弓形体病论文

随着分子生物学的飞速发展，最为世人瞩目的人类基因组计划即将提前完成。人类将向了解自己的生命奥秘这一目标迈进一大步。但是，由于基因是遗传信息的携带者，而生命活动的执行者却是蛋白质，即基因的表达产物。因此，即使得到人类全部基因序列，也只是解决了遗传信息库的问题。人类揭示整个生命活动的规律，就必须研究基因的物产——蛋白质。相对于基因组而言，后者称为蛋白质组。1 蛋白质组概述及其相关研究技术和方法鉴于基因组研究的局限性，1994年澳大利亚Macquaie 大学的Wilkins和Williams等在意大利的一次科学会议上首次提出了蛋白质组（Proteome）这个概念。定义为“蛋白质组指的是一个基因组所表达的蛋白质”，即“PROTEOME”是由蛋白质的”PROTE”和基因组的“OME”字母拼接而成[1].这个新术语很快得到了国际生物学界的认可。目前对蛋白质组的分析工作大两个方面。一方面，通过二维胶电泳等技术得到正常生理条件下的机体、组织或细胞的全部蛋白质的图谱，相关数据将作为待测机体、组织或细胞的二维参考图谱和数据库。另一方面是比较分析在变化了生理条件下蛋白质组所发生的变化。目前蛋白质组研究技术常用以下手段：（1）用于蛋白质分离技术方面的如双向凝胶电泳（2-DE）、双向“高效”柱层析等。（2）用于蛋白质鉴定的技术如质谱技术、凝胶图像分析、蛋白质和多肽的N端、C端测序及氨基酸组成分析等。（3）用于蛋白质相互作用及作用方式研究的双杂交系统。（4）用于分析大量数据的生物工程信息学等[2].。2 蛋白质组在医学研究中的现状和前景自蛋白质组概念提出以来，已发表相关论文及论著数篇。并于是1997年举行了第一届国际性的“蛋白质组学”会议。同年出版式了第一部蛋白质组学的专著。目前蛋白质组在医学方面的研究重点在于对人类疾病的发病机制、早期诊断及治疗，对致病微生物的致病机理、耐药性及发现新的抗生素为主。现将这两方面的进展情况综述如下。 人类疾病的蛋白质组研究 直肠癌 直肠癌的发生是因多个基因的突变，导致肿瘤抑制基因失能所致，但确切机制仍不清楚。为探讨其发病机制，Sanchez等对15例结肠癌和13例正常人的结肠上皮进行2-DE，每个多肽模式用Melanie I12-DE分析软件进行分析。据此建立了包括882和861个斑点的结肠癌及正常人结肠粘膜的标准胶图。结果发现在分子量为13kD和pI值为处的蛋白质仅出现在结肠癌的组织中。15例结肠癌患者中13/蛋白有13例（87%）。此外，发现13/蛋白不仅在中度、低度分化的结肠癌及有24年病史的溃疡性结肠炎过度表达，而且出现在7例分化程度不同的腺瘤的癌前病灶。但对照组则极少出现。这表明该蛋白的出现对检测早期直肠癌有很强提示。通过对该蛋白HPLC及测序等分析后，发现与钙粒蛋白B（calgranulin B）及钙卫蛋白（calprotectin）有很大关系[3]。 肝癌 醛糖还原酶（aldose reductase, ）是醛酮还原酶超家族中的一个成员。它催化葡萄糖还原为山梨醇，通过减少内源或外源性代谢产物而起到解毒作用。Peter R等在用N-甲基-N-亚基脲诱导（N-methly-N-nitrosourea-induced）的小鼠肝癌中，用2-DE及氨基酸微型测序可分辩出一种肝癌诱导的醛糖还原酶样的蛋白质（35Kd/）。而在小鼠的晶状体中，则发现一种醛糖还原的同工酶，该酶与已知的小鼠醛糖还原酶有98%的同源性，而与肝癌诱导的醛糖还原酶样的蛋白质截然不同。这表明两种蛋白质是由相关的两条基因编码，在小鼠不同的器官中表达不同。肝癌诱导的醛糖还原酶蛋白质优先表达在肝癌及胎肝中，它们均受到纤维细胞生长因子的刺激，但随小鼠鼠器官的生理及病理环境而表现不同的形式。经免疫组化证实，肝癌诱导的醛糖还原酶样的蛋白质在成人肝脏中不表达，但在小鼠的肝癌 中又重新表达。同时发现该蛋白在癌前病变及肝癌中表达强烈，而在肝脏周围的正常组织不表达[4]。表明该蛋白可能与肝癌的发病有很大关系。 扩张型心肌病 扩张型心肌病是一种严重的可导致心衰的心脏病，大多数患者需行心脏移植术。目前其发病机理不明，推测可能为多种因素所致。1990年已有两组人员进行该病的蛋白质组分析。其后不久心肌的2-DE数据库建成，并进入国际互联网络。Knecht等采用2-DE取得了3300个心肌蛋白条带，通过氨基酸序列分析、Edman降解法及基质辅助的激光解吸离子化质谱（MALDI-MS）等分析了其中150条。经活检及术后病理证实，有12条为扩张性心肌病特有的蛋白。但具体资料尚在进一步分析之中[5]。Arnott D等对新福林诱导的肥大心肌细胞进行蛋白质组分析，同对照相比亦发现有8种蛋白质的表达水平发现了变化[6]。 膀胱癌 IFN-γ除抗病毒外，还有一项重要的功能即抗肿瘤作用。目前其抗肿瘤作用机制不明。有资料表明，IFN-γ可能通过在相关细胞中增强或抑制有关基因而发挥抗肿瘤作用。重组IFN-γ和IL-2已开始应用于膀胱癌的治疗中。为探明其作用机制，George等将四种分级程度不同的人膀胱癌新鲜活检标本，用50U/ml IFN-γ作用20个小时后，采用2-DE、微型序列分析、等电聚集、蛋白质印迹等方法，对标本进行蛋白质组分析。结果表明有五种蛋白质（色按酸-tRNA合成酶、IFN-γ诱导的r3，超氧化物歧化酶及两种分子量为和的未知蛋白）的表达量增加了75%，而醛糖还原酶表达量则下降。为研究IFN-γ对治疗膀胱癌的作用机制提供了一种方法[7]。此外，由于缺乏对膀胱鳞状细胞癌客观可靠的组织学分级标准，因而很其进行早期诊断。为此，Morten等对150例膀胱癌进行双盲法2-DE，并结合了蛋白质印迹法、微型序列分析及质谱等技术，建立了新鲜膀胱癌标本的2-DE数据库，且发现角蛋白10、14及银屑病相关的脂肪酸结合蛋白（psoriasis-associated fatty acid-binding protein,PA-FABP）等可以作为膀胱癌不同分化程度的标记物[8]。为早期诊断提供了一种新的手段。[ 本帖最后由 snow_white 于 2007-7-20 16:32 编辑 ]查看完整版本请点击这里：蛋白质组学研究〔综述〕05我也来说两句 查看全部回复 最新回复snow_white (2007-7-20 16:31:50) 其它 目前人的各种组织、器官、细胞乃至各种细胞器已被广泛研究。以期为疾病诊治及了解发病机制提供新的手段。在一项利用蛋白质组研究技术进行的酒精对人体毒性的研究中发现，乙醇 会改变血清蛋白糖基化作用，导致许多糖蛋白的糖基缺乏，如转铁蛋白[9]。Jagathpala等对免疫所致的不孕症的男性精子蛋白质进行蛋白质组分析，发现了导致不孕症的6种自体及异体抗 精子抗体[10]。在对肾癌的研究中，发现有4种蛋白质存在于正常肾组织而在肾癌细胞中缺失。其中两种分别是辅酶Q蛋白色素还原酶和线粒体乏醌氧化还原复合物I。这提示线粒体功能低下可能在肿瘤发生过程中起重要作用[11]。Ekkehard Brockstedt等利用2-DE、Edman微型序列法、MALDI-MS等对人BL60-2伯基特淋巴瘤细胞系进行了细胞凋亡机制的研究，结果发现RNA聚合酶转录因子3a（BTF3a）和/或BTF3b与抗IgM抗体介导（anti-IgM antibody-mediated）的细胞凋亡有很大关系[12]。 致病微生物的蛋白质组研究 近年来，WHO越来越重视感染性疾病对人类健康的影响。除结核、多重耐药链球菌感染及机会致病菌外，出现了一些新的感染因素如HIV、博氏疏螺旋体及埃博拉病毒等。因此这些致病微生物的蛋白质组分析，对于了解其毒性因子、抗原及疫苗的制备非常重要，此外对疾病的诊断、治疗和预防也同样重要。现已获得18种微生物的全部基因组序列，另有60余种的基因序列正在研究之中。这些工作的开展为蛋白质组的研究提供了有利条件。 检测博氏疏螺旋体与免疫有关的蛋白质 博氏疏螺旋体（Borrelia burgdorferi）是莱姆病的主要病因，表现为环形红斑及流感样症状，大约有50%的未治患者发展为神经系统及关节系统疾病。该螺旋体可分为3种类型： sensu stricto,, 。其诊断需依靠血清学检查，但存在敏感性及特异性变化的缺点。为获得更可靠的血清学检查，Peter等用2-DE从得到217个银染的蛋白斑点。从中国兔多克隆抗体鉴别出6个已知的讥原。将不同临床表现莱姆病患者的血浆用 2-DE图杂交。用抗IgM及抗IgG作为第二抗体，在10例有游走性红斑的患者血浆中，检测出60~80个抗原。同时发现在有关节炎的患者血浆中，包含有抗15种抗原的IgM抗体及抗76种不同抗原的IgG抗体。而晚期有神经系统症状的患者血浆中，则包含有抗33种抗原的IgM抗体及抗76种抗原的IgG抗体。上述3种类型患者的血浆中均包含有抗6种已知抗原的抗体，且被SDSPAGE杂交所证实。这些抗原均是潜在的具有特异性诊断的标志物。 弓形体抗原的检测 弓形体病是由鼠弓形体虫引起的寄生虫病。全球人口大约有30%是携带者，在欧洲是最常见的寄生虫病。如果妊娠者感染，该虫可通过胎盘引起胎儿的感染。且随着妊娠时间的增加，感染的机会也增加。大约50%母体的感染可引起新生儿先天性疾病。因此诊断及治疗越早越好。目前要依靠血清学及PCR，而单独采用血清学如用IgG，IgM,或IgA抗体对疾病活动期敏感性不够，尤其对于妊娠或有免疫抑制的患者。潜在感染常发生在有免疫抑制的患者中。对AIDS患者来说，鼠弓形体虫是最主要的致命性脑损伤的病因。因此，能否早期诊断对治疗来说尤为关键。Jungblut等将鼠弓形体虫RH株在人羊膜细胞系FL521中传代后，用2-DE得到300个银染的斑点。再将其与以下3种患者的血浆进行免疫杂交：（1）患有急性弓形体病的妊娠女性（n=11）; (2)患急性弓形体病的非妊娠者（n=6）(3)有潜在感染的患者（n=9）。结果有9个斑点对各阶段的弓形体感染均反应，这9种斑点被用来当作弓形体感染的标记。其中7种标记可用作区别疾病的不同阶段。但对区别急性期与潜在期仍需联合应用多种抗原[4]。 白色念珠菌 芽管结构是白色念珠菌向菌丝体转变的早期阶段，该结构能增强白色念珠菌对宿主细胞的粘附力、穿透力及破坏性。目前通过蛋白质组分析方法如2-DE、质谱等已检测出在芽管结构所表达的一组特异蛋白如DNA结合蛋白等，为致病提高了一些参考指标[13]。Monkt等发现，在conA反应后的SDS-PAGE图中，在芽管结构的膜上，分子量为80kD复合糖处，出现很淡的考马斯亮蓝染色，而在孢子时则未出现。提示膜的整合、出现未与ConA结合的80kD复合糖可能与芽管结构的发生及生长有关。粘附素（adhesin）是白色念珠菌表面的组成部分，介导其与宿主的结合，是侵入宿主所需的重要蛋白，包含多种成分如白色念珠菌胞壁上的疏水蛋白等，通过增强菌株的粘附性而在其致病机制中发挥一定作用。但由于这些蛋白有很大同源性、多种糖基化作用及与胞壁或胞浆膜上其它成分形成共价结合，故提纯及分析很难。现通过等电聚集、2-DE及洗脱电泳等方法，可使这些蛋白得到很好的纯化、分离及分析[14]。抗真菌药通过改变真菌胞壁组分的生物合成和重组胞壁相关酶的结合位置而发挥作用。抗真菌药远少于抗细菌药就在于对真菌细胞壁蛋白分析了解太少。现在临床上用于抗真菌的药物多为咪唑类（咪康唑、酮康唑）及三唑类（氟康唑、伊曲康唑），但有很多患者出现耐药现象。在白色念珠菌中，目前发现至少有8种CDR家族的基因可产生耐药株的表现型。且有55种基因分别表达ABC及MFS蛋白（菌内药物输出泵）[]。但这些基因、蛋白与耐药之间的关系仍未清楚。应用2-DE、免疫检测蛋白质等技术，对这些蛋白在菌内的表达量进行分析，发现Cdrlp及CaMdrlp蛋白在耐咪唑类菌株中过量表达。在对咪唑类每感及去除CDR1基因的白色念珠菌株CA114中，提取并检测耐氟康唑突变子（FL3）的表达。结果发现FL3对氟康唑的耐是去除CDR1的基因的白色念珠菌株CA114的500倍 ，是CA114的250倍。且CDR1 mRNA在FL3的量是Ca114的8倍[17]。同时，对敏感性及耐药株蛋白质的2-DE图分析发现，在耐中有25种蛋白质增加，有76种蛋白质减少。推测白色念株菌是通过改变染色体数目或染色体重组来调节基因的表达量，进而产生耐药性[18]。随着蛋白质组技术成熟完善，将对真菌壁及耐药基因分泌的各种蛋白组成分析带来重大突破，并对抗真菌的研制提供重要资料。虽然蛋白质组学还处在一个初期发展研段，但我们相信随着其不断地深入发展，蛋白质组（学）研究在提示诸如生长、发育和代谢调控等生命活动的规律上将会有所突破，对探讨重大疾病的机理、疾病诊断、疾病防治和新药开发将提供重要的理论基础。[ 本帖最后由 snow_white 于 2007-7-20 16:33 编辑 ]snow_white (2007-7-20 16:34:25)二、蛋白质组学的研究进展蛋白质组学强调的是针对蛋白质的一个整体思路。从整体的角度看，蛋白质组研究大致可分为两种类型：一种是针对细胞或组织的全部蛋白质，也就是着眼点是整个蛋白质组；而另一种是以与一个特定的生物学机制或机制相关的全部蛋白质为着眼点，在这里整体是局部性的。针对细胞蛋白质组的完整分析的工作已经比较全面地展开，不仅如大肠杆菌、酵母等低等模式生物的蛋白质组数据库在建立之中，高等生物如水稻和小鼠等的蛋白质研究也已开展，人类一些正常和病变细胞的蛋白质数据库也已在建立之中。与此同时，更多的蛋白质组研究工作则是将着眼点放在蛋白质组的变化或差异上，也就是通过对蛋白质组的比较分析。首先发现并去鉴定在不同生理条件下或不同外界条件下蛋白质组中有差异的蛋白质组分。限于篇幅，本文不对这方面的工作做进一步论述。本文接下来重点介绍近期发表的关于蛋白质组学的几个工作，从中可以看到蛋白质组学的思想方法在蛋白质整体（或局部整体）水平上是如何解决生理学的一些重要问题的。1999年11月《Nature》杂志发表了一篇用蛋白质组学方法研究蛋白质折叠的研究论文[10]。在这篇文章中，Houry等报道了在大肠杆菌胞质中的2500种新生多肽链种只有近300种以GroEL作为分子伴侣来帮助其折叠成正确构象。在以往的相关研究中，通常只是针对某个或某些特定的蛋白质，观察它（们）在折叠过程中是否需要诸如GroEL等分子伴侣的帮助。而在这个工作中，研究是从一个整体的思路出发，首先通过免疫共沉淀的方法获得所有与GroEL结合的肽链，再通过二维电泳和数据库比较等蛋白质研究的手段对这些肽链进行分析鉴定，从而实现了对大肠杆菌近2500条新生多肽链与分子伴侣GroEL的关系的全面分析。在这个工作中，研究者还通过对其中50种与GroEL作用的肽链的鉴定，进一步揭示了决定这些蛋白质能与GroEL相互作用的关键结构特征。应该说，这个工作很好地体现了蛋白质组学的思想方法和技术手段的运用。过去在细胞生物学领域还没有得到过一个主要亚细胞结构的完整的分子图。核孔复合体是一个巨大的跨核膜的八角形结构，是控制大分子在胞质和核质间运输的通道。多年来，很多方法被用来分析这一复合体的组成成分。虽然这些工作取得了很大的进展，但究竟在多大程度上反映了这一复合体的分子原貌仍然是一个未知数。最近通过使用蛋白质组学的手段，Rout等[11]鉴定了完整的酵母核孔复合体所有能检测到的多肽，并系统地对每种可能的蛋白质组分在细胞中定位，结合免疫电镜的方法将各组分在复合体内定位并定量，从而揭示了酵母核孔复合体的完整分子构造，并在此基础上揭示了其工作原理。这个工作可以说是蛋白质组学解决构造生物学问题的一个典范，为揭示其他巨大分子机器的"构造"和工作原理指出了一条新路[12]。通过分析一个蛋白质是否跟功能已知的蛋白质相互作用可得到揭示其功能的线索。因为经验告诉我们，如果两个蛋白质相互作用，那么它们一般参与相同或相关的细胞活动[13]。从近期国际上蛋白质组学研究的发展动向可以看出，揭示蛋白质之间的相互作用关系，建立相互作用关系的网络图，已成为揭示蛋白质组复杂体系与蛋白质功能模式的先导，业已成为蛋白质组学领域的研究热点。2000年初，《Science》登载了一篇应用蛋白质组学的大规模双杂交技术研究线虫生殖器发育的文章[14]。在这个工作中，Walhout等以线虫的生殖发育过程作为研究对象，从已知的27个与线虫发育的蛋白质出发，构造了一个大规模的酵母双杂交系统，得到了100多个相互作用的结果，初步建立了与线虫生殖发育相关的蛋白质相互作用图谱，从而为深入研究和揭示线虫发育的机制等提供了丰富的线索。这个工作不同于一般的应用酵母双杂交进行研究的地方在于，它出于对一个生物学问题的整体思考，尽可能地从所有已知的蛋白质而不只是个别的蛋白质为出发点。这一个工作为以前专注于信号转导过程中单个蛋白质作用的科学家们提供了一个新的思路，即将整个途径的相关蛋白质一起考虑。那么，能否通过酵母双杂交系统来分析一种细胞或特定组织的所有可能的蛋白质之间的相互作用呢？在今年初，《Nature》发表了一篇通过大规模双杂交技术研究酵母近6000个蛋白质之间相互作用的论文[15]。啤酒酵母基因组DNA的全序列业已测定，这为通过双杂交技术来鉴定酵母基因组编码的全部6000种左右的蛋白质间的可能相互作用提供了非常有利的条件。在这个工作中，研究人员采用了两种不同的策略对酵母的蛋白质间的相互作用作了全面分析。一是所谓的列阵筛选法（array screening）。在此方法中，6000株表达不同"猎物"蛋白的酵母单克隆分别加在微滴定板上，带有不同的"诱饵"蛋白的酵母株与前面6000株细胞一一接合形成二倍体细胞，"猎物"蛋白与"诱饵"蛋白的相互作用通过报道基因的表达而被鉴定。这篇文章中报道了192种不同的"诱饵"蛋白与近6000种"猎物"蛋白的相互作用的结果。另一种方法是文库筛选法。该方法与前一种方法的区别是，将表达6000种不同"猎物"蛋白的酵母细胞混在一起构成文库，再将这个文库分别与6000株表达不同"诱饵"蛋白的酵母细胞接合，再进一步筛选鉴定阳性克隆，即"诱饵"与"猎物"发生相互作用的克隆。根据这篇报告，上述两种策略得到了不同的结果，相比之下阵列筛选法更为有效，而文库筛选法的长处是通量大。这一工作的重要意义在于我们已经看到，在基因组序列被了解的基础上，可以利用大规模双杂交技术全面地，当然也是初步地，分析其物种或其细胞、组织的所有蛋白质之间的相互作用关系。相信类似的工作将很快针对其他物种开展，特别是基因组序列已被揭示的物种。由此可见，蛋白质组学已经开始从建立数据库走向解决生命科学的重大问题，成为研究生物学问题或机制的强有力手段。snow_white (2007-7-20 16:37:32)三、蛋白质组学研究进展与趋势曾 嵘 夏其昌（中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所蛋白质组学研究分析中心 上海 200031）如果在五年前提到蛋白质组学（Proteomics），恐怕知之者甚少，而在略知一二者中，部分人还抱有怀疑态度。但是，2001年的Science杂志已把蛋白质组学列为六大研究热点之一，其“热度”仅次于干细胞研究，名列第二。蛋白质组学的受关注程度如今已令人刮目相看。1．蛋白质组学研究的研究意义和背景随着人类基因组计划的实施和推进，生命科学研究已进入了后基因组时代。在这个时代，生命科学的主要研究对象是功能基因组学，包括结构基因组研究和蛋白质组研究等。尽管现在已有多个物种的基因组被测序，但在这些基因组中通常有一半以上基因的功能是未知的。目前功能基因组中所采用的策略，如基因芯片、基因表达序列分析(Serial analysis of gene expression, SAGE)等，都是从细胞中mRNA的角度来考虑的，其前提是细胞中mRNA的水平反映了蛋白质表达的水平。但事实并不完全如此，从DNA mRNA 蛋白质，存在三个层次的调控，即转录水平调控(Transcriptional control )，翻译水平调控(Translational control)，翻译后水平调控(Post-translational control )。从mRNA角度考虑，实际上仅包括了转录水平调控，并不能全面代表蛋白质表达水平。实验也证明，组织中mRNA丰度与蛋白质丰度的相关性并不好，尤其对于低丰度蛋白质来说，相关性更差。更重要的是，蛋白质复杂的翻译后修饰、蛋白质的亚细胞定位或迁移、蛋白质－蛋白质相互作用等则几乎无法从mRNA水平来判断。毋庸置疑，蛋白质是生理功能的执行者，是生命现象的直接体现者，对蛋白质结构和功能的研究将直接阐明生命在生理或病理条件下的变化机制。蛋白质本身的存在形式和活动规律，如翻译后修饰、蛋白质间相互作用以及蛋白质构象等问题，仍依赖于直接对蛋白质的研究来解决。虽然蛋白质的可变性和多样性等特殊性质导致了蛋白质研究技术远远比核酸技术要复杂和困难得多，但正是这些特性参与和影响着整个生命过程。传统的对单个蛋白质进行研究的方式已无法满足后基因组时代的要求。这是因为：(1) 生命现象的发生往往是多因素影响的，必然涉及到多个蛋白质。(2) 多个蛋白质的参与是交织成网络的，或平行发生，或呈级联因果。(3) 在执行生理功能时蛋白质的表现是多样的、动态的，并不象基因组那样基本固定不变。因此要对生命的复杂活动有全面和深入的认识，必然要在整体、动态、网络的水平上对蛋白质进行研究。因此在上世纪90年代中期，国际上产生了一门新兴学科－蛋白质组学（Proteomics），它是以细胞内全部蛋白质的存在及其活动方式为研究对象。可以说蛋白质组研究的开展不仅是生命科学研究进入后基因组时代的里程碑，也是后基因组时代生命科学研究的核心内容之一。虽然第一次提出蛋白质组概念是在1994年，但相关研究可以追溯到上世纪90年代中期甚至更早，尤其是80年代初，在基因组计划提出之前，就有人提出过类似的蛋白质组计划，当时称为Human Protein Index计划，旨在分析细胞内的所有蛋白质。但由于种种原因，这一计划被搁浅。90年代初期，各种技术已比较成熟，在这样的背景下，经过各国科学家的讨论，才提出蛋白质组这一概念。国际上蛋白质组研究进展十分迅速，不论基础理论还是技术方法，都在不断进步和完善。相当多种细胞的蛋白质组数据库已经建立，相应的国际互联网站也层出不穷。1996年，澳大利亚建立了世界上第一个蛋白质组研究中心：Australia Proteome Analysis Facility ( APAF )。丹麦、加拿大、日本也先后成立了蛋白质组研究中心。在美国，各大药厂和公司在巨大财力的支持下，也纷纷加入蛋白质组的研究阵容。去年在瑞士成立的GeneProt公司，是由以蛋白质组数据库“SWISSPROT” 著称的蛋白质组研究人员成立的，以应用蛋白质组技术开发新药物靶标为目的，建立了配备有上百台质谱仪的高通量技术平台。而当年提出Human Protein Index 的美国科学家Normsn G. Anderson也成立了类似的蛋白质组学公司，继续其多年未实现的梦想。2001年4月，在美国成立了国际人类蛋白质组研究组织（Human Proteome Organization, HUPO）,随后欧洲、亚太地区都成立了区域性蛋白质组研究组织，试图通过合作的方式，融合各方面的力量，完成人类蛋白质组计划（Human Proteome Project）。snow_white (2007-7-20 16:37:49)2．蛋白质组学研究的策略和范围蛋白质组学一经出现，就有两种研究策略。一种可称为“竭泽法”，即采用高通量的蛋白质组研究技术分析生物体内尽可能多乃至接近所有的蛋白质，这种观点从大规模、系统性的角度来看待蛋白质组学，也更符合蛋白质组学的本质。但是，由于蛋白质表达随空间和时间不断变化，要分析生物体内所有的蛋白质是一个难以实现的目标。另一种策略可称为“功能法”，即研究不同时期细胞蛋白质组成的变化，如蛋白质在不同环境下的差异表达，以发现有差异的蛋白质种类为主要目标。这种观点更倾向于把蛋白质组学作为研究生命现象的手段和方法。早期蛋白质组学的研究范围主要是指蛋白质的表达模式（Expression profile）, 随着学科的发展，蛋白质组学的研究范围也在不断完善和扩充。蛋白质翻译后修饰研究已成为蛋白质组研究中的重要部分和巨大挑战。蛋白质-蛋白质相互作用的研究也已被纳入蛋白质组学的研究范畴。而蛋白质高级结构的解析即传统的结构生物学，虽也有人试图将其纳入蛋白质组学研究范围，但目前仍独树一帜。

1: 弓虽笨重,但能射得又远又准;雕上行猎图后,弓变得华美了,但却失去了实用价值。真正的美在于实用价值,不事雕琢的朴素人生照样绽放生命华彩。

2 :由黑檀木制成的弓笨重,外观毫不出色,一点也不美,这是它形式上的缺憾,但它功能好,这是它本身价值的体现,内在美是一种更高层次的美。

一、立意角度

1、正确立意角度：

猎人角度：苛求与失去、完美也要适度、重其本质、轻其形式、顺其本性、莫让爱水横流弓的角度：真实最美、去掉装饰，追求本质，华而不实与实而不华

事件角度：追求生命的本色、完美无需装饰

2、立意失误举例：

缺陷是美 感谢残缺找准自己的位置 主观与客观协调 主观认识找到高度 自作聪明用辩证的观点看问题 懂得追求珍惜眼前 学会生活物尽其能 有得必有失

从学生作文的实际情况看有如下立意：

①开始好使的弓——雕图后断了——不是美的就一定好

②有些东西不需要别的东西去装饰——简单的也可以是美的

③弓耐用的本质胜过它的美丽外表——东西的本质胜过外表

④重视内在本质，不要刻意注重外表——美不只注重外表

⑤其实朴实也可以很美

⑥华丽的修饰不一定真美，平平淡淡才是美

⑦任何事物都有它不完美的一面，不要刻意去追求完美

⑧残缺的也可以是美的

⑨金无足赤，人无完人——过分追求完美只会事倍功半

⑩弓为什么断，弓断的原因——猎人对弓的爱不是真正的爱

还有“不要盲目追求不属于我们的东西”“知足者常乐”等立意，作文结构模式还有弓的自白（命运，自述）——加以引伸、联系、深化,猎人自述——从父母、师长的角度出发：什么爱才是真正的爱？等。

学生作文的立意角度归类：

①缺憾与完美②外表与本质③细节决定成败④人的追求与措施等。

教师点拨：材料作文的关键，是看懂材料，选好写作角度。具体步骤如下：

1、完整地阅读材料、及全部要求

2、在整体感觉的基础上给材料分层或分人物、角度

3、再整合起来，对材料形成整体理解

4、认真看“要求”，是可以任选一个角度，还是只能就主旨写作。但无论如何角度都必须是材料中有的，不能偏离或曲解材料。

二、材料分析

（1）弓：出色的、又远又准——猎人：珍惜 、 喜爱

（2）弓的外观：毫不出色、稍微笨重——猎人：可惜、 补救 别让爱变成伤害

（3）爱的初衷——弓断的结果

莫让溺爱之水横流

爱是洒向花儿的清水和阳光，甘甜温暖，滋润它茁壮成长。

爱是母亲一句轻声的问候，是对孩子的一次轻柔抚摸，激励温暖了孩子的心头。

但爱又是无节制地对花儿的修剪，翻土，松根，让还未绽放的花蕾早早凋零。爱又是任孩子为所欲为，满足其一切要求的放任，让孩子长久依赖于他人，无法走向社会与未来。

爱可以温暖一切，感染一切。但过度的爱便成了溺爱，成了毁灭，它可以淹没一个人的前程，断送一个人的命运。因此我要说：莫让溺爱之水横流。

商纣王爱他的美姬，爱得将臣子的心挖出来以博她一笑，爱得辜负百姓，无所作为。纣王将所有的爱倾注于她的身上，将朝政、家国、百姓、良臣忠言统统抛之脑后。爱终于无法承受，溺爱的洪水泛滥了，咆哮着奔向纣王安睡的寝宫，冲向外面早已冷却的世界，将纣王连同他的美梦一同吞噬，使一个朝代早早退出历史舞台。殊不知，这一切都因纣王无节制的爱而起，爱一旦超越原有的界限，便如滔天般巨浪淹没一切。

赵太后爱长安君，这爱众所周知，“尊长安君之位，而封之以膏腴之地，多予之重器”，还舍不得长安君到齐国作人质。而触龙却说：“老臣窃以为媪之爱燕后，贤于长安君。”没错，将燕后远嫁他乡，并为她祈祷，不希望她回来，这是使“子孙相继为王”的长久打算。爱长安君，却尊其位，封其地，厚其物，却没有考虑“一旦山陵崩，长安君何以自托于赵？”过分的爱，定会贻害长安君，使其无法立足于赵。而赵太后最终也明白了这一点，质长安君于齐，最终赢得众人的信任与佩服。

邹忌对他的国君很忠诚，这也是一种爱。然而邹忌却没有让溺爱之水横流。他以敏锐的眼光，以巧妙的进谏，讽喻齐王察纳雅言，扬长避短以赢得万民拥戴，终使齐国富国强兵，称雄于天下。

爱是钟表里的那一根发条，轻轻地拧几下，便足以让表继续走下去，爱得越深，拧得越紧，只会使发条崩断，适得其反。因此，爱需要控制，适当的爱才会让花儿更茁壮，天空更蔚蓝，才会让快乐的笑声回荡于耳边。

溺爱只能葬送人之所爱，朋友，请您切记，莫让溺爱之水横流。

名师点评：本文在素材选用方面，有三个亮点：一是善于用足用好课本素材；二是善于把课本素材与课外阅览的文学素材、哲理素材结合起来综合运用；三是善于一材多用，创新思维，对“邹忌讽齐王纳谏”的议论评述，尤为新颖独到，令人颔首称叹。

春节朋友来串门时，带来了一箱柑橘，盒子喜庆而漂亮。等到打开却发现，里面的桔子大多发黑，已经不可食用了。朋友惊呼上当：本以为如此精致的包装中一定是上好的佳品！

我一笑，拿出了去年收藏的一个极为精美的月饼包装盒。如果仅仅从包装上看，谁能想到里面昂贵的月饼的味道甚至赶不上超市三元一块的散装月饼呢？

于是，我们在批评商家投机的时候不禁又自问起来：是什么蒙住了我们的双眼？在我们过度的追求华丽的外表时可曾注意过它的内在品质？我们追逐的到底是什么？

一张檀木弓，本来射得又远又准，可带着对外观的失落请最优秀的艺术家在弓上雕出了一幅绝美的《行猎图》时，弓却被拉断了。当这张弓失去了它的实际价值时，再精美的图画也失去了存在的意义。

记得曾经看到过这样的一则报道：某市市长，为了向人展示自己城市的风采，大修城市广场，大搞形象工程，而终因负债累累，城市经济趋向萎靡，在美丽的广场，留下的不是市民的欢笑声而是阵阵怨声。

也记得眼见过这样的一个故事：一位父亲，用品牌将自己的孩子“武装”到了牙齿，以期望成为他人眼中最为优秀的孩子。而当孩子因过度追求物质的享乐而走上歧路时，我不知道这个家长在追逐着警车呼号的同时是否还会有一种思考。

注重外表，忽略内在品质，带给我们的布仅仅是遗憾，甚至是悲剧。还有什么比“金玉其外，败絮其中”更让人无奈更让人痛心呢？“买椟还珠”留下的也不仅仅是笑柄吧。

乌龟本不美丽，可它却以自己的执著的爬行深深的刻在了孩子们的童话世界里，比起浮躁的白兔，它博得了更多的爱恋。

小草本不美丽，却因那青翠的绿色燃烧起了人们生命的热情，于是，它以盎然的生机永远存活在诗人的生命中。

司马迁本不美丽，他受辱的躯体在世人异样的目光中，爆发出了无穷的生命能量，于是，那残缺的身体照亮了一个民族的历史。

霍金亦不美丽，但他那跳动的手指中的神秘宇宙却让他永远定格在了二十一世纪的灿烂星空。

绿天涯的小草永远惹人爱怜；滋润大地的雨滴永远让人期盼；播洒温暖的阳光永远得人赞美。品质决定生命，除去外表的浮华，留下的才是生命的重量。

海尔集团以它的成功告诉我们：品质永远是第一位的，外表的美丽换得的只是暂时的开放，只有“心”美，才是真美，才能永恒。

长江壮，黄河阔，泰山伟，峨眉奇。空中的鸟儿如果不满足双翅奢求双鳍，它的生活会痛苦；林中的鹿如果不满足奔跑的四肢而期待双翅，它的生活会从此无味。

有位名人曾说：“人生最痛苦的事不是得不到而是永不满足得到的。”历代的贪官污吏，明明已腰缠万贯，却仍处心积虑，不择手段，结果留得一世骂名；毕加索的画，明明已经震惊世界，可他却追求毫不实际的完美，结果他疯了。

奇美的维纳斯，假如接上那断臂，它将失去风采；神秘的蒙娜丽莎，假如注明微笑的缘由，它将失去韵味。世间的美往往是不能苛求的，美是一种本质，一种内涵，一种在不知不觉中流露出的自然。

拥有了智慧就不要期待美丽的外表，山顶的怪石自有它的动人之处；拥有了健康就不要向往百万家产，空中的鸟儿自有它快乐的方向。

很多时候，我们常常被不满足的欲望牵制着，而忽视了自身的实际情况。尺有所短，寸有所长。羡慕别人的满腹诗书而忽略了自己的才华横溢，羡慕别人的温文尔雅而忽略了自己知书达理。人无完人，过分追求完美是傻的，追求完美而使自己迷失是糊涂至极。

有这样一则故事：一个人拥有一张出色的弓，他利用这支弓百发百中，可却不满意它外表的笨重不出色，终因在上面雕刻图画而而使弓断裂。

这种近乎残酷的完美令人汗颜。失去了梦想，也失去真实。做人要有李白“天生我材必有用”的豪气与自信；也要有谭嗣同“我自横刀向天笑，去留肝胆两昆仑”的壮气。相信自己接受自己，展示自己才是明智之举。春天的脚步，自有它的轻盈；夏天的微风，自有它的柔美；秋日的阳光，自有它的明媚；冬日的雪花，自有它的晶莹。让我们忘记完美，活在真实，相信自己，拿出“舍我其谁”的豪迈吟出：“天生我材必有用！”

五 失去本质的东西再美也无用

“哇，这个人的脸怎么那么黑，嘴角还有个胎记，长得真丑……”生活中总是会听到诸如此类的话语，我总会反驳他们：外表再美，内心是丑的，那又有何用呢？

贝多芬的音乐是多么的优美动听，他是多少人心目中的偶像呐！但是，他的外表完美吗？不，他是个残疾人，他听不见自己优美动听的音乐，可是他还是成功了，他凭借着自己对音乐的向往与喜爱，最终还是成为了著名的音乐家。从星光大道出来的杨光、阿宝，他们俩本身都是农村出来的。杨光是个瞎子，而且胖乎乎的，一点也不像个明星的样子，可是他不在乎别人的看法，他热爱音乐；而阿宝，他当初是从山沟沟里出来的，他长得就是土包子一个，就是个拿锄头的人，可是现在呢，他红遍了中国，许多人喜欢他的歌；他们的外表并不美的，但是他们有实力，他们本质美，所以他们成功了。

还有韩红，她可是中国著名的女艺人，是“天后”，但是她没有苗条的身材，漂亮的脸蛋，她只有圆鼓鼓的水桶腰，大饼脸……只是那又怎样呢？她现在不愁吃不愁穿，日子过得似神仙，她还能四处献爱心呢。

外表不一定要好，本身的实力和内心的需要才是重要的，就算外表变漂亮了，结果往往适得其反。

美国著名的歌手迈克·杰克逊，他本身是黑种人，但是他为了要变白，选择了整容，全身上下不知整了多少次，才变白了，可是过了不久，因病离开了我们，他就是太过于看重外表才会不幸得病的，不然以他的才艺和歌唱技术，我相信他一定可以更加成功的，但是，很不幸的还是离开了人世。

世界上还有很多人，他们拥有着美丽的外表，但他们的内心却是邪恶的，他们会犯罪、会吸毒……如果他们合理的运用自身的优点，我想世界应该会和谐许多吧。

不要一味的追求外在的美丽，其实内存美才是最重要的，一件东西如果你一味地想要去改变，只会破坏它本身的美丽，而这样的东西，外表看上去再美、再无可挑剔也是无用的。

我一直追求本质，失去本质的东西再美也无用，包括——人类。

六被扰乱了的美

自然而淳朴的美，有时不加修饰，往往，是最纯洁的！

故事里的那把弓，笨重外观不出色，却可以射得又远又准，这就是它的特点，它美。却因为这样，虽被雕出很优美的装饰，可已不再是那把结实耐用的好弓了。结果，它就扰乱了！

事实上，生活中有许多事物，实际上它本质就是美好的、自然的、朴实的。却不曾想，因为我们的贪婪与追求，不小心被扰乱了，最后，就不止是扰乱的了。

看到这个故事，我冷不丁的想到了四天前的环保，费尽心血了，大自然中的环境也是一种被扰乱的美。社会在进步，经济在发展，当然了，每个人也在不断的追求美好的事物，所以，许多东西的本质就被糟蹋了，就像故事中的那个人，他的观念扰乱了所有事物美。

如今食品安全问题泛滥。为了鱼的肥大，为了猪的重量，为了肉能多瘦，人们可以“自由”地加激素、瘦肉精。为了面粉有多白，为了食品多“活”几天，大量的洗衣粉、添加剂在食品里出现，为了多赚几个钱，地沟油、毒豆芽、三聚氰氨奶粉……出世了。这些具有原味的好东西，化上妆之后，“美”不胜收。最后呢？人们对这些问题非常谨慎，就算是真的，那也不再是原来的美！因为它不自然，不朴实、不纯洁了。

被扰乱的美，谁还敢要？

现在的蔬菜，很油亮，没有虫子，没有瑕疵，可这样好吗？没有农药的浓，怎么会有这么“绿色”的食品，如今的蔬菜很美，可是，连虫子都不敢吃的菜，人，吃多了呢？是农药扰乱了蔬菜健康的美！

我曾见过一个报道，有一个小山村，好山好水好地方，可就是因为穷，为了富，村里人将那里的一座山上的大理石运输出来，钱赚到了，村里也逐渐富起来了。山里的石头少了，他们就用炸药把地下的大理石开采出来。最后山秃了，连植物动物都很少出现。几年后的一天，村里的地质学家发现，这个地方要是当初发展观光农业，还可以保留这儿的美，可是现在，剩下的只是黄土。大理石没了，这个村子还能富多久？后来，自然灾害上了道，慢慢地，这个村的人迁出去了，而这个村“一无所有，只是个驱壳……”自然的美就这么被扰乱了。

有很多时候，有很多事物，不是改变了就是最美的，或许它的本质就是一种完美。甚至纯朴的滋味才是迷人的香味。既然它已经够美了，就请别扰乱了它！

七适合不等于绝配

一双鞋，合不合适，只有穿在自己脚上，才会知道，有时候别人脚上穿上的鞋，款式、颜色正如自己所意，于是我们就会想要拥有，以为适合自己的，便会去追求，但有时追求到了，穿在自己脚上，会发现，并不搭配，有可能是大小不配，也有可能是与自己搭的服装不配。所以说，适合并不等于绝配。

听说过这样一个故事：一个人拥有一张又远又准的弓，但弓的外观却毫不出色，于是，他便去请了最优秀的艺术家在弓上雕一些图画，添上一副行猎图的弓显得更加精致，这个人充满喜悦地拉了弓，结果，弓断了。

一把出色的弓因为雕上一行猎图却断了，这个人，他不知道弓的能力，只是停留于对弓外观的改造，行猎图固然好看，它适合被当做装饰图画，但对于这把弓来说，它不能搭配得上。弓断，正因为它不能有该行猎图。所以，行猎图适合这把弓，但不是弓的绝配。

我们的学习生活亦是如此：有些学生看到优秀生有一套好的学习方法，自认为按照那样自己便可以优秀生，于是盲目地去追随别人的方法，但是最终的结果并不都如自己所意。

每个人的学习都有自己的方法，别人的方法有时虽适合自己，但毕竟人各有不同，在一些方面，比如：能力、知识面、作息时间等都会有差别；清华、北大的学生的学习方法有可能也适合我们，但并不是每个人学习了都能考入清华、北大。适合不等于绝配，不能盲目地去照搬别人的做法，要有属于自己的、和自己的学习生活可以相配的方法。

我们看到的奥运冠军、体育健将都是通过每一次辛勤的锻炼，一起重复着令人几乎乏味的动作，他们的成功有一个共同的因素：苦练。但是，是否每个人只要苦练像他（她）们一样，就能成功吗？不，不能。苦练这方式适合每一个运动员，但他（她）们需要一个与他（她）们绝配的训练方法。每年一个运动员都有一套自己的训练方法。那才是他们“练”向成功的关键。

弓配上一幅好的行猎图，不能使它更出色却使它断了，学生认为优秀学生的学习方法适合他们，但并不能使每一个都成为优秀学生；运动员都需要有一套自己的训练方法，与自己的能力相配，绝配自己……

综上所述，适合并不等于完全合适，并不等于绝配。

八   珍惜且珍行

“人生若只如初见，何事秋风悲画扇”这是纳兰容若的诗，我对此深有感触。是啊，要是事物都能像刚开始时的样子那该多好啊，只是我们却无力改变，只能走好每一步。

一张出色的黑檀木制成的弓虽射的又远又准，刚开始主人很珍惜它。但是后来发现弓有点笨重且外观又不出色，所以决定改造他，但一失足成千古恨，待弓断了，他只能独自一人惋惜着。

他虽珍爱着这把弓，但却用错了方法，使弓变成了无用之物。所以他应该找适合物质本身的东西，从而进一步改造它，升华它，而不是盲目地去改变它，这难免有些“画蛇添足”。

同样，这样现象在当今社会下也屡见不鲜。

现如今，家长对孩子的教育尤其重视。专家说，孩子三至五岁是开发右脑的黄金时期。所以很多家长都纷纷开始了“学前教育”，让孩子们小小年纪还没享受到童年的乐趣时便让他们随着巨大的压力。

殊不知，这对孩子是多么的残忍。孩子应该享受他们应有的童年，而不是被厚重的锁结锁住。虽说腹有诗书气质华，但未免太早了点。所以，应该珍惜且珍行。

对于人生我们应该有正确的奋斗目标，身为当代中学生的我们应以学习为重。好好珍惜我们所拥有的。珍惜生命，亦是不可忽视的。

弱不禁风的林黛玉，她虽面临着人生的各种磨难与挫折，但她却依然顽强的活着，走好生命中的每一步。

当代青年刘伟，他的双臂没了，但他却依然乐观向上的活着。

他对音乐有着无限的喜爱，尽管他的求学之路是多么的艰难，可他却从不放弃，凭着执着的信念，靠着顽强的意志不懈地完成他的音乐梦想。终于成为了一个家喻户晓的人，还成功的拍摄了电影。史铁生说过：死不是一件急于求成的事，死是一个必然降临的节目。他亦对生命有着执着的热爱，他努力走好生命中的每一步，从不言弃。的确，要活着，要好好地活着。

在人生的道路上，我们应该珍惜且珍行！