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可溶性糖含量的测定方法:
蒽酮比色法、铜还原碘量法、费林试剂法、原子吸收法、气相色谱法、液相色谱-蒸发光散射法,及连续流动法
糖在硫酸作用下生成糠醛,糠醛再与蒽酮作用形成绿色络合物,颜色的深浅与糖含
量有关。在625 nm波长下的OD值与糖含量成正比。由于蒽酮试剂与糖反应的呈色强
度随时间变化,故必须在反应后立即在同一时间内比色。
试剂中的Cu2+与还原糖作用,生成氧化亚铜(Cu2O)沉淀。加入H2SO4后,氧化亚铜
溶解生成Cu+,试剂中的KIO3与KI在酸化的同是生成I2。
KIO3+5KI+3H2SO4→3K2SO4+3H2O+3I2,然后Cu+被I2氧化,2Cu++I2 →2Cu+ 2I-
溶液中剩余的碘以淀粉为指示剂,用Na2S2O3标准溶液滴定:Na2S2O3+ I2 → Na2S2O6 + 2NaI 同时以水代替样试液做空白滴定,将空白与样品的滴定差值带入由滴定标准系列糖液计算的回归方程中,即可求得所求试样中还原糖的含量。
在沸热条件下,用还原糖溶液滴定一定量的费林试剂时将费林试剂中的二价铜还原为一价铜,以亚甲基蓝为指示剂,稍过量的还原糖立即使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝。
将样液与过量的碱性铜盐反应,使产生沉淀,然后取上层清液用原子吸收分光光谱
仪测定剩余铜含量,通过标准曲线计算水果蔬菜中可溶性糖含量
用糖醇衍生化成乙酸酯,用石英毛细管色谱柱对稻子、小麦麸皮样品进行分析测定,得到样品中可溶性NSP各组成单糖的色谱峰,并依据色谱图提供的数据计算样品中可溶性非淀粉各组成单糖的含量及其总含量
不挥发样品颗粒对光的散射程度与其质量成正比。
用盐酸直接水解样品中的可溶性糖,然后用连续流动分析仪测定样品中可溶性糖的含量。
执念梦浮生
蒽酮比色法测定可溶性糖如下:
一、实验目的
1、掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。
2、学习植物可溶性糖的提取方法。
二、实验原理
糖在浓硫酸作用下,可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛,生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物,在一定范围内,颜色的深浅与糖的含量成正比,因此可以用于糖的定量测定。糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区的吸收峰为620nm。
三、实验材料
任何植物鲜样或干样。
四、药品试剂
1、80%乙醇。
2、葡萄糖标准溶液(100μg/ml):准确称取100mg分析纯无水葡萄糖,溶于蒸馏水并定容至100ml,使用时再稀释10倍(100μg/ml)。
3、蒽酮试剂:称取1g葱酮,溶于80%浓硫酸(将98%浓硫酸稀释,把浓硫酸缓缓加入到蒸馏水中)1000mI中,冷却至室温,储于具塞棕色瓶内,冰箱保存,可使用2~3周。
五、实验器材
分光光度计、分析天平、离心管、离心机、恒温水浴、试管、三角瓶、移液管、剪叨瓷盘、玻棒、水浴锅、电炉、漏斗、滤纸。
六、实验方法
1、样品中可溶性糖的提取:称取剪碎混匀的新鲜样品零点五到一克,放入大试管中,加入15 ml蒸馏水,在沸水浴中煮沸20分钟,取出冷却,过滤入100 ml容量瓶中,用蒸馏水冲洗残渣数次,定容至刻度。
2、标准曲线制作:取6支大试管,从0~ 5分别编号,按表1-3加入各试剂。
注意事项
1、蒽酮试剂含有浓硫酸,使用时应小心。
2、蒽酮要全部取自同一瓶,以保证条件一致性。
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