提取茯苓多糖论文文献综述

说到复合多糖，就不得不提到多糖了。多糖（polysaccharide），是由糖苷键结合的糖链，至少要超过10个的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物，其中，单糖一般是含有3-6个碳原子的多羟基醛或多羟基酮。最简单的单糖是甘油醛和二羟基丙酮。

什么是复合多糖？

碳水化合物有区分为简单与复杂，一般把单糖和低聚糖归类为简单碳水化合物，多糖则是复杂碳水化合物。单糖是构成各种糖分子的基本单位，天然存在的单糖一般都是D型。可用通式(C6H10O5)n表示。

微生物来源活性多糖的研究进展【关键词】 多糖；,,,微生物；,,,药用；,,,生物合成 摘要： 活性多糖是新药研发中的一个热点，其中研究相对较多的是来源于微生物的多糖。近年来，关于微生物多糖的研究有了进一步的发展，本文对药用微生物多糖在生物合成、作用机制和构效关系等各方面的最新研究进展进行了综述。 关键词： 多糖； 微生物； 药用； 生物合成 Advances in the research of active polysaccharides derived from microbes ABSTRACT Over the past few years, many advances have been made toward research on active polysaccharides especially microbial polysaccharides, it becomes a hot spot in new drug research and development. This review will focus on recent studies that illustrate the biological activities, mechanisms of action and structurefunction relationships of microbial polysaccharides for drug use. KEY WORDS Polysaccharide; Microorganism; Drug use; Biological activities 多糖广泛分布于高等植物、地衣、海藻、动物和微生物中。微生物来源的多糖是至今研究得比较详细的一类多糖，其广泛的生物活性使得其已成为微生物药物一个重要的组成部分，且在新药研发中越来越受到重视。本文对迄今为止所发现的微生物多糖的药用生物活性进行了综述，并总结了近年来关于多糖构效关系和作用机理方面的研究成果。 1 免疫调节功能 免疫调节剂在疾病治疗中的作用越来越受到重视。多糖免疫调节剂于40余年前被首次发现，近二十年来，有更多微生物来源的多糖被确认对机体免疫反应的调节有着极为重要的意义。这些多糖的免疫调节作用涉及到免疫系统的各个方面，对于其免疫调节机制的研究也体现在各个层次上，对这些多糖分子决定它们与宿主免疫系统相互作用的结构特征也已经进行了更为深入的研究。以下对几种比较典型的免疫调节剂分别进行介绍。 1.1 两性离子多糖 两性离子多糖(zwitterionic polysaccharides,Zps)是有同时含有阳离子和阴离子结构以实现其生物功能的一类多糖。多糖A(PS A)是Zps的分类原型。PS A是从革兰阴性厌氧菌脆弱拟杆菌中分离得到的两种荚膜多糖中的一种。Zps在菌体表面组装成荚膜多糖复合物(CPC)。早期研究证明，CPC能调节腹腔内脓毒症伴随性脓肿的形成〔1〕。CPC的腹膜内给药能诱导脓肿形成，而皮下和肌肉的预防性给药则能防止宿主在细菌感染后形成脓肿。一方面，在诱导脓肿形成过程中，Zps扮演了多重角色，它能诱导细菌在腹腔间皮表面的粘附，并能刺激某些促免疫细胞因子和化学增活素，进而诱导宿主细胞CAMs的表达，完成腹腔内多形核白细胞的募集。另一方面，Zps预防脓肿形成、保护机体免于免疫反应的作用，并非是作为一种经典的免疫原去介导特异性的免疫反应，而是对宿主的免疫系统进行调节，从而对导致脓肿形成的免疫反应实现全面抑制。其具体机制是Zps对CD4+T细胞活性和IL2生成的调节〔2〕，而IL2似乎是Zps调节机体免疫以预防脓肿的中心环节〔3〕。对于其构效关系的研究表明，Zps同时含有阴阳电荷基团的重复单元是其免疫调节作用的关键性结构，破坏多糖的电荷结构能使其活性显著降低〔4〕。 1.2 β(13)葡聚糖从酵母和真菌中纯化得到的β(13)葡聚糖是另一类免疫调节剂。沿着β(13)葡聚糖主链随机分布着β(16)葡聚糖基支链。Williams等证明β(13)葡聚糖能显著增加动物体内嗜中性粒细胞水平并增加骨髓细胞的增殖。PGG是Williams研究组经高度纯化已获专利的一种β(13)葡聚糖。PGG给药后，嗜中性和嗜酸性粒细胞的比例增加，从给药小鼠体内得到的嗜中性粒细胞，在体外对大肠埃希菌的吞噬作用增加〔5〕；巨噬细胞的形态发生改变，巨噬细胞同时表现出磷酸酶活性增加和脂多糖(LPS)刺激的NO生成的特征〔6〕。研究表明，β(13)葡聚糖能调节淋巴细胞和单核细胞中促免疫细胞因子的产生〔7〕。β(13)葡聚糖对NFκB样和NFIL6样转录因子的调节作用具有时间和浓度依赖性〔8〕。其所涉及的信号转导通路与超抗原LPS不同。PGG用于预防治疗也获得了肯定的实验结果。能显著降低腹腔内脓毒症的致死率。Williams在脓毒症小鼠模型试验中研究了β(13)葡聚糖对转录激活、细胞因子表达的影响，发现与对照动物相比，NFκB和NFIL6的核结合活性降低，TNFα和IL6的mRNA水平也有所下降。转录因子活性和细胞因子表达的下调和败血症动物的存活率升高是正相关〔10〕。β(13)葡聚糖的免疫调节生物活性基于它们与巨噬细胞和多形核中性粒细胞(PMNs)的直接作用。Muller等的工作表明，磷酸葡聚糖，一种水溶性的(13)βD葡聚糖，能够与人或鼠的单核/巨噬细胞结合。这种结合特异地导致了外来细菌的内在化和增加的胞浆空泡化〔11〕。β(13)葡聚糖的免疫调节还涉及到补体途径。补体受体3(CR3)也已经被确认是某些葡聚糖的受体〔12〕。CR3介导的吞噬作用和脱颗粒作用需要CR3结构域上一个iC3b结合位点和一个葡聚糖结合位点同时与配基的结合。用抗PGG葡聚糖受体的单克隆抗体对中性白细胞处理，可以抑制NFκB样因子的激活〔13〕。将酵母菌株煮沸和酶处理得到可溶和不可溶的葡聚糖粗品。不可溶的葡聚糖可通过磷酸化、硫酸化和氨基化等方式进行衍生化修饰以提高其溶解性。可溶性葡聚糖在水溶液中主要以线形的三螺旋结构存在。研究表明，糖链的螺旋结构构象是其生物活性存在的必要条件，而糖链中的亲水性基团(多羟基)应位于螺旋体的表面〔14〕。微粒酵母葡聚糖的免疫调节活性还受其分子量和β(16)糖苷键数目的影响。同样的情况也发生在其他的一些β(13)D葡聚糖上，如真菌多糖pestalotan等。另外，支链长度也会影响多糖的活性。从真菌Phytophthoraparasitica中分离得到的活性β(13)D葡聚糖，其具有葡聚三糖支链的组份，活性大大高于具有葡聚二糖支链的组分〔16〕。 1.3 甘露聚糖从白念珠菌中分离得到了有一定免疫调节活性的甘露聚糖。巨噬细胞递呈的甘露糖结合凝集素(MBL)能与甘露聚糖结合，并通过一种非自身识别机制激活宿主免疫系统。甘露聚糖包裹感染性抗原并介导了内吞和吞噬作用，甘露聚糖受体识别多糖里的一个重复单位，这种识别导致了细胞信号转导、细胞因子产生和补体的激活。研究表明，白念珠菌甘露聚糖在皮下注射给药后对宿主的免疫抑制作用与用药后迟发型超敏反应被抑制有关〔17〕。IL4是介导甘露聚糖特异性诱导免疫下调的关键性细胞因子。另外也有研究表明，IL12p40、IL10和IFNγ对CD+T细胞(下调效应细胞)的产生也有一定作用〔18〕。 1.4 蛋白结合多糖从真菌蘑菇中分离得到了蛋白结合多糖PSK和PSP。这些化合物在结构上比较相近，分子量约为100kDa〔19〕。其单糖间以α(14)和β(13)糖苷键连接，蛋白部分则以天门冬氨酸和谷氨酸为主，蛋白含量约为15%。这类多糖能够抑制体外肿瘤细胞系的生长并具有体内的抗肿瘤活性。对食道癌、胃癌、肺癌、卵巢癌和子宫颈癌等有肯定的防治效果。这类多糖的免疫调节作用机制尚不清楚。有研究表明，小鼠在PSK给药处理后，PSK能结合并抑制免疫抑制细胞因子TGFβ〔20〕。PSK还能够激活嗜中性粒细胞，这些可能是PSK抗癌活性的部分原因。PSK和PSP是生物反应调节剂，能刺激T细胞的激活和诱导IFNγ和IL2的生成。也有研究发现PSK和PSP能增强小鼠体内的超氧化物歧化酶(SOD)的活性〔21〕。 1.5 透明质酸透明质酸(HA)可以由链球菌产生，同时也是组成哺乳动物组织胞外基质的一种主要的糖类成分，在皮肤、关节、眼和大多数其它的器官和组织中都有存在。透明质酸是一个二糖的重复。该二糖是一种最简单的阴离子氨基葡聚糖。透明质酸是通过与真核细胞CD44受体的结合来完成对免疫系统的调节作用。这种配体受体间的相互作用对于T细胞胞间通信和白细胞外渗的调节是至关重要的〔22〕。低分子量HA则可被用于阻断T淋巴细胞CD44和真核细胞来源HA之间的相互作用。这在临床上可被用于防止同种异体移植的排斥反应以保护机体器官的功能。另外，HA能促使创伤愈合，并能在眼睛和关节外科中被用作人体HA的替代品〔9〕。 2 抗肿瘤活性微生物 多糖的抗肿瘤活性多与其免疫调节功能密切相关。多糖能激活免疫细胞，并诱导多种免疫细胞因子和细胞因子受体基因的表达，增强机体的抗肿瘤免疫力。从担子菌门真菌中得到的香菇多糖、裂褶多糖、云芝多糖、茯苓多糖等抗肿瘤多糖，在国内外临床上已普遍应用，都具有上述免疫调节剂的特征结构。从香菇子实体和深层发酵菌丝体中得到的两种具抗肿瘤活性的多糖分别为β(13)葡聚糖和含少量肽的α甘露糖。云芝多糖PSK则具有蛋白结合多糖结构。裂褶多糖和茯苓多糖也是β(13)葡聚糖，但当茯苓多糖含有β(16)葡聚糖侧链时没有活性，而用高碘酸盐氧化反应将侧链除去后，却表现出显著的抗肿瘤活性。免疫调节多糖的抗肿瘤作用需要宿主免疫系统的参与，但有些微生物多糖在体外也表现出对肿瘤细胞生长的抑制作用。除了免疫调节外，近年来对多糖抗肿瘤活性的其它作用机制也有所研究。主要有以下几个方面〔23〕：(1)影响细胞的生化代谢：茯苓多糖对肉瘤S180细胞的增殖有抑制作用，可导致S180细胞膜唾液酸(SA)含量增加，而膜磷脂、花生四烯酸和豆蔻酸的含量下降，细胞膜的PI转换被显著抑制，影响了肿瘤细胞转移和相关抗原的表达。香菇、猪苓、茯苓多糖能抑制人早幼粒细胞白血病HL60细胞酪氨酸蛋白激酶(TPK)的活性，激活磷酸酪氨酸蛋白磷酸酶(PTPP)，可降低细胞酪氨酸蛋白的磷酸化程度；(2)影响细胞周期：某些多糖可能作用于肿瘤细胞的细胞周期。Kamei等将云芝多糖与结肠癌细胞AGS一起培养4d后，肿瘤细胞的数量比对照组明显减少，流式细胞术检测表明，肿瘤细胞的生长被阻滞于S期和G2/M期〔15〕。(3)抗氧化作用：机体内过量的超氧化自由基和脂质过氧化物(LPO)对DNA的持续损伤，会导致细胞的癌变。动物和临床试验表明云芝多糖PSK能增强超氧化物歧化酶(SOD)的活性，缓解肿瘤宿主体内的氧化应激状态。Kariya等在联氨氧化反应体系中观察到云芝多糖有自由基清除剂作用，并通过电子自旋共振检测，证明其有拟SOD的作用。又有报道云芝多糖能增强正常小鼠和正常迟发型超敏感性(DH)小鼠淋巴细胞、脾及胸腺中SOD的活力，而对肿瘤组织中SOD则有明显的抑制作用。(4)其它：香菇、云芝和灵芝等多糖均能抑制鼠肝细胞对致癌物苯并芘的吸收。香菇多糖能使肿瘤部位的血管扩张和出血，造成肿瘤组织坏死。有些微生物来源的多糖与肿瘤细胞表面的糖类分子很相似，能抑制肿瘤细胞的粘附，从而抑制了肿瘤细胞的侵袭与转移〔24〕。 3 抗病毒活性 多糖的抗病毒作用已引起医药界的高度重视。尤其在抗HIV方面，硫酸酯化多糖因为其活性明确，已成为近年来的研究热点〔26〕。研究表明，其作用机制除了多糖的免疫激活作用外，该类聚合物可以通过阻断HIV病毒gp120与宿主细胞CD4受体的结合而发挥作用，这可以阻断病毒对宿主细胞的吸附，防止合细胞的形成〔25〕。某些硫酸多糖还能够抑制HIV逆转录酶活性，硫酸化侧链与RNA模板引物上的某些酶有相同的结合位点，从而产生竞争性抑制作用。最近的研究又发现，硫酸多糖与HIV1反式激活因子tat的结合能阻止tat蛋白进入胞内，使HIVLTR的转录激活受到抑制，从而抑制了HIV1的复制和整合。硫酸多糖的抗病毒活性首先源于其聚阴离子特性，因此硫酸基团是该类多糖活性的必要条件。分子中硫酸基团的含量越高，其抗HIV的作用越强。但硫酸根过多会产生抗凝血等不良反应〔27〕。硫酸基团分布的空间构象对抗病毒活性也有影响，如Tat蛋白与肝素的结合要求至少有2O、6O和N位置的硫酸化〔28〕。糖链柔性的降低能升高硫酸多糖的抗病毒活性。分子大小是多糖抗病毒活性的另一个影响因素。硫酸葡聚糖抗HIV的活性随着相对分子质量的增加而增加，相对分子质量在1×104～5×105的范围内能保持最大活性。除了抗HIV外,多糖对其他类型病毒也有抑制作用，如单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus，HSV1，HSV2)、巨细胞病毒(Cytomegalovirus，CMV)、流感病毒(Influenza virus)、囊状胃炎病毒(Vesicular stomatitis virus，VSV)等〔29〕。香菇多糖具有抗肿瘤作用，硫酸酯化后则具有显著的抗艾滋病作用，在浓度为100mg/L时能完全抑制RT活性，10～100mg/L时能抑制合体细胞的形成，10mg/L时能强烈抑制HIV抗原的合成，并能保护被HIV感染的MT4细胞。但硫酸酯化后的多糖却失去了原有的抗肿瘤活性。由此推测硫酸酯化多糖和非硫酸化多糖的免疫调节作用机制是不同的。通过13CNMR、苯胺蓝荧光法及粘度法测定证明，硫酸基团的引入造成多糖理化性质及其空间立体构象的变化，而这正是多糖活性的决定因素。 4 其它活性 多糖的免疫调节功能使其在临床上具有抗感染和抗炎活性。免疫调节剂的使用相对于常规药物治疗具有其独特的优点。对宿主免疫系统的先天抗感染能力的增强可能会有效地解决抗生素耐药的问题。吴倩等应用重组sIL1 RⅠ为靶点建立抑制剂筛选模型，从链霉菌的代谢产物中得到IL1的拮抗剂139A，动物模型的研究表明它们具有抗类风湿性关节炎的作用〔30〕。对139A生物合成中引导糖基转移酶基因的克隆和鉴定工作也已经完成〔31〕。对中药植物多糖降血糖活性的研究较为普遍，近年来，从微生物中也发现了一些有明显降血糖作用的多糖。从Cordyccps sinensis中提取得到的多糖CSF10能增强葡萄糖激酶活性，加速葡萄糖的代谢；并可以降低GLUT2蛋白水平从而抑制肝脏葡萄糖的输出，最终达到降低血糖的目的〔32〕。另外，发现某些微生物来源多糖(如银耳多糖)和一些多糖的硫酸化衍生物，具有肝素样抗凝血作用，其抗凝活性与多糖分子量和硫酸化程度相关；木耳多糖、银耳多糖等对血栓的形成有抑制作用，这可能与它们降低血栓纤维蛋白原含量，降低血小板数目及其粘附力的能力有关；香菇多糖可促进胆固醇代谢而降低血清胆固醇含量，从而达到降血脂的目的；灵芝多糖能抑制人嗜中性粒细胞自发和Fas介导的细胞凋亡，这与抗衰老活性相关；灵芝中的一种小分子多糖能增加蛋白和核酸的合成；而某些微生物多糖对RNase有抑制作用，可减少RNA降解，对RNA治疗可起到协同作用。5 结语 多糖类药物具有多效性、低毒性、来源广泛、天然绿色等优点，多糖与现有药物的联合用药可以提高药物的作用范围和效力，减少用药量，并可防止或推迟耐药的出现。但由于多糖结构太复杂，所以不易控制其质量标准，结构测定及合成难度较大；缺乏明确的作用机制研究；而有些多糖在天然产物中含量很低且不易分离得到。这使它们在临床上的应用受到限制。近年来，随着结构分析技术的进步和作用机制研究的不断积累和深入，人们对多糖如何作用于细胞因子网络、协调生物学功能的结构特征有了更多的了解，发现了一些多糖的特异受体，为新活性化合物的开发提供了基础。对于多糖构效关系的认识也更为丰富，为提高活性而进行的结构改造工作也有很大进展。多糖的结构研究是多糖研究中亟待解决的薄弱环节。在确保多糖纯度的前提下，现有二维核磁技术的结合(如：COSY谱、NOESY谱、HOHAHA谱、TOCSY谱等)使我们有可能推导出部分多糖完整的一级结构〔33〕。而质谱由于其高度的灵敏性，在多糖尤其是极少量多糖的结构分析中，也发挥了越来越重要的作用，FABMS和液质联用技术已越来越广泛地用于多糖的结构分析中。多糖的高级结构分析也有所发展，但还无法做到像核酸和蛋白质结构测定那样自动化、微量化和标准化。关于药用微生物多糖生物合成的研究也逐渐开展起来。对这些微生物菌株进行的多糖合成基因分析发现有共同的操作子结构，暗示了这些多糖的生物合成拥有相同的分子机制。对于多糖合成基因簇及其生物合成途径更深入的了解，能为进一步的组合生物学研究，以及最终获得新结构多糖、改变天然多糖理化性质、提高多糖的活性和产量提供理论基础。 参考文献 〔1〕 Kasper D L, Onderdonk A B, Crabb J, et al. 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有许多不同的分析技术用于糖的分离和测定,包括化学分析、比色分析、纸色谱、薄层色谱、气相色谱和高效液相色谱等。本文总结了近十年植物组织中糖类化合物的研究进展，为其含量测定提供理论依据。

1 分光光度分析法

分光光度法是基于长链多糖在水溶液中离解后可与染料等阳离子相互结合发生反应，从而引起染料吸收光谱的变化进行测定。这种方法具有较好的选择性，可以用于实际样品的测定，通常有两种常见方法。

1.1 蒽酮 - 硫酸比色法

糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糖醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的定量。糖类与蒽酮反应生成的有色物质，在可见光区的吸收峰为 630 nm，可在此波长下进行比色。该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖和己糖而且可以测寡糖和多糖，在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量。蒽酮比色法是一种快速而简便的定糖方法，但测定结果误差较大，只能测定样品中可溶性糖总量。陈鸿英等人用蒽酮硫酸法测定淫羊藿多糖的含量，得到的结果较稳定。

1.2 苯酚 - 硫酸比色法

植物体内的糖主要是指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖。苯酚法测定糖的原理是在浓硫酸作用下，糖脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10mg～100 mg 范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485 nm 波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，试剂便宜，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色可稳定 160 min 以上。

2 气相色谱法

气相色谱法是以气体作为流动相的一种色谱分析方法气相色谱法测定糖类，具有选择性好、样品用量少、分辨率高、快速准确、灵敏等优点。曾昭睿采用三 - 端烯丙基 - 不对称二苯并 14- 冠 - 4- 二羟基冠醚做固定相分离了鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖的乙酸酯衍生物。吴建元等人利用气相色谱法分析茯苓多糖的单糖组成结果 6 种标准单糖的衍生物实现了良好的分离并具有良好的峰形。胡磊等人用 1 一甲基咪唑为溶剂和催化剂、盐酸羟胺和乙酸酐为肟化和乙酰化试剂，对植物样品中糖与糖醇进行乙酰化衍生化利用气相色谱分离和质谱鉴定的分析方法。

3 高效毛细管电泳法

除了少数带有羧基和磺酸基的糖类化合物，绝大多数糖类化合物不带电荷，极性很大且没有发色基团。所以用一般的高效毛细管电泳系统无法得到分离和检测。为了使糖类化合物能产生电迁移而得以相互分离，可采用的方法有：（1）衍生化使之带上发色、荧光基团或电荷；（2）与硼酸盐等络合；（3）与缓冲液中的添加剂形成包合配合物；（4）高 pH缓冲条件下使之电离；（5）加入表面活性剂使形成胶束。20世纪 90 年代以来毛细管电泳因具备分离快速，所需样品量少和自动化程度高的特点，已广泛应用于糖化合物的分析。

4 高效液相色谱法

HPLC 用于糖的定性和定量分析具有快速、灵敏、样品处理简单等优点。从大量的文献报道和综述中可以看出，由于糖的特殊结构及它本身不含强紫外和荧光吸收的官能团，到目前为止还没有建立一个统一的方法来分析所有的单糖和低聚糖。分析糖的色谱柱有化合键合烷基柱、阴阳离子交换柱、氨基键合硅胶柱和硅胶柱等。

文献来源：孙艳涛，由欣. 植物组织中糖化合物测定方法的研究进展.科教文汇(上旬刊).  2011,10(上旬刊) ：134-135.网页链接

多糖(Polysaccharide)是由单糖之间脱水形成糖苷键,并以糖苷键线性或分枝连接而成的链状聚合物。一般将多于20个糖基的糖链则称为多糖。近年来，糖类结构测定和生物活性研究取得了明显的进展，大量实验事实揭示糖类是重要信息分子，参与许多生理和病理过程，有关研究已渗诱到生物学各个领域[1]。研究表明,中药多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降血糖等多种功能。1 免疫调节功能1.1对细胞免疫的影响多糖可以增加T、B淋巴细胞的杀伤功能。张秀娟等[2]报道灵芝多糖对T细胞及其亚群有明显的影响,它可增加混合淋巴细胞培养中T细胞的回收量,在增加Lyt2+ 和L3T4+ 细胞回收量的同时,还可增强细胞毒T淋巴细胞(CTL)的杀伤功能。张伟云[3]等用铜绿假单胞菌分离纯化出胞外多糖（PEP）实验，得出PEP对小鼠胸腺淋巴细胞的增殖皆具有显著的促进作用，当浓度为6．25mg/L时即有非常显著的促进作用的结论。可以增加树突状细胞（DC）细胞前体细胞的数量。DC细胞是目前发现的功能最强的抗原递呈细胞（APC），它能摄取各类抗原,在机体细胞免疫和体液免疫调控中均起着重要作用。何彦丽等[4]分析得出枸杞多糖、香菇多糖、云芝多糖等多种中药多糖（主要由β-1,3糖苷键为主链的葡聚糖或杂聚糖组成）可增加淋巴细胞培养上清液中的CSF(集落刺激因子)活力，促进骨髓有核细胞数和粒 / 巨噬细胞集落数量的增加(CFU-GM)，而DC细胞与单核、粒细胞、T、NK等细胞有共同的祖细胞，有可能同时增加DC前体细胞数量。可以提高巨噬细胞（MΦ）的活性。MΦ是具有多种功能的重要免疫细胞，可通过处理抗原和释放可溶性因子对免疫功能起重要的调节作用。关于多糖激活MΦ的机制，目前尚未完全清楚，但绝大多数中药多糖都能促进MΦ的吞噬功能。唐省三等[5]用猴头菇、香菇、茯苓3种真菌的多糖，配以葡萄籽多酚和甘草酸，制成复合多糖，研究对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞活性的影响，得与荷瘤模型组和香菇多糖组比较，复合多糖各组可明显升高S180肉瘤小鼠腹腔巨噬细胞的活性，具有显著性差异。姚金凤[6]等的研究发现，海洋真菌多糖（YCP）可以明显促进小鼠腹腔巨噬细胞产生NO，并呈一定的浓度相关性。随药物浓度升高,其诱生作用增强，另外，YCP还可以明显促进小鼠腹腔巨噬细胞分泌IL-1。1.2 对体液免疫的影响多糖可以促进抗体的生成。陈丽芳[7]等报道香菇多糖能增加人体中外周单核细胞抗体的产生，裂褶菌多糖能促进患者脾脏形成抗体的细胞增加。云芝多糖能使抗体下降的患者产生抗体，使其免疫能力恢复到正常水平。多糖还可以恢复空斑形成细胞(PFC)的反应。倪峰[8]报道灵芝多糖（5mg/kg）腹腔注射3天可明显恢复降低的PFC反应。1.3 对细胞因子的影响多糖可以促进干扰素生成。干扰素是最先发现的细胞因子，具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节、控制细胞增殖等重要作用。倪峰[8]报道用平盖灵芝提取的多糖在体外可诱导Th细胞产生IFN，在体内增强ConA诱导T淋巴细胞增殖效应并产生IFN-α。多糖还可以提高白细胞介素类（IL）的作用。倪峰[8]报道香菇多糖体内外均可增加腹腔MΦ产生IL-1，体内给药数小时后可见血清CSF和IL-1明显增加，且能提高免疫细胞对IL-2的敏感性。1.4 对补体系统的影响补体系统是机体重要的免疫系统。补体固有成分可被经典和旁路途径所激活。陈金烟等[9]报道香菇多糖也可以激活补体系统的经典途径和替代途径，导致MΦ的非特异细胞毒活性提高和嗜中性白细胞对肿瘤组织的浸润。茯苓多糖能激活肿瘤邻近的补体系统，协同吞噬细胞、淋巴细胞杀灭肿瘤细胞。1.5 对红细胞免疫的影响刘景田等[10]用灵芝、茯苓等进行试验研究发现中药多糖对红细胞免疫有促进和调节作用，作用机理是提高了红细胞膜相CD35免疫活性,进而促进红细胞与补体致敏酵母菌的粘附作用，从而使RBC.C3bRR（红细胞C3b受体花环率）增高，从而达到调节和增强其红细胞免疫功能的作用。2. 抗肿瘤作用2.1 抗肿瘤复发转移作用中药多糖作为血管活性抑制剂发挥抗肿瘤复发转移作用。汪效英等[11]试验得出灵芝多糖能显著对抗血栓形成，减少血栓湿重，缩短血栓长度；显著延长部分凝血活酶时间，抑制血小板聚集，但对血小板数无影响。大剂量还有降低纤维蛋白原含量，缩短凝血酶和凝血活酶时间的作用。2.2 对S180肉瘤的抑制作用唐省三等[5]用猴头菇、香菇、茯苓3种真菌的多糖，配以葡萄籽多酚和甘草酸，制成复合多糖，研究复合真菌多糖对小鼠S180肉瘤的抑制作用，发现复合多糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组荷瘤和香菇多糖组动物的瘤重、抑瘤率、瘤体比与荷瘤模型组相比均有明显的抑制作用。香菇多糖组亦有明显的抑制作用，但远不及复合多糖各组的作用效果。2.3 对B16肿瘤的抑制作用张伟云[3]等用铜绿假单胞菌分离纯化出胞外多糖（PEP）实验，发现PEP组对B16肿瘤细胞的生长皆有显著的抑制作用，并且随着浓度的增加，其抑制程度亦增加，当浓度为6．25mg/L时，差异有显著性；而当浓度为12．5mg/L时,其差异性有非常显著性。2.4 对Lewis 肺癌的抑制作用孙赛[12]等发现从海洋真菌中分离出的一种多糖YCP，可明显抑制Lewis肺癌的生长。3. 降血糖作用现己发现具有降血糖活性的真菌多糖有灵芝多糖、虫草多糖、云芝多糖、银耳多糖、毛木耳多糖、猴头多糖和木耳多糖。Hidino等[13]从灵芝子实体中分离得到两种具有降血糖活性的多糖Ganodetan A和 Ganodetan B，对正常小鼠及四氧嘧啶诱发的高血糖小鼠都有明显降糖活性。4. 抗病毒作用真菌多糖的抗病毒作用主要是利用其结构相似，通过免疫调节机制产生宿主免疫功能，以抗病原体的侵袭。许多研究证明，多糖对多种病毒，如艾滋病毒（HIV1）、单纯孢疹病毒（HSV1，HSV2）、巨细胞病毒（CMV）、流感病毒、囊状胃炎病毒（VSV）等有抑制作用[14]。另有研究表明，香菇多糖对泡状口炎病毒感染引起的小鼠脑炎有显著疗效和预防作用，对阿伯耳氏病毒和十二型腺病毒感染也有效。裂褶菌多糖可提高感染仙台病毒(sendai virus)小鼠的存活率，且有效抑制病毒的扩散。带有肽残基的云芝硫酸酯化多糖抗爱滋病病毒（HIV），作用效果与SO42-基的量成明显的比例关系。香菇多糖、灵芝多糖等对抗慢性肝炎也有显著疗效[15]。5. 抗白血病作用研究证明：杂色革盖菌多糖、猪苓多糖、茯苓多糖有抗白血病的作用[16]。6. 抗氧化作用已发现许多真菌多糖具有清除自由基、提高抗氧化酶活性和抑制脂质过氧化的活性，起到保护生物膜和延缓衰老的作用。从长白山野生云芝(coriolus versicolar)中提取的彩云多糖(cvPs)，给予荷瘤或受γ射线全身照射的小鼠，能使多种脏器和细胞内soD活力升高、脂质过氧化物(LipidPeroxide，LPO)水平下降[17]。7. 展望真菌多糖具有十分广泛的药理学活性，可以把它作为一种新保健食品的发展方向，或是一种新药来源的开发研究方向。但是由于多糖的种类比较多，很难筛选出一种单体，对它的分离提纯造成了很大的难度。在多种药理学活性中还有很多作用机制并不清楚，而且在对其的毒理学特性、副作用方面的报道也并不多见。另外，真菌多糖作为一种植物药材的来源，它的采收加工对其的作用影响甚大，尤其现在，人们对它的高级结构还不了解，分离提纯技术还不到位的情况下，植物的来源、采加等对其发挥它独特的药理作用有着重大的影响。参考文献：[1] 焦克芳，陈望忠，曲红.糖类与生命科学研究进展[J].大学化学，1999，14(1)：28-31.[2] 张秀娟，季宇彬. 真菌多糖的免疫药理作用的研究[J]. 哈尔滨商业大学学报，2002，18（1）：63-65.[3] 张伟云，肖杭，杨金宇，施佩花，侯亚义，凌立君. 假单胞菌多糖对肿瘤细胞和淋巴细胞的作用[J]. 卫生毒理学杂志，2004，18（4）：248-249[4] 何彦丽，苏俊芳. 中药多糖抗肿瘤免疫药理研究的新思路——对树突状细胞的影响[J]. 中国中西医结合杂志，2003，23（1）：73-76.[5] 唐省三，朱晓琴. 复合真菌多糖的抗肿瘤及免疫增强作用初探[J]. 基础医学与临床，2004，24（5）：599-600.[6] 姚金凤，吴亮，吴希哲，韩方，高向东. 海洋真菌多糖YCP对巨噬细胞免疫功能的影响[J]. 中国药科大学学报，2004，35（6）：573—575[7] 陈丽芳，吴文光，陈国锐等. 真菌多糖的抗肿瘤作用探讨[J]. 海峡药学，2002，14（2）：58-59.[8] 倪峰. 免疫活性的中药多糖[J]. 福建中医学院学报，2001，11(1)：57-58.[9] 陈金烟，卢政辉. 真菌多糖的免疫效应抗肿瘤作用机理的探讨[J]. 福建轻纺，2002，4：4-7.[10]刘景田，党小军，王惠萍等. 中药多糖对红细胞膜相CD35免疫活性的调节作用[J]. 中国现代医学杂志，2002，12（1）：7-9.[11]汪效英，刘广芬，陈崇宏等. 灵芝多糖的提取纯化及GLP-2抗血液凝固和抗血栓形成作用[J]. 福建医科大学学报，2002，36（2）：189-192.[12]孙赛，陈真，钱之玉，高向东，郭青龙. 真菌多糖 YCP 对 Lewis 肺癌小鼠的抑瘤作用和机制初步探讨[J]. 中华实用中西医杂志，2005，18（5）：738-740。[13]葛玉，肖红，张欣，段玉峰. 真菌多糖的研究开发现状[J]. 食品研究与开发，2005，26（1）：23-25。[14]王长云，管华诗. 多糖抗病毒作用研究进展，多糖抗病毒作用[J]. 生物工程进展. 2000，20（1）：17-20。[15]王长云，管华诗.多糖抗病毒作用研究进展I:多糖抗病毒作用[J].生物工程进展，2000，20(1):17-20。[16]唐慎华、路羡. 植物及真菌多糖抗白血病作用[J]. 中国新医药. 2004，3（2）：39-41。[17]谭建权，魏文树，陈海生.彩云多糖药理研究进展[J]. 中成药，1999，21(5):259-260.——————————————————————自己以前写的综述