遵义师范学院周璐发表论文

教育学原理作为一门基础和必修课程，不仅是高等师范院校学生和欲取得教师资格的其他院校学生的一门重要公共课，还是各级各类教育专业的必修课。下面是我给大家推荐的教育学原理的论文，希望大家喜欢!

教育学原理的论文篇一

《关于教育学原理的教学改革》

摘要：当前我国高校教育学原理的教学质量不容乐观，学生普遍缺乏对其学习的积极主动性。分析了教育学原理教学存在的主要问题，探讨了改革的对策为建议。

关键词：教育学原理;教学改革

作者简介：李章琼(1973-)，女，贵州湄潭人，遵义师范学院副教授，研究方向为教育学原理。

中图分类号：G712文献标识码：A文章编号：1001-7518(2012)08-0034-02

在我国教育学原理包括两个方面，一方面，教育学原理是教育学一�学科中重要的二�学科之一。另一方面，教育学原理是教育学各个专业的一门重要的基础课程。其中，作为一门基础课程，教育学是高等师范院校学生和想要取得教师资格的学生的一门重要的公开课，在不同的高校，教育学原理有不同的称谓。(教育概论，教育通论，教育学)这门基础课程的主要任务旨在培养学生具有系统扎实的教育学的基本理论知识。然而，目前在我国，教育学原理这么基础课的开展效果并不理想。很大一部分学生不明确教育学原理的目标任务，还有一部分学生对其不感兴趣，深感教育学原理内容枯燥，乏味，与教学实践想脱离。本文着从当前我国高校教育学原理这门课程的教学现状入手，分析当前教育学原理的教学存在的诸多问题，并提出相应的改革措施。本文所讲的教育学原理的基础课程主要是针对本科生而言。

一、存在问题

(一)学生问题

学生的积极性不高主要体现在大部分学生对教育学原理这门基础课程的兴趣不大。究其原因，主要是因为学生存在对教育学原理的认识误区。相当一部分学生把教育学原理当做入门课，不能认识到理论学习的重要性。尽管教育学是一门实践性质的学科，经验和实践是必要的。然而，缺乏理论指导的实践是盲目的和无效的。因此大部分高校学生不但要重视教育实习等实践课程的学习，更要在实习之前加强对理论的重视，避免盲目的实践。

(二)教材问题

事实上，当前教育学原理的教材五花八门，层出不穷。既有高校内部的自编教材，也有延续多年的老教材。例如，数量上严重超支，然而质量有待提升，精品、经典教材严重匮乏。各高校普遍面临教材内容陈旧、空洞、缺失个性的问题。教材的质量问题反映了我国出版界的浮躁作风。为了跟上教学改革的步伐，相当一部分教材仍旧延续老教材的框架，只是在少许章节略加修改。还有一部分教材是不同教材的拼凑的结果，缺乏层次性和逻辑性。另一方面，当前教育学原理的教材缺乏现实性。虽然教育学原理的任务旨在让学生了解教育的基本理论。但是理论来源于实践。教育学归根结底是一门实践课程。当前的教育实践瞬息万变，因此教育学的理论研究也应紧随实践步伐，体现出时代性和实践性。

(三)教学方法问题

我国高校目前的教育学原理的开展仍旧属于理论教学。因此从教学形式上来看仍旧是教师讲授、学生聆听，教师主导的形式。在教学方法上，高校教师普遍采用教授法。一言堂的教学形式仍是主调。采用教授法的优势主要体现在教学的高效率。由于高等院校不同于中小学，教材内容量大，冗杂，而教学时间却极为有限。教师要在有限的课堂时间内完成繁多的教学任务，教授法仍旧是最普遍的选择。此外，当前我国的高校教育学原理的教学实现了多媒体、信息化。信息技术的应用可以有效提升教学效率。然而，速度的提升导致了学生的被动聆听，被动思考。例如，许多年轻教师缺乏教学经验，在课堂上只能照幻灯片读，教学严重缺乏趣味，学生不能有效参与，导致教学质量的低劣。

(四)教学评价问题

教学的评价形式单一是影响我国高校教育学原理教学质量的最为重要的因素。当前我国大部分高校仍旧沿袭考试的评价方式。闭卷考试仍旧是最为重要、最为方便的评价方法。试卷中的大部分试题学生可以在教材中找到答案。据笔者调查，我国大部分高校普遍存教师在考前圈定考试范围的潜规则。学生为了能通过考试，在考前进行突击。平时的课堂教学成为走过场。大部分学生为了应对考试，对教育学原理的内容进行死记硬背，临阵磨枪，并不能真正理解教育学原理中的基本概念，教育家的基本思想。考试结束，平时课堂上的学习内容成为过眼云烟。

二、改革探讨

(一)有效调动学生积极性

调动学生对教育学原理学习的积极性应该从两方面入手。一方面，学生自身要做到思想重视。尽管实践是检验真理的唯一标准，教育实践的重要性不言而喻。然而，高校学生普遍缺乏教学经验，对教学实践存在很多认识误区，对教学理论的应用和理解较为理想化。因此理论的学习一方面可以为学生今后的教学实践提供理论指导，避免盲目的实践。更重要的是，理论学习能够帮助学生真正理解教育，包括教育目的、教育家的思想，教育的历史等，能够正确认识教育现象，客观认识教育问题。教育实践是极其复杂的，有着不确定性。新手教师如何在遇到棘手的教学问题时，如何能够机智应对，拥有实践智慧?先前的理论学习对于培养教师的教学机智、实践智慧是极其重要的。因为教育学的基本理论问题来自于教学实践，是实践问题的结晶，是经过实践检验的。虽然在教育学原理的教学内容中，不存在放之四海而皆准的教学原则与教学方法，但是教育学原理的理论学习至少提供了一种参考的视角，为高校学生在走向将来的教学实践提高了借鉴的范例。

(二)重视教材的精选与内容提炼

教材是高质量教学的保证。为了提升教育学原理的教学质量，我国高校首先要做到精选教材。当前市场上同一学科专业的教材琳琅满目。因此，高校教师首先自己应该通晓不同版本的教材，对不同版本的教材做比较，然后斟酌，根据自身学校定位与学生特点选择适合的教材。此外，精选教材并不意味着教材的唯一。因为不同的教材有不同的侧重点和闪光点，因此课堂上以一本教材为主，课下可参考其他教材。学生通过对不同版本教材的阅读与学习，可以加深对同一问题的认识，形成批判意识。另一方面，教材不应该局限于教科书。网络资源和期刊文献也是有效的教材和教学内容。事实上，相当一部分教科书的内容是落后于当前研究的，因此，高校教师应该针对具体的教学内容为学生提供教材之外的资源。例如，在对教学本质的讲授时，大部分教材只是罗列了几种观点。教师可以给学生提供当前学者的最新颖的观点和视角。一方面学生可以了解同一问题的不同观点。另一方面，学生能够意识到教材的局限性，学会批判教材，提升自学能力。

再者，教师在讲授教学内容时应超越书本，加入自己对教学内容的理解，引人自己的观点。高等学校的教学不同于中小学，许多问题并无标准答案，教育学是一门开放性的学科，教材或者论文只是提供了一种视角。教师在讲解自己观点时也能够激发学生自己的思考，形成自己观点，进而做到超越书本与教材。

(三)教学方法多元化

当前大部分高校的教育学原理的教学仍旧属于理论教学。理论教学主要采用教授的教学方法和班�授课的理论教学形式。教师采用讲授法可以保证在规定时间内完成教学任务。然而，这种教学的弊端也是显而易见的。教育学原理的相当一部分教学内容是来源于教学实践的。然而，大部分高校学生缺乏教学实践，因此在理解这部分内容时普遍存在困难。这就需要教师更新教学方法。此外，还有一部分教学内容是存在争议的，并不存在唯一的答案。这时，教师可以结合其他教学方法，确保学生能够深刻理解教学内容。例如，教育学原理对教育的定义的争论。教师可以将全班学生分成几个小组。不同的小组成员分别进行讨论，探讨不同的定义的合理性与不合理性。通过这种方式一方面可以激发学生的学习兴趣，调动他们的积极性。另一方面，可以帮助学生学会独立思考，独立思维，建构自己的思想。因此，高校教师应该改变传统的以知识讲解和学生聆听为重心的教学模式，引导学生质疑、调查、探究的积极主动的学习，促进学生参与教学。教育学原理可以突破单一的讲授法，采用以下教学方法。

1.案例教学。教育学原理运用案例教学法应注重理论性、原理性。好的案例既包含着当前教育实践中存在的大量问题，也内含着丰富的知识与学术信息。教师不但要筛选案例，而且引导学生学会分析案例，将案例的分析与探讨与理论结合起来。

2.小组讨论。教师可以将全班学生随机分成若干小组。各小组成员可以对所学的理论知识各抒己见，互相评价。一方面，学生通过听取其他同学的观点，可以开拓自己的视野，丰富自己的理论知识。另一方面，学生表达自己观点的同时也是一个再创造与学习、训练的过程。

3.探究式教学。教师可以为学生选定不同的课题，学生在课下自己查阅文献，最终以报告的形式在课堂上展示。这种教学方法可以有效培养学生的自学能力和独立研究能力。

总之，高校的教学不同于中小学，应突破传统的以传授知识为主的固定思维模式。高校的教学应着重培养学生的批判思维、理论联系实际的能力，而不仅仅是对理论的记忆与背诵。

(四)教学评价多元化

考试的评价方式既可以激励学生的学习，也可以造成学生的功利心态。目前我国的教育体制中，考试成绩与学生的学分、评优相挂钩。学生为了能够争取学分，拿到学位，在备考的过程中，被迫消化、理解所学内容。因此，考试也是一个学习的过程。然而，考试并不是唯一的评价方式。学生为了应对考试往往采取死记硬背的学习方法，这种评价方式僵化了学生的思维。因此，高校应该建立多元的评价方法。例如，教师可以给学生设计一个主题，围绕相关主题，鼓励学生形成学术论文或者报告，根据学生论文或者报告的质量评价学生。

总之，高校教师和学生都应该重视对教育学原理的学习，对教育基本理论与问题的学习。正如汉森所讲：“观察渗透着理论，任何观察都具有理论负荷。”

参考文献：

[1]王铁军.对我国教育学的反思―教育学不是指令，而是具有更高的力量[J].华东师范大学学报(教育科学版)，1991(2).

[2]沈有禄，石连海.教育学原理教学改革探讨[J].辽宁教育行政学院学报，2010(3).

教育学原理的论文篇二

《教育学原理教学改革探讨》

摘要：本文基于教育学原理教学存在的问题，探讨了科学实践教学改革策略。对提升教学水平，优化教学效果，培养新时期综合全面人才，有积极有效的促进作用。

关键词：教育学原理教学改革策略

中图分类号：G420文献标识码：A文章编号：1673-9795(2013)03(b)-0057-01

教育学原理是一门重要的教育学基础课程，通过实践教学，可培养学生掌握丰富的教育理论、巩固综合能力水平。目前，教育学原理在我国开展效果还有待进一步提升，较多学生没有充分了解该学科目标任务，无法提起学习兴趣。还有些学生感到教育学原理教学内容的单一枯燥性，无法同教学实践紧密联系。针对这一现状，本文就教育学原理教学如何科学改革探索，制定了科学有效的实践策略，对提升教育水平，激发学生学习兴趣，有重要的实践意义。

1教育学原理教学存在的现实问题

教育学原理实践教学中，较多学生没有正确认识到该学科教学的重要性，存在认识层面的一定误区。虽然教育学属于一类实践性学科，然而其同样需要科学理论的有效引导，因此，学生不仅应注重教育实习，更应注重实习前期强化理论重视，方能避免盲目教学实践。当前有关教育学原理的学科教材种类丰富，呈现出数量达标、质量还需进一步提升，缺乏经典优质教材的不良问题。一些学校则普遍存在选用教材教学内容陈旧、单一，无法突出个性的弊端。为快速紧跟教学改革实践步伐，一些教材仍然持续应用老教材体系框架，仅仅对少量章节内容进行略微修改。而一些教材则借鉴多本教材进行内容的单一拼凑，欠缺科学逻辑性及丰富层次性。再者，较多教育学原理编制教材欠缺现实性，基于教育学是一类实践教学课程，且教育实践丰富变换，为此，教育学理论相关研究应跟上实践发展步伐，方能体现良好的实践性以及时代性特征。当前，我国较多学校开展教育学原理仍停留于理论教学层面，教学形式则多为教师传授知识、学生被动学习，虽然提升了教学效率，却无法有效激发学生学习兴趣。加之信息化时代，教师过分依赖多媒体课件、幻灯片教学，没有注重同学生的良好互动，令教学质量无法实现良好提升。从教学评价层面来讲，则存在形式单一的不良问题。一些学校仍旧采用闭卷考试单一评价模式，令学生过分注重应试技能锻炼，形成了考前突击学习、考后快速忘记的不良问题。

2教育学原理教学实践改革策略

2.1提升学生学习积极性

针对教育学原理实践教学中，学生积极性不强的现状，应由思想层面提升学生重视性，虽然真理的检验需要依靠实践来完成，然而，由于在校学生通常欠缺实践教学丰富经验，对教学存在认识理解误区，应用教学理论往往过于理想化。为此，加强理论学习可为学生实践教学提供优质的理论引导，杜绝盲从实践弊端问题。理论学习还可令学生正确理解教育内涵，树立科学教育目标，掌握教育家精髓思想意识，明晰教育历史并通过教育现象客观明确教育问题。实践教学较为复杂，包含较多不确定性。青年教师在应对棘手教学问题阶段中，如何做到机智、灵活，形成实践智慧，理论学习则显得尤为重要。因此，教育学原理教学阶段中，教师应引导学生明晰该学科学习的重要性，为学生提供一类科学的实践参考依据，扩充其教育视野，进而全面提升学习积极性，基于教育学原理指引学生前进方向，为其教育实践提供优质的借鉴范例。

2.2注重教材的优选以及核心内容的良好提炼

优质教材可确保高效良好的教学实践，因此，我们应科学做好教材精选。针对当前丰富多样的教育学原理教材，教师应就不同版本学科教材进行全面对比，科学通晓。通过仔细斟酌，依据学校发展定位、专业学生综合特征做好优质选择。同时教材精选并不代表唯一性，各个教材均有其重点研究内容与闪光之处，为此课堂教学可将一本教材作为主导，课后则可令学生多参考基本学科教材。令其通过丰富的教材阅读、实践学习，深化问题认识，提升批判精神。另外，教材选择不应仅仅限定在教科书范围内，网络资源以及期刊文献也可作为教学内容。实践教学中，针对较多教材进行观点罗列的状况，教师可进一步丰富学生视野，为其提供最前沿的学科理论，最独特的学习视角，令学生接触针对同一问题的各类不同视角观点。还可锻炼学生评判教材局限性的实践能力，促进其自学能力的优化提升。再者，教师实践教学阶段中，应有效跨越书本内容，引入自己对教育学原理内容的独到见解，进而激发学生创新思维，优化教学效果。

2.3多元化应用教学方式，提升教学水平

(1)基于案例教学，促进理论与实践教学的有效结合。教育学原理教学应科学应用案例教学方式，通过案例令学生掌握教育学相关理论与原理知识。案例应涉及当前教育阶段中包含的问题，并涵盖多元化学科知识与先进性学术知识。教师则应做好案例选择，并引导学生实施案例分析，掌握研究技能，促进案例分析、研讨同理论学习的有效结合。(2)积极组织小组讨论。教师在实践教学中可随机将班级学生分为不同小组，组内成员则可就教育学理论知识抒发自身理解，展开互相评价。学生则可在听取同伴观点的基础上丰富视野，扩充理论知识，并畅所欲言，抒发观点，进而优化学习、再创造以及全面训练的学习提升过程。(3)开展探究式教学，提升学生综合学习能力。教育学原理教学阶段中，教师可为学生设计编制不同课题，令其在课后利用网络信息工具自主查阅文献，并通过报告模式进行课堂展示。该类教学方式可全面培养学生形成自主学习与独立探究综合能力，进而达到事半功倍的学习效果。

2.4丰富开展教学评价，优化教学效果

考试并不应该是单纯的教学评价模式，否则，将会令学生形成为了考试而考试的僵化学习模式。为此，应创建多元、丰富的教学评价模式。例如，教师可设计编制一个教学主题，并令学生围绕相关内容主题，形成报告、编写学术论文，依据其完成综合质量进行学生学习效果的综合评价。还可将平时成绩、出勤率、课后作业完成情况、学生实习能力等作为教学评价手段，通过设计一些开放性题目考查学生变通、总结、自我创新能力，进而真正优化教学效果，提升学生综合学习水平。

3结语

总之，针对教育学原理教学实践存在的问题，我们只有制定科学有效的应对策略，提升学生学习兴趣、注重教材优选、应用多元化教学方式、丰富开展教学评价，方能优化教学效果，提升学生综合实践能力水平，并培养出全方位发展的学科人才。

参考文献

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[4]陈双虎.“先学后教”就是让学生充分地自主学习[J].大观周刊，2011(43)：79.

分子生物技术在微生物降解环境 污染物中的应用 [摘要〕介绍了与环境微生物关键降解酶基因的筛选、克隆及应用相关的分r生物技术，包括聚合酶链式反应技 术、基因重组技术、荧光原位杂交技术和生物信息学等技术，并对这些技术在污染物降解基因检测、筛选和克隆方 面的应用进行了阐述与探讨、 [关键词]分子生物技术;微生物;基因;环境污染物;降解 随着现代j:\地技术的发展，多环芳烃、含氯有 机物和硝基苯类化合物等人工合成井难以降解的 污染物大量排放，造成世界范围内的环境污染和生 态破坏，严重地威胁人类和其他生物的正常生存和 发展。利用微生物修复技术对受污染的水体及土 壤进行处理，凸显了其重要的意义和可行性。研究 人员发现并筛选到一些微生物，它们不仅对环境有 较高的适应性、对污染物有较高的耐受性，而且对 污染物有较强的降解效率和专一性。然而环境中 存在的大量微生物中仅有少于1%可通过传统的培 养方法进行培养、分离和纯化，绝大多数细菌需要 非常严格的营养条件川。因此，为了对修复环境有 所贡献却难以培养的微生物进行更全面了解，也为 了筛选到更多有利于降解环境污染物的微生物菌 种及其关键酶基因，分子生物技术和手段逐渐被广 泛应用到环境可降解污染物及降解机理方面的研 究中。 本文对近年来发展起来的聚合酶链式反应 (PCR)技术、基因重组技术、荧光原位杂交(FISH) 技术和生物信息学等多种分子生物技术进行了介 绍，并总结了它们在污染物降解基因检测、筛选和 克隆方面的应用。 1与环境污染物降解相关的分子生 物技术 1.1PCR及其相关技术 PCR是一种利用脱氧核糖核酸(DNA)半保留 复制原理，在体外扩增位于两段已知序列之间的 DNA区段从而得到大量拷贝的分子生物技术。根 据其模板、引物来源或扩增条件的不同，PcR技术 可分为以下几种:(l)反转录pCR(RT一PeR)技 术，将mRNA反转录为cDNA后再对其进行PCR 扩增，可用来构建cDNA文库，分析不同生长时期 的mRNA表达状况和相关性以及mRNA的定量测 定等;(2)巢式PCR技术，在扩增大片段目的DNA 时，先用非特意性引物扩增再用特意性引物对第一 次扩增产物进行第二次扩增，以获得可供分析的 DNA;(3)竞争PCR技术，是一种定量PCR，向PCR 反应体系中加人人工构建的带有突变的竞争模板， 通过控制竞争模板的浓度来确定目的模板的浓度， 对目的模板作定量研究;(4)实时荧光定量PCR技 术，在PCR反应体系中加人荧光基团，利用荧光信 号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线 对未知模板进行定量分析，该法已广泛用于基因表 达研究、转基因研究等方面;(5)扩增的rDNA限制 酶切分析技术，根据原核生物rDNA序列的保守性， 将扩增的rDNA片段进行酶切，通过酶切图谱来分 析菌间的多样性;(6)RNA随机引导PCR技术，基 于任意寡核昔酸引物与RNA之间可能的配对，在 低严谨度条件下经聚合酶催化使链延伸，将细胞总 RNA或InRNA作为反转录反应的模板，此技术结 合单链构象多态性，用非变性胶分辨大小相同而构 象不同的片段，可用于诊断遗传突变及分析污染条 件下序列的多态性;(7)随机扩增多态DNA (RAPD)技术，是一种基于PCR检测PCR引物结合 位点序列改变的方法，通常以10bp的寡核昔酸序 列为引物，对基因组DNA随机扩增，电泳分离染色 扩‘增产物，再分析多态性。 1.2FISH技术 FISH技术利用荧光标记的探针在细胞内与特 异的互补核酸序列杂交，通过激发杂交探针的荧光 来检测信号。荧光探针比放射性探针更安全，具有 较好的分辨力，不需要额外的检测步骤。近年来， 由于FISH技术具有灵敏、便捷等优点，迅速发展完 善成为研究环境微生物的有力工具。此外，可用不 同激发和散射波长的荧光染料标记探针，在一步反 应中同时检测几个靶序列。该技术主要包括试样 固定、预处理、预杂交、探针和试样变性、杂交、漂洗 去除未结合的探针、检测杂交信号等步骤。由于 165rRNA具有遗传稳定性，因此成为FISH技术检 测最常用的靶序列。 1.3基因重组技术 基因重组技术是从供体生物的基因组中通过 酶切扩增等手段获取目的基因，与载体连接形成重 组DNA分子，再导入到受体细胞中，让外源基因得 以表达。在已经分离出的许多菌株中，与降解能力 有关的基因多在质粒体上。由于质粒很容易在细 菌的繁殖过程中遗失，对细菌降解能力的长期稳定 非常不利，可将其与污染物降解有关的酶基因重组 到大肠杆菌等微生物中进行表达，以此构建的各种 生物降解特性增强的重组菌可用于污染环境的治 理修复或发酵某些废弃物。 1.4生物信息学 20世纪后期，生物学的迅猛发展，从数量上和 质量上极大地丰富了基因组数据库、蛋白质数据 库、酶数据库和文献数据库等许多生物科学的数据 资源。已有多个国家和国际科研组织建立了生物 信息数据库，如欧洲分子生物学实验室(Eur叩ean MolecularBiologyLaboratory)核酸序列数据库和美 国国家生物技术情报中心(Nationaleente:fo:Bio- technologyInformation，NCBI)基因序列数据库等。 科学家利用计算机及生物信息分析软件分析这些 数据资源，确定大分子序列、结构、表达模式和生化 途径与生物数据之间的关系，区分生物个体间遗传 差异，揭示DNA多样性。例如，基本局部比对搜索 工具(BasieLoealAlignmentSearehTool，BLAST)， 是一套在蛋白质数据库或DNA数据库中进行相似 性比较的分析工具。它基于Altschul等的方法「2〕， 在序列数据库中对查询序列进行同源性比对工作。 BLAST程序可对一条或多条、任何数量、任何形式的 序列在一个或多个核酸或蛋白序列库中进行比对，甚 至将有缺口的比对序列也考虑在内，利用比较结果中 的得分对序列进行相似性说明。基因的序列分析可 揭示出生物物种之间的关系，在污染治理研究中可用 于生物基因组特殊区域或特异基因的测序。 2分子生物技术在环境污染物降解 中的应用 2.1土壤试样总DNA的提取 用适当方法直接从土壤中提取DNA并纯化， 是从分子生物学角度对土壤微生物进行研究的前 提条件，而后可进行酶切、PCR扩增、核酸分子杂交 等分子生物学技术操作。从土壤中提取微生物 DNA主要分为汽接法和间接法}’{。直接法是在 ogram等的方法基础卜发展起来的，其主要包括2 个步骤:(l)原位细胞裂解;(2)DNA提取和纯化。 直接法提取的DNA超过细菌总DNA的60%且省 力，但提取的DNA常常有折断、腐殖酸污染、甚至 提取物中还夹杂有未知的胞外DNA和真核生物的 DNA。最先报道间接法的是Faegri等[‘〕，其主要包 括4个步骤:(l)分散土壤;(2)分离细胞与土壤; (3)细胞裂解;(4)DNA纯化。间接法提取DNA 产量低且费力，但纯度较高、DNA损伤小，提取的 大片段DNA可用来构建cos而d和细菌人工染色体 文库等。 2.2采用PCR及相关技术扩增分析DNA片段 可降解污染物的微生物必然能产生分解代谢 该污染物的酶。selvaratnam等L’l用编码苯酚单加 氧酶dmpN摹因的RT一PCR技术来检测序列间歇 式活性污泥反应器‘{一，降解酚的假单胞菌。检测结 果表明，RT一PCR技术不仅能检测微生物降解酚的 能力，还能测量dmpN基因的转录水平，从而确定假 单胞菌特殊的分解活性，发现了在转录水平下，酚 浓度与通气时间之问存在正相关关系。 将PCR技术和变性梯度凝胶电泳(DGGE)结 合起来，在变性条件适当的情况下能分辨一个碱基 对，分辨率较高。染色后的凝胶用成像系统进行分 析，可在一定程度l几反应试样的复杂性。条带的多 少能反应试样「 一 }1微生物组成的差异，条带的亮度能 反应试样中微生物的多少。基于以上优点，日前该 技术在微生物群落结构的分析和动态研究方面得 到了厂‘泛应用。DGGE可通过分析PCR扩增的基 因点突变来探索微生物的复杂性。徐玉泉等[“〕从 某废水中分离出一株能以苯酚为惟一碳源的菌株 PHEA一2，使用PCR一DGGE技术对该菌165 rDNA进行分析，发现该菌与醋酸钙不动杆菌同源。 M盯sh等r了)利用PcR一DGGE技术获得了活性污泥 中真核微生物的种群变化情况。王峰等下8〕采用 PCR一DGGE技术对城市污水化学生物絮凝处理中 活性污泥和生物膜微生物种群结构进行了分析，结 果表明活性污泥培养前后微生物种群结构发生r 很大改变。 RAPD技术也是一种应用比较广泛的以多态性 引物来扩增某些片段的技术。RAPD技术可用于检 测含有混合微生物种群的各种微生物反应器中微 生物的多样性。用RAPD技术分析检测实验室规 模的油脂淤泥培养料中的细菌菌群发现，用油脂淤 泥改良过的培养料比未改良的更适于不同的微生 物种群生长[9j。vainio等t’。〕从516种孤立的菌落 中提取出165rDNA，经PCR扩增后进行测序，检测 活性污泥中微生物种群的结构。这些组合技术的 应用显著增强r对微生物的检测和鉴定能力，为理 论研究工艺优化及提高生物处理效率提供了条件。 2.3基因重组 基因工程技术应用于环境保护起始于20世纪 80年代。其基本原理是通过基因分离和重组技术， 将目的基因片段，比如可编码降解某种污染物的 酶，转移到受体生物细胞中并表达，使受体生物具 有该目的基因表达显现的特殊性状，从而达到治理 污染的目的。找到特定污染的抗性基因，利用基因 重组技术转基因后也可获得其他抗性植株以及筛 选到可转化污染物的植物，还可开发超量积累植物 进行污染土壤的生物修复。 罗如新等L”〕用放射性同位素标记tfdc基因片 段作探针，Southemblot杂交定位Ll菌株的邻苯二 酚1，2一双加氧酶基因位于Pstl的I片段和BamH I的M、N片段，回收并将其直接克隆至表达载体 pKT230卜，获得的重组子能转化不具开环酶活性 的甲胺磷降解菌P2，得到高于天然宿主21倍的邻 苯二酚1，2一双加氧酶。stingley等{”〕通过构建基 因文库和重组质粒等基因工程方法证实了NidAB 双加氧酶是降解菲的关键酶类，并首次鉴定出此基 因通过磷苯二甲酸实现降解功能。chae等‘”}发现 不能降解苯酚的su如lobusso扣taricu、98/2菌株中 的儿茶酚2，3一双加氧酶基因与能降解苯酚的 sulfolo右u，，o如taricu、咫有[6J源区，分析得知它们 是山共同祖先进化而来。把儿茶酚2，3一双加氧酶 基因克隆到大肠杆菌中表达，可获得有较高降解活 性的双加氧酶。 重金属污染是环境污染的重要方面之一。随 着分子生物学技术的发展，越来越多的修复性蛋白 基因正被从植物、微生物和动物中陆续分离出来， 如汞离子还原酶基因、有机汞裂解酶基因、汞转运 蛋自基因、金属硫蛋白基因、植物络合素合成酶基 因、铁离子还原酶基因和锌转运蛋白基因L’‘〕。这些 基因通过基因工程的改造，重组到合适的受休细胞 中表达相应的蛋白质和酶，达到治理难以降解的有 毒有害污染物的目的。sorsa等〔”〕把MTS插人 LamB序列的153位点，在E.eoli中表达MTs，解决 r细胞内MTs对金属离子有限的吸附能力。综L 所述，基因重组技术具有快速、高效的特性，已逐渐 成为环境生物技术的研究热点。 2.4FISH技术 FISH技术利用核糖体内长度适中(约1500bp)、 高度保守的165:RNA序列作为理想的基因分类靶 序列，其中使用的165:RNA寡核普酸探针一般是 进行了荧光标记的20bp左右特异性核昔酸片段， 利用该报告分子(如生物素、地高辛)与荧光素标记 的特异亲和素之间的免疫化学反应，经荧光检测系 统对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析。 FISH技术能提供处理过程中微生物的数量、空间分 布和原位生理学等信息。 硝化细菌是一类生理上非常特殊的化能自氧 菌，传统的研究方法要经过富集、分离、分类和鉴定 步骤，耗时长。HSH技术的引人解决了上述困难。 FlsH技术还被广泛用于活性污泥系统、硝化流化床 反应器和膜生物反应器等废水处理系统}’61。 基因工程微生物越来越多地被用于农业害虫 控制和环境污染的生物修复，对人类健康和环境的 影响引起广泛关注。1994年出现了一种新的标记 系统:绿色荧光蛋白(GFP)，由于GFP基因表达产 物对细胞没有毒害作用，且由GFP产生的荧光标记 检测卜分方便、简单。在某些被污染的环境中可分 离出降解该污染物的细菌，通过基因重组等手段使 用GFP分子标记，可更容易的分离检测被标记的 细胞叫。 Bastes等[’8]进行了苯酚降解菌染色体GFP基 因标记实验。通过PCR和Southemblot分析，证明 GFP基因已成功整合到宿主细胞的染色体中。对 标记菌与野生型的降解能力比较结果证明，GFP分 子标记的插人并不影响细胞的苯酚降解能力。 用G即标记Pseudomonasputida，研究活性淤 泥中细菌存活情况{’9飞。Pseudomonasputida被转到 活性淤泥2min后，观察到细胞在淤泥絮凝物间自 由游动;培养3d后，发现荧光细胞减少，大部分已 被合并到淤泥絮凝物中，以防止细菌被原生动物捕 食。用oFP标记石.eozi和Serraliamarceseern，考 察菌株附到絮凝物卜的过程{’()j。使用表面荧光显 微镜能将带有GFP标记的细胞从活性污泥中区分 开，井进行观察和记数。而聚焦激光扫描显微镜 (cLsM)可使GFP标记细菌产生三维轮廓，结合表 面荧光显微镜和CLSM观察GFP标记细胞，结果表 明，细胞表面疏水性在细菌附到絮凝物的过程中起 重要作用，两种细菌附在絮凝物上的模式有很大不 同，通过这种方法可更好地理解细菌赫附机理，有 助于提高废水处理效果。 3结语 分子生物技术的应用使研究人员可从微观的 角度更细致深人地了解微生物对污染物降解的具 体生理生化机制，在分子水平 _ _ [揭示生物体吸收、 迁移、积累有害物质最终被毒害，及适应、抗性等生 态问题，从而筛选到更多有利用价值的微生物。随 着越来越多微生物全部基因序列的解码，对各种细 菌体内可降解基因的分布和表达会有更深人的了 解，有关技术的发展和成熟必将对污染物的降解过 程有一个整体的、生态水平上的认识。 参考文献 l李凤，刘世贵 . 分子生物学技术在环境微生物研究中的 应用 . 世界科技研究与发展，2003，25(4):88一92 2AltsehulSF，GishW，MillerW，etal.Basieloealalign- mentsearehtool . 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