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红色芍药
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rosebonbon

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除了有扫膜后的图片,还要有利用灰度值做定量分析的柱形图

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天凄微凉

上一期我们聊了期刊杂志的新要求,总结如下: ▶  不建议跑平行胶,因为平行胶和剥离膜,孵育体系,操作条件的不一致,影响定量的准确性,因此最好内参和目的蛋白要在同一张印迹膜上。 ▶  选择宽动态范围的方法,确认信号强度与所上样量之间的线性关系,例如用胶片做化学发光方法的动态范围就很窄,不建议使用。 ▶  强烈推荐使用总蛋白进行归一化,因为看家蛋白容易受处理条件影响而发生变化,影响定量的结果,使用总蛋白定量更真实地反映目标蛋白表达量的变化。 ▶  提交原始数据,例如:JBC,PLOS和CELL等杂志都要求要提供原始数据。 Azure公司除了有Sapphire双模式多光谱激光成像系统可满足需求, Azure600多功能分子成像系统也可帮助您获得期刊杂志要求的Western Blot数据: ▶ Azure600标配有5个荧光光源,可同时在一张印迹膜上进行4通道荧光成像 ,同时也具有高灵敏化学发光检测功能,灵敏度可达fg级 荧光Western Blot使用荧光基团标记的二抗进行检测,膜上的靶标蛋白浓度与可见荧光信号强度呈线性关系,实现真实可靠的定量分析。荧光染料发射光谱不同,因此在一张印迹膜上可实现多个蛋白检测。这样目标蛋白和内参蛋白在同一张膜上,可以避免数据造假的情况发生,更容易被期刊杂志接收。 图1:通过使用四种光谱不同荧光基团标记的二抗,可以同时检测多达四种不同的蛋白。HeLa细胞裂解物上样, Anti-Tubulin (550nm, 绿色), Anti-Actin (700nm红色), Anti-GAPDH (800nm, 灰色), 和Anti-Transferrin (490nm, 蓝色)这四种蛋白同时成像,没有交叉。 ▶ Azure600近红外采用激光光源, 激发强度大,单色性好,减少光泄漏,在更短的时间内达到更好的信噪比,Western Blot精准定量的金标准 ▶ Azure600配合AzureRed总蛋白荧光染色剂可以做总蛋白归一化和定量三个靶标蛋白,生成可以信赖的定量Western Blot数据 使用总蛋白归一化,以校正泳道和样品之间的差异。传统的方法无法准确知道条带灰度值和强度的变化是由于样品的生物学变化引起的,还是由于上样不一致性或样品制备的差异引起的。总蛋白定量的优势如下: ★ 总蛋白比看家基因等内参的线性检测范围更宽; ★ 在整个实验和系统中更加稳定; ★ 能有效排除实验条件和体系对结果的影响; ★ 更真实地反映目标蛋白表达量的变化。 图2.总蛋白归一化和定量三个靶标蛋白. Tubulin 红色通道, Actin 蓝色通道, GAPDH绿色通道, AzureRed/Total protein 用灰色表示 图3.使用总蛋白对Tubulin信号进行归一化纠正上样误差 ▶Azure600标配9.1MP的高分辨CCD,动态范围可达4.8OD,保证结果的准确性 图4.过饱和检测可防止定量误差,相同的印迹膜分别使用胶片成像和Azure成像系统, Azure成像系统具有过饱和提醒,自动计算曝光时间以避免饱和 ▶ Azure600可做彩色Marker与化学发光条带的自动整合,分子量查看更直观 ▶ Azure600提供原始数据16bit的tiff图给到期刊,这里的tiff原始数据是指未经裁剪,像素修改,对比度调整等任何操作的图,保证结果的真实性和可靠性 Azure600除了进行荧光印迹膜,化学发光印迹膜检测外,还可以进行普通凝胶成像,EMSA检测,菌落筛选,小动物成像,植物成像等。

216 评论

坤坤890206

1 标题的撰写标题是文章的文眼,应当简明精炼,准确表达文章信息。长度最好不要超过22个字,去掉"研究、分析、探讨"等词,尽可能用最少的词表达最核心的内容,尽量不要使用副标题。示例:1.1 以下标注为红色的字应当去掉 (1)喜马拉雅造山带东、西构造结的地质特征与对比研究(2)中太平洋多金属结壳的地球化学特征研究(3)煤的吸附性能及影响因素探讨(4)塔里木盆地低电阻率油层成因分析与评价 1.2 以下标题需进行了较大的修改 (1) 松辽盆地及渤海湾盆地的形成:地幔柱构造控制修改为:地幔柱构造对松辽盆地及渤海湾盆地形成的制约 (2) 露头油藏及其研究意义 (标题不明确)修改为:露头油藏的形成条件及成藏模式. 2 摘要的撰写一篇文章摘要的好坏直接影响到您的文章能否被EI或SCI收录。摘要和标题在数据库中成为一篇独立的文章,包括目的、方法、结果、结论四要素,要求准确、简洁、量化,可读性、逻辑性强。摘要中不要写本学科领域中常识性的内容,只写自己的新发现,确保每一句话都可能被读者引用。长度限制在200-300字之间。(1) 目的,即为什么(why)要做这项工作以及做这项工作有什么意义?先提出问题,给文章一个清楚的定位。(2) 方法,即描述怎样(how)做这项工作,以及所采用的具体的实验手段和材料。(3) 结果,即通过以上研究方法所得到的一些数据或认识,最好量化。(4) 结论或讨论,即由结果所揭示出的原理、规律或现象。 示例:例一:青藏高原东部贡觉盆地新生代火山岩的K-Ar稀释法年龄(标题)摘要:(目的)为了解青藏高原的隆升作用,(方法)利用K-Ar同位素稀释法对贡觉盆地7个新生代高钾钙碱性中、酸性火山岩样品进行了年龄测定。(结果)全岩和黑云母的表面年龄均在40.8-46.2 Ma间(平均值为44.2 Ma).样品中放射成因Ar与K构成了一条相关性良好的、几乎通过原点的线性等时线,表明它们有相同的成因和相近的形成时代,而且样品中可能既无过剩Ar,也无放射成因Ar的丢失,代表着真实的成岩年龄(始新世中期).(结论)火山活动发生在印度-欧亚板块碰撞(50 Ma左右)后形成的构造环境中,受陆内水平剪切-走滑断裂带控制.结合前人对藏东地区岩浆活动的年代学研究成果,表明青藏高原东缘新生代岩浆活动具多期性.这种多期性可能反映着青藏高原阶段性隆升的壳-幔相互作用. 例二:利用湖泊底泥和粉煤灰制备瓷质砖的实验研究(标题)摘要:(目的)将湖泊底泥引入瓷质砖的生产,既可消除污染,又能减少传统的瓷质砖生产中所需的粘土. (方法)以武汉市东湖底泥和湖北黄石电厂粉煤灰为主要原料,辅以伟晶花岗岩、石英为添加剂,设计4个底泥含量分别为40%、50%、60%和70%的配方,每一配方压制6片生坯,分别在1190,1175,1160,1130,1115和1100 ℃下烧成.(结果)XRD分析显示瓷坯中的莫来石晶相随烧成温度的升高而增加.在1160-1175 ℃烧成的瓷坯的吸水率和断裂模数测试结果分别为0.08%-0.20%和39.36-51.08 MPa,(结论)表明利用湖泊底泥和粉煤灰作为主要原料可以烧制瓷质砖,二者的总用量可达75%-80%. 例三:污染河水中氨氮对浅层地下水的影响(标题)摘要:(目的)研究长期排污河中的氨氮是否对浅层地下水造成污染.(方法)室内试验选用3种天然砂土作为渗透介质,以生活污水模拟污染河水,经过近10个月的土柱试验,(结果)发现氨氮在粗砂中第17天达吸附饱和,第18-140天去除率小于10%,在中砂中第130-140天吸附饱和,以后均发生解吸出水浓度大于进水浓度.野外实验凉水河的氨氮浓度为46.86 mg/L和26.95 mg/L时,地下水的氨氮浓度均小于1.10 mg/L。(结论)表明凉水河对地下水的实际影响不如室内大,原因是底泥、河床下部渗透介质的厚度和岩性以及河水渗漏量的影响.排污河还清试验表明,排污河清淤、灌入清水后,会很明显地把排污河下部渗透介质中的氨氮带到地下水中,造成地下水的二次污染. 例四:确定堤坝工程地基渗透系数的敏感分析法(标题)摘要:(目的)为了解决堤坝工程中地基渗透系数的选取具有较大随机性的问题,(方法)采用敏感性分析理论建立了求解渗透系数敏感性因子的数学模型,(结果)该模型在河南省燕山水库水利工程中的应用表明:覆盖层渗透系数的敏感性最大(>10-2),其他部分渗透系数的敏感性相对较小(10-6-10-3)。(结论)设计时覆盖层应取试验值的大值,其他可取试验值的均值;对于防渗设施,只要达到一定密实度,再降低其渗透系数,防渗效果不会再有明显改善. 3 量和单位的使用量和单位的使用请参照国家法定计量单位最新标准(GB 3100-93),采用国际单位制(SI单位)。示例:名称 国际单位 备注压力,压强 Pa, kPa, MPa, GPa, mPa 1 bar=105 Pa, 1 atm=101.325 kPa公倾(土地面积)Hm21hm2=102m2=15市亩旋转速度(转每分) r/min (直流)电导 S, mS, kS (西门子) 电导率 S/m 电阻率 ??m (放射性)活度 Bq(贝可) 4 图、表要求(1)图表名必须有中英文对照。(2)表中所有数据必须注明单位、测试者、测试手段、测试条件、测试精度及误差范围。 (3)所有的图件要求用CORELDRAW8.0,9.0,10.0绘制,并提供CDR图形文件。(4)照片或图版需提供照片,若采用扫描,则提供JPG或TIF文件,精度不低于500dpi。(5)地质图中必须有比例尺、方向或标注经、纬度。(6)坐标图中,必须标注纵、横坐标名称以及国际单位。 5 参考文献的著录本刊参考文献采用著者-出版年制,即按作者姓氏的首字母顺序排列。中文参考文献必须有对应的英文翻译,文内的文献必须与文后的文献对应。在文献中若有3个以上作者,在文内仅列出一个作者再写"等",若有两个作者,在文内必须全部列出;同时引用几条文献时,按出版年从老到新排列。英文文献中期刊名用斜体表示,姓用全称,名用缩写。为方便前后文献对照检查,在投稿时作者最好在文内的右上角标注序号,文后的参考文献也对应地标上序号,以免重复或漏掉文献。示例如下:(1) 期刊(文内) ……经过几代人几十年对生物地层的潜心研究,建立了该剖面各门类生物组合,如牙形石在界线层和早三叠世自下而上划分了5个带(张克信等,1995;Mei et al., 1998;Tong and Yang, 1998),菊石建立了3个带……。(对应的文献)Mei,S.L.,Zhang,K.X.,Wardlaw,B.R.,1998.A refined succession of Changhsingian and Grriesbachian neogondolellid conodonts from the Meishan Section,candidate of the global stratotype section and point of the Permian Triassic boundary. Palaeogeography,Paleoclimatology,Palaeoecology,143:213-226.Tong,J.N.,Yang,Y.,1998.Advance in study of the Lower Triassic conodonts at Meishan Section,Zhejiang Province. Chinese Science Bulletin,43 (16):1350-1353. 张克信,赖旭龙,丁梅华,等,1995.浙江长兴煤山二叠-三叠系界线层牙形石序列及其全球对比.地球科学--中国地质大学学报,20(6): 669-676.Zhang,K.X.,Lai,X.L.,Ding,M.H.,et al.,1995.Conodont sequence and its global correlation of Permian-Triassic boundary in Meishan Section,Changxing,Zhejiang Province.Earth Science-Journal of China University of Geosciences, 20(6):669-676 (in Chinese with English abstract). (文内) ……自Pognante and Spencer(1991)在南迦帕尔巴特西南方的Kaghan谷中首次发现榴辉岩以来,……Le Fort et al.(1997)在位于南迦帕尔巴特-哈拉木什地块东侧Stak地区印度河缝合带中发现了由基性岩变质而成的榴辉岩,……。 (对应的文献)Le Fort, P.,Gullot,S.,Pecher,A.,1997.HP metamorphic belt along the Indus suture zone of NW Himalaya:New discoveries and significance. C.R.Acad.Sci.Paris,325:773-778. Pognante,V.,Spencer,D.A.,1991.First report of eclogites from the Himalayan belt,Kaghan valley (northern Pakistan).European Journal of Minerology,3:613-618. (2) 专著、译著(文内)……王尚彦和殷鸿福(2001)对贵州省威宁县哲觉剖面早三叠世卡以头组57层至61层孢粉进行研究,从剖面上所获得的孢粉数量较少,……。 (对应的文献)王尚彦,殷鸿福,2001.滇东黔西陆相二叠纪-三叠纪界线地层研究.武汉:中国地质大学出版社,88.Wang,S.Y.,Yin,H.F.,2001.Study on terrestrial Permian- Triassic boundary in eastern Yunnan and western Guizhou.China University of Geosciences Press,Wuhan,88 (in Chinese). (文内)……根据希尔契(1989)的研究成果:(1)对于高频感应测井,黄铁矿影响增大;(2)在含高矿化度地层水的地层中……。 ……希尔契,D.W.,1989.现代测井解释.龚伟华,张中伟,译.北京:石油工业出版社.Hilich,D.W.,1989.Modern well log interpretation.Translated by Gong,W.H.,Zhang,Z.W..Petroleum Industry Press,Beijing (in Chinese). (3) 论文集中析出文献(文内)……图2为南迦帕尔巴特西南的巴基斯坦喜马拉雅和南迦帕尔巴特地区的反映变质作用和深熔作用的温度-时间图(Searle,1996)……。 (对应的文献)Searle,M.P.,1996.Cooling history,erosion,exhumation,and kinematics of the Himalaya Karakoram Tibet orogenic belt.In:Yin, A.,Harrison,T.M.,eds.,The tectonic evolution of Asia.Cambridge Univ.Press,New York,37-110. (4) 报告(文内)……Zhang(2001)选择冰岛Bakki低温温泉系统,采用矿物饱和指数法获得了120~160℃的深部热储平衡温度……。(对应的文献)Zhang,Z.S.,2001.Waterrock interaction in the Bakki lowtemperature geothermal field,Southwest Iceland.Report 17.In:Geothermal training in Iceland 2001.UNU G.T.P.,Iceland,405-434. 6 相关的注意事项(1) 作者单位的中文必须与英文对照,结构如下大学或研究所 院系 ,省市 邮编示例:中国地质大学地球科学学院,湖北武汉 430074Faculty of Earth Sciences, China University of Geosciences, Wuhan 430074, China(2) 第一作者简介包括:姓名(19--),职称,研究方向或主要工作,E-mail,Tel.(3) 提供基金项目的名称和项目号。示例:基金项目:国家"九五"重中之重科技攻关项目(No.96-B02-03-05)(4) 提供WORD文档和CORELDRAW8.0,9.0,10.0的图形文件。(5) 注明投稿者的联系方式,包括通信地址、邮编、电话和E-mail。(6) 投稿时请提供至少3个教授级专家作为审稿人,注明他们的职称、研究方向、通讯地址、邮编、E-mail或联系电话。

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