因的耐热性异淀粉酶工程菌应用到工业生产中的报道。众所周知，利用物理和化学诱变剂单独或复合处理微生物细胞是选育高产变种菌株行之有效的经典方法，它在为培育多种抗生素、氨基酸、核苷酸激酶(尤其是蛋白酶和淀粉酶)的高产变种菌株方面曾经起过极为重要的作用，至今仍然是方便易行和行之有效的方法之一。 主要参考文献： [1][美]惠斯特勒等编王雏文等译.淀粉的化学与工艺学[M].北京：中国食品出版社，1988 [2]张树政.酶制剂工业[M]. 北京: 科学出版社，1998 [3]邬显章.酶的工业生产技术[M]. 吉林: 吉林科学技术出版社，1988 [4]Taniguchi H, Sakano Y, Ohnishi M, Okada G(1985) Pullulanase[J].TanpakushitsuKakusan Koso. 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张之屏（1866～1935），字树侯，安徽寿县瓦埠乡曹家岗村西邢家岗人，生于清同治五年（1866年）。其父张子兰，中过秀才，因生活所迫，就馆寿县。树侯幼年从父兄读书，不久，父亲去世，靠兄长西园、朗轩抚养成人。树侯在求学之余，也做些杂活，如推磨种菜之类。 1890年，张树侯考上秀才。此后，他渐渐接触了反清思想，产生了革命抱负，因而放弃科举考试。为了摆脱家庭的拖累，便于进行革命活动，遂将老母、妻子迁依岳家曹氏，即曹少修烈士先人之家，在寿县瓦埠地方。1898年，张树侯与同乡数人密谋革命，创办了“强立学社”，与孙毓筠所办的“阜才学堂”共同在寿州传播反清革命思想。接着，寿州有志之士，如孙养癯、段云、权道涵、石寅生等先后东渡，留学日本，寻求出路。他为了学习军事，培养革命力量，扩大革命活动，乃于1904年和张子嘉、吕宪集、吕竣泉、孙卓如等数十人，考入安庆武备练军学堂，并与柏文蔚等革命党人相联络。1905年春，他改充安庆鸣凤学堂教习，以为接洽密会场所。原先，有皖北人郭其昌，是哥老会首领，谋在安庆起义未成，被捕下狱。树侯潜入狱中与郭其昌通气，了解到匿迹省垣的哥老会地下组织，遂与联系，集结党人，多次密商，议定外联豫皖会党，内集在省的革命志士，共谋大举；标营中以柏文蔚为内线，先夺械弹，攻占省城。其时，树侯有书愤一诗云：“昆仑东下五千年，莽莽神州我占先。太息武功凋谢尽，乘时恢复莫盘桓。”当得知同盟会于东京成立时，又有一诗云：“同盟军书传海外，三千侠士仗江流。中原从此除膻种，汉族还须再出头！”由于他的活动频繁，风声所播，为寿州豪绅孙某侦悉。孙某径向两江总督周馥告密。周馥密檄皖抚，先杀郭其昌于狱中而不布，同日晚，又派兵来围鸣凤学堂，意图逮捕他。幸为同乡卞秉粲（寿县人，当时名华章）得悉，急来鸣凤学堂通知张树侯，他立即逃走，同前来捕他的兵，相距甚近，仅隔前后门而已。其在《晚菘堂谈屑》中记有：“时将天晚，在院纳凉，悉讯后，为避人疑，手持芭蕉扇一把，伪为大便，光脊而出。”时霍邱人郑赞丞（芳荪）及李广缙（又名北申），均系淮上志士，在皖南广德筹办矿务局，遂奔就之，暂在那里隐避。清吏逮捕落空，便下令通缉，一时风声险恶。张树侯怕致郑、李受累，乃潜走杭州，依西湖韬光寺和尚，隐伏暂避，化名“尹其康”，法号“隐康”。并得与浙省革命志士相往还，一住数月。迨至缉声稍懈，始返芜湖，应李光炯之邀，还俗，就任皖江公学经学讲师，得与吴旸谷等相结识，遂参加同盟会。在离杭时曾有诗云：“骇浪惊涛卷地来，血花剑影事堪哀。武林一去几千里，浙水吴山日溯洄。”在芜湖曾有诗示同仁云：“漫言祖国凭谁挽，要识民权自有真。万里沙场三尺剑，愿将鲜血洗乾坤！”又有：“频年碌碌走风尘，车马关河总怆神。世界大千犹有憾，鸠江讲学亦论兵。”可见，他反清的革命思想是很坚决的。当时革命，南方特盛，清廷对南方更是严加戒备。张树侯分析当时形势后，认为北方还有隙可乘。适有卞秉粲、杨端甫在吉林胡殿甲处供职。胡殿甲也是寿州人，任吉林军统领，兼吉林陆军小学总办。经卞秉粲等向胡殿甲推荐，聘树侯为陆军小学教习。他于1906年秋初，毅然出塞，并约有六安彭卓甫、霍山朱则羲等人同赴东北。时柏文蔚也在东北。当时吉林省的革命活动，咸以张树侯和柏文蔚为领袖，壮志雄心，密谋大举，惜在事将成熟之时，为吉林长官达桂侦悉，派队逮捕他们，幸在胡殿甲的保护下，得以脱险。张树侯和卞秉粲两人化装夜走延吉岗，不能立足，乃潜越国境，到朝鲜清津投陈其顺。陈其顺是东北人，时招募吉林边境流民（中、朝均有）两万余人，在清津为朝鲜拆城筑路。张树侯以同胞身分投效，得为陈其顺办文牍，日渐接近，并向陈其顺解释反清革命道理，动员他率领拆城工众参加起义，深得陈其顺欣许，并把他的话，名之曰“打江山”。那时拆城工众多系赋敛所逼，生活无路而来，所以一招即应。于是，一面派卞秉粲往日本谒中山先生，商筹款械，一面又派工长某东北人与有关方面相联系，计划进扑吉林并策动胡殿甲为内应，期以吉林为根据地。不意卞秉粲到日本时，适中山先生亲赴蒙自发难，因时间较久，清津拆城筑路已告竣工，不得不将工众遣散，而柏文蔚等也都已南返，因此起义计划没有实现。张树侯嗟叹不已，作诗云：“吉林西去走车难，石子垒踉路百盘。壮志豪情余涕泪，灯光剑影照心肝。”1907年，张树侯遄返家乡，就芍西学堂教务，仍以反清革命思想灌输学生，曹蕴真、曹渊、方运炽、曹鼎等均是他学生，深受其影响而走上了反清革命道路。同时与家乡革命同仁相联系。次年春，熊成基、范传甲安庆举义失败。熊成基来寿县，就访于芍西学堂。树侯意欲留熊成基在寿，约同仁举民团以应之，而熊成基认为皖省环境险恶，乃远走省外，不幸在吉林就义，范传甲亦在安庆牺牲，一时皖省反清革命转向低潮。1909年春，树侯离芍西教职，与郑赞丞同赴上海，在沪组织革命机构，寓李少川家。李家为苏、皖间反清人士的联络机关。树侯专任各方联络工作。1910年间，在沪同志咸以内地发展为重要，一旦首义，才有群众基础。树侯遂与张汇滔、管鹏等先后转回寿县，组织力量，来往城乡各地，联络乡里武装，为辛亥的淮上军开创了基础。1911年春，各方同仁，群集广州，将谋大举。张树侯与董少亭动身前来，及至九江，得悉广州起义失败，乃复回里门。是年秋，武昌起义，淮上军崛起寿州。树侯与瓦埠的方振九率乡里子弟自瓦埠湖东，迂回到湖西各集镇，城乡均兵未血刃而光复。十月初，淮上军出师毗邻各县时，他先则率众到合肥与孙品骖相会，继则时而寿县，时而六安，时而阜、颍，与张汇滔、权道涵等人，共策整军安民计划。据权道涵生前谈，淮上军所到之处，军政府印均为张树侯所手刻。民国成立以后，有些人争官、争利，喧嚷一时，而张树侯一向是奔走劳瘁，决不钻营宦途。1912年自题小照诗云“试把余生付金石，更将遗恨托芸编”，大有借书画以了天年之慨。袁氏称帝之际，各地酝酿倒袁，他为黄少泉写了一些诗，这里录二首。诗云：“汉上军声卷地来，江淮千里战云开。浔阳九派岩关壮，赖有将军筑炮台。”“帝业于今已化羊，一肩行李莫还乡。溯风凛冽方凄紧，漫把良弓一例藏。”这时，倪嗣冲督皖，仇视党人，东南五省通缉张树侯的命令齐下，被迫匿于肥西童茂倩家。时川督陈宦，系童茂倩的学生，藉此渊源，张树侯离开合肥，潜走六安，偕同徐迂亭经鄂入川。未几，云南护国军起，他和迂亭指陈利害，策动川督归附，以讨袁军。1916年，张树侯返回家乡。继此，北洋军阀当道，国事日非，他决心不参与军政活动，打算隐居教学。1918年，张树侯曾受聘在北京女子师范大学任教，讲授经学与书法。时值五四运动，他目击时艰，再次愤然归里，匿迹于寿州、六安、合肥等地乡间。大革命伊始，设帐于肥西童茂倩家，每与童老谈及时政，追怀中山先生，曾有句云：“北上燕京拯故国，遗留三策共千秋（指联俄、联共、扶助农工三大政策）。”当“四·一二”惨案消息传来，曾以书愤诗二十首加以抨击，兹记其一首云：“风云义烈感沧桑，痛哭血花溅沪江。新义三民嗟幻影，神州暗淡恨茫茫。”此时，其子张曙云（原自上海大学随周总理至广州，进黄埔，从军北伐，加入共产党）在北伐军总部任编辑，来信问时事，复信中根据他自己的见解，有云：“当今青年，如大海孤舟，方向为主，一时逆风起处，澎湃狂澜，则飘荡中流，不知所止，尔曹其勉乎哉。”并有诗云：“应识庐山真面目，漫将璞玉当石沙！”1925年，袁子金北伐驻军石家庄，于民间得戚继光遗砚。袁归里后，以示张树侯，属为之铭。此砚为广东端砚，长方形，抄手式。长17 厘米，宽11厘米，厚6.5 厘米。石质细腻，雕琢精巧，又系名人用砚，为端砚中之珍品。左侧行书戚继光铭文，曰：“他山之石，允文允武，决疑定计，取君之府，军书飞驰，日傍午，传檄天下惟赖汝，四海一，与汝息。继光铭。”右侧张树侯隶书曰：“民国十四年，袁子金师长北伐驻军石家庄，得戚南塘少保遗砚于民家。归里后，以示张树侯，属为之铭。铭曰（篆书）：‘明季多难，少保以生，今复多难，赉在将军，古人往矣，此传薪。’”1930年，张树侯应友人李少川约去上海，居沪二载，多结翰墨之缘。1932年，张树侯以自己在燕京大学习字科教学讲义为基础著述的《书法真诠》在上海出版，《书法真诠》与以往的书法理论著作相比，呈现出思想解放认识超前、思辨深刻见解独具、语言精练立说严谨等特点。 1934年，应前安徽省烈士省葬委员会之请，为辛亥以来安徽死难烈士撰刻碑文而回居安庆。朋辈为之欢欣，各省友人，咸以诗文寄颂，陈独秀、段祺瑞、汪兆铭、孙科、柏文蔚、于右任、翁文灏、齐白石等均寄有贺幅，达近千件之多。甚至有从海外寄画者。1935年4月18日拂晓，张树侯在安庆南庄岭省葬委员会内住处逝世。先生身后，纸笔一束，清风两袖。老友柏文蔚、权道涵、孙养癯、江彤侯等缅怀旧谊，为之集资公葬于安庆城西烈士祠后院内（老火药库的旧址）。张树侯在书法、篆刻艺术上均享有盛名。书法各体兼优，隶书更擅其长。客居省城安庆，《学风》杂志载文称“求书者日夕盈门，有洛阳纸贵之势”。晚年喜画梅花。《申报》于1933年发表过他的一幅梅花图，并附之以跋云：“先生沉酣八法，指研篆刻，以倒海屠龙之手，写暮年伏枥之心……”
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