酶促反应动力学毕业论文

1、pH：在一定pH下，酶促反应具有最大速度，高于或低于此值，反应就会下降。2、温度：在温度较低时，反应的速度随温度增高而加快，在温度超过一定范围后，酶变性且反应速度反而随温度上升而减慢。3、激活剂：不可逆抑制剂引起酶的永久性失活。可逆抑制剂引起酶活性暂时性丧失。4、抑制剂：加入激活剂酶促反应速度增加。通常酶对激活剂有一定选择性，且有浓度的要求。扩展资料1、pH对酶促反应速度的影响，通常为钟形曲线。人体内大多数酶的最适pH在6.5～8.0之间。酶的最适pH不是酶的特征性常数。2、酶的最适温度与实验条件有关，因而它不是酶的特征性常数。低温时反应速度降低，但温度升高后，酶活性可恢复。3、酶的催化特异性表现在它对底物的选择性和催化反应的特异性两方面。体内的化学反应除了个别自发进行外，绝大多数都由专一的酶催化，一种酶总能在复杂的底物中找到与之作用的底物。参考资料来源：百度百科—酶促反应参考资料来源：百度百科—酶参考资料来源：百度百科—酶促反应动力学

1、pH：在一定pH下，酶促反应具有最大速度，高于或低于此值，反应就会下降。

2、温度：在温度较低时，反应的速度随温度增高而加快，在温度超过一定范围后，酶变性且反应速度反而随温度上升而减慢。

3、激活剂：不可逆抑制剂引起酶的永久性失活。可逆抑制剂引起酶活性暂时性丧失。

4、抑制剂：加入激活剂酶促反应速度增加。通常酶对激活剂有一定选择性，且有浓度的要求。

扩展资料：

按照酶的化学组成可将酶分为单纯酶和结合酶两类。单纯酶分子中只有氨基酸残基组成的肽链。结合酶分子中则除了多肽链组成的蛋白质，还有非蛋白成分，如金属离子、铁卟啉或含B族维生素的小分子有机物。结合酶的蛋白质部分称为酶蛋白（apoenzyme），非蛋白质部分统称为辅助因子 （cofactor），两者一起组成全酶（holoenzyme）；

只有全酶才有催化活性，如果两者分开则酶活力消失。非蛋白质部分如铁卟啉或含B族维生素的化合物若与酶蛋白以共价键相连的称为辅基（prosthetic group），用透析或超滤等方法不能使它们与酶蛋白分开；

反之两者以非共价键相连的称为辅酶（coenzyme），可用上述方法把两者分开。辅助因子有两大类，一类是金属离子，且常为辅基，起传递电子的作用；另一类是小分子有机化合物，主要起传递氢原子、电子或某些化学基团的作用。

结合酶中的金属离子有多方面功能，它们可能是酶活性中心的组成成分；有的可能在稳定酶分子的构象上起作用；有的可能作为桥梁使酶与底物相连接。

酶的竞争性抑制作用实验报告实验四酶的竞争性抑制作用一、目的要求: 通过实验加深对酶的竞争性抑制作用的了解二、实验原理: 与底物化学结构类似的抑制剂,能与底物竞争和酶活性中心的结合、抑制酶的活性,这种类型的抑制为竞争性抑制。竞争性抑制的程度由抑制剂与底物相对浓度决定。如果底物浓度不变,酶活性被抑制的程度随抑制剂的浓度增加而增强。反之,如果抑制剂浓度不变,则酶活性随底物浓度的增加而逐渐恢复。(来自:写论文网:酶的竞争性抑制作用实验报告) 本实验观察丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响。琥珀酸脱氢酶的活性,在隔绝空气的条件下,可从加入的甲烯蓝褪色情况来观察。 COOHCOOH︳︳ CH2琥珀脱氢酶CH ︳+甲烯蓝——————→‖+甲烯白 CH2CH ︳︳ COOHCOOH三、实验材料1、试剂: mol/L琥珀酸:称取琥珀酸,用蒸馏水配成约600ml,用5mol/LNaOH调pH至,再加水至1000ml /L琥珀酸:用mol/L琥珀酸稀释10倍 mol/L丙二酸:称取丙二酸,用蒸馏水配成约600ml,5mol/LNaOH调pH至,再加水至1000ml /L丙二酸:用mol/L丙二酸稀释10倍/L磷酸盐缓冲液:取mol/LNa2HPO419ml,加蒸馏水至200ml(6)%甲烯蓝液体石蜡2、器材小试管及试管架吸量管及滴管研钵四、实验方法 1、心肌匀浆的制备:取动物心肌1g,置研钵中,剪碎,研磨成匀浆,再加入/L磷酸盐缓冲液10ml,磨匀,备用2、取小试管5支并编号,按下表操作: 加入液体石蜡后,室温放置。观察各管甲烯蓝褪色情况。五、结果处理记录各管甲烯蓝褪色情况,并解释结果。六、注意事项 1.心肌要用新鲜的 2.注意各种试剂加入的顺序,混匀各管已加入的试剂后马上加入液体石蜡3.及时、仔细观察颜色变化 4.观察结果过程中,不要摇动试管,以免溶液与空气接触而使甲烯白重新被氧化变蓝七、思考题在此实验基础上,如何设计实验来观察“增加底物浓度,酶的竞争性抑制作用可以降低或消除”的现象? 酶促反应动力学实验报告杨恩原实验目的: 1.观察底物浓度对酶促反应速度的影响 2.观察抑制剂对酶促反应速度的影响 3.掌握用双倒数作图法测定碱性磷酸酶的Km值实验原理: 一、底物浓度对酶促反应速度的影响在温度、pH及酶浓度恒定的条件下,底物浓度对酶的催化作用有很大的影响。在一般情况下,当底物浓度很低时,酶促反应的速度(v)随底物浓度[S]的增加而迅速增加,但当底物浓度继续增加时,反应速度的增加率就比较小,当底物浓度增加到某种程度时反应速度达到一个极限值(即最大速度Vmax)。底物浓度和反应速度的这种关系可用米氏方程式来表示(Michaelis-Menten方程)即: 式中Vmax为最大反应速度,Km为米氏常数,[S]为底物浓度当v=Vmax/2时,则Km=[S],Km是酶的特征性常数,测定Km是研究酶的一种重要方法。但是在一般情况下,根据实验结果绘制成的是直角双曲线,难以准确求得Km和Vmax。若将米氏方程变形为双倒数方程(Lineweaver-Burk方程),则此方程为直角方程,即: 以1/V和1/[S]分别为横坐标和纵坐标。将各点连线,在横轴截距为-1/Km,据此可算出Km值。本实验以碱性磷酸酶为例,测定不同浓度底物时的酶活性,再根据1/v和1/[S]的倒数作图,计算出其Km值。二、抑制剂对酶促反映的影响凡能降低酶的活性,甚至使酶完全丧失活性的物质,成为酶的抑制剂。酶的特异性抑制剂大致上分为可逆性和不可逆性两类。可逆性抑制又可分为竞争性抑制和非竞争性抑制等。竞争性抑制剂的作用特点是使该酶的Km值增大,但对酶促反映的最大速度Vmax值无影响。非竞争性抑制剂的作用特点是不影响[S]与酶的结合,故其Km值不变,然而却能降低其最大速度Vmax。本实验选取Na2HPO4作为碱性磷酸酶的抑制物,确定其抑制作用属于哪种类型。实验步骤: 实验一:底物浓度对酶促反应速度的影响 1.取试管9支,将/L基质液稀释成下列不同浓度: 管号试剂 2.另取9支试管编号,做酶促反应: 管号试剂 3.混匀,37℃水浴保温5分钟左右。 4.加入酶液后立即计时,各管混匀后在37℃准确保温15分钟。 5.保温结束,立即加入/LNaOHml以中止反应。各管分别加入%4-氨基安替比林ml及%铁***化钾ml。 6.充分混匀,放置10分钟,以管1为对照,于波长510nm处比色。读取各管吸光度, 做记录。(酶活性计算及Km值计算) 实验计算: 1.在37°C下保温15分钟产生1mg酚为1个酶活性单位,从标准曲线查出释放的酚量, 以此计算处各管的酶活性。 2.以1/v为纵坐标、1/S为横坐标,在坐标纸上作图,求出酶的Km值。 Y=+,Km= 实验二:抑制剂对酶促反映的影响 1.取试管9支,将/L基质液稀释成下列不同浓度

一、实验原理：

与底物化学结构类似的抑制剂，能与底物竞争和酶活性中心的结合抑制酶的活性，这种类型的抑制为竞争性抑制竞争性抑制的程度由抑制剂与底物相对浓度决定。

如果底物浓度不变，酶活性被抑制的程度随直抑制剂的浓度增加而增强。反之，如果抑制剂浓度不变，则酶活性随底物浓度的增加而逐渐恢复。

本实验观察丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响琥珀酸脱氢酶的活性，在隔绝空气的条件下，可从加入的甲烯蓝褪色情况来观察。

二、实验材料

1、试剂：

（1）0.2molL琥珀酸：称取琥珀酸23.618，用蒸馏水配成约600m1用 5molL5 NaOH调pH至7.4，再加水至1000ml。

（2）0.02mol/L琥珀酸：用0.2mo1/L琥珀酸稀释10倍。

（3）0.2mol/L丙二酸：称取丙二酸22.92g，用蒸馏水配成约600m1，5 molL NaOH调ph至7.4，再加水至1000m。

（4）0.02mol/L丙二酸：用0.2mo1L丙二酸稀释10倍。

（5）0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.4）：取02mol lL/ NHPO4419m，加蒸馏水至200m1。

（6）0.02%甲烯蓝。

（7）液体石蜡。

2、器材

（1）小试管及试管架。

（2）吸量管（0m11）及滴管（8支）。

（3）研钵。

三、实验方法

1、心肌匀浆的制备：取动物（鼠、猪等）心肌1g，置研钵中，剪碎，研磨成匀浆，再

加入0.1mo1/L磷酸盐缓冲液10m1，磨匀，备用

2、取小试管5支并编号，按下表操作：

加入液体石蜡后，室温放置。观察各管甲烯褪色情况。

四、结果处理

记录各管甲烯蓝褪色情况，并解释结果。

五、注意事项

1、心肌要用新鲜的。

2、注意各种试剂加入的顺序，混匀各管已加入的试剂后马上加入液体石蜡。

3、及时、仔细观察颜色变化。

4、观察结果过程中，不要摇动试管，以免溶液与空气接触而使甲烯白重新被氧化变蓝。